本文主要研究内容
作者姚富泉(2019)在《小麦生长素外运载体基因TaPIN1的分离及功能研究》一文中研究指出:生长素在调控植物分枝产生和根系发育方面具有重要的作用。本研究对编码小麦(Triticum aestivum L.)生长素转运蛋白TaPIN1基因的进化、结构和表达模式进行了分析,并对该基因进行了初步的生物学功能研究。主要研究结果如下:利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtPIN1基因序列,在小麦EnsemblPlants数据库中进行检索,发现在小麦A、B和D基因组均存在拟南芥AtPIN1基因直系同源基因,其中,6A染色体有1个拷贝,6B染色体有4个拷贝,6D染色体有1个拷贝,各拷贝之间序列同源性均大于77%。进化树分析结果显示小麦TaPIN1与水稻(Oryza sativa L.)中的OsPIN1b具有较近的亲缘关系。TaPIN1蛋白在拟南芥的亚细胞定位结果显示该蛋白位于细胞膜。跨膜结构特征预测发现具有典型的N末端跨膜保守结构域及一个由中间跨膜的胞质区和C末端跨膜片段共同组成的可变结构域。定量PCR结果显示TaPIN1基因主要在小麦的幼叶、根、单棱期和二棱期的茎尖、小穗原基、梨形胚中表达;原位杂交结果显示TaPIN1基因在幼叶、侧根、侧根原基和单棱期的茎尖中表达。为分析TaPIN1基因的表达是否受生长素的诱导,本研究用IAA和2,4-D对萌发5天的小麦根尖进行处理,结果发现随着处理时间和处理浓度的不同,根尖中TaPIN1基因的表达量会发生相应变化。为了研究TaPIN1基因在小麦中的功能,构建了pUbi::TaPIN1-RNAi载体、pUbi::TaPIN1A过表达载体和pTaPIN1::gTaPIN1A-GFP融合表达载体,以小麦品系CB037和Fielder的幼胚为外植体,进行了农杆菌介导的遗传转化。目前已获得T2代TaPIN1-RNAi阳性转基因株系,TaPIN1A过表达载体和GFP融合表达载体T0代阳性植株。初步的研究结果显示,TaPIN1-RNAi阳性转基因株系中TaPIN1的表达量明显降低。转基因株系的二级根数目明显减少,转基因株系的分蘖数目明显增多,分蘖夹角增大。综上所示,本研究对TaPIN1基因进行了进化树分析、亚细胞定位和时空表达模式分析。构建了TaPIN1-RNAi载体、过表达载体和GFP融合蛋白载体,并进行了小麦遗传转化。初步研究结果表明,利用RNAi技术可降低TaPIN1基因的表达水平,进而抑制小麦侧根发生,增加分蘖数目,增大分蘖角度。研究结果为分析TaPIN1基因调控小麦发育的机理提供了重要信息。
Abstract
sheng chang su zai diao kong zhi wu fen zhi chan sheng he gen ji fa yo fang mian ju you chong yao de zuo yong 。ben yan jiu dui bian ma xiao mai (Triticum aestivum L.)sheng chang su zhuai yun dan bai TaPIN1ji yin de jin hua 、jie gou he biao da mo shi jin hang le fen xi ,bing dui gai ji yin jin hang le chu bu de sheng wu xue gong neng yan jiu 。zhu yao yan jiu jie guo ru xia :li yong ni na gai (Arabidopsis thaliana)AtPIN1ji yin xu lie ,zai xiao mai EnsemblPlantsshu ju ku zhong jin hang jian suo ,fa xian zai xiao mai A、Bhe Dji yin zu jun cun zai ni na gai AtPIN1ji yin zhi ji tong yuan ji yin ,ji zhong ,6Aran se ti you 1ge kao bei ,6Bran se ti you 4ge kao bei ,6Dran se ti you 1ge kao bei ,ge kao bei zhi jian xu lie tong yuan xing jun da yu 77%。jin hua shu fen xi jie guo xian shi xiao mai TaPIN1yu shui dao (Oryza sativa L.)zhong de OsPIN1bju you jiao jin de qin yuan guan ji 。TaPIN1dan bai zai ni na gai de ya xi bao ding wei jie guo xian shi gai dan bai wei yu xi bao mo 。kua mo jie gou te zheng yu ce fa xian ju you dian xing de Nmo duan kua mo bao shou jie gou yu ji yi ge you zhong jian kua mo de bao zhi ou he Cmo duan kua mo pian duan gong tong zu cheng de ke bian jie gou yu 。ding liang PCRjie guo xian shi TaPIN1ji yin zhu yao zai xiao mai de you xie 、gen 、chan leng ji he er leng ji de jing jian 、xiao sui yuan ji 、li xing pei zhong biao da ;yuan wei za jiao jie guo xian shi TaPIN1ji yin zai you xie 、ce gen 、ce gen yuan ji he chan leng ji de jing jian zhong biao da 。wei fen xi TaPIN1ji yin de biao da shi fou shou sheng chang su de you dao ,ben yan jiu yong IAAhe 2,4-Ddui meng fa 5tian de xiao mai gen jian jin hang chu li ,jie guo fa xian sui zhao chu li shi jian he chu li nong du de bu tong ,gen jian zhong TaPIN1ji yin de biao da liang hui fa sheng xiang ying bian hua 。wei le yan jiu TaPIN1ji yin zai xiao mai zhong de gong neng ,gou jian le pUbi::TaPIN1-RNAizai ti 、pUbi::TaPIN1Aguo biao da zai ti he pTaPIN1::gTaPIN1A-GFProng ge biao da zai ti ,yi xiao mai pin ji CB037he Fielderde you pei wei wai zhi ti ,jin hang le nong gan jun jie dao de wei chuan zhuai hua 。mu qian yi huo de T2dai TaPIN1-RNAiyang xing zhuai ji yin zhu ji ,TaPIN1Aguo biao da zai ti he GFProng ge biao da zai ti T0dai yang xing zhi zhu 。chu bu de yan jiu jie guo xian shi ,TaPIN1-RNAiyang xing zhuai ji yin zhu ji zhong TaPIN1de biao da liang ming xian jiang di 。zhuai ji yin zhu ji de er ji gen shu mu ming xian jian shao ,zhuai ji yin zhu ji de fen nie shu mu ming xian zeng duo ,fen nie ga jiao zeng da 。zeng shang suo shi ,ben yan jiu dui TaPIN1ji yin jin hang le jin hua shu fen xi 、ya xi bao ding wei he shi kong biao da mo shi fen xi 。gou jian le TaPIN1-RNAizai ti 、guo biao da zai ti he GFProng ge dan bai zai ti ,bing jin hang le xiao mai wei chuan zhuai hua 。chu bu yan jiu jie guo biao ming ,li yong RNAiji shu ke jiang di TaPIN1ji yin de biao da shui ping ,jin er yi zhi xiao mai ce gen fa sheng ,zeng jia fen nie shu mu ,zeng da fen nie jiao du 。yan jiu jie guo wei fen xi TaPIN1ji yin diao kong xiao mai fa yo de ji li di gong le chong yao xin xi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自山东农业大学的姚富泉,发表于刊物山东农业大学2019-07-05论文,是一篇关于生长素外运载体论文,基因分离论文,农艺性状论文,小麦论文,山东农业大学2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自山东农业大学2019-07-05论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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