黑河市第一人民医院黑龙江黑河市164300
【摘要】目的：探讨血小板假性减少的原因及纠正措施。方法：对血细胞分析仪检测的30例血小板假性减少标本进行血涂片复检、手工计数血小板。结果：12例EDTA依赖患者、8例存在大血小板的患者、10例采血不顺患者仪器阻抗法血小板计数结果与手工计数血小板结果比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：EDTA依赖引起血小板聚集导致血小板假性减少，电阻抗法计数大血小板有一定的误差也会导致血小板假性减少，采用手工计数血小板复检假性血小板减少标本可保证结果的准确性。
【关键词】血小板假性减少；血球分析仪；影响因素
【中图分类号】R331.1+43【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2017）02-019-01
Analysisof30casesofthrombocytopeniaandItsCountermeasures
Summary：Objectivetoexplorethecausesandcorrectivemeasuresofthrombocytopenia.Method：30casesoffalseplateletofbloodcellanalyzerdetectionwerereducedbloodsmear，manualplateletcounting.Results：12casesofEDTAdependentpatients，8casesofpatientswithlargeplatelets，andbloodsampleswerecollectedfromthepatientswiththedisease.Theresultsshowedthattherewasasignificantdifferencebetweentheresultsofplateletcountandmanualcountingplateletcount（P<0.05）inpatientswith.Conclusion：EDTAdependentpseudothrombocytopeniacausedbyplateletaggregation，plateletcountresistancemethodhascertainerrorwillleadtoplateletdecreasing，theaccuracyofmanualplateletcountingrepseudothrombocytopeniaspecimenscanguaranteeresults.
Keywords：Thrombocytopenia；Hematologyanalyzer；influencefactor
随着全自动血球分析仪的普及，提高了血细胞分析的速度，血细胞计数结果的准确性和精密度也得到了提高。最为广泛的抗凝剂是被国际血液学标准化委员会（ICSH）认定的乙二胺四乙酸（EDTA）盐。然而，由于血小板易聚集、黏附、破坏等特点及血球仪自身原理的限制，测定血小板常会出现假性减少现象，即EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA-PTCP），近几年的报道也日趋增多。[1]血小板检测是临床最为常用的检测项目之一，EDTA依赖引起的假性血小板减少若不及时发现和纠正对医生的诊断和患者治疗都带来重要影响。现对30例血小板假性减少结果及影响因素报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选择本院2015年10月至2016年10月发现的假性血小板减少患者30例。
1.2仪器与试剂
日本SysmexXE-5000全自动血细胞分析仪，Olympus、显微镜。SysmexXE-5000全自动血细胞分析仪原装配套试剂和质控，草酸铵血小板稀释液，配方参照《全国临床检验操作规程（第3版）》[2]，吉姆萨-贵氏染液（Boas公司），阳普公司EDTA-K2真空采血管。
1.3方法
对假性血小板减少患者采静脉血标本2mL，用EDTA-K2真空抗凝管采集。上机前，首先观察标本性状，检查标本有无凝固、抗凝剂比例是否合适，以排除不合格标本造成的影响，然后上机检测，对血小板低于100X109/L且直方图异常或仪器报警提示有血小板聚集的标本，推片染色镜检，显微镜下观察血小板分布情况、有无大量血小板聚集、有无大血小板等，并采患者末梢血进行人工血小板计数，操作规程按草酸铵稀释液法进行。将仪器法和人工计数法两种方法测定的血小板计数结果进行统计学数据处理。
1.4统计学处理
采用SPSS17.0统计学软件进行数据处理。计量资料以平均值±s表示，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
仪器阻抗法假性血小板减少血小板计数结果与人工计数血小板结果比较差异有统计学意义（P<0.05）。
3讨论
血细胞分析仪检测血小板减少大致分两种情况：（1）是血小板真性减少，即患者由于自身疾病导致的血小板减少，如特发性血小板减少性紫癫（ITP）、白血病、肝肾疾病、药物反应等。（2）是患者血小板正常而结果显示减少的假性减少，如血小板聚集（EDTA抗凝剂依赖）、大血小板的存在、采血不顺等，这种情况仪器会发出报警，如：血小板聚集，或直方图、散点图显示异常，这时就需要人工辨别减少的真伪。
3.1EDTA抗凝剂的影响
早在1969年Gowland等首次报道了EDTA依赖性血小板减少症（EDTA-PTCP），引起了国内外的广泛关注，但造成血小板聚集的具体机制仍不是很清楚。目前一般认为是血小板抗体与血小板表面抗原反应所致，可能是EDTA的存在修饰了血小板膜表面某种隐蔽的抗原结构，与血浆中的自身抗体结构结合，激活卵磷脂酶A，磷脂酶C等活性物质，这些活性物质又能活化血小板纤维蛋白受体，促使血小板与纤维蛋白原聚集而出现凝聚。另外，EDTA能够增加血小板表面电荷防止血小板凝聚，血小板抗体可能减少了血小板表面电荷而削弱了EDTA的功效，血小板抗体是因何所致尚不清楚。EDTA依赖性血小板减少在患者和健康体检者中都有发生，其中2例是一对母子，母亲产检期间发现是EDTA依赖性血小板减少，产后新生儿同样是EDTA依赖性血小板减少，这与文献报道的可能有遗传性相符。
3.2大血小板的影响全血细胞
分析仪电阻抗法计数血小板的阈值通常在2-24fL，是根据颗粒体积大小通过检测小孔产生的脉冲来区别和计数，通常血小板体积在2-20fL，而许多病理情况下血小板的体积大小有很大差异，甚至达到30fL以上，如肿瘤、急性心肌梗死、妊娠等大血小板会增多，仪器会错计为小红细胞[3]而导致血小板假性减少。SysmexXE-5000全自动血细胞分析仪用阻抗法测定血小板异常时，可转至网织红细胞/血细胞计数通道用核酸荧光染色法进行测定。由于血小板含有RNA，能被荧光染色，成熟的红细胞没有RNA不被染色，因此，根据荧光强度可以把血小板和小红细胞及其它杂质分开，这样既可以消除小红细胞及碎片的影响，又可以避免遗漏大血小板而造成的假性结果。但核酸荧光染色法目前还没有完全普及，对于没有核酸荧光染色法的仪器，简单的方法还是人工计数和推片镜检。
3.3其它影响
静脉穿刺不顺或未及时混匀会使血液产生凝块，若凝块细小肉眼不易发现就会造成血小板假性减少。常见于新生儿、儿童、肥胖者、长期输液的重症患者等。对于此类标本，可与临床沟通重新抽血或采末梢血均可。另外，标本放置时间过长、血小板冷凝集、低温均可导致血小板假性减少。
综上所述，在日常工作中遇到血小板减少的标本，一定要提高警惕，结合临床诊断、标本状况、仪器警号提示等综合分析。对于血小板假性减少的患者及时进行人工复检保证结果的准确性，以免误诊、误治造成医疗纠纷甚至医疗事故的发生。
参考文献：
[1]张茹，张涛.如何减少乙二胺四乙酸抗凝剂依赖性假性血小板减低[J].临床误诊误治，2015，23（2）：134-135.
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2016：136-137.
[3]周小棉，邹晓.假性血小板减少症研究进展[J].中华检验医学杂志，2015，30（9）：1065-1067.