阚婷婷:定点突变改善PvEH1对邻甲基苯基缩水甘油醚的催化特性论文

阚婷婷:定点突变改善PvEH1对邻甲基苯基缩水甘油醚的催化特性论文

本文主要研究内容

作者阚婷婷,宗迅成,苏永君,王婷婷,李闯,胡蝶,邬敏辰(2019)在《定点突变改善PvEH1对邻甲基苯基缩水甘油醚的催化特性》一文中研究指出:环氧化物水解酶能够对外消旋环氧化物进行动力学拆分保留单构型的环氧化物。测定了菜豆环氧化物水解酶(Pv EH1)针对苯基缩水甘油醚及其甲基衍生物的催化特性,并基于分子对接及多序列比对分析确定7个突变位点,通过单点和组合突变对Pv EH1进行改造,以期改善Pv EH1对邻甲基苯基缩水甘油醚(1a)的催化特性。底物谱分析表明Pv EH1对1a的催化活性(157.2U/g湿细胞)和对映选择性(E=5.6)最高。单点突变结果显示E.coli/pveh1L105I和E.coli/pveh1V106I对1a的催化活性和对映选择性均有明显提高;L105I和V106I位组合突变菌株E.coli/pveh1L105I/V106I的催化活性(493.8U/g湿细胞)是E.coli/pveh1的3.1倍,对映选择性(E=8.3)也提高至E.coli/pveh1的1.5倍。纯化后Pv EH1L105I/V106I的催化活性为17.6U/mg,是Pv EH1的1.5倍,对1a的催化效率提高至Pv EH1的2.1倍。SDS-PAGE分析表明提高了蛋白质的可溶性表达量。利用E.coli/pveh1L105I/V106I全细胞催化100mmol/L 1a水解动力学拆分获得手性纯(R)-1a(ee>96%)的产率和时空产率分别为31.2%和5.12g/(L·h),因此,在手性纯(R)-1a的制备中,E.coli/pveh1L105I/V106I是一种颇具潜力的生物催化剂。

Abstract

huan yang hua wu shui jie mei neng gou dui wai xiao xuan huan yang hua wu jin hang dong li xue ca fen bao liu chan gou xing de huan yang hua wu 。ce ding le cai dou huan yang hua wu shui jie mei (Pv EH1)zhen dui ben ji su shui gan you mi ji ji jia ji yan sheng wu de cui hua te xing ,bing ji yu fen zi dui jie ji duo xu lie bi dui fen xi que ding 7ge tu bian wei dian ,tong guo chan dian he zu ge tu bian dui Pv EH1jin hang gai zao ,yi ji gai shan Pv EH1dui lin jia ji ben ji su shui gan you mi (1a)de cui hua te xing 。de wu pu fen xi biao ming Pv EH1dui 1ade cui hua huo xing (157.2U/gshi xi bao )he dui ying shua ze xing (E=5.6)zui gao 。chan dian tu bian jie guo xian shi E.coli/pveh1L105Ihe E.coli/pveh1V106Idui 1ade cui hua huo xing he dui ying shua ze xing jun you ming xian di gao ;L105Ihe V106Iwei zu ge tu bian jun zhu E.coli/pveh1L105I/V106Ide cui hua huo xing (493.8U/gshi xi bao )shi E.coli/pveh1de 3.1bei ,dui ying shua ze xing (E=8.3)ye di gao zhi E.coli/pveh1de 1.5bei 。chun hua hou Pv EH1L105I/V106Ide cui hua huo xing wei 17.6U/mg,shi Pv EH1de 1.5bei ,dui 1ade cui hua xiao lv di gao zhi Pv EH1de 2.1bei 。SDS-PAGEfen xi biao ming di gao le dan bai zhi de ke rong xing biao da liang 。li yong E.coli/pveh1L105I/V106Iquan xi bao cui hua 100mmol/L 1ashui jie dong li xue ca fen huo de shou xing chun (R)-1a(ee>96%)de chan lv he shi kong chan lv fen bie wei 31.2%he 5.12g/(L·h),yin ci ,zai shou xing chun (R)-1ade zhi bei zhong ,E.coli/pveh1L105I/V106Ishi yi chong po ju qian li de sheng wu cui hua ji 。

论文参考文献

  • [1].白念珠菌钙调蛋白定点突变重组菌株的构建和鉴定[J]. 陈孙孝,温海,姚志荣,邓安梅,仲人前,廖万清.  第二军医大学学报.2001(11)
  • [2].组蛋白脱乙酰化酶-1保守氨基酸中组氨酸定点突变的建立[J]. 陈坚,张晓琴,傅继梁.  生物技术通讯.2000(02)
  • [3].人脑源性神经营养因子基因的定点突变[J]. 李军,舒斯云,包新民,戚正武.  第一军医大学学报.1998(03)
  • [4].定点突变及非定点突变技术的新进展[J]. 胡美浩.  生物工程进展.1993(06)
  • [5].“定位突变”,还是“定位诱变”?[J]. 王培之.  生命的化学(中国生物化学会通讯).1989(06)
  • [6].非连续多核苷酸定点突变的方法[J]. 王易伦,张平武,戴建新,郭瀛军,陆德如.  生物工程学报.1996(S1)
  • [7].天花粉蛋白基因定点突变及其表达活性的研究[J]. 徐琼芳,麻孙恺,陈华伦,董贻诚,王斌,杨显荣,邵鹏柱.  中国科学(B辑 化学 生命科学 地学).1995(12)
  • [8].定点突变研究的新进展[J]. 何景就.  生命的化学(中国生物化学会通讯).1986(05)
  • [9].定点突变对Procaspase-8 DEDs蛋白溶解性的影响[J]. 庞威威,孔庆宏,王冠林,张宽仁.  昆明理工大学学报(自然科学版).2017(06)
  • [10].利用人工锌指蛋白核酸酶进行植物基因定点突变和置换[J]. 张余洋,张晓辉,张婵娟.  中国生物工程杂志.2008(11)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国生物工程杂志的阚婷婷,宗迅成,苏永君,王婷婷,李闯,胡蝶,邬敏辰,发表于刊物中国生物工程杂志2019年06期论文,是一篇关于环氧化物水解酶论文,定点突变论文,催化活性论文,动力学拆分论文,邻甲基苯基缩水甘油醚论文,中国生物工程杂志2019年06期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国生物工程杂志2019年06期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

    标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  

    阚婷婷:定点突变改善PvEH1对邻甲基苯基缩水甘油醚的催化特性论文
    下载Doc文档

    猜你喜欢