导读:本文包含了杂交反应论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:DNA链杂交反应,HCV,DNA,HPV,DNA,H7N9,DNA
杂交反应论文文献综述
张金芝[1]（2019）在《基于DNA链杂交反应的生物传感器的研究及应用》一文中研究指出DNA链杂交反应具有经济、实时和高灵敏度的特点,被广泛应用于医学诊断、基因检测和环境监测等领域。链置换反应和杂交链式反应是DNA链杂交的两种形式,常被用于检测细胞、DNA、蛋白质和金属离子等。链置换反应指通过DNA链杂交使旧链剥离的过程,它已被用于多种体外等温扩增策略,譬如滚环扩增、环介导的等温扩增等。杂交链式反应是一种现代的信号放大机制,它利用目标物触发打开多个发卡探针,使信号放大,反应条件温和。本文以DNA链杂交反应为基础,开发了叁个不同的生物传感器,用以测定HCV DNA、HPV DNA和H7N9 DNA,具体情况如下:(1)基于链置换反应和杂交链式反应无酶无标记荧光法检测HCV DNA。在HCV DNA存在时,HCV DNA与HP1杂交,诱发HP1和HP2发生链置换反应,形成HP1-HP2复合物。加入HP3和HP4后,HP1-HP2复合物可以引发HP3和HP4发生杂交链式反应,形成DNA长双链结构。加入的SG I可与DNA长双链结合,发出强烈的荧光信号。实验结果表明,体系荧光强度差值与H7N9 DNA浓度在0.1-10 nM范围内有着线性关系,检出限为82 pM。(2)目标物触发的多循环荧光及比色法检测HPV DNA。HPV DNA打开发夹HP1和HP2发生链置换反应,产生长双链DNA,加入Nt.BbvCI之后发生剪切作用,产生很多富含G碱基的DNA链。加入ThT之后,能形成G-四链体使荧光增强。由荧光法可以检测HPV DNA;当加入氯化血红素(Hemin)之后,与Hemin结合形成的G-四链体可以催化氧化ABTS~(2-)显色,因此可以通过多种方法高效、灵敏地检测HPV DNA。荧光法检测的线性范围为0.05-5 nM,检出限为32.9 pM;紫外法检测的线性范围为0.4-15 nM,检出限为0.284 nM;而HPV DNA浓度在0.4-15 nM范围内,实验体系的颜色变化逐渐加深,可用目视比色法直接观察实验结果。(3)基于核酸外切酶III辅助的目标物循环无标记荧光法检测H7N9 DNA。体系加入H7N9 DNA后,与发夹HP1作用,利用Exo III的剪切特性,目标物被释放,进行循环,并且产生大量的富含G碱基的DNA,当与荧光染料硫磺素T(ThT)结合时,形成G-四链体,体系荧光增强。实验结果表明,体系荧光强度差值与H7N9 DNA浓度在0.05-25 nM范围内有着线性关系,检出限为17 pM。(本文来源于《湘潭大学》期刊2019-05-01）
杨大威,缪鹏[2]（2017）在《基于邻位效应诱导的DNA链取代反应及链式杂交反应的蛋白质定量分析方法》一文中研究指出在蛋白质定量分析方法中,邻位效应诱导的DNA链取代反应是一种重要的信号放大方法。本工作中,我们结合邻位效应诱导的DNA链取代反应及链式杂交反应(hybridization chain reaction, HCR)设计了一种无酶信号放大体系,实现了目标蛋白质的超灵敏电化学检测。本工作以一种血小板衍生生长因子为例(PDGF-BB),首先,当靶蛋白存在时,靶蛋白可以与两个分裂适体结合,由于邻位效应,其中电极表面的一个分裂适体将被取代下来;接着,电极表面上的InitiatorDNA末端将暴露出足够多的碱基序列,从而可以与Reporter DNA结合,进而触发链式杂交反应;由于HCR的发生,电极表面生成了超长双链DNA,然后电化学活性物质六铵合钌可以吸附至电极表面的双链DNA中,产生显着的电化学信号,进而实现靶蛋白的超灵敏检测。在本工作中,当靶蛋白PDGF-BB的浓度在1pg/mL到50ng/mL范围内时,电化学信号与PDGF-BB的浓度成正相关,检测限为0.3pg/mL。本工作设计了一种无酶信号放大体系,实现了PDGF-BB的高灵敏检测,也为其他蛋白质的检测提供了新的思路。(本文来源于《第十叁届全国电分析化学学术会议会议论文摘要集》期刊2017-04-14）
郭庆生,卞非卡,刘玉乾,孙清江[3]（2016）在《二氧化硅包覆的量子点荧光编码微球用于链式杂交反应》一文中研究指出本工作中,我们结合了链式杂交反应(HCR)和量子点荧光编码微球的优点,开发了一种用于核酸高灵敏多元检测的方法(Fig.1)。我们制备了四种不同的由二氧化硅包覆的高稳定编码微球,并在每种编码微球表面偶联与一种人类乳头瘤病毒(HPV)基因片段互补的探针序列。通过编码微球表面的HCR扩增以及GelRed染料标记,编码微球表现出HPV基因型依赖的荧光发射,检测结果通过流式细胞术和荧光显微成像进行表征。实验结果表明,该检测方法与没有HCR参与的普通杂交方法相比,检测限降低了约3个数量级。此外,我们以编码微球的色度坐标作为输入,以HPV基因型作为输出,设计了一个4-to-16解码器。通过解码的过程,实现了对四个HPV基因的同时检测,为多元检测提供了一种方便的检测后分析的方法。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第四分会：生物分析和生物传感》期刊2016-07-01）
宋超[4]（2015）在《基于核酸链杂交反应用于肿瘤标记物EBNA-1的电化学免疫传感器的研究》一文中研究指出目的：EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)即人类疱疹病毒4型,目前全球感染该病毒的人口大于90%。EB病毒在儿童时期常常成隐性感染,到了成人当免疫系统低下时便容易出现症状。EB病毒的检测与多种疾病有关如：致死性传染性单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤、霍奇金病、鼻咽癌、胃癌、唾液腺肿瘤和近来发现的出现在免疫抑制患者身上的平滑肌肿瘤等相关。在上述疾病中,EB核抗原-1(EBNA-1)是最早期表达蛋白之一,且是持续表达的蛋白。EBNA-1不仅是EB病毒有关的肿瘤标志物而且能够区分其它病原微生物感染。因此,本研究构建了一种准确、高灵敏和快速检测EBNA-1电化学免疫传感器新方法。方法：1.石墨烯-多壁碳纳米管-壳聚糖(GS-MWCNTs-Chit)纳米复合物的制备。利用一步合成法将石墨烯、多壁碳纳米管均匀分散到壳聚糖中。在纳米复合物上电沉积金纳米颗粒。使用电镜和电化学方法对合成的纳米复合物进行表征。2.多壁碳纳米管上连接DNA和多克隆抗(DNA-MWCNTs-Ab2)。DNA引发链和多克隆抗体通过原位合成法连接到多壁碳纳米管上。发卡结构的两类核酸发生核酸链杂交反应形成纳米线结构。通过原子力显微镜和电化学方法对其进行表征。3.以玻碳电极作为反应基板,5mM铁氰化钾溶液为基础反应液,在对基础反应液pH值、石墨烯与多壁碳纳米管的比例、核酸链杂交反应时间和抗原抗体孵育时间等实验条件优化后,利用差分脉冲伏安法对不同浓度的EBV核抗原1进行电化学检测,并绘制标准曲线,对此EBV核抗原1(EBNA-1)电化学免疫传感器的稳定性、灵敏度和选择性进行评估。结果：1.成功合成GS-MWCNTs纳米复合物。通过一步原位合成法合成GS-MWCNTs纳米复合物,从扫描电子显微镜下可以看到GS-MWCNTs的形态学特征。通过原子力显微镜(AFM)可以观察到MWCNTs和DNA-MWCNTs-Ab2的叁维图像,表明信号放大复合物制备成功。2.所制备的免疫传感器,在最佳条件下,对目标物EBNA-1进行检测,在0.05-6.4 ng mL-1范围内信号与目标物浓度呈线性相关性,R2=0.99249,最低检测限为0.7 pg mL-1 (S/N=3),线性方程为Y=24.81X-19.11。3.该传感器性能良好：批间差异小于4.2%,批内差异小于4.0%,选择性好,最大干扰差异为4.3%。稳定性好,储存27天后,相应电流仅下降了8.1%。结论：通过将石墨烯、多壁碳纳米管、金纳米颗粒层层修饰到玻碳电极表面,来增大电极的表面积、提高电子传递能力及增加单克隆抗体的负载量,制备的免疫传感器可用于快速、超灵敏检测EBNA-1。本研究结合了免疫反应的特性与核酸杂交链反应放大系统,同时利用了纳米材料包括石墨烯、多壁碳纳米管、金纳米颗粒促进了电子传递,从而增加了免疫传感器的灵敏性具有较宽的检测范围。此种电化学免疫传感器具有特异性强、重复性好和灵敏度高等特点,为临床定量检测EBNA-1提供了有效的方法。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2015-05-01）
张宇,冯城婷,张艳军,胡盛强,侯小琪[5]（2014）在《酶标板上基于竞争杂交反应的几种miRNA序列的比色检测》一文中研究指出多种miRNA序列的同时检测对癌症的预警与早期诊断具有重要的意义。本文基于生物素标记的miRNA和靶点miRNA与酶标板上固定的寡核苷酸探针之间的竞争反应,通过比色法来定量检测叁种与胶质瘤相关的miRNA序列,即miR-182、miR-185和miR-381。通过亲和素与生物素之间的特异性相互作用,将亲和素标记的多聚辣根过氧化物酶(SA-polyHRP)衍生到微孔表面。通过检测HRP催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺和H2O2的显色反应来对叁种靶点miRNA序列进行定量。方法最低检测浓度为10fmol/L,有望用于临床上miRNA的定量分析。碱基错配的结果表明该方法具有较好的选择性。(本文来源于《中国科技论文》期刊2014年03期）
杨帆,张杨刚,田橙[6]（2011）在《基于纳米金表面竞争杂交反应的新型DNA检测方法(英文)》一文中研究指出基于纳米金表面DNA的竞争杂交反应和纳米金粒子的离心分离-富集过程,建立了一种DNA荧光检测方法,实现对飞摩尔级目标DNA的高灵敏度检测.同时通过DNA的竞争杂交过程并结合缓冲液离子强度的阶跃式升高,实现了对目标DNA上单个碱基错配的有效分辨.本研究还提供了一种简单有效的DNA分离-富集方法,相对于通常使用的磁珠分离过程更为经济方便.(本文来源于《中国科学技术大学学报》期刊2011年11期）
黄海平,朱俊杰[7]（2011）在《基于量子点修饰DNA杂交反应的电化学发光及溶出伏安测定》一文中研究指出DNA是构成生物遗传功能、维持生物体各种机能正常运行的基本单元,对DNA的分离、检测技术成为医学诊断、药物研制等诸多领域研究的热点。本文首先通过Au-S将探针DNA固定到金电极表面,再与目标DNA链杂交,最后通过生物素-亲和素反应将量子点(QDs)耦联到修饰电极上。利用量子点的电化学发(本文来源于《第十一届全国电分析化学会议论文摘要（2）》期刊2011-05-12）
张晖,覃君慧,柳金雄,冯亚玫,陈秋生[8]（2010）在《Mnb/Dyrk RNA探针的制备及其全鸡胚原位杂交反应》一文中研究指出本试验应用体外转录的方法合成正、反义地高辛标记Mnb/Dyrk的RNA探针。通过全胚胎原位杂交方法,用体外转录的RNA探针检测了10HH阶段的鸡胚Mnb/Dyrk mRNA的表达模式。结果表明,Mnb/Dyrk原位杂交信号在CNS中很强。在封闭的神经管中可检测到杂交信号,包括将来发育为前脑,中脑和菱脑的区域,以及脊髓。在头部有很强的杂交信号。尾部神经板区域杂交信号很弱。此外,在体节中杂交信号很弱。这些结果说明,Mnb/DyrkmRNA主要分布于CNS中。Mnb/Dyrk mRNA在早期鸡胚中的分布与Cdc25B是相似的。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集》期刊2010-08-10）
覃君慧,侯放亮,张晖,包慧君,周强[9]（2009）在《鸡CDC25B-mRNA探针制备及其在鸡十二指肠黏膜的原位杂交反应》一文中研究指出应用RT-PCR方法从鸡胚中扩增CDC25B基因片段,将其连接于pGM-Teasy。分别利用pGM-Teasy中T7和SP6启动子及其RNA聚合酶,以线性化的CDC25B/pGM-Teasy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。以合成的地高辛(DIG)标记的CDC25B-mRNA为探针,进一步应用原位杂交组织化学方法(in situhybridiza-tion histochemistry,ISHH)探查CDC25B-mRNA在鸡十二指肠黏膜的分布。结果表明,成年鸡十二指肠肠腺上皮细胞中有丰富的CDC25B-mRNA的转录,其中CDC25B-mRNA探针杂交阳性细胞在肠腺基底部和小肠绒毛中部分别占上皮细胞总数的81.60%±9.63%和36.21%±8.81%。原位杂交阳性产物大部分分布于十二指肠肠腺上皮"干细胞部"和"增生部"细胞的胞质和胞核,肠腺基底部杂交信号由下至上逐渐减弱,至小肠绒毛下部消失,转为阴性。在黏膜肌层以及肌肉层杂交反应呈阴性。本研究从基因水平证明了鸡十二指肠黏膜肠腺上皮"干细胞部"和"增生部"细胞中有CDC25B-mRNA的存在,表明该区域有活跃的增殖过程,以补充绒毛上端死亡脱落的细胞。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2009年05期）
冯亚玫,柳金雄,刘仪,陈秋生[10]（2008）在《鸡SP-mRNA探针制备及其在INR的杂交反应》一文中研究指出应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增P物质(Substance P,SP)基因片段,将其连接于pGM-T质粒并转化大肠杆菌,挑取阳性克隆,测序鉴定为目的片段。分别利用pGM-T质粒中T7和SP6启动子及T7和SP6RNA聚合酶,以线性化的SP/pGM-T为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。通过原位杂交(in situhybridization histo-chemistry,ISHH)技术,用新合成的探针探查SP-mRNA在鸡肠Remak神经(Intestinal nerve of Remak,INR)中的分布情况。结果表明,鸡INR中SP-mRNA阳性神经元数量众多,在空、回肠段和直肠段INR中的阳性细胞分别占总神经元的82.98%和98.01%。阳性细胞呈多突起的椭圆形或梭形,在INR神经节中较有规律地层状分布或成群出现,在神经节边缘分布更为密集,并且在节间束也有少量的阳性细胞分布。本研究从基因水平证明INR中大部分神经元有SP的mRNA转录,这些神经元作为外来的SP神经纤维可以支配到肠道和输卵管。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2008年01期）
杂交反应论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
在蛋白质定量分析方法中,邻位效应诱导的DNA链取代反应是一种重要的信号放大方法。本工作中,我们结合邻位效应诱导的DNA链取代反应及链式杂交反应(hybridization chain reaction, HCR)设计了一种无酶信号放大体系,实现了目标蛋白质的超灵敏电化学检测。本工作以一种血小板衍生生长因子为例(PDGF-BB),首先,当靶蛋白存在时,靶蛋白可以与两个分裂适体结合,由于邻位效应,其中电极表面的一个分裂适体将被取代下来;接着,电极表面上的InitiatorDNA末端将暴露出足够多的碱基序列,从而可以与Reporter DNA结合,进而触发链式杂交反应;由于HCR的发生,电极表面生成了超长双链DNA,然后电化学活性物质六铵合钌可以吸附至电极表面的双链DNA中,产生显着的电化学信号,进而实现靶蛋白的超灵敏检测。在本工作中,当靶蛋白PDGF-BB的浓度在1pg/mL到50ng/mL范围内时,电化学信号与PDGF-BB的浓度成正相关,检测限为0.3pg/mL。本工作设计了一种无酶信号放大体系,实现了PDGF-BB的高灵敏检测,也为其他蛋白质的检测提供了新的思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
杂交反应论文参考文献
[1].张金芝.基于DNA链杂交反应的生物传感器的研究及应用[D].湘潭大学.2019
[2].杨大威,缪鹏.基于邻位效应诱导的DNA链取代反应及链式杂交反应的蛋白质定量分析方法[C].第十叁届全国电分析化学学术会议会议论文摘要集.2017
[3].郭庆生,卞非卡,刘玉乾,孙清江.二氧化硅包覆的量子点荧光编码微球用于链式杂交反应[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第四分会：生物分析和生物传感.2016
[4].宋超.基于核酸链杂交反应用于肿瘤标记物EBNA-1的电化学免疫传感器的研究[D].重庆医科大学.2015
[5].张宇,冯城婷,张艳军,胡盛强,侯小琪.酶标板上基于竞争杂交反应的几种miRNA序列的比色检测[J].中国科技论文.2014
[6].杨帆,张杨刚,田橙.基于纳米金表面竞争杂交反应的新型DNA检测方法(英文)[J].中国科学技术大学学报.2011
[7].黄海平,朱俊杰.基于量子点修饰DNA杂交反应的电化学发光及溶出伏安测定[C].第十一届全国电分析化学会议论文摘要（2）.2011
[8].张晖,覃君慧,柳金雄,冯亚玫,陈秋生.Mnb/DyrkRNA探针的制备及其全鸡胚原位杂交反应[C].中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集.2010
[9].覃君慧,侯放亮,张晖,包慧君,周强.鸡CDC25B-mRNA探针制备及其在鸡十二指肠黏膜的原位杂交反应[J].畜牧兽医学报.2009
[10].冯亚玫,柳金雄,刘仪,陈秋生.鸡SP-mRNA探针制备及其在INR的杂交反应[J].畜牧兽医学报.2008