导读:本文包含了人脐静脉血内皮祖细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:姜黄素,血红素氧合酶1,内皮祖细胞
人脐静脉血内皮祖细胞论文文献综述
丁红,黄维义,沈桂冬[1]（2015）在《姜黄素对人脐静脉血来源内皮祖细胞HO-1表达的影响及机制探讨》一文中研究指出目的观察姜黄素(CMN)对人脐静脉血来源内皮祖细胞(EPCs)血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达的影响,并探讨其机制。方法采用密度梯度离心法体外分离、培养人脐静脉血单个核细胞,以免疫荧光法观察细胞吸收Dil-ac-LDL和FITC-UAE-1情况并同时进行CD133免疫荧光鉴定EPCs。将EPCs分为0、5、10、15μmol/L CMN组,分别以终浓度为0、5、10、15μmol/L CMN的培养基孵育24 h,检测各组HO-1蛋白表达、细胞增殖能力及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力。将EPCs分为单纯组、CMN组、CMN+ATRA组,分别在单纯培养基、加15μmol/L CMN的培养基、加15μmol/L CMN+1μmol/L ATRA的培养基中孵育24 h,检测各组HO-1蛋白表达。结果从脐静脉血分离出来的单核细胞培养3~4 d开始贴壁,7 d后有一定方向性,呈簇状生长,免疫荧光检测显示CD133表面标记阳性率及Di I-ac LDL和FITC-UEA-1双染色阳性率均>90%。随CMN浓度升高,EPCs的HO-1蛋白表达逐渐升高(P均<0.05),细胞增殖能力逐渐增强(P均<0.05),细胞培养液中LDH活力则无明显改变(P均>0.05)。与单纯组比较,CMN组、CMN+ATRA组HO-1蛋白表达量增加(P均<0.05),且后两组比较,P<0.05。结论 CMN可诱导人脐静脉血来源EPCs高表达HO-1蛋白,这可能与Nrf2/ARE信号途径有关。(本文来源于《山东医药》期刊2015年07期）
徐义喜,栾天竹,史平炜,周立君,徐卿璐[2]（2014）在《匹伐他汀对体外培养人脐静脉血内皮祖细胞数量及功能的影响》一文中研究指出目的:通过体外培养人脐静脉血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),观察他汀类新药(匹伐他汀)对EPCs数量及增殖、迁移和粘附功能的影响。方法:采用密度梯度离心法分离培养人脐静脉血单个核细胞,将其接种在包被有人纤维连接蛋白培养板上,培养7 d后,收集贴壁细胞,加入不同浓度匹伐他汀(分别为0.001μmol/L、0.01μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L)培养24h,用免疫荧光法观察EPCs吸收FITC-UEA-I和Dil-acLDL情况对EPCs进行鉴定,然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、粘附能力测定实验对各实验组测定,来观察匹伐他汀对EPCs数量及增殖、迁移和粘附功能影响。结果:匹伐他汀组与对照组相比,匹伐他汀显着提高了体外培养EPCs的数量及增殖、迁移与粘附能力(P<0.05)。匹伐他汀浓度在0.1μmol/L时对EPCs影响达到最大。随着药物浓度的继续增大,EPCs的上述功能反呈下降趋势,但1.0μmol/L组仍高于对照组。结论:匹伐他汀能增加体外培养EPCs的数量及增殖、迁移和粘附能力,可作为EPCs培养的一种改良方法,为其更好的应用于临床具有重要的意义。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2014年06期）
周丽,常青,李自成[3]（2013）在《辛伐他汀对人脐静脉血晚期内皮祖细胞数量和功能的影响》一文中研究指出目的:研究不同浓度辛伐他汀对体外培养的人脐静脉血晚期内皮祖细胞(EPCs)数量和功能的影响。方法:用密度梯度离心法分离人脐静脉血单个核细胞,接种于人纤维连接蛋白包被的培养瓶,在EGM-2MV培养基中诱导分化获得晚期EPCs,并通过流式细胞术及免疫荧光染色进行鉴定。取生长状态良好的第2代晚期EPCs与不同浓度辛伐他汀(10-8、10-7、10-6及10-5mol/L)培养24、48及72h后,采用CCK-8增殖能力检测、粘附能力测定及血管形成实验来观察辛伐他汀对晚期EPCs增殖、粘附及血管形成能力的影响。结果:从人脐静脉血中成功分离并培养出晚期EPCs。与对照组相比,较低浓度辛伐他汀(10-8、10-7与10-6mol/L)对晚期EPCs的增殖、粘附及血管形成有明显促进作用,以10-7mol/L组作用最强;高浓度(10-5mol/L)则抑制EPCs的上述功能。辛伐他汀促增殖作用随时间延长而增加,而粘附与体外血管形成能力则在48h作用最强。结论:辛伐他汀在较低浓度时显着增加了晚期EPCs的数量并改善其功能,高浓度则起抑制作用。(本文来源于《临床心血管病杂志》期刊2013年06期）
周丽[4]（2013）在《辛伐他汀对人脐静脉血晚期内皮祖细胞功能的影响》一文中研究指出目的：1．内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)参与了机体内生理和病理条件下的血管再生。目前其定义尚不明确，不同研究者应用不同培养方法可得到不同类型EPCs，至少包括早期和晚期EPCs，因晚期EPCs有更强的增殖力及血管生成能力，它们在细胞移植治疗中更有前景。本研究第一部分拟从人脐静脉血中培养出晚期EPCs并对其培养过程中不同分离方法及培养条件进行比较，以获取更多的晚期EPCs用于临床。2．他汀类药物在心血管疾病中除了有降脂作用外，还有独立于其降脂之外的多效性作用，其中他汀促进早期EPCs参与新生血管形成的作用已为人熟知，而他汀对晚期EPCs的影响研究甚少。本研究第二部分将不同浓度辛伐他汀与人脐静脉血来源的晚期EPCs共同培养，以观察他汀对晚期EPCs功能的影响。方法：1．按以下方法优化培养晚期EPCs：①分别采用密度梯度离心和羟乙基淀粉沉降法分离脐静脉血来源的单个核细胞(mononuclear cells, MNCs)，比较两种方法对MNCs存活数的影响；②分别采用EGM-2MV和M199完全培养基诱导培养MNCs，比较获得的两种EPCs细胞形态、表面标记及功能，同时也鉴别了两种类型的EPCs；③分别采用不同浓度胎牛血清(5%、10%、15%)和不同首次换液时间(24h、48h、72h、96h)诱导培养MNCs，比较晚期EPCs克隆出现时间和数量。2．取生长状态良好的第2代晚期EPCs与不同浓度辛伐他汀（10-8Mol/L、10-7Mol/L、10-6Mol/L、10-5Mol/L）培养24h、48h、72h后，通过增殖、粘附及血管形成能力来观察辛伐他汀对晚期EPCs功能的影响。结果：1．晚期EPCs优化培养的结果如下：①密度梯度离心法较羟乙基淀粉沉降法分离获得的MNCs存活数更高(P<0.05)。②用EGM-2MV培养获得晚期EPCs，M199完全培养基获得早期EPCs；两者比较如下：细胞形态：晚期EPCs呈内皮样，可出现边界清楚的类圆形单层鹅卵石样细胞克隆；早期EPCs呈梭形，可形成中心由圆形细胞组成，周围梭形细胞呈放射状排列的细胞集落。表面标记：晚期EPCs高表达内皮系表面抗原CD31、CD34、eNOS、VE-Cadherin，KDR、低表达内皮和造血祖细胞标记CD133，不表达造血系表面标记CD14、CD45；早期EPCs高表达造血系表面抗原CD14、CD45，也可表达KDR，几乎不表达CD133、CD31。细胞功能：晚期EPCs增殖能力强，具有体外血管形成能力；早期EPCs增殖能力差，无体外成管能力；但两者均可吞噬Dil-ac-LDL并结合FITC-UEA-I。③采用含10%胎牛血清的培养基及在48-72h进行首次换液的方法培养晚期EPCs，晚期EPCs细胞克隆出现最早且数量最多(P<0.05)。2．与对照组相比，较低浓度辛伐他汀（10-8Mol/L、10-7Mol/L、10-6Mol/L）对晚期EPCs的增殖、粘附及血管形成有明显促进作用,以10-7Mol/L组作用最强；高浓度（10-5Mol/L）时则抑制EPCs的上述功能(P<0.05)。辛伐他汀促增殖作用随时间延长而增加，而粘附与体外血管形成能力则在48h作用最强(P<0.05)。结论：1．通过比较实验，我们得到了晚期EPCs的优化培养方案，为后续研究打下了基础，也为晚期EPCs在缺血性疾病、细胞移植治疗和血管组织工程中的应用提供了借鉴。2．辛伐他汀促进人脐静脉血晚期EPCs增殖、粘附和血管形成的作用，为其在心血管疾病治疗中的临床获益又提供了新的理论依据。(本文来源于《暨南大学》期刊2013-04-09）
丁红[5]（2012）在《姜黄素诱导HO-1表达增强人脐静脉血内皮祖细胞活力及抗氧化损伤能力的实验研究》一文中研究指出目的：体外分离、培养及鉴定人脐静脉血内皮祖细胞（EPCs）。探讨姜黄素(Curcumin, CMN)诱导EPCs表达血红素氧合酶-1(Heme Oxygenase-1,HO-1)增强自身细胞活力及抗氧化损伤能力的作用及机制。方法：实验研究分为四部分：1.人脐静脉血EPCs的分离、培养、鉴定：采用密度梯度离心法分离、培养人脐静脉血EPCs，通过倒置相差显微镜下观察EPCs形态学变化，免疫荧光法观察EPCs吸收Dil-ac-LDL和FITC-UAE-1情况并对7d的EPCs进行CD133免疫荧光鉴定。2. CMN的细胞毒性作用及诱导EPCs表达HO-1的效果评价：将培养的EPCs分为A、B、C、D四组，分别以终浓度为0、5、10、15μmol/L CMN的培养基孵育24h，CCK-8检测各组细胞增殖活力、比色法检测各组培养液中LDH活力，分析CMN对EPCs是否具有细胞毒性作用。Western blot检测各组细胞HO-1表达量，明确CMN诱导EPCs表达HO-1的作用以及选择后续实验所需CMN的最佳浓度。3. CMN诱导EPCs表达HO-1的细胞内信号转导机制研究：将培养的EPCs分为A、B、C叁组，分别在单纯培养基、终浓度15μmol/L CMN的培养基、终浓度15μmol/L CMN+1μmol/L全反式视磺酸（ATRA）的培养基中孵育24h。Western blot检测各组细胞HO-1表达量，探讨CMN诱导EPCs表达HO-1的信号机制。4. CMN诱导EPCs表达HO-1增强自身细胞活力及抗氧化损伤能力的作用及机制研究：将培养的EPCs分为A、B、C、D四组，分别在单纯培养基、终浓度15μmol/L CMN的培养基、终浓度500μmol/L H2O2+15μmol/L CMN的培养基、终浓度500μmol/LH2O2+15μmol/L CMN+10μmol/L锌原卟啉（ZnPPIX）的培养基中孵育24h。CCK-8检测各组细胞活力、比色法检测各组培养液中LDH活力、ELISA法检测各组培养液中的血管内皮生长因子(VEGF)和人碱性成纤维生长因子（bFGF）活力、AnnexinV-FTTC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。明确CMN增强EPCs活力及抗氧化损伤能力的作用及机制。结果：1.从脐静脉分离出来的单核细胞培养3-4d开始贴壁；7d后有一定方向性，呈簇状生长；大约9d时出现多个血岛样细胞团。表面标记CDl33免疫荧光检测显示绿色阳性率>90％，免疫荧光鉴定显示>90％的贴壁细胞呈双荧光染色阳性。2.以终浓度分别为0、5、10、15μmol/L的CMN孵育的各组EPCs，细胞增殖活力分别为（0.743±0.250)、（0.810±0.135）、（0.854±0.374）、（0.895±0.193），组间比较有显着差异（P<0.05），表明EPCs的增殖活力随CMN浓度的升高而明显升高； LDH活力分别为（732.4±45.2）、（728.1±35.8）、（745.7±48.6）、（750.2±47.3），组间比较无差异（P>0.05），表明CMN对EPCs无明显毒性作用；代表HO-1表达量的光密度比值分别为（0.65±0.02）、（0.87±0.08）、（1.25±0.05）、（1.34±0.03），组间比较显着差异（P<0.05），表明EPCs表达HO-1的量随CMN浓度的升高而升高。3.实验3中A、B、C叁组测得的代表HO-1表达量的光密度比值分别为（0.47±0.04）、（1.43±0.02）、（1.11±0.05），B组明显高于与A组与C组（均为P<0.05）。4.实验4的A、B、C、D四组中，细胞增殖活力分别为（0.752±0.238）、（0.640±0.119）、（0.724±0.450）、（0.681±0.309）；VEGF分别为（40.52±2.63)、(15.81±3.24)、(31.43±2.90)、(20.74±2.16)；bFGF分别为（80.32±3.58)、(49.64±4.73)、(65.29±5.12)、(54.17±4.98)，上述3项指标的组间比较显示，B，C、D组均明显低于A组（均为P<0.05），其中，B、D组又低于C组（均为P<0.05），而B、D两组间则无明显差异（P>0.05）。各组LDH活力分别为（511.2±58.6）、（830.4±54.3）、（725.8±49.4）、（795.6±58.7）；细胞凋亡率分别为（1,95±0.83)、(25.07±2.54)、(17.03±2.04)、(22.55±1.98)，上述2项指标的组间比较显示，B，C、D组均明显高于A组（均为P<0.05），其中，B、D组又高于C组（均为P<0.05），而B、D两组间则无明显差异（P>0.05）。结论：浓度≤15μmol/L的CMN对人脐静脉血EPCs无明显毒性作用，并能呈剂量依赖性诱导EPCs高表达HO-1；CMN可能主要通过Nrf2／ARE信号途径诱导EPCs中HO-1的表达；CMN能显着增强EPCs增殖与分泌细胞因子的活力和抗氧化应激损伤能力，且这一作用很可能是通过诱导EPCs高表达HO-1实现的。(本文来源于《泸州医学院》期刊2012-05-01）
孙京京[6]（2012）在《载脂蛋白AI模拟肽R-D4F对人脐静脉血内皮祖细胞黏附迁移功能的影响》一文中研究指出目的：建立内皮祖细胞培养方法套路,探索载脂蛋白A1模拟肽R-D4F对内皮祖细胞黏附、迁移活性的影响。方法：1.单个核细胞(MNCs)分离、培养采用Ficoll-hypaque(葡聚糖—泛影葡胺)密度梯度离心法,从人脐静脉血中分离出MNCS.重悬于EGM-2完全培养基,调整细胞浓度,接种在已包好人纤维连接蛋白的培养皿中。将培养皿置于5%CO2、饱和湿度、37℃恒温培养箱中静置培养。2.内皮祖细胞(EPCs)鉴定细胞培养至20d后,进行Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色鉴定。在激光共聚焦显微镜下观察细胞吞噬Dil-ac-LDL及膜内表面结合FITC-UEA-I的能力。3.载脂蛋白A1(APOA1)模拟肽R-D4F对EPCs黏附功能的影响培养3-4周的EPCs分为5组,分别为DMEM组、D-4F(50μg/ml)组、R-D-4F(5μg/ml,10μg/ml,50μg/ml)组。加入干预药物后将培养皿置于37℃培养箱中孵育24h。胰酶消化后调整细胞浓度为1×105/ml,接种于人纤维连接蛋白包被的24孔培养板中。每组6孔,每孔500μl。各组随机3孔37℃孵育2h,另外3孔37℃孵育4h。显微镜下每孔随机选择8个视野计数贴壁细胞,取平均值。检测5组细胞的黏附功能有无变化并比较有无统计学意义。4.载脂蛋白A1(APOA1)模拟肽R-D4F对EPCs迁移功能的影响用24孔transwell(孔径8μm)行体外迁移实验。培养3-4周的EPCs用胰酶消化后重悬于完全培养基中,调整细胞悬液浓度为1×105/ml。transwell下室先加600μ1EGM-2培养基,再根据分组加入不同的干预药物。上室中加细胞悬液100μl。将24孔板置于37℃培养箱中孵育12h。经固定、染色、洗涤后,每个小室随机选择10个连续显微镜视野(200倍)计数迁移到上室膜下的细胞。主要结果：1、MNCs的分离、培养4d后首次换液,轻轻吸弃未贴壁细胞。一周左右即可见到贴壁细胞小集落,细胞呈长椭圆形。一周后细胞生长明显加速,呈克隆样生长,逐渐出现大面积团簇状生长,细胞呈放射条索状排列。20d左右细胞已基本长满瓶底70-80%,呈典型的铺路石样改变。2、EPCs的鉴定细胞双荧光染色鉴定结果：贴壁细胞呈Dil-ac-LDL(红色荧光)、FITC-UEA-I(绿色荧光)双阳性的即为EPCs,阳性率可达90%。3、APOA1模拟肽对EPCs黏附、迁移功能的影响与DMEM对照组相比,D-4F显着增强内皮祖细胞的黏附、迁移功能；R-D4F(5μg/ml,10μg/ml,50μg/ml)呈剂量依赖性的增强内皮祖细胞的黏附、迁移功能。同时,4h组黏附细胞数较2h组多,各项比较有统计学意义。与D-4F阳性对照组相比,同浓度(50μg/ml)的R-D4F比D-4F的促进作用更强,但无统计学意义。主要结论：内皮祖细胞(EPCs)易于分离和体外培养扩增,可作为治疗血管损伤性疾病的种子细胞。载脂蛋白A1(APOA1)模拟肽R-D4F对EPCs的生物活性具有正向促进作用,应用于心脑血管疾病的治疗具有一定的可行性。(本文来源于《扬州大学》期刊2012-04-01）
王莹[7]（2011）在《胎盘血管疾病患者脐静脉血内皮祖细胞数量的变化》一文中研究指出目的研究胎盘血管疾病(S/D比值异常)患者脐静脉血内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPCs)数量的变化。方法分别选取孕28周-40周行B型超声检查提示脐血流S/D比值异常的孕妇18例及同期正常健康孕妇21例,抽取脐静脉血50ml,采用密度梯度离心法获取其单个核细胞,体外培养使其诱导分化为内皮祖细胞,应用激光共聚焦技术鉴定细胞,应用流式细胞仪检测技术对两组血管内皮祖细胞数量分别计数。结果异常组刚分离所得内皮祖细胞数量为(5.13±1.36)%,与对照组(13.55±1.54)%相比,有所减少(P<0.05);培养3、7天的实验组中同时表达CD133、CD34的细胞数量分别为(36.17±1.45)%、(59.48±2.51)%,与对照组(63.24±3.24)%、(81.57±3.27)%相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胎盘血管疾病(S/D比值异常)患者脐静脉血内皮祖细胞的数量减少。(本文来源于《华中科技大学》期刊2011-05-01）
刘峰,雷闽湘,谢晓云,廖洁[8]（2009）在《软脂酸对人脐静脉血内皮祖细胞增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响》一文中研究指出目的探讨软脂酸(PA)对人脐静脉血内皮祖细胞(EPC)增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法密度梯度离心法获取人脐静脉血单个核细胞,培养7d后,收集贴壁细胞并加入不同浓度软脂酸(分别为200mmol/L、400mmol/L、600mmol/L)干预48h。MTT法检测PA对EPC增殖能力的影响;流式细胞仪检测PA对细胞凋亡率的影响;提取细胞RNA,采用逆转录一聚台酶链式反应(RT-PCR)技术检测Bcl-2mRNA表达;采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白表达水平。结果PA呈浓度依赖性抑制EPC增殖,诱导EPC凋亡(P<0.05或P<0.01);基础状态下EPC表达Bcl-2mRNA及蛋白,PA处理能抑制其表达,并存在量效关系(P<0.05或P<0.01)。结论PA通过下调Bcl-2表达诱导EPC凋亡、抑制EPC增殖,这可能影响血管内皮的修复及新生血管的形成。(本文来源于《中西医结合心脑血管病杂志》期刊2009年04期）
宋显晶,刘斌,杨萍,姜峰[9]（2008）在《辛伐他汀对体外培养人脐静脉血内皮祖细胞扩增及黏附能力的影响》一文中研究指出背景:他汀类药物可促进急性缺血后的血管新生、加速球囊损伤血管的再内皮化并减少新内膜下组织的增生,且这两个作用均与血管内皮祖细胞密切相关。目的:通过体外培养人脐静脉血血管内皮祖细胞,观察辛伐他汀对血管内皮祖细胞扩增及黏附能力的影响。设计、时间及地点:以细胞为观察对象,分组对比实验,于2006-02/10在吉林大学基础医学院病理生理教研室完成。材料:人脐静脉血采集来源于吉林大学第二临床医学院妇产科6名正常足月顺产健康产妇。方法:密度梯度离心法分离培养人脐静脉血血管内皮祖细胞。通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收乙酰化低密度脂蛋白和荆豆凝血素Ⅰ情况,流式细胞仪定量检测血管内皮祖细胞表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定血管内皮祖细胞。倒置显微镜下观察血管内皮祖细胞形态学变化,计数细胞并绘制生长曲线。实验按M199培养基含辛伐他汀纯品浓度不同分5组,分别为0,0.01,0.1,1,10μmol/L辛伐他汀组,其中0μmol/L作对照。四甲基偶氮唑盐比色法观察血管内皮祖细胞增殖情况,计数贴壁细胞数法评价血管内皮祖细胞的黏附程度。主要观察指标:原代培养血管内皮祖细胞形态变化;各组细胞增殖及黏附能力。结果:①培养细胞呈长梭形,接种2~4d梭形形态细胞较少,为细胞生长的潜伏期;6~10d贴壁梭形细胞逐渐增多,为对数增殖期;10~14d细胞融合呈集落样生长,梭形细胞明显增多,进入生长平台期。②激光共聚焦显微镜鉴定乙酰化低密度脂蛋白、荆豆凝血素Ⅰ双染阳性的细胞为正在分化的血管内皮祖细胞。③流式细胞仪检测细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为(7.30±2.71)%、(42.00±6.42)%,(89.30±10.45)%。④四甲基偶氮唑盐比色结果表明各浓度组血管内皮祖细胞增殖活力、贴壁的血管内皮祖细胞数均较对照组增强(P<0.05);但以1μmol/L浓度下血管内皮祖细胞增殖活力最强。结论:辛伐他汀能增强体外培养血管内皮祖细胞的扩增及黏附能力。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2008年37期）
宋显晶,杨萍,刘斌,姜峰[10]（2008）在《人脐静脉血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定》一文中研究指出目的体外分离、培养及鉴定人脐静脉血内皮祖细胞。方法密度梯度离心法分离培养人脐静脉血EPCs。、通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收DiL-acLDL和FITC-UEA-I情况,流式细胞仪定量检测EPCs表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定EPCs。倒置显微镜下观察EPCs形态学变化,计数细胞并绘制生长曲线。结果培养细胞呈长梭形,接种2-4 d梭形形态细胞较少,为细胞生长的潜伏期;6-10 d贴壁梭形细胞逐渐增多,为对数增殖期;10-14 d细胞融合成集落样生长,梭形细胞明显增多,进入生长平台期。激光共聚焦显微镜鉴定DiL-acLDL、FITC-UEA-I双染阳性的细胞为正在分化的EPCs;流式细胞仪检测结果:细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为:7.3+2.71%、42.0+6.42%、89.3+10.45%。结论从人脐静脉血可分离、纯化、扩增培养出内皮祖细胞。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2008年04期）
人脐静脉血内皮祖细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:通过体外培养人脐静脉血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),观察他汀类新药(匹伐他汀)对EPCs数量及增殖、迁移和粘附功能的影响。方法:采用密度梯度离心法分离培养人脐静脉血单个核细胞,将其接种在包被有人纤维连接蛋白培养板上,培养7 d后,收集贴壁细胞,加入不同浓度匹伐他汀(分别为0.001μmol/L、0.01μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L)培养24h,用免疫荧光法观察EPCs吸收FITC-UEA-I和Dil-acLDL情况对EPCs进行鉴定,然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、粘附能力测定实验对各实验组测定,来观察匹伐他汀对EPCs数量及增殖、迁移和粘附功能影响。结果:匹伐他汀组与对照组相比,匹伐他汀显着提高了体外培养EPCs的数量及增殖、迁移与粘附能力(P<0.05)。匹伐他汀浓度在0.1μmol/L时对EPCs影响达到最大。随着药物浓度的继续增大,EPCs的上述功能反呈下降趋势,但1.0μmol/L组仍高于对照组。结论:匹伐他汀能增加体外培养EPCs的数量及增殖、迁移和粘附能力,可作为EPCs培养的一种改良方法,为其更好的应用于临床具有重要的意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人脐静脉血内皮祖细胞论文参考文献
[1].丁红,黄维义,沈桂冬.姜黄素对人脐静脉血来源内皮祖细胞HO-1表达的影响及机制探讨[J].山东医药.2015
[2].徐义喜,栾天竹,史平炜,周立君,徐卿璐.匹伐他汀对体外培养人脐静脉血内皮祖细胞数量及功能的影响[J].现代生物医学进展.2014
[3].周丽,常青,李自成.辛伐他汀对人脐静脉血晚期内皮祖细胞数量和功能的影响[J].临床心血管病杂志.2013
[4].周丽.辛伐他汀对人脐静脉血晚期内皮祖细胞功能的影响[D].暨南大学.2013
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