导读:本文包含了人工启动子文库论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:代谢工程,合成生物学,启动子文库,转录调控
人工启动子文库论文文献综述
余君涵,马雯雯,王智文,陈涛,赵学明[1](2016)在《人工合成启动子文库研究进展》一文中研究指出随着合成生物学的发展,人工合成功能元件在代谢工程领域显示出巨大应用潜力。启动子是调控基因转录水平的重要元件,可以利用人工合成启动子文库对代谢途径进行精细调控,使基因适量表达,实现代谢途径的组合优化。文章综述了人工合成启动子文库的研究进展,评述了不同文库的构建策略,讨论了人工合成启动子文库在代谢工程领域的应用,并展望了人工合成启动子文库的发展方向。(本文来源于《微生物学通报》期刊2016年01期)
易永红[2](2010)在《利用人工启动子文库技术筛选低温敏感性启动子》一文中研究指出低温敏感性启动子是一类特殊的启动子,它们在低温下的转录强度高于常温下的。低温下表达外源蛋白,可以增加蛋白的可溶性;一些热敏感的蛋白非常适合低温表达。自然界的低温敏感性启动子数量较少。为了研究这类启动子的特点,以及构建新型的低温表达载体,本课题运用人工启动子文库(SPL)技术,筛选人工的低温敏感性启动子,并对这些启动子进行研究。建立了适合低温敏感性启动子筛选的方法。通过对比研究抗性基因kan和绿色荧光蛋白基因EGFP各自做报告基因时的优缺点,确认采用EGFP基因为本课题中启动子的报告基因。建立了简便的双层平板诱导法对启动子进行初筛。通过分析对比大肠杆菌中四种冷激蛋白基因的启动子序列,设计了随机的人工启动子序列,运用反向PCR技术建立了包含1500个以上转化子的人工启动子文库。初筛后获得106个有效启动子;复筛后得到17个低温敏感性启动子;测序后确认了7个不同的低温敏感性启动子。选择温度敏感性较好的强启动子P129和弱启动子P3分别进行了特征测定。分析过程中以天然的低温敏感性启动子PCspA为对照,发现P129和P3各方面的特性均与PCspA类似。最佳表达温度为15℃;持续表达时间长达45 h;最佳表达的菌龄在对数生长早期(OD600为0.4左右)。以D15基因检验了P129和P3的表达蛋白的效果。发现P3启动子的效果与用荧光蛋白检测的结果一致,即表达强度弱于PCspA启动子。另外,比对D15基因在T7启动子下的表达情况,发现低温敏感性启动子未形成包涵体,而T7启动子下形成了严重的包涵体。这证明了低温敏感性启动子在表达某些蛋白时具有一定优势。(本文来源于《安徽大学》期刊2010-04-01)
人工启动子文库论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
低温敏感性启动子是一类特殊的启动子,它们在低温下的转录强度高于常温下的。低温下表达外源蛋白,可以增加蛋白的可溶性;一些热敏感的蛋白非常适合低温表达。自然界的低温敏感性启动子数量较少。为了研究这类启动子的特点,以及构建新型的低温表达载体,本课题运用人工启动子文库(SPL)技术,筛选人工的低温敏感性启动子,并对这些启动子进行研究。建立了适合低温敏感性启动子筛选的方法。通过对比研究抗性基因kan和绿色荧光蛋白基因EGFP各自做报告基因时的优缺点,确认采用EGFP基因为本课题中启动子的报告基因。建立了简便的双层平板诱导法对启动子进行初筛。通过分析对比大肠杆菌中四种冷激蛋白基因的启动子序列,设计了随机的人工启动子序列,运用反向PCR技术建立了包含1500个以上转化子的人工启动子文库。初筛后获得106个有效启动子;复筛后得到17个低温敏感性启动子;测序后确认了7个不同的低温敏感性启动子。选择温度敏感性较好的强启动子P129和弱启动子P3分别进行了特征测定。分析过程中以天然的低温敏感性启动子PCspA为对照,发现P129和P3各方面的特性均与PCspA类似。最佳表达温度为15℃;持续表达时间长达45 h;最佳表达的菌龄在对数生长早期(OD600为0.4左右)。以D15基因检验了P129和P3的表达蛋白的效果。发现P3启动子的效果与用荧光蛋白检测的结果一致,即表达强度弱于PCspA启动子。另外,比对D15基因在T7启动子下的表达情况,发现低温敏感性启动子未形成包涵体,而T7启动子下形成了严重的包涵体。这证明了低温敏感性启动子在表达某些蛋白时具有一定优势。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人工启动子文库论文参考文献
[1].余君涵,马雯雯,王智文,陈涛,赵学明.人工合成启动子文库研究进展[J].微生物学通报.2016
[2].易永红.利用人工启动子文库技术筛选低温敏感性启动子[D].安徽大学.2010