导读:本文包含了群特异性抗血清论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:牛支原体,MAC,补体激活途径,代谢抑制
群特异性抗血清论文文献综述
张云科,吴文学[1]（2018）在《特异性抗血清抑制牛支原体生长的分子机制研究》一文中研究指出研究背景:补体系统作为先天性免疫系统的主要组成部分,在抗病原微生物感染过程中发挥了重要作用。补体系统由30余种蛋白组成,其固有成分在不同激活物的作用下,分别激活经典途径、旁路途径或凝集途径,然后再通过一系列丝氨酸蛋白酶的级联酶解反应形成攻膜复合体(MAC),裂解靶细胞。支原体是一类没有细胞壁、可用人工培养基培养的最小原核细胞型微生物。支原体生长抑制试验(GI)和代谢抑制试验(MI)作为支原体鉴定的方法之一,其原理是根据特异性血清能够抑制支原体生长这一特性,但其具体分子机制并不清楚。研究方法 :本研究,以纯化后的兔抗M.bovis特异性IgG作为"诱饵",通过Pull-down试验及LC-MS/MS鉴定,成功筛选到9个牛支原体优势抗原蛋白。通过大肠杆菌表达系统成功表达丙酮酸脱氢酶(E2)、嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)、甘油ABC转运蛋白(ugpB)、P81蛋白等四个蛋白,并分别制备其兔多克隆抗体,通过Western blotting和透射免疫电镜(Transmission electron microscopy,TEM)鉴定发现ugpB和P81蛋白为膜蛋白。通过牛支原体代谢抑制试验发现兔抗ugpB特异性血清具有高效的抑菌活性,将血清热灭活、或通过酵母聚糖消耗掉血清中补体成分、或除去血清中特异性IgG这种抑制现象消失,因此,我们推测特异性血清抑制支原体生长依赖于特异性抗体和补体。为了进一步验证我们的推测,将牛支原体经兔anti-ugpB血清处理后,通过Western blotting可检测到菌体表面沉积大量的C5b-9分子与IgG分子,扫描电镜(Scanning electronmicroscope,SEM)可见支原体破裂,而经其他蛋白的兔抗血清处理的牛支原体检测均未检测到C5b-9分子,也未能观察到菌体破裂。研究结论 :牛支原体特异性抗血清中特异性IgG与牛支原体特定膜蛋白结合通过经典途径激活补体系统,形成的攻膜复合体沉积在菌体表面,造成菌体破裂,进而抑制了牛支原体生长。该研究为牛支原体防治、新型疫苗的研发提供了重要的科学参考。(本文来源于《第十叁届全国免疫学学术大会壁报交流集》期刊2018-11-07）
苏俊,刘曼,王吉贵,孙燕,刘维全[2]（2018）在《水貂生长激素的原核表达及特异性抗血清制备》一文中研究指出本研究旨在建立水貂生长激素(mink growth hormone,mGH)的原核高效表达体系,探索mGH蛋白规模化生产方法,利用获得的目的蛋白制备特异抗血清。将已构建的原核表达载体pET28b-mGH转化大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS感受态细胞,经IPTG诱导表达,超声破碎菌体后离心获得包涵体蛋白,利用8mol/L尿素对其进行溶解和复性,经Ni-NTA树脂亲和层析纯化获得重组蛋白。通过Western blotting检测及MALDI-TOFMS质谱分析对获得的蛋白进行鉴定。用SDS-PAGE电泳法检测蛋白纯度,用BCA法测定其浓度。复性mGH蛋白与完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂乳化制备免疫抗原,采用皮下多点注射法免疫3只新西兰大白兔,首次免疫剂量为600μg/只,二免剂量为600μg/只,叁免剂量为400μg/只。叁免10d后分离制备血清,Western blotting法检测其特异性,间接ELISA法检测其效价。结果表明,原核表达的包涵体经Ni-NTA柱纯化后所得蛋白鉴定为mGH融合蛋白;SDS-PAGE电泳鉴定复性mGH蛋白条带单一,纯度达90%以上,BCA法计算蛋白浓度为669μg/mL,均达到了免疫动物的要求;制备的抗血清经Western blotting检测具有良好的结合特异性,间接ELISA法测定其抗体效价达1∶256 000以上。上述结果表明,原核表达载体pET28b-mGH可在大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS细胞中高效表达mGH融合蛋白,表达蛋白经变性、复性和纯化后免疫新西兰大白兔,可制备高效价特异性抗血清。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年04期）
陈梓茵,江朝杨,陆承聪,韩艳红[3]（2017）在《茉莉C病毒外壳蛋白的原核表达和特异性抗血清的制备》一文中研究指出茉莉C病毒(Jasmine virus C,JaVC)是侵染茉莉(Jasminum sambac)的一种病毒,该病毒属于乙型线性病毒科(Betaflexiviridae),香石竹潜隐病毒属(Carlavirus),首先发现于台湾地区。现有研究表明,JaVC可能是茉莉黄化嵌纹病的病原之一;本实验室尚未发现JaVC单独侵染的茉莉植株。为了便于进一步的研究,根据茉莉C病毒台湾分离物(JaVC-TW)(GenBank No.NC-030926.1)和本实验室测定的序列,采用引物carCPF:5′-AAGAAGGAGATATACCATGAGTTCCACTTCAGACGACAATTC-3′(下划线为载体序列)和carCPR:5′-TGGTGGTGGTGGTGGTGCTCTCTTTTCCAAATCCCCCGTTC-3′(下划线为载体序列)扩增获得JaVC外壳蛋白(CP)基因的全长片段。利用Gibson组装(NEB#E5510S)的方法将该片段克隆到pET-28a(+)载体上,获得重组质粒pET-28aCP。SDS-PAGE分析显示,pET-28aCP在大肠杆菌Rosetta中,经1mmol/L IPTG诱导后,可特异性的表达分子量大小约为33ku的融合蛋白,但是该蛋白只存在于包涵体中。将包涵体蛋白溶于高浓度尿素溶液中,经Ni-NTA Agarose亲和层析柱纯化后,获得高纯度的目的融合蛋白。Western blot检测纯化后的蛋白,结果表明该融合蛋白可被His抗体识别,证实了目的蛋白成功表达并且融合表达了His标签。用纯化后的CP融合蛋白作为抗原免疫健康白兔,制备了特异性的抗血清。(本文来源于《中国植物病理学会2017年学术年会论文集》期刊2017-07-25）
魏超君,陈玉芊,吴玲,卢思奇[4]（2015）在《蓝氏贾第鞭毛虫α-8贾第素特异性抗原表位肽的模拟合成及其抗血清的制备与鉴定》一文中研究指出目的利用生物信息学相关软件对α-8贾第素的氨基酸序列进行序列分析及抗原表位的多参数预测,并制备相应抗血清予以鉴定。为贾第虫细胞骨架的研究增添新的知识和研究资料,为抗贾第虫药物靶点的选择提供理论和实验依据。方法首先,根据蓝氏贾第鞭毛虫α-8贾第素基因表达的氨基酸序列,采用DNAstar软件和BIOSUN(本文来源于《中华医学会第十二次全国临床微生物学术年会暨第十一次全球华人临床微生物学与感染症学术年会论文汇编》期刊2015-08-06）
赵莉,石保新,杨帆,赵璐,色力克·吾布力哈生木[5]（2015）在《EgM123蛋白特异性抗血清对泡型棘球蚴体外发育的影响》一文中研究指出目的:两种EgM123重组表达蛋白高免血清分别作用体外培养的泡球蚴原头蚴,观察其发育变化。方法:在37℃、5%CO2培养箱中,体外培养原头蚴48 h后,在24孔细胞板里加入原头蚴约150-200枚/孔;用两种EgM123重组表达蛋白(pET41b-EgM123和pET28a-EgM123)的抗血清按不同含量(200μL/孔、100μL/孔、50μL/孔)分别作用3天、6天,观察原头蚴发育变化情况,计算其死亡率。结果:两种EgM123抗血清随着抗血清的含量增高,原头蚴的死亡率升高。结论:抗血清对泡型棘球蚴的原头蚴体外发育具有杀伤作用。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十叁次学术研讨会论文集》期刊2015-07-25）
王海新[6]（2015）在《新城疫病毒蛋白特异性抗血清的研制》一文中研究指出新城疫是由新城疫病毒引起的鸡和火鸡以及其他200多种鸟类的一种传染病。该病具有较高的发病率和死亡率,被世界动物卫生组织列为法定报告疫病。在我国新城疫的暴发和流行虽然得到了控制,但是新城疫隐性感染以及免疫鸡群流行新城疫等现象依然存在,生产性能和产品质量因此遭受严重影响。改进检测技术以及开发新的免疫评价方法成为当前新城疫防控工作的重点。新城疫病毒包括6种结构蛋白:大分子RNA依赖性RNA聚合酶蛋白(Large polymerase protein,L)、血凝素-神经氨酸酶(Hemagglutinin-neuraminidase,HN)、融合蛋白(Fusion protein,F)核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,NP)、磷蛋白(Phosphoprotein,P)和基质蛋白(Matrix protein,M)。本研究通过SDS-PAGE分离纯化了新城疫病毒的结构蛋白,并以其免疫豚鼠,成功制备了HN蛋白抗血清和NP蛋白抗血清,为新城疫的临床诊断和实验室研究奠定了基础。通过试验研究,主要得到了以下成果。1.病毒的纯化30%蔗糖密度梯度超速离心法,只需要一个蔗糖密度梯度,操作简单有效。经鉴定,采用此方法浓缩纯化的新城疫病毒血凝滴度达15log2,蛋白含量约为5.3 mg/mL,病毒纯度达99.4%。2.蛋白的分离制备利用SDS-PAGE对蛋白质进行电泳分离后,采用0.25 M KCl处理使蛋白条带呈现乳白色,并分别对蛋白HN、NP、M条带予以切开、分离,进一步采用以1%SDS为主要成分的回收液煮沸回收其中的蛋白。经验证,该方法蛋白回收效率理想,并且不会破坏蛋白的一级结构。3.动物试验采用分离制备的新城疫病毒蛋白免疫豚鼠,能够引起良好的免疫反应。并且成功制备了HN蛋白抗血清和NP蛋白抗血清,经鉴定,HN蛋白抗血清特异性良好,抗体效价约为1:20000,综合质量较高;NP蛋白抗血清效价约为1:60000,综合质量理想。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2015-05-01）
薛青红,李润,印春生,支海兵,夏业才[7]（2014）在《犬细小病毒特异性抗血清的制备及应用研究》一文中研究指出为制备犬细小病毒特异性抗血清,用犬细小病毒DD株免疫健康易感比格犬,无菌采血后分离血清制备犬抗CPV-2血清。通过SN、ELISA、IFA、HI方法对制备的血清进行检测,未检出犬类常见的5种病毒抗体,说明该血清特异性良好。经测定,该血清中和抗体效价为1∶512;HI效价为1∶1280。应用结果表明,该血清对不同犬细小病毒毒株中和能力相当,对CPV-2感染犬有良好的治疗效果。(本文来源于《中国兽药杂志》期刊2014年10期）
陈立加,陈伟才,邓卫武,朱平安[8]（2014）在《HBx突变体特异性抗血清的制备及临床研究》一文中研究指出目的探讨HBx突变体特异性抗血清的制备及临床效果。方法通过多肽合成的方法制备HBxd431、HBx-d382缺失型突变体特异性多肽抗原,免疫动物制备相应抗血清。产生的抗体经纯化、酶标后,建立检测HBx-d431、HBx-d382特异性多肽抗原及其抗体的ELISA方法。通过对肝细胞癌患者和非肝细胞癌患者临床标本的检测,研究HBx-d431、HBx-d382缺失型突变体多肽抗原及其抗体的临床意义。结果 ELISA法研制的兔抗体HBx-d431、HBx-d382多克隆抗体均能与相应的抗原发生反应,并随着兔抗血清稀释的增加,A值会逐渐下降,肝细胞癌组HBxAg-w、HBxAg-m、HBxAb-w和HBxAb-m明显高于正常健康组,差异有统计学意义。结论建立的ELISA方法将可用于HBV相关肝细胞癌的早期诊断、HBV携带者及慢性乙肝患者的监测。(本文来源于《现代中西医结合杂志》期刊2014年10期）
李丽,李勇文,段小群,陈旭,杨新平[9]（2012）在《罗汉果甜苷V特异性抗血清的制备与应用》一文中研究指出目的制备罗汉果甜苷V(MogV)特异性抗血清,建立MogV含量竞争性抑制酶联免疫检测法。方法用罗汉果甜苷V-丁二酸酯-牛血清蛋白(MogV-HS-BSA)结合比约为44∶1为免疫抗原制备抗血清,用罗汉果甜苷V-丁二酸酯-人血清蛋白(MogV-HS-HSA)结合比约为64∶1为包被抗原,建立MogV含量竞争性抑制酶联免疫检测法。结果包被抗原工作浓度为1μg.mL 1,血清最佳稀释倍数为1∶8 000,在此工作浓度下,MogV浓度在1×10-4~1μg.mL 1内回归方程Y=0.158X+0.298,r=0.991 0。结论成功制备了MogV抗血清,MogV浓度在1×10-4~1μg.mL 1内对抗血清的OD(405 nm)值抑制作用呈良好的线性关系。(本文来源于《中国现代应用药学》期刊2012年07期）
严兵,彭开松,薛秀恒,涂健,王强[10]（2010）在《青霉素酶特异性抗血清间接ELISA方法的建立》一文中研究指出以青霉素酶为抗原,免疫健康獭兔,自行制备青霉素酶特异性抗血清(PcAb),并建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA)的测定方法,优化试验条件,测定制备的青霉素酶特异性抗血清效价。结果表面抗原最佳包被浓度为10μg/mL,酶标二抗最佳稀释度为1∶2 000,阳性血清最佳稀释度为1∶2 000,抗原最佳包被条件为4℃过夜,血清最佳反应时间为37℃1 h,酶标二抗反应最佳时间为37℃1 h,与底物作用的最佳时间为20 min。(本文来源于《动物医学进展》期刊2010年09期）
群特异性抗血清论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究旨在建立水貂生长激素(mink growth hormone,mGH)的原核高效表达体系,探索mGH蛋白规模化生产方法,利用获得的目的蛋白制备特异抗血清。将已构建的原核表达载体pET28b-mGH转化大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS感受态细胞,经IPTG诱导表达,超声破碎菌体后离心获得包涵体蛋白,利用8mol/L尿素对其进行溶解和复性,经Ni-NTA树脂亲和层析纯化获得重组蛋白。通过Western blotting检测及MALDI-TOFMS质谱分析对获得的蛋白进行鉴定。用SDS-PAGE电泳法检测蛋白纯度,用BCA法测定其浓度。复性mGH蛋白与完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂乳化制备免疫抗原,采用皮下多点注射法免疫3只新西兰大白兔,首次免疫剂量为600μg/只,二免剂量为600μg/只,叁免剂量为400μg/只。叁免10d后分离制备血清,Western blotting法检测其特异性,间接ELISA法检测其效价。结果表明,原核表达的包涵体经Ni-NTA柱纯化后所得蛋白鉴定为mGH融合蛋白;SDS-PAGE电泳鉴定复性mGH蛋白条带单一,纯度达90%以上,BCA法计算蛋白浓度为669μg/mL,均达到了免疫动物的要求;制备的抗血清经Western blotting检测具有良好的结合特异性,间接ELISA法测定其抗体效价达1∶256 000以上。上述结果表明,原核表达载体pET28b-mGH可在大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS细胞中高效表达mGH融合蛋白,表达蛋白经变性、复性和纯化后免疫新西兰大白兔,可制备高效价特异性抗血清。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
群特异性抗血清论文参考文献
[1].张云科,吴文学.特异性抗血清抑制牛支原体生长的分子机制研究[C].第十叁届全国免疫学学术大会壁报交流集.2018
[2].苏俊,刘曼,王吉贵,孙燕,刘维全.水貂生长激素的原核表达及特异性抗血清制备[J].中国畜牧兽医.2018
[3].陈梓茵,江朝杨,陆承聪,韩艳红.茉莉C病毒外壳蛋白的原核表达和特异性抗血清的制备[C].中国植物病理学会2017年学术年会论文集.2017
[4].魏超君,陈玉芊,吴玲,卢思奇.蓝氏贾第鞭毛虫α-8贾第素特异性抗原表位肽的模拟合成及其抗血清的制备与鉴定[C].中华医学会第十二次全国临床微生物学术年会暨第十一次全球华人临床微生物学与感染症学术年会论文汇编.2015
[5].赵莉,石保新,杨帆,赵璐,色力克·吾布力哈生木.EgM123蛋白特异性抗血清对泡型棘球蚴体外发育的影响[C].中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十叁次学术研讨会论文集.2015
[6].王海新.新城疫病毒蛋白特异性抗血清的研制[D].西北农林科技大学.2015
[7].薛青红,李润,印春生,支海兵,夏业才.犬细小病毒特异性抗血清的制备及应用研究[J].中国兽药杂志.2014
[8].陈立加,陈伟才,邓卫武,朱平安.HBx突变体特异性抗血清的制备及临床研究[J].现代中西医结合杂志.2014
[9].李丽,李勇文,段小群,陈旭,杨新平.罗汉果甜苷V特异性抗血清的制备与应用[J].中国现代应用药学.2012
[10].严兵,彭开松,薛秀恒,涂健,王强.青霉素酶特异性抗血清间接ELISA方法的建立[J].动物医学进展.2010