导读:本文包含了小鼠前脂肪细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:平目汤,格雷夫斯眼病,疾病模型,小鼠
小鼠前脂肪细胞论文文献综述
毛晓明,李红,高龙[1]（2019）在《平目汤对格雷夫斯眼病小鼠眼球后脂肪细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的探讨平目汤对格雷夫斯眼病小鼠模型眼球后脂肪细胞凋亡的影响及作用机制。方法 BALB/c雌性小鼠随机分为模型组和平目汤低、中、高剂量组,每组15只。采用hTSHR重组质粒免疫BALB/c雌性小鼠建立格雷夫斯眼病小鼠模型。造模成功后,平目汤低、中、高剂量组分别按照7.75 g·kg~(-1)·d~(-1 )、15.5 g·kg~(-1)·d~(-1 )、31 g·kg~(-1)·d~(-1 )生药量灌胃干预,共灌胃8周。观察小鼠眼球后脂肪细胞凋亡情况,以及眼球后脂肪细胞Bax、Bcl-2、Fas、Fasl、Chop、Caspase-12 mRNA及蛋白表达情况。结果与模型组比较,平目汤各组眼球后脂肪细胞凋亡率均升高(P<0.05);除平目汤高剂量组Caspase-12 mRNA外,其余各组Bax、FasL、Chop、Caspase-12 mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05),以平目汤中剂量组更为明显。结论平目汤可有效促进格雷夫斯眼病小鼠眼球后脂肪细胞的凋亡,其凋亡途径可能为线粒体途径、死亡受体途径与内质网途径共同作用。(本文来源于《上海中医药杂志》期刊2019年09期）
寇艳波,刘庆亚,汤仁仙,王玉刚,颜晓庆[2]（2019）在《急性寒冷刺激诱导小鼠米黄色脂肪细胞形成方法的建立》一文中研究指出目的:建立急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法。方法:连续3天每天4 h预冷刺激使小鼠适应寒冷环境,然后持续24 h进行急性寒冷刺激,诱导小鼠皮下脂肪中米黄色脂肪细胞形成。采用免疫组化检测皮下脂肪中Ucp1阳性细胞,荧光定量PCR检测米黄色脂肪细胞标志性基因Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea的转录,Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Prdm16和Ucp1的表达。结果:急性寒冷刺激后小鼠皮下脂肪中Ucp1阳性细胞数量明显增加,Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea转录明显上调,Prdm16、Ucp1蛋白表达明显升高。结论:本研究建立的急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法可靠,可用于米黄色脂肪细胞形成调控机制的研究。(本文来源于《交通医学》期刊2019年04期）
武晓慧,孙成,徐玉乔,张丰,魏婉丽[3]（2019）在《组蛋白H3甲基转移酶Ezh2与小鼠脂肪细胞分化关系研究》一文中研究指出目的:探索组蛋白H3K27me3甲基转移酶Ezh2对小鼠白色、棕色和米色脂肪细胞分化的影响。方法:构建诱导型Ezh2全身敲除小鼠(Ezh2~(flox/flox) CAGcre)并于6周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导敲除,以同窝、同性别、相同基因型假诱导(腹腔注射玉米油)小鼠作为对照。诱导完成后在光镜下观察脂肪细胞形态,采用Western Blot法检测脂肪组织中H3K27me3、Ezh2和Ucp1的蛋白表达量。采用Realtime PCR法检测不同部位脂肪组织的脂肪分化相关基因(Pparγ、Adipoq和Fabp4)、棕色脂肪标志基因(Ucp1、Cidea和Prdm16)和米色脂肪标志基因(CD137、Tmem26和Tbx1)的表达。检测敲除组小鼠的冷耐受能力,并予以高脂饮食诱导肥胖,观察小鼠体重增长情况、诱导结束后小鼠的糖耐量和胰岛素敏感性指标。结果:Ezh2敲除小鼠Ezh2和H3K27me3的蛋白含量降低,背部棕色脂肪细胞脂滴明显小于对照组,Ucp1的基因和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05);敲除组小鼠白色脂肪细胞分化较差,米色脂肪分化增加,米色脂肪的Ucp1和Tbx1基因表达增加(P<0.05)。敲除小鼠可以更好地耐受冷刺激,并抵抗高脂饮食诱导的肥胖和胰岛素抵抗。结论:Ezh2在体内促进白色脂肪细胞的分化,抑制棕色和米色脂肪细胞分化。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年12期）
任玲,胡鑫,邢义珅,王亚慧,李俊雅[4]（2019）在《S100a10基因对小鼠前体脂肪细胞白色和棕色成脂分化的影响》一文中研究指出旨在用小鼠模型探究全基因组关联分析(GWAS)筛选到的西门塔尔牛大理石花纹评分性状正相关基因S100钙结合蛋白A10(S100A10)对小鼠前体脂肪细胞成脂分化的影响。本研究以来源于C57BL/6品系小鼠腹股沟两侧白色脂肪组织的前体脂肪细胞为材料,体外进行白色/棕色成脂分化。通过siRNA干扰S100a10基因表达,通过油红O染色检测前体脂肪细胞分化效果,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹和细胞免疫荧光检测基因和蛋白表达变化。结果显示,敲低S100a10后,通过油红O染色发现脂滴明显变少;通过qRT-PCR检测白色成脂分化标志基因Pparg、C/ebpa、Fabp4、Glut4、Adiponectin、Leptin表达量显着下降(P<0.01);棕色成脂分化基因Ucp1、Pgc1a、Fabp4、Elovl3、Cox7a表达量显着下降(P<0.01)。敲低S100a10后,通过蛋白免疫印迹检测发现,FABP4和PPARG在白色成脂分化中表达量显着下降(P<0.01),通过细胞免疫荧光检测发现FABP4在白色成脂分化中表达量下降;敲低S100a10后通过蛋白免疫印迹和细胞免疫荧光检测发现,UCP1和FABP4在棕色成脂分化中表达量显着下降(P<0.01)。综上表明,敲低S100a10基因后抑制小鼠前体脂肪细胞的白色/棕色成脂分化,本研究将为探究S100A10基因对于肉牛肌内脂肪沉积的影响提供科学依据。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2019年06期）
齐雯[5]（2019）在《MEHP对3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢的影响及机制》一文中研究指出邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)是邻苯二甲酸酯类物质中最常使用的增塑剂,广泛应用于食品包装材料、医疗器械、儿童玩具等,可通过多种途径进入人体。DEHP摄入机体后,可在肝脏和小肠细胞中迅速代谢成其水解产物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯(mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP),DEHP对机体的毒性作用主要通过MEHP实现。作为一种环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptor,EEDs),DEHP暴露可对生物体生殖系统、神经系统、内分泌系统等多个组织系统产生毒性作用。流行病学研究和毒理学研究表明DEHP暴露可影响机体脂代谢,诱发肥胖;MEHP对3T3-L1小鼠前脂肪细胞生长具有促进作用,能够促使3T3-L1细胞分化为成熟脂肪细胞,增加细胞内脂质沉积,但其作用机制尚不清楚。本研究通过体外培养3T3-L1小鼠前脂肪细胞并给予DEHP代谢产物MEHP暴露,分析MEHP暴露对3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢的影响,探讨脂代谢相关信号通路和脂代谢关键基因在MEHP暴露影响3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢中的作用和机制,可为防治环境内分泌干扰物所致人群脂代谢相关疾病提供理论依据。第一部分MEHP对3T3-L1细胞分化和脂代谢的影响目的:明确MEHP对3T3-L1细胞分化和脂代谢的影响,探讨脂代谢关键基因在MEHP影响3T3-L1细胞分化中的作用。方法:使用含10%小牛血清的DMEM培养基体外培养3T3-L1小鼠前脂肪细胞,给予3T3-L1细胞梯度MEHP暴露。MTT法检测3T3-L1小鼠前脂肪细胞存活率;根据MTT结果确定染毒剂量与实验分组。暴露剂量与分组:空白对照(0μM MEHP),溶剂对照组(0.25‰DMSO,0μM MEHP),低剂量组(10μM MEHP),中剂量组(50μM MEHP)和高剂量组(250μM MEHP)。采用流式细胞术检测细胞周期、细胞内活性氧以及线粒体膜电位的改变;采用经典激素鸡尾酒方法进行3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化实验,并在分化过程中持续给予不同剂量MEHP暴露;油红O染色观察3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化程度;化学发光法检测甘油叁酯、胆固醇水平;实时荧光定量PCR方法检测脂代谢关键基因Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγm RNA表达水平;western blot方法检测脂代谢调控因子Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγ的表达水平。采用IBM SPSS 24.0进行统计分析。结果:1.3T3-L1细胞暴露于63,125,250,500μM MEHP 24 h后,细胞存活率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.各剂量MEHP组3T3-L1小鼠前脂肪细胞周期无明显改变(P>0.05);与对照组相比,中、高剂量组3T3-L1细胞活性氧含量显着升高(P<0.05),线粒体膜电位显着降低(P<0.05)。3.诱导分化过程中可见,3T3-L1小鼠前脂肪细胞体积增大、形态变圆、细胞质内出现反光脂滴,细胞内脂质含量随MEHP暴露剂量增加而升高(P<0.05);分化结束后,中、高剂量组细胞中甘油叁酯含量明显高于对照组,差异具有统计学意(P<0.05)。4.3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化后,MEHP暴露组中Acox-1 m RNA表达水平显着高于对照组(P<0.05),中、高剂量组中Acox-1 m RNA表达显着高于低剂量组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组中FABP4和PDK4 m RNA的相对表达量显着高于对照组,高剂量组FABP4 m RNA的相对表达量显着高于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05);高剂量组FAS和C/EBPβm RNA的相对表达量显着高于其他各组(P<0.05);3T3-L1细胞中PPARγm RNA的相对表达量随着MEHP暴露剂量的增加而增加(P<0.05)。5.3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化后,低、中、高剂量组中的Acox-1蛋白表达水平显着高于对照组(P<0.05),中、高剂量组中Acox-1蛋白表达显着高于低剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05);中、高剂量MEHP暴露组中C/EBPβ蛋白的表达水平显著高于对照组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组中FABP4蛋白表达水平显着高于对照组,高剂量组FABP4蛋白表达量显着高于其他各组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组FAS蛋白表达水平显着高于其他各组(P<0.05);中剂量MEHP暴露组LPL和PDK4蛋白表达水平显着高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),中、高剂量MEHP暴露组PPARγ蛋白的表达量显著高于低剂量组和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.MEHP暴露能够促进3T3-L1小鼠前脂肪细胞的增殖、分化和细胞内脂质蓄积。2.MEHP暴露能够改变3T3-L1小鼠前脂肪细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧的水平影响线粒体功能。3.MEHP暴露可通过上调Acox-1、C/EBPβ、FAS、FABP4、LPL、PDK4和PPARγ基因m RNA及其蛋白的表达影响脂代谢。第二部分MEHP对3T3-L1细胞脂代谢相关信号通路的影响目的:明确MEHP暴露对3T3-L1细胞脂代谢相关信号通路JAK-STAT信号通路和及Notch信号通路基因表达的影响,探讨JAK-STAT信号通路和Notch信号通路在MEHP影响3T3-L1前脂肪细胞分化和脂代谢中的作用。方法:3T3-L1细胞培养、实验分组以及甘油叁酯、胆固醇水平检测同第一部分。Real-time-PCR方法检测JAK-STAT信号通路中JAK-1、JAK-2、JAK-3、TYK-2、STAT-1、STAT-3、STAT-5a和STAT-5b m RNA的表达水平,以及Notch信号通路中Notch-1、Notch-2、Notch-3、Notch-4及其配体Dll-1、Dll-4、Jagged-1、Jagged-2 m RNA表达水平;western Blot方法检测JAK-STAT信号通路中JAK-1、JAK-2、JAK-3、TYK-2、STAT-1、STAT-3、STAT-5a以及STAT-5b的蛋白表达水平,以及Notch信号通路中Notch-1、Notch-2、Notch-3、Notch-4及其配体Dll-1、Dll-3、Jagged-1以及Jagged-2蛋白表达水平。采用IBM SPSS 24.0进行统计分析。结果:1.3T3-L1细胞诱导分化后,高剂量组细胞JAK-2、JAK-3 m RNA表达显着低于其余各组(P<0.05);与对照组相比,MEHP暴露组细胞TYK-2 m RNA表达显着升高,差异具有统计学意义(P<0.05),中、高剂量组TYK-2 m RNA表达水平显着高于低剂量组(P<0.05);高剂量组STAT-1 m RNA表达显着高于空白对照组(P<0.05);MEHP暴露组STAT-3 m RNA的相对表达量显着高于对照组(P<0.05);中、高剂量组中STAT-3 m RNA表达明显高于低剂量组(P<0.05);高剂量组STAT-5a m RNA表达显着高于对照组和低剂量组(P<0.05)。2.诱导分化后,高剂量组3T3-L1小鼠前脂肪细胞中JAK-1蛋白表达明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MEHP暴露组细胞TYK-2蛋白表达水平显着高于对照组(P<0.05);中、高剂量组TYK-2蛋白表达显着高于低剂量组(P<0.05);MEHP暴露组细胞STAT-3、STAT-5a蛋白表达水平显着高于对照组(P<0.05),中、高剂量组STAT-3、STAT-5a表达水平显着高于低剂量组(P<0.05);中、高剂量组中STAT-5b表达水平显着升高(P<0.05),高剂量组STAT-5b蛋白表达水平最高(P<0.05)。3.JAK-STAT信号通路基因表达水平与甘油叁酯水平的相关研究发现,诱导分化后3T3-L1细胞中甘油叁酯的含量与TYK-2、STAT-3、STAT-5a m RNA和蛋白表达水平显着相关(P<0.05)。4.3T3-L1细胞诱导分化后,中剂量组细胞Notch-1 m RNA的相对表达量显着高于对照组(P<0.05),高剂量组Notch-1 m RNA显着高于其余各组(P<0.05);Notch-3、Notch-4 m RNA表达水平随着MEHP暴露剂量升高而呈上升趋势,高剂量组显着高于其余各组(P<0.05);中剂量组细胞Jagged-1 m RNA表达显着高于空白对照组(P<0.05);中、高剂量组与对照组相比,3T3-L1细胞Jagged-2m RNA表达明显上升(P<0.05),高剂量组Jagged-2 m RNA表达显着高于低剂量组(P<0.05);高剂量组Dll-4 m RNA的相对表达量显着高于其余各组(P<0.05)。5.诱导分化后的3T3-L1细胞,高剂量组细胞Notch-2蛋白表达显着高于其余各组(P<0.05);中剂量组的Jagged-1表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);高剂量组细胞Jagged-2蛋白表达显着高于对照组(P<0.05);高剂量组Dll-1蛋白表达水平相助高于其余各组;高剂量组与低剂量组Dll-4蛋白表达量显着升高(P<0.05)。6.JAK-STAT信号通路和Notch信号通路基因m RNA和蛋白表达水平与3T3-L1细胞内TG含量的相关性研究结果显示,诱导分化后3T3-L1细胞内TG含量与JAK-STAT信号通路TYK-2、STAT-3、STAT-5a m RNA及其蛋白表达水平显着相关;与Notch信号通路Notch-1、Jagged-2 m RNA表达水平显着相关(P<0.05)。结论:1.MEHP暴露可影响JAK-STAT信号通路相关基因和蛋白的表达,影响3T3-L1细胞分化成熟和细胞内脂质蓄积。2.MEHP暴露后3T3-L1细胞中TG含量与JAK-STAT信号通路中TYK-2、STAT-3、STAT-5a m RNA及其蛋白表达密切相关。3.MEHP暴露可影响Notch信号通路中基因和蛋白表达,影响3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化成熟和细胞内脂质蓄积。4.MEHP暴露后3T3-L1细胞中TG含量与Notch信号通路中Notch-1、Jagged-2 m RNA及其蛋白表达密切相关。第叁部分STAT-3在MEHP影响3T3-L1小鼠前脂肪细胞分化和脂代谢中的作用及其机制目的:构建稳定转染3T3-L1小鼠前脂肪细胞STAT-3沉默细胞株;明确JAK-STAT信号通路中STAT-3在MEHP影响3T3-L1前脂肪细胞分化和脂质水平中的作用;探讨STAT-3在MEHP所致脂代谢紊乱中的作用机制。方法:采用STAT-3沉默慢病毒(Lv/sh-STAT-3)、非沉默慢病毒(Lv/sh-NC)分别感染3T3-L1小鼠前脂肪细胞,构建稳定转染3T3-L1小鼠前脂肪细胞STAT-3沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR方法以及western blot方法检测细胞中STAT-3的沉默效率。采用经典激素鸡尾酒法对正常3T3-L1细胞和Lv/sh-NC、Lv/sh-STAT-3稳转3T3-L1细胞进行诱导分化,并给予不同处理。实验分组为:亲本对照组(Parental)为0μM MEHP,非沉默感染组(Lv/sh-NC)为0μM MEHP,STAT-3沉默组(Lv/shSTAT-3)为0μM MEHP,暴露组包括250μM MEHP暴露STAT-3沉默组(Lv/shSTAT-3+MEHP)和250μM MEHP暴露非沉默感染组(Lv/sh-NC+MEHP)。油红O染色观察3T3-L1细胞分化程度;化学发光法检测甘油叁酯、胆固醇水平;实时荧光定量PCR方法检测脂代谢调控因子Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγm RNA表达水平;western blot方法检测脂代谢调控因子Acox-1、C/EBPβ、FABP4、FAS、LPL、PDK4、PPARγ的表达水平。结果:1.STAT-3沉默慢病毒(Lv/sh-STAT-3)以及非沉默慢病毒(Lv/sh-NC)感染3T3-L1小鼠前脂肪细胞后,感染效率较高,感染效果较好。2.Lv/sh-NC组细胞内STAT-3 m RNA和蛋白表达水平与Parental组相比均无明显变化(P>0.05),Lv/sh-STAT-3组STAT-3 m RNA及其蛋白表达水平均显着低于Parental组和Lv/sh-NC组(P<0.05)。3.Lv/sh-STAT-3组3T3-L1细胞内TG含量略低于Parental组和Lv/sh-NC组,但差异无统计学意义(P>0.05);Lv/sh-STAT-3+NC组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组3T3-L1细胞中TG含量明显高于非暴露Parental组、Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组,差异具有统计学意义(P<0.05);而Lv/sh-STAT-3+MEHP组细胞内TG含量明显低于Lv/sh-NC+MEHP组,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.Lv/sh-NC和Lv/sh-STAT-3组细胞内Acox-1、FAS、FABP4、LPL、PDK4m RNA表达水平与Parental组相比未发生明显变化(P>0.05)。Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组中Acox-1、FAS、FABP4、LPL、PDK4 m RNA表达水平明显高于Parental组、Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.与Parental组相比,Lv/sh-NC组细胞C/EBPβ基因m RNA表达水平未发生明显变化(P>0.05),而Lv/sh-STAT-3组与Parental组和Lv/sh-NC组相比,细胞内C/EBPβm RNA表达水平显着降低(P<0.05);Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/shSTAT-3+MEHP组细胞C/EBPβm RNA表达水明显高于Parental组、Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组(P<0.05),而Lv/sh-STAT-3+MEHP组C/EBPβm RNA表达水平明显低于Lv/sh-NC+MEHP组(P<0.05)。与Parental组比较,Lv/sh-NC组细胞PPARγm RNA表达水平无明显变化(P>0.05);而Lv/sh-STAT-3组细胞PPARγm RNA表达水平显着低于Parental组和Lv/sh-NC组(P<0.05);与非暴露Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组相比,Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组内的PPARγm RNA表达水平显着升高(P<0.05);而Lv/sh-STAT-3+MEHP组的PPARγm RNA表达水平显着低于Lv/sh-NC+MEHP组(P<0.05)。6.与Parental组相比,Lv/sh-NC组和Lv/sh-STAT-3组细胞Acox-1、FABP4、FAS、PDK4和C/EBPβ、PPARγ蛋白表达水平未发生明显变化;而MEHP暴露后,Lv/sh-NC+MEHP组和Lv/sh-STAT-3+MEHP组内的Acox-1、FABP4、FAS、PDK4和C/EBPβ、PPARγ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:1.采用STAT-3沉默慢病毒(Lv/sh-STAT-3)成功构建稳定转染3T3-L1小鼠前脂肪细胞STAT-3沉默细胞株。2.STAT-3能够促进3T3-L1细胞分化成熟和内脂质蓄积3.MEHP可能通过STAT-3调节脂代谢关键基因C/EBPβ和PPARγm RNA及其蛋白的表达水平在所致脂代谢紊乱中发挥作用。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
崔忆馨[6]（2019）在《姜黄素对猪和小鼠前体脂肪细胞增殖和成脂分化的作用研究》一文中研究指出近年来,随着人们对食品安全及生态环境的关注度不断提高,抗生素残留和细菌耐药性等问题也逐渐暴露出来,抗生素的禁用将会是畜牧兽医行业发展的必然趋势。因此,寻求开发绿色、安全的替代抗生素的饲料添加剂刻不容缓。姜黄素(Curcumin,Cur)是从中药姜黄中提取的一种酚类物质,作为一种多效的天然活性成分,姜黄素有希望取代抗生素,在畜禽“无抗养殖”中发挥重要作用。虽然长期以来姜黄素作为一种常用的天然色素,已被广泛地应用在食品工业中,但其在畜牧兽医生产中的应用性研究相对较少,尤其是在减少畜禽脂肪沉积效果方面的研究更少。本研究以原代培养的猪前体脂肪细胞和小鼠3T3-L1前体脂肪细胞系为体外模型,探讨姜黄素对脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,并以高脂日粮诱导的C57BL/6J肥胖小鼠为体内模型,深入探讨姜黄素对小鼠脂肪沉积的调控作用及对高脂饮食诱导小鼠肥胖的抑制效果。研究结果将为姜黄素作为安全、有效的饲料添加剂在畜牧兽医生产上的应用提供科学依据。实验一、姜黄素对小鼠3T3-L1前体脂肪细胞增殖和成脂分化的作用研究将小鼠3T3-L1前体脂肪细胞进行增殖培养,待细胞达到80%-90%融合时,利用含终浓度为 0.1 mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX),2.5 μμmol/L地塞米松(DEX),1 μg/mL胰岛素(Insulin)和2 μmol/L罗格列酮的诱导分化液I对细胞进行诱导分化,同时添加不同浓度姜黄素处理,共分为6组:①未诱导分化组(None,完全培养基);②诱导分化对照组(DM,诱导分化液+姜黄素溶解试剂DMSO);③诱导分化液+2.5 μμmol/L姜黄素组(DM+2.5μmol/LCur);④诱导分化液+5μmol/L 姜黄素组(DM+5μmol/LCur);⑤诱导分化液+10 μmol/L姜黄素组(DM+10 μmol/L Cur);⑥诱导分化液+15 μmol/L姜黄素组(DM+15 μmol/L Cur);3天后,更换只含有1 μg/mL Insulin的诱导分化液II进行处理,2天换液一次,6天后(共处理9天)在显微镜下观察细胞成脂分化情况,采用CCK法检测细胞增殖活力,通过油红O染色和甘油叁酯(TG)定量试剂盒检测细胞内TG含量,通过甘油含量测定试剂盒和小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA检测试剂盒测定细胞上清中甘油和FFA的含量,通过以上指标综合评价姜黄素对小鼠3T3-L1前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响。此外,通过荧光定量PCR(q-PCR)法进一步检测姜黄素对3T3-L1细胞成脂分化相关基因表达的影响,初步阐明姜黄素影响3T3-L1细胞成脂分化的可能机制。研究结果显示,与DM组相比,2.5、5、10、15 μmol/L姜黄素处理对细胞活力无显着影响,而20 μmol/L姜黄素处理能显着抑制细胞增殖活力。显微镜下观察发现,与DM组相比,2.5、5、10、15μmol/L姜黄素处理组细胞脂滴沉积量显着降低,油红O染色结果表明,与DM组相比,姜黄素处理组红染阳性细胞明显减少,TG沉积量显着下降,并且呈剂量依赖性抑制作用;此外,姜黄素处理组细胞上清中甘油和FFA释放量也呈剂量依赖性抑制作用。以上结果表明,姜黄素处理能在一定程度上抑制3T3-L1前体脂肪细胞的增殖和成脂分化,呈剂量依赖性。q-PCR的结果显示,姜黄素处理能显着抑制脂肪细胞分化关键转录因子C/EBP-α、PPAR-γ和C/EBP-β,脂肪合成标志基因FAS、SCD和aP2的mRNA表达,并显着增加脂肪分解标志基因ATGL mRNA表达。以上结果说明姜黄素抑制3T3-L1细胞脂质沉积,一方面与抑制成脂分化、减少脂肪合成有关外,另一方面还可能与脂肪分解的增强有关。实验二、姜黄素对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的作用研究分离断奶仔猪颈、背部皮下脂肪组织,采用Ⅰ型胶原酶分离前体脂肪细胞,细胞达到80%-90%融合时,使用含终浓度为 0.1 mmol/LIBMX,2.5μμmol/LDEX,1μg/mLInsulin 和2 μmol/L罗格列酮的诱导分化液进行成脂分化诱导,并同时添加姜黄素处理,根据姜黄素浓度的不同,共分为5组:①诱导分化对照组(DM,诱导分化液+DMSO);②诱导分化液+2.5μmol/L姜黄素组(DM+2.5μmol/LCur);③诱导分化液+5 μmol/L姜黄素组(DM+5 μmol/L Cur);④诱导分化液+10 μmol/L姜黄素组(DM+10 μmol/L Cur);⑤诱导分化液+15 μmol/L姜黄素组(DM-+15 μmol/LCur);利用CCK法检测细胞增殖活力,通过油红O染色法检测细胞内TG含量,采用q-PCR方法检测脂肪细胞分化关键基因PPAR-γ和C/EBP-β、脂肪合成关键酶FAS和ACC以及脂肪分解限速酶HSL,ATGL和LPL的mRNA表达。应用酶化学法测定细胞内脂肪分解酶的酶活。CCK检测结果显示,与DM对照组细胞相比,2.5、5、10 μmol/L姜黄素处理48 h和72 h对原代培养的猪前体脂肪细胞增殖活力无显着影响,但20 μmol/L姜黄素处理48 h和72 h均显着抑制了细胞的增殖活力。油红O染色结果表明,与DM组细胞相比,10μmol/L姜黄素处理48 h和72 h极显着降低了细胞内TG含量。显微镜下观察也发现,与DM对照组细胞相比,10 μmol/L姜黄素处理组细胞脂滴沉积量明显减少,表明姜黄素对猪前体脂肪细胞的增殖和成脂分化也有一定的抑制作用,并且呈剂量、时间依赖性。q-PCR的结果表明,与DM组细胞相比,10μmol/L姜黄素处理能显着降低脂肪分化成脂过程中两个重要转录因子PPAR-γ和C/EBP-β的mRNA表达,此外,脂肪合成过程中两个重要的合成酶ACC和FAS的mRNA表达也显着下降;另外,姜黄素处理能显着升高脂肪分解限速酶HSL和ATGL的mRNA表达量和酶活。此外,10 μmol/L姜黄素处理能显着增加自噬标志基因LC3和溶酶体酸性脂肪酶LIPA的mRNA表达,并能显着增加LC3蛋白的表达及LC3II/LC3I的比值。以上结果表明,姜黄素抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化可能与脂肪合成的抑制及脂肪分解的增强有关,还可能跟自噬激活机制有关。实验叁、日粮中添加姜黄素对高脂日粮诱导的C57BL/6J肥胖小鼠模型脂肪沉积的影响选取60只饲养环境、遗传背景等相似的C57BL/6J雄性小鼠(4周龄,15-17 g),随机均分成5组,分别饲喂标准日粮(Normaldiet,ND)、高脂日粮(Highfatdiet,HFD)、高脂日粮和0.1%姜黄素(HFD+0.1%Cur)、高脂日粮和0.5%姜黄素(HFD+0.5%Cur)及高脂日粮和1%姜黄素(HFD+1%Cur),饲喂12周。记录每周体重(Body weight,BW)与采食量;在第4、8、12周分别进行口服葡萄糖耐受试验(Oral glucose tolerance test,OGTT)并计算曲线下面积(AUC)。试验结束时,记录小鼠体重、附睾脂肪重量,并计算体重增长量及附睾脂肪重量/体重比值,记录肝脏、心脏、脾脏、肾脏、睾丸、腓肠肌及比目鱼肌的重量并计算器官和体重比。检测血浆中脂代谢相关生化指标含量,并通过HE染色法检测附睾脂肪和肝脏组织中脂滴沉积量,并对心脏、脾脏和肾脏组织样等进行病理学分析。研究结果显示,与HFD组小鼠相比,HFD+Cur处理能显着降低小鼠体重、小鼠体重增长值、并能显着抑制小鼠附睾脂肪组织重及附睾脂肪与体重比,并且呈剂量依赖性抑制作用。此外,HFD与HFD+Cur组小鼠的采食量和饲料利用率无显着差异。相对器官重量统计结果显示,与HFD组小鼠相比,HFD+Cur处理对肝脏、心脏、脾脏、肾脏、睾丸、腓肠肌、睾丸的重量并无显着影响,但能显着增加比目鱼肌重量以及肝脏/体重和比目鱼肌重/体重。OGTT实验结果显示,与HFD组小鼠相比,HFD+0.1%Cur、HFD+0.5%Cur和HFD+1%Cur处理能不同程度抑制血糖浓度,并显着抑制AUC值,且呈剂量依赖性抑制作用。血液生化指标显示,低浓度Cur就能显着抑制LDL-C含量、高浓度Cur能显着抑制血浆中TG、Glucose、TCH和NEFA含量,而对AST、ALT和AST/ALT无显着影响。HE切片结果发现,HFD+0.1%Cur、HFD-+0.5%Cur和HFD+1%Cur处理能显着降低附睾脂肪组织和肝脏组织中脂滴的数目及附睾脂肪组织中脂肪细胞的体积,而对心脏、脾脏以及肾脏并无显着病理变化。以上结果显示,日粮中添加姜黄素能显着抑制小鼠附睾脂肪沉积并降低血脂含量,对高脂日粮诱导的肥胖有较好的扭转效果,此外,姜黄素可以显着降低血糖含量,改善葡萄糖耐受。揭示姜黄素可以作为一种潜在调节剂,有效降低体脂沉积、血脂含量和血糖水平,增强葡萄糖耐受,从而为把姜黄素作为一种安全、有效的降脂、降糖饲料添加剂应用于畜牧兽医生产实践提供有力的理论保障。(本文来源于《扬州大学》期刊2019-06-01）
任倩[7]（2019）在《FTO通过抑制线粒体UPR缓解小鼠脂肪细胞凋亡的作用机制》一文中研究指出脂肪与肥胖相关基因(Fat and obesity associated gene,FTO)属于非血红素双加氧酶超家族的一员,该基因转录翻译的蛋白质参与细胞内多个生理学进程,如细胞的增殖、凋亡、分化和细胞周期等。肥胖是Ⅱ型糖尿病最主要的风险因子,而FTO突变体会影响肥胖发生与Ⅱ型糖尿病的易患性。通过研究欧洲大量不同年龄及BMI指数的人的FTO基因与BMI、预测体重过重及肥胖的相关性得知从出生到老去整个过程中FTO与BMI和衰老密切相关(Frayling et al.,2007)。此外,FTO序列中包含着的多个有潜在功能的SNP位点与欧洲人口中的早发性及严重肥胖特征高度相关。因此,FTO基因对能量平衡的影响仍需要深入研究(Dina et al.,2007)。有研究表明超表达FTO后猪肌内脂肪前体细胞的增殖与分化增强(Zhang et al.,2015)。细胞凋亡作为细胞重要的生理活动是否受FTO调控还不清楚。本研究利用qPCR、Western blotting、免疫荧光、转录组测序、免疫组化等方法,探究FTO通过缓解线粒体未折迭蛋白反应(线粒体UPR,UPR~(mt))抑制小鼠脂肪细胞凋亡的作用及其机制,这些结果将为深入揭示UPR~(mt)与脂肪细胞凋亡的互作关系以及预防脂肪代谢紊乱征提供一定试验证据。本研究获得以下研究结果:1.FTO通过激活JAK2/STAT3信号通路抑制脂肪细胞凋亡。环亮氨酸(CL)处理3T3-L1细胞极显着上调FTO mRNA水平(P<0.01),但凋亡标志基因Caspase-3、Bax的mRNA水平显着下降,Bcl-2的mRNA水平显着提升(P<0.05);甜菜碱(Bet)处理作用相反。通过转录组测序发现超表达FTO上调Bax与XAF1的转录水平,qPCR验证结果一致。超表达FTO后细胞增殖标志基因p27、p53与凋亡标志基因Caspase-3、Caspase-9与Bax mRNA水平显着下调(P<0.05),PCNA、CyclinE与Bcl-2 mRNA水平显着上调(P<0.05)。棕榈酸(PA)诱导凋亡模型下FTO进一步下调促凋亡基因的mRNA和蛋白水平(P<0.05),上调抑凋亡基因的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01);TUNEL等染色及免疫荧光的结果显示超表达FTO抑制脂肪细胞凋亡(P<0.05)。从测序结果中筛选出JAK2/STAT3信号通路并用抑制剂SD1008处理发现超表达FTO激活该信号通路蛋白磷酸化并抑制下游Caspase-3切割(P<0.05)。2.FTO通过降低HSP60 mRNA m6A甲基化水平抑制UPR~(mt)。烟酰胺核糖(NR)处理脂肪细胞构建UPR~(mt)模型后用FTO处理脂肪细胞检测发现线粒体呼吸链标志基因的mRNA水平显着下调(P<0.05),线粒体生物合成相关基因的mRNA水平显着下调(P<0.05);超表达FTO对HSP60 mRNA水平无显着影响,但ClpP mRNA水平被显着抑制(P<0.05),模型下HSP60和ClpP的mRNA水平显着上升(P<0.05);与对照组相比,超表达FTO显着抑制HSP60和ClpP蛋白水平表达。为了进一步研究FTO调控脂肪细胞UPR~(mt)的分子机制,用CL及Bet处理脂肪细胞检测发现这两种药物对HSP60及ClpP的mRNA水平无显着影响,但CL处理抑制HSP60的蛋白水平(P<0.05),而Bet处理作用相反(P<0.05),预测HSP60 mRNA的m6A修饰位点并突变,突变后的载体处理脂肪细胞发现HSP60的mRNA水平无显着变化,突变组的HSP60蛋白水平显着下调(P<0.05);突变后超表达FTO处理脂肪细胞发现HSP60的mRNA及蛋白水平都无显着变化。以上结果表明FTO通过降低HSP60mRNA的m6A水平抑制脂肪细胞UPR~(mt)。3.FTO通过抑制线粒体UPR缓解脂肪细胞凋亡。PKR抑制剂2-AP及FTO处理脂肪细胞检测发现2-AP显着抑制PKR/eIF-2α信号通路的激活(P<0.05),而超表达FTO进一步下调PKR/eIF-2α信号通路的蛋白磷酸化水平(P<0.05),UPR~(mt)模型下线粒体中的ATF5蛋白水平显着下降(P<0.05),而核中的ATF5蛋白水平显着上升(P<0.05),超表达FTO处理脂肪细胞检测发现ATF5的转移被显着抑制(P<0.05);干扰ATF5处理脂肪细胞检测发现ATF5及Bax mRNA水平显着下降(P<0.05),超表达FTO后ATF5及Bax mRNA水平被进一步下调(P<0.05);在脂肪细胞及组织上处理FTO及NR检测发现超表达FTO显着抑制UPR~(mt)模型下促凋亡基因的mRNA水平(P<0.05)及蛋白水平(P<0.05),显着上调抑凋亡基因Bcl-2的mRNA及蛋白水平(P<0.05);HE染色发现超表达FTO处理后脂肪组织中脂滴数量增多(P<0.05),NR处理后减少脂滴数量(P<0.05)。免疫组化显示超表达FTO后脂肪组织中Bcl-2蛋白表达水平显着上升(P<0.05),NR处理后缓解超表达FTO对Bcl-2的上调(P<0.05),Bax蛋白表达与Bcl-2相反。本试验结果显示FTO抑制脂肪组织中UPR~(mt)介导的促凋亡基因的表达。本试验证明了FTO促进JAK2/STAT3信号通路激活抑制脂肪细胞凋亡并通过降低HSP60 mRNA的m6A水平抑制UPR~(mt)。本研究结果揭示了线粒体UPR在脂肪细胞凋亡调控中的作用,为深入研究脂肪代谢及功能提供理论基础,进一步为肥胖等代谢综合征的治疗提供研究思路。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-04-01）
[8]（2019）在《利用上皮细胞-间充质转化诱导小鼠乳腺癌细胞转化为脂肪细胞》一文中研究指出上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,在胚胎发育、慢性炎症、组织重建(如伤口愈合)、癌症转移和多种纤维化疾病中发挥着重要作用。EMT是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程。癌细胞可以利用EMT从原发肿瘤转移并形成继发性转移(本文来源于《海南医学》期刊2019年03期）
武晓慧,杨蕙宇,王轲,宁晓霞,黄振鹏[9]（2018）在《老年小鼠糖耐量减退与脂肪细胞分化关系的实验研究》一文中研究指出目的研究老年小鼠糖耐量减退与脂肪细胞分化的关系,为探索老年性糖尿病的发病机制提供基础依据。方法取6、20、40周龄C57BL/6J小鼠,分别模拟人类的青少年期,中年期和老年期,检测体重、附睾白色脂肪重量/体重、空腹血糖、葡萄糖耐量以及冷暴露后体温,取小鼠背部棕色脂肪及附睾、皮下、腹股沟和肠系膜脂肪进行组织学分析。采用RT-qPCR方法检测各组小鼠肝脏、腓肠肌以及附睾、皮下、腹股沟和肠系膜脂肪的葡萄糖转运蛋白4(GLUT4,小鼠称为Slc2a4)基因相对表达量。在背部棕色脂肪及附睾、皮下、腹股沟和肠系膜5个部位的脂肪组织检测Ucp1、Prdm16和Cidea基因并在后4个部位的脂肪组织检测CD137和Cytc基因的mRNA相对表达量。采用Western Blot法检测小鼠棕色脂肪解偶联蛋白1(Ucp1)的表达。对棕色脂肪及皮下、腹股沟区脂肪组织的Ucp1相对表达量与各年龄组空腹血糖做相关分析。结果 40周龄小鼠体重、附睾脂肪重量/体重及空腹血糖水平明显高于6周龄组(均P<0.05),并存在糖耐量减退(P<0.05);各部位脂肪组织中Slc2a4基因表达均呈下降趋势(P<0.05)。棕色脂肪细胞脂滴增大并融合,细胞标志物Ucp1、Prdm16和Cidea基因表达量(P<0.05)及Ucp1的蛋白表达量均下降,40周龄组小鼠在4℃环境下体温下降更快(P<0.05)。小鼠附睾白色脂肪细胞直径随年龄增长逐渐增大,皮下、腹股沟和肠系膜区域米色脂肪分化逐渐减少。米色脂肪分子标志物Ucp1、Prdm16、Cidea、CD137、CytC出现不同程度的表达下调(P<0.05)。20周龄组小鼠的以上部分指标也出现不同程度的改变。背部棕色脂肪及皮下和腹股沟区脂肪的Ucp1基因表达量均与空腹血糖呈负相关(R2=0.974;R2=0.8933;R2=0.7109)。结论老年小鼠棕色脂肪形态和功能减退以及米色脂肪细胞分化减少与其糖耐量减退密切相关。(本文来源于《西部医学》期刊2018年12期）
黎海燕,刘宇,廉梅,陈恒伟,温悦婷[10]（2019）在《小鼠棕色脂肪转基因过表达miR-155损坏棕色脂肪细胞的分化》一文中研究指出为探究microRNA-155(miR-155)对小鼠棕色脂肪组织分化的影响,收集广泛过表达miR-155的转基因小鼠(RL-m155小鼠)棕色脂肪组织,离体棕色脂肪大体拍照,然后收集部分组织固定、石蜡包埋和切片,并行HE染色,观察棕色脂肪细胞的大小和形态;同时RT-qPCR检测棕色脂肪组织中分化相关基因的表达水平。结果表明,RL-m155小鼠的体重、体型与对照小鼠无显着差异;与对照小鼠相比,RL-m155小鼠棕色脂肪组织中miR-155表达水平显着升高,而棕色脂肪组织体积及棕色脂肪细胞的大小均显着减小;棕色脂肪中特异表达基因(UCP1和SCA-1)、棕色脂肪分化调控因子(BMP2、BMP6、Smad1、Smad5、C/EBPB、MYO10和PTEN)、棕色脂肪分化诱导因子(PPARγ、PGC-1α、BMP2、BMP4、BMP7、BMPR1A和Sirt1)等棕色脂肪分化相关功能基因的mRNA表达水平均显着降低(P<0.05)。表明RL-m155小鼠棕色脂肪组织中miR-155过表达,导致棕色脂肪组织分化受损。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年08期）
小鼠前脂肪细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:建立急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法。方法:连续3天每天4 h预冷刺激使小鼠适应寒冷环境,然后持续24 h进行急性寒冷刺激,诱导小鼠皮下脂肪中米黄色脂肪细胞形成。采用免疫组化检测皮下脂肪中Ucp1阳性细胞,荧光定量PCR检测米黄色脂肪细胞标志性基因Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea的转录,Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Prdm16和Ucp1的表达。结果:急性寒冷刺激后小鼠皮下脂肪中Ucp1阳性细胞数量明显增加,Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea转录明显上调,Prdm16、Ucp1蛋白表达明显升高。结论:本研究建立的急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法可靠,可用于米黄色脂肪细胞形成调控机制的研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠前脂肪细胞论文参考文献
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