本文主要研究内容
作者邹闻书（2019）在《α-倒捻子素抑制TAK1/NF-κB信号通路缓解LPS诱导的IEC-6细胞炎性损伤》一文中研究指出：α-倒捻子素是一种天然中药成分,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤的作用。脂多糖(LPS)作为革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分可以引起多种炎症。本论文中用LPS刺激大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)构建炎症模型,探讨了α-倒捻子素的抗炎作用及其潜在的分子机制。试验一:利用LPS作为刺激物建立IEC-6细胞炎症模型,通过CCK-8法检测细胞活力、倒置显微镜观察细胞形态、流式细胞术检测细胞凋亡状况。结果表明:LPS刺激IEC-6细胞引起损伤的最佳作用剂量和时间为10μg/mL,24 h,在此模型条件下,细胞活力降低、细胞形态改变、细胞凋亡率升高(P<0.05)。试验二:采用CCK-8法筛选α-倒捻子素的作用浓度、倒置显微镜下观察细胞形态学变化、流式细胞术检测细胞凋亡状况。结果表明:低、中、高浓度分别为2.5、5、10μM的α-倒捻子素预处理细胞,能够显著降低LPS诱导的细胞损伤程度、降低细胞凋亡率(P<0.05)。试验三:ELISA检测细胞上清中PGE2、IL-6、TNF-α和IL-1β的含量,格里斯(Griess)试剂检测NO分泌,qPCR检测炎症因子iNOS、COX-2、IL-6、TNF-α和IL-1βmRNA水平,western blot检测TAK1、pTAK1、pIKK、IκB、pIκB、p65和pp65蛋白表达量,免疫荧光检测p65入核情况。结果表明:α-倒捻子素可以显著抑制由LPS引起的NO、PGE2、IL-6、TNF-α及IL-1β的含量增加(P<0.05),同时也可以抑制由LPS诱导的iNOS、COX-2、IL-6、TNF-α及IL-1βmRNA表达升高(P<0.05)。α-倒捻子素能够改善由LPS诱导的IκB蛋白表达下降、抑制pTAK1、pIKK、pIκB和pp65蛋白表达量升高(P<0.05)。免疫荧光结果表明:α-倒捻子素可以显著抑制由LPS引起的p65入核。因此证明,α-倒捻子素可以通过抑制TAK1/NF-κB信号通路从而缓解LPS诱导的炎症。试验四:使用Illumina hiseq测序平台进行全基因组的探索,并用qPCR进行验证。一共检测到了37199个差异基因,LPS刺激后928个基因显著上调,1068个基因显著下调(log2 fold change>1 or log2 fold change<-1,P<0.05)。α-倒捻子素预处理后151个基因显著下调,324个基因显著上调(log2 fold change>1 or log2 fold change<-1,P<0.05)。结果表明:差异基因显著富集的GO主要与炎症和氧化应激相关,此外与凋亡也有一定关联;从pathway分析提示差异表达的基因富集与NF-κB信号通路和炎症性肠病(IBD)密切相关。试验五:LPS构建大鼠肠炎模型,探究α-倒捻子素对大鼠肠道的保护作用。结果表明:α-倒捻子素可以有效地改善由LPS所致大鼠肠道损伤,尤其对肠绒毛有很好的保护作用。上述研究结果显示,α-倒捻子素有很好的抗炎作用,可以作为治疗胃肠道炎症的选择。
Abstract
α-dao nian zi su shi yi chong tian ran zhong yao cheng fen ,ju you kang yang hua 、kang yan he kang zhong liu de zuo yong 。zhi duo tang (LPS)zuo wei ge lan shi yin xing jun xi bao bi de zhu yao cheng fen ke yi yin qi duo chong yan zheng 。ben lun wen zhong yong LPSci ji da shu chang shang pi xi bao (IEC-6xi bao )gou jian yan zheng mo xing ,tan tao le α-dao nian zi su de kang yan zuo yong ji ji qian zai de fen zi ji zhi 。shi yan yi :li yong LPSzuo wei ci ji wu jian li IEC-6xi bao yan zheng mo xing ,tong guo CCK-8fa jian ce xi bao huo li 、dao zhi xian wei jing guan cha xi bao xing tai 、liu shi xi bao shu jian ce xi bao diao wang zhuang kuang 。jie guo biao ming :LPSci ji IEC-6xi bao yin qi sun shang de zui jia zuo yong ji liang he shi jian wei 10μg/mL,24 h,zai ci mo xing tiao jian xia ,xi bao huo li jiang di 、xi bao xing tai gai bian 、xi bao diao wang lv sheng gao (P<0.05)。shi yan er :cai yong CCK-8fa shai shua α-dao nian zi su de zuo yong nong du 、dao zhi xian wei jing xia guan cha xi bao xing tai xue bian hua 、liu shi xi bao shu jian ce xi bao diao wang zhuang kuang 。jie guo biao ming :di 、zhong 、gao nong du fen bie wei 2.5、5、10μMde α-dao nian zi su yu chu li xi bao ,neng gou xian zhe jiang di LPSyou dao de xi bao sun shang cheng du 、jiang di xi bao diao wang lv (P<0.05)。shi yan san :ELISAjian ce xi bao shang qing zhong PGE2、IL-6、TNF-αhe IL-1βde han liang ,ge li si (Griess)shi ji jian ce NOfen bi ,qPCRjian ce yan zheng yin zi iNOS、COX-2、IL-6、TNF-αhe IL-1βmRNAshui ping ,western blotjian ce TAK1、pTAK1、pIKK、IκB、pIκB、p65he pp65dan bai biao da liang ,mian yi ying guang jian ce p65ru he qing kuang 。jie guo biao ming :α-dao nian zi su ke yi xian zhe yi zhi you LPSyin qi de NO、PGE2、IL-6、TNF-αji IL-1βde han liang zeng jia (P<0.05),tong shi ye ke yi yi zhi you LPSyou dao de iNOS、COX-2、IL-6、TNF-αji IL-1βmRNAbiao da sheng gao (P<0.05)。α-dao nian zi su neng gou gai shan you LPSyou dao de IκBdan bai biao da xia jiang 、yi zhi pTAK1、pIKK、pIκBhe pp65dan bai biao da liang sheng gao (P<0.05)。mian yi ying guang jie guo biao ming :α-dao nian zi su ke yi xian zhe yi zhi you LPSyin qi de p65ru he 。yin ci zheng ming ,α-dao nian zi su ke yi tong guo yi zhi TAK1/NF-κBxin hao tong lu cong er huan jie LPSyou dao de yan zheng 。shi yan si :shi yong Illumina hiseqce xu ping tai jin hang quan ji yin zu de tan suo ,bing yong qPCRjin hang yan zheng 。yi gong jian ce dao le 37199ge cha yi ji yin ,LPSci ji hou 928ge ji yin xian zhe shang diao ,1068ge ji yin xian zhe xia diao (log2 fold change>1 or log2 fold change<-1,P<0.05)。α-dao nian zi su yu chu li hou 151ge ji yin xian zhe xia diao ,324ge ji yin xian zhe shang diao (log2 fold change>1 or log2 fold change<-1,P<0.05)。jie guo biao ming :cha yi ji yin xian zhe fu ji de GOzhu yao yu yan zheng he yang hua ying ji xiang guan ,ci wai yu diao wang ye you yi ding guan lian ;cong pathwayfen xi di shi cha yi biao da de ji yin fu ji yu NF-κBxin hao tong lu he yan zheng xing chang bing (IBD)mi qie xiang guan 。shi yan wu :LPSgou jian da shu chang yan mo xing ,tan jiu α-dao nian zi su dui da shu chang dao de bao hu zuo yong 。jie guo biao ming :α-dao nian zi su ke yi you xiao de gai shan you LPSsuo zhi da shu chang dao sun shang ,you ji dui chang rong mao you hen hao de bao hu zuo yong 。shang shu yan jiu jie guo xian shi ,α-dao nian zi su you hen hao de kang yan zuo yong ,ke yi zuo wei zhi liao wei chang dao yan zheng de shua ze 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自北京农学院的邹闻书，发表于刊物北京农学院2019-07-10论文，是一篇关于倒捻子素论文,北京农学院2019-07-10论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自北京农学院2019-07-10论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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