导读:本文包含了转染活性论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:非病毒载体,基因传递,金属脂质,Zn(II)-二甲基吡啶胺
转染活性论文文献综述
易文婧,阿地力江·阿不力米提,赵志刚[1]（2019）在《DPA-Zn金属阳离子脂质的合成及转染活性研究》一文中研究指出基于Zn(II)-二甲基吡啶胺(Zn-DPA)合成了含十六烷基醇疏水性尾部的单/双核金属阳离子脂质6a-6b.通过凝胶电泳、溴乙锭置换和粒径电位实验考察了它们与质粒DNA的相互作用.结果表明,两个金属脂质均可将DNA包裹缩合成具有适当粒径大小和zeta电位的纳米颗粒.并且,双核金属脂质6b具有比单核脂质6a更强的DNA结合能力.MTT细胞毒性实验显示金属脂质体/DNA复合物具有较低细胞毒性(细胞存活率大于80%).体外基因转染研究表明,单核金属脂质6a的转染效率优于双核金属脂质6b.(本文来源于《西南民族大学学报(自然科学版)》期刊2019年03期）
黄晓燕,王沙,沈鑫,孙晶莹,董向辉[2]（2019）在《pVAX-eNOS转染急性心肌梗死患者早期内皮祖细胞及对其活性的影响》一文中研究指出目的探讨利用pVAX1介导一氧化氮合酶(e NOS)基因体外转染急性心肌梗死患者(AMI)外周血早期内皮祖细胞(EPCs)的可行性。方法选择陕西省人民医院2017年12月～2018年6月因心脏病发病入院且经冠脉造影检查确诊为AMI患者30例。Ficoll密度梯度离心法分离患者空腹静脉外周血单个核细胞诱导培养至EPCs并鉴定,纯化pVAX-eNOS质粒。将EPCs分为3组,e NOS转染组:用阳离子聚合物JetPEITM体外转染eNOS基因至EPCs。转染后24 h,硝酸还原酶法检测EPCs中一氧化氮(NO)的含量,ELISA和Western blot检测EPCs分泌eNOS及血管内皮生长因子(VEGF)的能力;采用Wst-1法检测EPCs增殖情况,用Transwell小室检测各组EPCs迁移及黏附功能;空质粒转染组:只转染pVAX空质粒至EPCs中;对照组:不转染EPCs。结果成功转染pVAX-eNOS基因至AMI患者早期EPCs,转染后24 h,与空质粒转染组及对照组比较,NO含量明显升高(P <0.01),eNOS表达量明显增加(P <0.01),分泌VEGF的能力明显增强(P <0.01);EPCs增殖、迁移及黏附能力明显增加(P <0.01),空质粒转染组与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论阳离子聚合物JetPEITM可成功介导pVAX-eNOS有效转染AMI患者早期EPCs,并有效增强EPCs增殖、迁移、黏附及分泌功能,为AMI患者进行自体EPCs移植改善心肌缺血奠定了基础。(本文来源于《中国医药导报》期刊2019年11期）
刘娟娟,齐跃,郝莹莹,林蓓[3]（2018）在《α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞中HER2/neu表达及活性的影响》一文中研究指出目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,FUT1)基因转染对人卵巢癌细胞中HER2/neu表达及活性的影响。方法:分别应用Real time PCR、免疫细胞化学染色和Western blot方法检测转染前后卵巢癌细胞中HER2/neu在基因、蛋白水平上的表达和磷酸化情况,利用免疫共沉淀方法检测HER2/neu蛋白上是否有Lewis(y)结构。结果:Real time PCR结果显示转染后细胞中HER2/neu mRNA表达明显增高。免疫细胞化学染色、免疫共沉淀结合Western blot检测到转染后卵巢癌细胞中HER2/neu蛋白和Lewis(y)抗原的表达均较转染前显着增加,HER2/neu蛋白上有Lewis(y)抗原结构。Western blot结果显示基因转染后HER2/neu的酪氨酸磷酸化水平显着升高。结论:Lewis(y)抗原是HER2/neu结构上的一部分,其表达增加不但促进卵巢癌细胞中HER2/neu的表达,还激活了HER2/neu受体酪氨酸激酶。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2018年19期）
罗利琼,卢圆媛,丁滨,曾慧明,冯刚[4]（2018）在《养正消积药粉在常氧和低氧条件下对转染目的基因骨髓间充质干细胞生物活性的影响》一文中研究指出目的观察养正消积药粉在常氧和低氧条件下作用不同时间后对转染目的基因的骨髓间充质干细胞(rBMSCs)增殖能力、黏附活性和迁移能力的影响。方法在湖北中医药大学基础实验室进行实验。应用养正消积药粉在常氧和低氧条件下处理rBMSCs,观察rBMSCs的增殖能力、黏附能力、迁移能力等生物活性的变化,取对数生存期的rBMSCs种于96孔培养板,加入养正消积药粉(实验组):1μg/ml(A组)、5μg/ml(B组)、10μg/ml(C组)、20μg/ml(D组)。置37℃常氧或低氧(5%)条件下培养24、48、72 h。以不含养正消积药粉组为对照组。MTT法检测rBMSCs增殖能力,LDH检测rBMSCs黏附能力,Transwell检测rBMSCs迁移能力。。结果在常氧和低氧条件下经养正消积药粉分别处理rBMSCs 24、48、72 h后,各组细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。在常氧条件下经养正消积药粉分别处理后0.5 h,细胞黏附能力差异无统计学意义(P>0.05);处理后1 h,对照组和实验组细胞黏附能力差异有统计学意义(P<0.05),但C组和D组组间比较差异无统计学意义(P>0.05);与处理后1 h比较,处理后2 h和3 h的结果差异无统计学意义(P>0.05)。在低氧条件下经养正消积药粉分别处理后0.5 h、1 h,对照组和实验组细胞黏附能力差异无统计学意义(P>0.05);处理后2 h,对照组和实验组细胞黏附能力差异有统计学意义(P<0.05);处理后3 h与处理后2 h比较差异也无统计学意义(P>0.05)。在常氧和低氧条件下经养正消积药粉分别处理后3、6、12、24 h,细胞迁移情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论养正消积药粉不能增强rBMSCs增殖能力和迁移能力;在适当浓度和适当时间的作用下能增强rBMSCs的黏附能力,但在低氧条件下细胞黏附能力有所下降。(本文来源于《疑难病杂志》期刊2018年08期）
罗高斌,劳山,杜刚,韦达隆,杨稀仁[5]（2018）在《rhBMP-2基因转染小鼠间充质干细胞的成骨活性和BMP-2的释放规律分析》一文中研究指出通过pcDNA3.1-rh BMP-2质粒转染小鼠间充质干细胞C3H10T1/2研究其成骨能力和增殖效应,探讨BMP-2的释放规律。将预先准备好的重组rhBMP-2质粒转染至C3H10T1/2细胞,利用G418抗药性筛查转染成功的细胞。将研究实验细胞分为转染组、空载组、空白组。通过ELISA检测各组细胞上清液中的BMP-2含量,CCK-8试剂盒检测各组细胞的增值活性,通过测定ALP活性和进行ALP、钙茜素红染色,检测各组细胞成骨活性。结果显示转染组BMP-2浓度随着时间推移逐渐达到高峰并维持一段时间,各检测点均明显高于空白组和空载组(p<0.05),转染组细胞较其余两组更具增殖活性、成骨活性(p<0.05)。此结果表明C3H10T1/2细胞是pcDNA3.1/rhBMP-2重组质粒的良好宿主,转染后能在一定时间内平稳和持续地表达外源性BMP-2,有较强诱导细胞成骨分化能力。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年06期）
万雷,黄宏兴,黄红,王凡,柴爽[6]（2018）在《补肾健脾活血方含药血清提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性》一文中研究指出背景:有研究发现中药可以通过Wnt/β-catenin信号通路影响成骨细胞,而Sost是Wnt信号通路的抑制因子和骨形成中的抑制蛋白,也是一种调控骨分化的拮抗因子,可调控成骨细胞的分化和增殖。补肾健脾活血方是广州中医药大学附属骨伤科医院临床防治骨质疏松症的经验方,对骨形成有促进作用,治疗骨质疏松症疗效显着。目的:应用补肾健脾活血方含药血清干预过表达骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)重组腺病毒转染的成骨细胞,观察其对细胞增殖、碱性磷酸酶活性和相关蛋白的影响。方法:将培养好的成骨细胞分为空白对照组、过表达Sost组(Ad-Sost组)2组,空白对照组给予空载腺病毒转染,Ad-Sost组予过表达Sost重组腺病毒转染,两组分别给予空白血清和含药血清干预,采用CCK-8检测细胞增殖、碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性,Western Blot检测骨调节蛋白表达情况。结果与结论:(1)与空白血清干预比较,两组含药血清在24,48,72 h均可以提高细胞活性(P均<0.01);(2)与空白血清干预比较,两组含药血清均可以提高碱性磷酸酶活性(P<0.01);(3)与空白血清干预比较,空白对照组含药血清可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白的表达(P均<0.01),对骨桥蛋白、肿瘤坏死因子α蛋白的表达无明显影响,Ad-Sost组含药血清也可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白蛋白的表达(P均<0.01),提高肿瘤坏死因子α蛋白的表达(P<0.01);(4)结果说明,补肾健脾活血方含药血清可以提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性,影响低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白和肿瘤坏死因子α蛋白的表达。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2018年16期）
曾丹妮[7]（2017）在《从转染细胞活性Meta分析SPIO用于分子影像学研究的最佳浓度区间》一文中研究指出目的:通过检测转染细胞的活性,Meta分析超顺磁性氧化铁纳米(superparamagnetic iron oxide,SPIO)在分子影像学实验中用于转染细胞的最佳浓度区间。方法:系统检索国外(Pub Med、Embase、Cochrane Library)及国内主要数据库(万方、维普、中国知网及中国生物医学数据库)建库至2016年3月间关于SPIO转染细胞的最佳浓度区间的相关文献,结合Cochrane协作网的推荐,制定纳入研究文献的标准,对纳入文献进行质量评估并提取研究数据。采用STATA 12.0进行统计学分析:偏倚性检验(Begg’s检验)、异质性检验(I2、P值、Q值检验法),在异质性较大时行亚组分析,讨论各组异质性(I2、P值、Q值检验法),计算各组死细胞比率均差值在各浓度上的合并效应量及95%可信区间,并画出SPIO浓度对细胞活性影响的剂量反应曲线,获取最佳浓度区间。结果:共14篇国内外研究论着符合纳入标准,文献异质性检验I2=60.61%;P=2.675×10-9;Q=139.62,提示数据组间存在显着的异质性,故进一步行亚组分析,按SPIO修饰或标记材料不同分为4组[A组:SPIO-聚乙烯酰胺(PEI)组;B组:SPIO-多聚赖氨酸(PLL)组;C组:SPIO-葡聚糖组;D组:SPIO-核苷酸组],各组数据无明显异质性;拟合各组各浓度节点死细胞比率均差值及95%可信区间,画出剂量反应曲线(叁次样条插值拟合曲线),分别得到A至D组较适宜的浓度区间值:4~6μg/m L、10~50μg/m L、10~50μg/m L、5~25μg/m L。Deeks漏斗图呈较对称漏斗形,P=0.23>0.1,表明数据无明显发表偏倚。结论:在分子影像学研究中,当SPIO由聚乙烯酰胺(PEI)、葡聚糖、葡聚糖-多聚赖氨酸(PLL)包裹或制备为SPIO-核苷酸探针时,以SPIO对细胞的毒性影响为主要衡量指标,标记细胞的适宜浓度区间分别为:4~6μg/m L、10~50μg/m L、10~50μg/m L、5~25μg/m L。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2017-05-01）
冯永增,王成贵,水小龙,余洋,蔡乐益[8]（2016）在《VEGF-165/ANG-1双基因共转染血管内皮祖细胞复合多孔生物活性玻璃的生物相容性研究》一文中研究指出目的制备一种具有诱导血管再生活性的新型复合骨组织工程材料,并评价其生物相容性。方法将血管内皮生长因子-165(VEGF-165)/血管生成素-1(ANG-1)双基因共转染的血管内皮祖细胞(EPCs)复合多孔生物活性玻璃,制成复合人工骨材料。采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测已转染EPCs中VEGF-165及ANG-1的表达。噻唑蓝(MTT)细胞毒性试验、骨植入试验及扫描电镜观察细胞在材料表面黏附情况等综合评价材料的生物相容性;CD31免疫组织化学法染色观察材料中血管再生的情况。结果Western blot检测、RT-PCR反应显示,实验组VEGF-165、ANG-1的表达较对照组升高。MTT细胞毒性试验、骨植入试验均显示,材料无毒性反应。扫描电镜显示,材料表面有较多血管内皮祖细胞黏附,并有较多伪足伸出。苏木精-伊红染色法(HE)染色显示,材料周围组织生长良好,未见明显的炎症细胞浸润,材料与周围组织交界处有大量的新骨生成。CD31免疫组织化学法染色显示,材料中有较多新生的毛细血管。结论 VEGF-165/ANG-1双基因共转染EPCs复合多孔生物活性玻璃的骨组织工程材料生物相容性良好,具备一定的诱导血管再生活性。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2016年15期）
王昕,王鹏,李玲,潘雪,余祖江[9]（2016）在《US3基因转染树突状细胞诱导的T淋巴细胞增殖活性及NK细胞杀伤活性观察》一文中研究指出目的观察US3基因转染树突状细胞(DCs)诱导的T淋巴细胞增殖活性和自然杀伤(NK)细胞杀伤活性。方法构建表达US3基因腺病毒载体r-US3和空载体r-Track。分离培养DCs,分为r-US3组(转染r-US3的DCs细胞)、r-Track组(转染r-Track的DCs细胞)和正常对照组,将叁组细胞分别与T淋巴细胞混合培养,MTT法观察各组DCs诱导的T淋巴细胞增殖活性;另外将叁组细胞分别与NK细胞混合培养,乳酸脱氢酶释放法观察NK细胞杀伤活性。结果 r-US3组、r-Track组、正常对照组混合培养第24 h时T淋巴细胞增殖活性分别为1.250 0±0.062 4、1.653 3±0.035 1、1.596 7±0.066 6,混合培养第48 h时分别为1.823 3±0.066 6、2.203 3±0.047 3、2.136 7±0.060 3,r-US3组与r-Track组、正常对照组相比,P均<0.05。r-US3组、r-Track组、正常对照组NK细胞杀伤DCs活性分别为87.67%±3.21%、103.02%±2.65%、100.00%,r-US3组与r-Track组、正常对照组相比,P均<0.05。结论转染US3基因的DCs诱导的T淋巴细胞增殖和NK细胞杀伤活性降低。(本文来源于《山东医药》期刊2016年23期）
贾奕扬[10]（2016）在《酒石酸衍生的阳离子脂质材料的制备及其基因转染活性研究》一文中研究指出目的:基因治疗需要高效安全的载体系统将基因递送到靶细胞或细胞核内。基因治疗载体主要分为病毒载体与非病毒载体两大类。非病毒载体因其负载量大,稳定性和安全性高,易于大规模生产等优点,成为目前基因载体研究的热点。阳离子脂质体是目前研究最为广泛的非病毒载体,在基因治疗中具有广阔的发展与应用前景。本论文以酒石酸为骨架,通过在酒石酸羟基端引入氨基己酸为阳离子头部,在其羧基端引入不同长度的疏水链制备得到新型骨架的阳离子脂质材料,以期为基因治疗提供高效低毒的载体。方法:以L-(+)-酒石酸,6-氨基己酸,长链烷基胺或醇(辛胺,十二胺,十六胺,辛醇,十二醇,十六醇)等为原料,构建了单链阳离子脂质材料(TS1-TS3)和双链阳离子脂质材料(TD1-TD3)。采用质谱、核磁、红外等方法对合成的材料进行结构鉴定。将上述脂质材料与辅助脂质DOPE按照一定比例混合,采用薄膜分散法制备得到阳离子脂质体并对其进行表征和细胞毒性评价。采用凝胶电泳阻滞方法考察所得6种阳离子脂质体与质粒DNA的复合能力和核酶降解保护作用,为基因转染筛选适宜的N/P比。以293T细胞和报告基因p EGFP-N1为模型,采用流式细胞仪和荧光显微镜对上述阳离子脂质体的转染能力进行初步评价。对初筛转染活性较好的阳离子脂质材料进行处方优化,并进一步考察其在He La细胞中的转染活性。选用不同细胞内吞途径抑制剂观测TD2/DNA复合物的入胞机制。结果:设计合成了6种基于L-(+)-酒石酸的阳离子脂质材料,包括3种单链阳离子脂质材料TS1-TS3和3种双链阳离子脂质材料TD1-TD3,经1H NMR,MS和IR等方法鉴定,所得脂质材料的结构与目标物的结构一致。阳离子脂质体粒径及zeta电位测定结果表明,所制备的6种阳离子脂质体粒径均小于150 nm,zeta电位均在35 m V以上,满足基因递送载体的要求。MTT细胞毒性实验结果表明,所设计的阳离子脂质材料毒性较低,具有较好的生物相容性,上述阳离子脂质体除TD1外,IC50均大于阳性对照DOTAP。凝胶阻滞实验结果显示,在N/P比小于3的情况下,所制备的阳离子脂质体均能与DNA完全复合,具有较强的携载DNA能力。6种载体材料在293T细胞中的基因转染活性测定结果表明,单链阳离子脂质材料TS1-TS3脂质体转染活性均较差,与裸DNA几乎无差异。双链阳离子脂质材料TD1转染能力较弱,TD2和TD3具有较好的转染活性。TD2和TD3的进一步处方优化结果显示,最优脂质材料/DOPE比例分别为1:0.5和1:2;最优N/P比均为1:1。与阳性对照DOTAP相比,TD2(MFI153.3±14.7)和TD3(MFI 190.5±7.8)的平均荧光强度与DOTAP(MFI 171.1±14.5)无显着性差异,但TD2(47.7%±7.0%)与TD3(32.9%±2.0%)两者的阳性转染细胞百分数均高于DOTAP(24.7%±1.8%;P<0.01),具有更好的转染活性。He La细胞上的转染实验结果表明,TD2(MFI 53.8±6.2)和TD3(MFI 54.7±2.0)的平均荧光强度虽小于DOTAP(MFI 98.0±1.8,P<0.01),但TD3(19.6%±0.9%)的阳性转染细胞百分数与DOTAP(18.3%±0.9%)相当,TD2(25.6%±0.4%)的阳性转染细胞百分数仍优于DOTAP,具有较强的基因转染能力。TD2/DNA复合物入胞机制研究结果表明,TD2与DNA形成的复合物主要通过小窝蛋白介导的途径入胞。结论:本论文在L-(+)-酒石酸骨架中引入6-氨基己酸作为阳离子头部,引入不同长度的疏水链分别构建了单链与双链疏水尾部的6种阳离子脂质材料并对其细胞毒性和基因转染活性进行研究。研究结果显示,除TD1外,上述阳离子脂质材料所得基因载体具有粒径均一,细胞毒性小,携载和保护DNA能力强等优点。其中TD2阳离子脂质体的基因转染能力最强,在293T和He La细胞系上均显示很好的转染活性,且TD2与DNA形成的复合物主要通过小窝蛋白介导的途径入胞,该途径可以避免被溶酶体降解,有利于提高该类基因递送系统的转染效率。(本文来源于《第四军医大学》期刊2016-05-01）
转染活性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨利用pVAX1介导一氧化氮合酶(e NOS)基因体外转染急性心肌梗死患者(AMI)外周血早期内皮祖细胞(EPCs)的可行性。方法选择陕西省人民医院2017年12月～2018年6月因心脏病发病入院且经冠脉造影检查确诊为AMI患者30例。Ficoll密度梯度离心法分离患者空腹静脉外周血单个核细胞诱导培养至EPCs并鉴定,纯化pVAX-eNOS质粒。将EPCs分为3组,e NOS转染组:用阳离子聚合物JetPEITM体外转染eNOS基因至EPCs。转染后24 h,硝酸还原酶法检测EPCs中一氧化氮(NO)的含量,ELISA和Western blot检测EPCs分泌eNOS及血管内皮生长因子(VEGF)的能力;采用Wst-1法检测EPCs增殖情况,用Transwell小室检测各组EPCs迁移及黏附功能;空质粒转染组:只转染pVAX空质粒至EPCs中;对照组:不转染EPCs。结果成功转染pVAX-eNOS基因至AMI患者早期EPCs,转染后24 h,与空质粒转染组及对照组比较,NO含量明显升高(P <0.01),eNOS表达量明显增加(P <0.01),分泌VEGF的能力明显增强(P <0.01);EPCs增殖、迁移及黏附能力明显增加(P <0.01),空质粒转染组与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论阳离子聚合物JetPEITM可成功介导pVAX-eNOS有效转染AMI患者早期EPCs,并有效增强EPCs增殖、迁移、黏附及分泌功能,为AMI患者进行自体EPCs移植改善心肌缺血奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转染活性论文参考文献
[1].易文婧,阿地力江·阿不力米提,赵志刚.DPA-Zn金属阳离子脂质的合成及转染活性研究[J].西南民族大学学报(自然科学版).2019
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[7].曾丹妮.从转染细胞活性Meta分析SPIO用于分子影像学研究的最佳浓度区间[D].重庆医科大学.2017
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[10].贾奕扬.酒石酸衍生的阳离子脂质材料的制备及其基因转染活性研究[D].第四军医大学.2016
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