导读:本文包含了糖肽的酶法合成论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:绿色合成,β-丙氨酸
糖肽的酶法合成论文文献综述
殷东亚,潘江,许建和[1]（2018）在《L-肌肽的酶法绿色合成》一文中研究指出左旋肌肽[L-carnosine]是由β-丙氨酸和L-组氨酸缩合得到的活性二肽,被广泛用作于化妆品、药品和保健品添加剂。目前工业上肌肽的制备主要通过化学法完成,其中邻苯二甲酸酐法技术相对成熟,应用比较广泛~([1]),但此法溶剂消耗较大,副产物较多,环(本文来源于《中国生物工程学会第十二届学术年会暨2018年全国生物技术大会论文集》期刊2018-11-09）
杨娟[2]（2018）在《γ-谷氨酰肽的酶法合成及其应用》一文中研究指出γ-谷氨酰肽是指含有γ-谷氨酰残基的一类小分子肽,近年来,因其具有显着的呈味效果而被广泛关注。γ-谷氨酰肽可通过γ-谷氨酰转肽反应合成,部分微生物源谷氨酰胺酶可催化此γ-谷氨酰转肽反应,因此可用于合成γ-谷氨酰肽。论文选用了叁种不同微生物来源的谷氨酰胺酶,通过酶学特性对它们催化γ-谷氨酰转肽反应的能力进行了研究。将具有显着催化γ-谷氨酰转肽作用的谷氨酰胺酶用于合成γ-谷氨酰肽,并对产物的呈味特性、促胆囊收缩素分泌作用和抑制DPP-IV酶活性进行研究。实验结果如下:(1)米曲霉和解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶具有催化γ-谷氨酰转肽作用的活性,其酶活力分别为10 U/g和100 U/g。其中,解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶表现γ-谷氨酰转肽作用的最适pH值和温度分别为pH 10.0和37℃。此酶具有广泛的底物选择性,谷氨酰胺可作为γ-谷氨酰供体,最佳的γ-谷氨酰受体包括色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、酪氨酸等。(2)解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶通过链式反应催化了系列γ-谷氨酰肽的合成。在谷氨酰胺和受体氨基酸存在的情况下,成功合成了系列γ-谷氨酰短肽,如γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Trp、γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Phe、γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Tyr、γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Met和γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Val肽等。各个酶促反应液中系列γ-谷氨酰肽的氨基酸组成特点可描述为N端聚γ-谷氨酰残基与C端受体氨基酸的结合。米氏常数测定结果显示此酶对受体的亲和力随着受体分子中γ-谷氨酰残基数的增多而降低。(3)γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Phe、γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Tyr、γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Met和γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Val肽具有显着的呈味效果。其呈味特性包括:在水溶液中呈现涩味和/或苦味;在含有基本呈味物质的溶液中具有增味作用,如使蔗糖甜味增加、味精鲜味增加和食盐咸味增加;添加到酱油或者鸡汤中可使酱油鲜味和持续感增加,使鸡汤的鲜味、浓厚感和满口味增加。这些结果表明此类γ-谷氨酰肽具有“厚味”呈味效果。此外,酶促反应液可作为风味增强剂用于酱油和鸡汤中,使酱油鲜味和持续性增加,鸡汤鲜味、浓厚感和满口感增加。(4)γ-[Glu]_(0≦n≦4)-Trp和γ-[Glu]_(0≦n≦5)-Phe可促进CCK的分泌。其中,γ-[Glu]_(2≦n≦4)-Trp和γ-[Glu]_(3≦n≦5)-Phe肽对CCK的促分泌作用与色氨酸和苯丙氨酸的促CCK分泌效果基本一致(p>0.05),且均低于γ-Glu-Trp和γ-[Glu]_((n=1,2))-Phe对CCK的促分泌效果(p<0.05)。说明对色氨酸和苯丙氨酸进行γ-谷氨酰基化可提高此它们对CCK的促分泌作用。γ-[Glu]_(0≦n≦4)-Trp和γ-[Glu]_(0≦n≦5)-Phe促CCK分泌的过程可通过CaSR-调节的Ca~(2+)/CaM/CaMK信使通路实现。(5)通过分子模拟技术和DPP-IV酶抑制率测定结果显示γ-Glu-Met、γ-Glu-Trp、γ-Glu-Phe和γ-Glu-Tyr可通过竞争性抑制作用对DPP-IV酶产生抑制效果。通过LIGPLOT程序确定了γ-Glu-Met与DPP-IV酶结合的氨基酸残基位点和共价键类型。(本文来源于《华南理工大学》期刊2018-07-06）
邹洋[3]（2012）在《糖核苷酸的酶法合成与唾液酸糖肽的分离制备》一文中研究指出糖类(包括单糖、寡糖和多糖)和糖缀合物广泛存在于生物体内,作为重要的结构组分和信息分子,在许多生物学过程中都发挥着重要的作用。糖链的结构与其功能有着密切的联系,有些糖链的改变会引起特定的生理反应,因此,糖链的结构与功能研究是糖生物学和生物医药领域的关注热点。本论文主要分为两个主要部分：一是合成多种糖核苷酸(第二章和第叁章),作为糖基转移酶合成糖缀合物的糖基供体；二是分离制备唾液酸糖肽,作为内切糖苷酶合成糖缀合物的糖基供体。在糖核苷酸的体外合成中,最为简便的方法是利用补救途径中的糖激酶和焦磷酸化酶进行合成。单糖首先在糖激酶的催化下合成糖-1-P,再利用焦磷酸化酶合成相应的糖核苷酸。因此,糖-1-P的合成是糖核苷酸合成的第一步。本论文的目标之一是解决酶法合成Gal/Glc-1-P及其结构类似物的问题,进而实现UDP-Gal/Glc及其结构类似物的酶法合成。本文第二章首先对肺炎链球菌来源的半乳糖激酶(GalKSpe4)进行了体外的表达及纯化,然后,我们选用了34种单糖(包括Gal/Glc及其结构类似物和6种L型糖)与半乳糖激酶进行反应,并对产物和产率进行了检测。半乳糖激酶具有较宽的底物适应性,它能够利用34种单糖中的14种作为底物,对于C-2、C-4、C-6位的变化都有较强的适应性,但是其催化活性会随着C-2位空间位阻的变大而逐渐降低,并且若在半乳糖结构中有两个位置同时变化,GalKSpe4则无法利用。另外,D型和L型对于GalKSpe4的识别也是十分重要。相比之前报道过的半乳糖激酶,它可以较为高效的合成Glc-1-P(25%)、GalNAc-1-P(68%),同时还具备合成从未报道过的L-Man-1-P(43%)的能力,这也是对半乳糖激酶研究的一个重大发现。同时,我们对几种糖-1-P进行了大量合成,并对其进行了纯化和结构鉴定,建立了一套完整的合成-纯化-鉴定糖-1-P的制备体系。本文第叁章在第二章研究的基础上,又对大肠杆菌来源的UDP-Glc焦磷酸化酶进行了表达和纯化,然后以第二章中半乳糖激酶能够利用的单糖为底物,利用半乳糖激酶和UDP-Glc焦磷酸化酶,一锅法合成各种糖核苷酸,并对产物的结构和产率进行了测定。实验结果表明,在14种单糖中,其中9种单糖可以通过一锅法直接合成相应的糖核苷酸。对于C-2位发生结构修饰的Gal结构类似物,只有Gal-2-N3的利用率达到了78%,Ga1NAc的利用率有32%,而Gal-2-DeO的利用率仅有15%,对于C-2位有较大取代基的Gal的结构类似物,没有转化成相应的糖核苷酸。对于C-4位、C-6位发生结构修饰的Gal结构类似物来说,随着空间位阻的变大,转化率有所降低。同时,我们利用一锅法大量合成了UDP-Glc并对产物进行了纯化和鉴定,建立了一套完整的糖核苷酸制备体系。利用糖苷内切酶的转糖基活性来合成带有均一糖链的糖蛋白和糖肽是目前较为高效的合成策略,特别是对于一些带有完整N-糖链的糖蛋白的合成。利用这种方法合成带有完整糖链的糖蛋白必须要有完整均一的糖链作为糖基供体。唾液酸糖肽是一种带有完整唾液酸化的N-糖量的糖肽,目前作为糖苷酶切酶的糖基供体已经广泛的用于糖蛋白的合成过程中。本文第四章的目标就是探索一种更为高效简便、周期短、成本低的唾液酸糖肽的分离制备方法。在本章中,我们用活性炭柱取代阴阳离子交换柱进行分离纯化,取代葡聚糖凝胶G-25进行脱盐,将原有的七个主要分离纯化步骤,简化为叁个,并对分离纯化的条件进行了优化。通过实验,我们从100个鸡蛋卵黄中纯化出唾液酸糖肽680mg,并其进行了结构鉴定和纯度测定,经检测,该唾液酸糖肽的结构与文献报道致,且HPLC纯度可达95%以上。我们建立了一套步骤简、周期短、成本低的唾液酸糖肽的制备体系,对糖生物学领域和生物医药领域都具有十分重要的意义。(本文来源于《山东大学》期刊2012-05-20）
邹洋,薛梦阳,赵颖华,陈敏[4]（2012）在《糖苷内切酶法合成带有均一糖链的糖蛋白和糖肽》一文中研究指出糖基化作用是真核生物蛋白翻译后修饰的重要环节,糖链对于蛋白质的结构和功能有重要影响。目前,合成带有均一糖链的糖蛋白和糖肽的策略主要有:(1)利用糖基化的氨基酸进行固相或液相合成。(2)将氨基化的寡糖链直接与预先合成的带有糖基化位点的多肽相结合。(3)利用糖基转移酶和糖苷酶的化学酶法合成策略。以上叁种方法,都有各自的优点和不足。相对而言,利用微生物来源的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶(ENGase)合成策略是目前发展较快且更具实践意义的方法。糖苷内切酶法合成策略的研究进展包括:(1)ENGase催化机制的研究。(2)糖基供体的研究。(3)ENGase突变体的研究。(4)糖苷内切酶法的应用。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2012年02期）
吴志刚[5]（2009）在《天然复杂型N-糖苷分离与糖肽的酶法合成》一文中研究指出糖蛋白具有重要的生理和生化作用,但以目前的技术获得均一糖蛋白很困难,因此对其结构和功能的研究非常缓慢。体外糖链人源化的改造主要是利用酶的合成活性进行糖肽的定向合成,将完整的N-糖苷直接连到肽链的糖基化位点上。因糖苷不易以化学方法或者酶法大量合成,因此从自然界中分离天然的N-糖苷便成为获得N-糖苷的最有效的方式。本实验从鸡蛋蛋黄中分离到复杂型N-糖苷,并尝试了两种酶法合成糖肽。鸡蛋蛋黄中富含复杂型的N-唾液酸寡糖,可为糖肽的体外合成提供丰富的N-糖苷来源,并且鸡蛋中含有的N-糖苷与人体内N-糖苷极其相似,因此获得鸡蛋蛋黄中的N-糖苷具有重要的意义。本实验改进了Akira Seko等人提出的分离方法,大大缩短了分离时间,提高了分离效率。按照Akira Seko的方法,从100个鸡蛋蛋黄中分离得到糖肽SGP大约需要五个半月的时间,用改进法1纯化,大约需要四个半月的时间,而使用改进法2大约只需两个月的时间。从100个鸡蛋中,用Akira Seko的方法大约得到240mg SGP和12mg寡糖苷FSG,用改进法1大约得到300mg SGP,15mg FSG,用改进法2大约得到340mg SGP。利用改进法2纯化SGP,纯化效率提高了41%,纯化时间仅为原来的45%,并且节约了试验试剂等费用,为大量生产糖苷或者糖肽奠定了试验基础。SG是只带有Asn的复杂型寡糖,相比带有6个氨基酸的SGP来说,更容易用化学法保护、修饰,保护修饰后的SG可作为底物,以固相合成法合成具有所需肽链序列的糖肽。1mg SGP经pronase酶切、Graphic Carbon纯化后可得到0.73mg SG,纯化效率可达到80%。SG的市场价格大约为RMB 20000/mg。蛋白酶中的半胱氨酸蛋白酶在一定的条件下具有逆反应活性,可以形成酰胺键合成肽链。基于催化中心和正反应催化机理的相似性,本实验探索了来源于酿酒酵母的糖酰胺酶(Pnglp)是否具有逆反应活性,即合成糖酰胺键形成糖肽。合成的促红细胞生成素糖基化位点八肽(底物)在2h后开始逐渐丢掉Asp的γ位羧基的保护甲基,在4h后,一半的八肽都失去了甲基。如果Asp的γ位羧基失去了保护甲基,由甲酯变成了羧基,则失去了作为Pnglp合成糖肽的底物的活性。因此,合成糖肽的反应时间应该少于4h。丙酮浓度大于8%时,Pnglp的酶切活性显着降低,超过10%则失去了酶切活性,因此选用8%的丙酮作为提高反应速率的有机溶剂。在8%丙酮存在的条件下,检测不同时间Pnglp的酶切活性,发现2h之内均有活性。综合以上优化条件,最终选取8%丙酮和2h,作为检测酶法合成糖肽的条件。经LC-MS检测,并未检测到可利用Pnglp逆反应合成的糖肽。实验证明在大肠杆菌中重组表达来源于拟南芥的AtPnglp,该酶表现为转谷氨酰胺酶活性,而作为糖酰胺酶活性很低。Andreas Diepold等人证明AtPnglp在酿酒酵母中重组表达为糖酰胺酶活性,而不具有转谷氨酰胺酶活性。结合上述两种结果可以得出结论:AtPnglp在不同的微生物中重组表达,表现出不同的活性;在原核生物大肠杆菌中表达,该酶表现出转谷氨酰胺酶活性,而在真核生物酿酒酵母中则表现出糖酰胺酶活性。推测很有可能是在真核生物中表达的酶被糖基化而表现出糖酰胺酶活性,在原核生物中表达的酶未被糖基化而表现出转谷氨酰胺酶活性。在AtPnglp合成糖肽的试验中,虽然用HPLC检测到了新峰的生成,但在新峰处用LC-MS并未检测到新合成糖肽对应的分子量。这可能与该酶对底物的结构偏好性有关,或者与检测手段有关。(本文来源于《山东大学》期刊2009-04-10）
李世军[6]（2008）在《胸腺五肽的化学—酶法合成及其脂质体缓释剂型研究》一文中研究指出胸腺五肽(TP-5)是人工合成的五肽(Arg-Lys-Asp-Val-Tyr)对应胸腺生成素的32至36位氨基酸,具有天然胸腺生成素的全部生物活性。它具有多种功能,可以诱导多种激素的分泌,介导早期T细胞分化和免疫调控并增强分化的T细胞的功能等。研究表明胸腺五肽在治疗类风湿性关节炎,变应性皮炎,异位性湿疹,以及某些生殖系统感染和放化疗辅助治疗方面都显示出疗效。胸腺五肽也可用于肿瘤的治疗或辅助治疗,胸腺五肽具有调节免疫系统使其正常化的特性,它对免疫超强和免疫缺陷引发的疾病均有作用。还有研究表明TP-5可以治疗有毒瘾的人的淋巴结病,抑制人体细胞内超氧化物的积累,对胰岛素依赖型糖尿病有缓和作用。当胸腺本身功能不足或依赖胸腺的免疫系统出现明显的原发性或继发性缺陷,而自身的调节又不足以修复时,给予外源性胸腺激素就可以产生明显的疗效。如果机体免疫系统功能紊乱、低下或亢进,外源性胸腺激素可产生明显的双向调节作用。由于TP-5具有广泛的应用前景,所以已经成为极具研究价值的生物活性肽之一。本论文主要围绕TP-5肽的酶法和化学法的合成及制剂方面进行了研究。一酶法合成TP-5前体二肽Bz-Arg-Lys-NH2和Z-Asp-Val-NH21前体二肽Bz-Arg-Lys-NH2的合成本研究采用酶法在动力学控制下合成了胸腺五肽前体二肽Bz-Arg-Lys-NH2。分别以工业用碱性蛋白酶Alcalase和胰酶为催化剂,以Bz-Arg-OEt?HCl为酰基供体,以Lys-NH2为亲核试剂,在有机溶剂/水双相体系中合成目标产物。并考察了影响肽合成产率的因素,对有机溶剂种类、含水量、pH值、反应温度、反应时间、底物摩尔比等进行条件优化,确定了Bz-Arg-Lys-NH2二肽合成的最佳反应条件。应用工业用碱性蛋白酶Alcalase为催化剂,在乙腈/DMF/ Na2CO3-NaHCO3 (80:10:10, V/V)体系中,反应6小时达到最大产率71.1%。研究证明Alcalase酶在此体系中保持催化活性,并且非常稳定。应用胰蛋白酶为催化剂,在乙醇/ Tris-HCl (80:20, V/V)体系中,反应4小时达到最大产率76.1%。并且建立了利用Sephadex G-10柱层析的简便有效的分离纯化方法,采用高压液相色谱(HPLC)法和质谱(MS)法鉴定目标产物的纯度和分子量。2前体二肽Z-Asp-Val-NH2的合成本研究采用Alcalase催化,动力学控制下合成了TP-5前体二肽Z-Asp-Val-NH2。以工业用碱性蛋白酶Alcalase为催化剂,以Z-Asp-OMe为酰基供体,以Val-NH2为亲核试剂,在有机溶剂/水双相体系中合成目标产物。并考察了影响肽合成产率的因素,对有机溶剂种类、含水量、pH值、反应温度、反应时间、底物摩尔比等进行条件优化,建立了最佳反应模型。反应5小时,前体二肽Z-Asp-Val-NH2最大产率达到63.0%。二化学法-酶法合成TP-5前体叁肽Z-Asp-Val-Tyr-OH本研究采用酶法和化学法相结合的技术合成了胸腺五肽前体叁肽Z-Asp-Val-Tyr-OH。首先,采用一种新颖的化学法合成了Val-Tyr-OH,反应分两步进行,首先制备NCA-Val,然后在乙腈与Na2CO3-NaOH缓冲液组成的双相体系中合成Val-Tyr-OH,这个方法具有高收率、低成本、合成规模大等特点。并探讨了有机溶剂,搅拌速度,反应温度,pH,反应时间,底物比例,酸化pH等各种因素对二肽合成产率的影响,找到了合成Val-Tyr-OH的最佳条件。在最佳条件下,目标产物的产率为91.36%。然后以Z-Asp-OMe为酰基供体,以Val-Tyr-OH为亲核试剂,以alcalase酶为催化剂,采用动力学控制的方式在水-有机溶剂双相体系中合成目标产物。我们考察了有机溶剂、水含量、温度、pH值和反应时间等因素对肽合成产率的影响,确定了Z-Asp-Val-Tyr-OH叁肽合成的最佳反应条件。在最佳反应条件下,反应时间2.5小时,Z-Asp-Val-Tyr-OH产率达71.3%。叁胸腺五肽的化学合成本研究采用固相合成法合成了胸腺五肽Arg-Lys-Asp-Val-Tyr。用羟基树脂(HMP)作载体,将Fmoc-Tyr(OBut)-OH连接到树脂上,然后依次连接Fmoc-Val-OH,Fmoc-Asp(OBut)-OH,Fmoc-Lys(Bos)-OH,Fmoc-Arg(Mtr) -OH,最后用TFA切落肽段。用固相法合成胸腺五肽,收率为30%。此外,还用液相法合成了胸腺五肽前体叁肽Z-Lys(Boc)-CONH-Asp-(OEt)2。四胸腺五肽脂质体制备及其表征本文采用逆相蒸发法制备了TP-5脂质体,在制备过程中对各种影响因素进行了考察,采用正交实验进行优化,确定最佳的工艺条件:卵磷脂/胆固醇比例为5:1 ,PBS 10ml胸腺五肽15 mg,超声时间5 min。得到胸腺五肽脂质体包封率为58.21%,平均粒径340nm。稳定性实验证明TP-5脂质体在4℃低温存放时较稳定,温度升高稳定性下降。随时间的延长包封率有下降的趋势。(本文来源于《吉林大学》期刊2008-05-01）
张学忠[7]（2003）在《在有机介质中酶法合成功能短肽的研究》一文中研究指出近二十年来,随着非水酶学研究的深入与发展,酶在有机合成中的应用已日趋成熟,酶促合成法较化学合成法显示了许多优越性~([1])。对于多肽合成来说,尽管化学合成法已有较长的历史,而且迄今仍然是合成较大肽片段的基本方法,然而它却有难以克服的缺点,例如,由于副反应,很难对中间产物进行纯化,而且给产物的分离带来困难。相比之下,酶促肽键的合成,其中包括较大肽段间的缩合,尤其是合成只含几个氨基酸的小肽片段,较传统的化(本文来源于《第四届中国酶工程学术交流讨论会论文集》期刊2003-10-12）
曹建军[8]（2003）在《化学酶法合成RGD叁肽的研究》一文中研究指出近年来，基因工程、蛋白质工程和酶工程技术的迅速发展，以及分离纯化与检测手段的现代化，大大加快了发现新活性多肽的速度。研究与开发具有生物活性或药物活性的肽类，包括其前体肽片段的合成，已成为国际高新技术领域竞争的一个重要部分。 传统的肽类合成多采用液相化学合成，常用的包括碳二亚胺(DCC)法，混合酸酐法、酰氯法、迭氮物法等等，为多肽的合成提供了多种选择。后来在肽类液相化学合成的基础上又进一步发展产生了固相合成法。近叁十年来酶促肽类合成又成为肽类合成领域的一大热门，随着非水酶学研究的深入与发展，酶在有机合成中的应用已日趋成熟，酶促合成法较化学合成法显示了许多优越性。最近几年，利用各种来源的蛋白水解酶，在非水介质中合成了各种功能短肽或其前体，其中包括一些具有营养功能的二肽和叁肽，如低热量高甜度的甜味剂二肽、RGD叁肽等。利用酶反应器，连续合成某些功能短肽已接近生产规模。 RGD是由精氨酸(Arg)、甘氨酸(Gly)、天冬氨酸(Asp)叁个氨基酸组成的序列肽，是近几年来发现的具有生物活性的短肽序列之一。RGD序列肽能够竞争性抑制包括纤维蛋白Fib在内的各种粘附蛋白与血小板的结合，因而抑制了Fib与血小板的结合，使之在未来的临床应用中，具有较好的前景。它在内皮细胞的识别、抗血栓、抗血凝、抑制肿瘤，眼科诊治，治疗烧伤和皮肤溃疡等方面具有重要的作用。有关RGD肽类的合成也越来越显示其重要性和潜在市场价值。 本文的目的是对RGD叁肽的合成工艺和路线进行初步的探讨，研究液相化学法(DCC法、混合酸酐法、氨解取代等)合成GD二肽、RGD叁肽的实验过程中多种缩合剂、成酐试剂的作用机制，并研究多种因素影响肽合成的程度，积累相关数据，从而为RGD叁肽的规模化制备提供理论基础和必要的技术常数。 本文以DCC法、混合酸酐法分别合成了HCl·Gly-Asp(oBzl)_2二肽产物和Z-Arg(Tos)-Gly-Asp(oBzl)_2叁肽产物，以酰氯合成(氨解取代)法合成了Gly-Asp(NH_2)_2二肽产物；研究了多中因素包括反应时间、溶剂种类、底物配比以及碱加入量等对化学合成RGD序列肽的影响。碱的加入量具体指叁乙胺和N-甲基吗啡啉，不同的反应中加入的目的和作用各不相同。 南京工业人学硕1论文 X外在实验过平小尝试不多 猪腴脂 二 醇（N。1。）和碘蛋〔酶（lryp劝；）分w今成一一j人广’物（Z八I·以1辽。幻Gly一八＊＊HN／＊以及＊一八＊以”IO叶一GI少八Sp（OI】ZI）Z》。川‘则几个成机】【5，彬．咧M家进计了初小的讨论，布点研究了他蚓时M、试剂下【·类，水加入量等因素对酶促反应的影响。山于实验室硬件的限制加＊时间有限，我们人。未得到T则＊山效果。酶促肽类合成的优协远没再发伸出来，这也处将我们个厂的 个亚点…叁仆了一、 本义对实验结策进行了初步的理论分析，并做出了们对合理的解释，得到了一些有指导意义的结论。 门）化学法法合成RGD…二肽、叁肽的实验小，考虑到低介电常数溶剂有不小）、司成少NJ财从规w］夕｛严二物否 夕＜多”L目U的气，阻n口厂N，N一二 小伙可丁区 服（DMI7）r山沸点较高丐 又／龟歹二物n后上划l带来于 人麻烦罗 同位 我们选择溶胶州Z较转户叫氢吹 响 （1’ll＊为溶产，而没在选择港只能力较女l’IV N，N一l： 111椎［II酚JjR（DMI。），IIYt［1了较好的效果。 （2）混合酸阶法制各C＊－一二肌的实验中，为了有利l复合物的生成，最好采）刊于少含有一个甲基的叔）j安。作者认为N一甲基吗丁啡咐因为氧原子的吸电诱导使它只有弱的碱性，N上有甲基空piJ位阻小，不影响它与I。BuOCOCI成故。 门）1兀C法于混合酸雨法书他至了8＊cG！卜八＊ ＊B1）＊。雹W仲，为了3。儿’1＿：成＿二见，必须先脱去B。c基，川无水1－1O／乙酸乙酯溶液和＿二氟乙酸两种o法，别能于 公 ｝ 几 人 H。c1；【，可 用 ＊O／乙酸＊酣溶液。＊以 千 5IJCI＠Gly一ASpXOBZI ）＊品休，便于重迭晶纯化，＊ 用叁I氟＊酸得刁到晶体，所以我们选择IJCI的乙酸乙酯溶液作为脱BOC试剂。 （4）与＊＊C法、混合酸钙法相＊、氨解取代制备＊1卜AS叭＊H二。二月反应时问过长，操作步骤烦琐、但其最大的优势便是成木极低，收率相对较高； 门）＊＊C法、混合酸除法。氮解取代法叁种方法对反应温度的要求都较高，都需要控制在0℃以卜，否则会发生消旋、重对。以及聚和反应，从而影，响产物的收率不恻没O （6）在酶促合成叁肽的实验中，山于时间有限，我们在现有条件下对酶促合成反应’。I。几种因素的影响进行了初步探讨，实验井未得到较好的效果。猪胰脂肪酸（I’l’L）合成 ZAI·g（ToS）Gly－ASI，（NfIZ）2收率仅为 53．6％，胰蛋〔酶（tfyl，Sill） ”l 南京L业人学顺上论义大多成 Z一AI以阿lbsyGly 一AsP（O13ZI 人收二年为 42、8 9＊，【．IA／十多’物主王荣入林远没人将峋促瓜类合成的优势发批出来，这也处将我(本文来源于《南京工业大学》期刊2003-05-10）
张学忠[9]（1998）在《在有机介质中酶法合成小肽的研究进展》一文中研究指出就利用蛋白酶在有机介质中合成小肽研究所涉及的几个关键问题以及方法学上的研究进展情况作了讨论和评述，目的在于探讨如何构建一个理想的肽键合成体系。(本文来源于《高技术通讯》期刊1998年07期）
糖肽的酶法合成论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
γ-谷氨酰肽是指含有γ-谷氨酰残基的一类小分子肽,近年来,因其具有显着的呈味效果而被广泛关注。γ-谷氨酰肽可通过γ-谷氨酰转肽反应合成,部分微生物源谷氨酰胺酶可催化此γ-谷氨酰转肽反应,因此可用于合成γ-谷氨酰肽。论文选用了叁种不同微生物来源的谷氨酰胺酶,通过酶学特性对它们催化γ-谷氨酰转肽反应的能力进行了研究。将具有显着催化γ-谷氨酰转肽作用的谷氨酰胺酶用于合成γ-谷氨酰肽,并对产物的呈味特性、促胆囊收缩素分泌作用和抑制DPP-IV酶活性进行研究。实验结果如下:(1)米曲霉和解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶具有催化γ-谷氨酰转肽作用的活性,其酶活力分别为10 U/g和100 U/g。其中,解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶表现γ-谷氨酰转肽作用的最适pH值和温度分别为pH 10.0和37℃。此酶具有广泛的底物选择性,谷氨酰胺可作为γ-谷氨酰供体,最佳的γ-谷氨酰受体包括色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、酪氨酸等。(2)解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶通过链式反应催化了系列γ-谷氨酰肽的合成。在谷氨酰胺和受体氨基酸存在的情况下,成功合成了系列γ-谷氨酰短肽,如γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Trp、γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Phe、γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Tyr、γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Met和γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Val肽等。各个酶促反应液中系列γ-谷氨酰肽的氨基酸组成特点可描述为N端聚γ-谷氨酰残基与C端受体氨基酸的结合。米氏常数测定结果显示此酶对受体的亲和力随着受体分子中γ-谷氨酰残基数的增多而降低。(3)γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Phe、γ-[Glu]_(1≦n≦5)-Tyr、γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Met和γ-[Glu]_(1≦n≦4)-Val肽具有显着的呈味效果。其呈味特性包括:在水溶液中呈现涩味和/或苦味;在含有基本呈味物质的溶液中具有增味作用,如使蔗糖甜味增加、味精鲜味增加和食盐咸味增加;添加到酱油或者鸡汤中可使酱油鲜味和持续感增加,使鸡汤的鲜味、浓厚感和满口味增加。这些结果表明此类γ-谷氨酰肽具有“厚味”呈味效果。此外,酶促反应液可作为风味增强剂用于酱油和鸡汤中,使酱油鲜味和持续性增加,鸡汤鲜味、浓厚感和满口感增加。(4)γ-[Glu]_(0≦n≦4)-Trp和γ-[Glu]_(0≦n≦5)-Phe可促进CCK的分泌。其中,γ-[Glu]_(2≦n≦4)-Trp和γ-[Glu]_(3≦n≦5)-Phe肽对CCK的促分泌作用与色氨酸和苯丙氨酸的促CCK分泌效果基本一致(p>0.05),且均低于γ-Glu-Trp和γ-[Glu]_((n=1,2))-Phe对CCK的促分泌效果(p<0.05)。说明对色氨酸和苯丙氨酸进行γ-谷氨酰基化可提高此它们对CCK的促分泌作用。γ-[Glu]_(0≦n≦4)-Trp和γ-[Glu]_(0≦n≦5)-Phe促CCK分泌的过程可通过CaSR-调节的Ca~(2+)/CaM/CaMK信使通路实现。(5)通过分子模拟技术和DPP-IV酶抑制率测定结果显示γ-Glu-Met、γ-Glu-Trp、γ-Glu-Phe和γ-Glu-Tyr可通过竞争性抑制作用对DPP-IV酶产生抑制效果。通过LIGPLOT程序确定了γ-Glu-Met与DPP-IV酶结合的氨基酸残基位点和共价键类型。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
糖肽的酶法合成论文参考文献
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