导读:本文包含了高致病性毒力岛论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:大肠杆菌,血清型,强毒力岛,致病性
高致病性毒力岛论文文献综述
刘超英,蒋欢,单春兰,高洪,严玉霖[1]（2019）在《云南撒坝猪源大肠杆菌优势血清型强毒力岛的检测及其致病性》一文中研究指出为研究撒坝猪大肠杆菌强毒力岛(HPI)的致病性,对撒坝猪致病性大肠杆菌进行了分离和血清型鉴定,获取优势血清型,采用PCR检测HPI,进行同源性比较,并通过耐药性试验和致病性试验对分离菌株与HPI的相关性进行分析。结果显示:分离得到101株大肠杆菌,确定血清型84株,其中O_3、O_4、O_(24)为优势血清型;HPI阳性率为88.64%,与GenBank登录的参考序列同源性比较大于99.3%;氨基糖苷类药物耐药性试验结果显示分离菌株普遍耐药,而HPI阳性株耐药性强,并检出含aac(3)-Ⅱa基因12株,含有aac(6′)-Ⅰb基因21株;致病性试验表明含irp2的菌株致病性强,而具有fyuA-irp2基因簇的菌株致病性更强。结果表明:HPI对大肠杆菌的毒力有增强作用。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年08期）
李红欢,陈朔,康立超,钱凌霄,张奇文[2]（2019）在《食源性单增李斯特菌毒力岛基因检测与致病性》一文中研究指出为了解食源性单增李斯特菌分离株的毒力岛1(LIPI-1)和毒力岛2(LIPI-2)的基因及致病性。利用PCR方法对8株分离株LIPI-1和LIPI-2进行基因检测,小鼠腹腔接种分离株菌悬液5×10~7 CFU/只,进行致病性的初步试验。结果显示,LIPI-1的6个毒力基因除actA基因检出率为50.0%外,hly、prfA、plcA、plcB、mpl的检出率为100.0%;LIPI-2中inlA、inlB、inlC基因检出率为100.0%,inlD和inlE基因检出率分别为87.5%和75.0%,inlF和inlG毒力因子基因的检出率较低,分别为50.0%和37.5%。小鼠致病性试验显示,8株分离株均能致死小鼠,致死率在50.0%～100.0%。其中,LM5567和LM5570在5 d内全部死亡,致死率为100.0%,表明这2株菌对小鼠有强致病力。说明LIPI-1基因检出率高于LIPI-2的基因检出率;菌株的致病性与毒力岛基因的携带率无明显相关,但分离株对小鼠均有致病性,提示食品安全不容忽视。本研究为食源性单增李斯特菌毒力岛基因携带率与致病力的关系提供铺垫。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年14期）
李汀[3]（2018）在《鸡致病性沙门氏菌分离鉴定及毒力岛核心基因多重PCR方法建立》一文中研究指出沙门氏菌属(Salmonella genus)是无芽孢的革兰氏阴性杆菌,细胞内寄生,在人和动物的肠道内寄生。禽致病性沙门氏菌病被世界动物卫生组织列为B类传染病。禽致病性沙门氏菌病具有传染性,对我国养禽业产生了严重的危害。近些年,随着养禽业规模发展之快速,禽致病性沙门氏菌病严重导致了养禽行业不可预测的经济损失,与此同时公共卫生问题也一定程度的受到了影响。目前,禽性沙门氏菌的研究较多集中于鸡源性沙门氏菌。本课题通过利用分离和鉴定细菌的方法对禽致病性沙门氏菌进行分离与鉴定,对禽致病性沙门氏菌分离株的5个主要毒力岛核心蛋白基因运用多重PCR方法进行检测并优化,建立简单、便利、快速、高效的多重PCR检测方法同时检测禽致病性沙门氏菌5个主要毒力岛核心蛋白基因。针对禽致病性沙门氏菌,本研究构建优化后的多重PCR检测方法可为该类疫病的病例进行精确、快速的诊断,并为治疗提供关键的技术支持,也可以提供真实可信的数据为流行病学调查提供真实可信的数据支撑。具体研究内容及结果如下:1、鸡致病性沙门氏菌的分离鉴定临床患沙门氏菌的病鸡一般急性病例可见脾脏、肝脏和肾脏充血、肿大,肝脏上可能有直径2~4 mm的白色病灶,有呼吸道症状的患禽,其肺脏有白色结节,心包增厚,心包内可能有渗出物,心肌或胰腺可能会出现似马立克氏病肿瘤的白色结节,偶尔可在盲肠或直肠壁上看到结节。病鸡剖解过程中采集具有沙门氏菌典型症状的组织样本和肠道粪便,通过分离鉴定得到致病性沙门氏菌。结果显示:通过SS琼脂选择培养基培养长出无色、透明、有黑色中心的小菌落。挑取典型菌落在氯化镁孔雀绿肉汤,沙门氏菌增菌液变浑浊的初步鉴定为疑似沙门氏菌。在叁糖铁培养基培养斜面为红色、底层穿刺后为黑色,产生H_2S。再进行生化试验鉴定,用鉴定沙门氏菌成套生化管的结果显示与沙门氏菌相识度为100%,判断出分离的菌属是沙门氏菌属。试验利用PCR技术扩增的分离菌16S rRNA基因,扩增出特异性的目的片段大小约1381 bp,与预期目的片段的大小一致。通过把Gen Bank数据库中的已知序列与测序结果做对比,该分离菌的16S rRNA序列与鼠伤寒沙门氏菌的同源性达99%,结果表明该分离菌为鼠伤寒沙门氏菌。动物回归试验中构建的实验组和对照组感染模型,结果得出该菌具有致病性。2、鸡致病性沙门氏菌毒力岛核心基因多重PCR检测方法建立依据Gen Bank中已发表关于禽沙门氏菌毒力岛核心蛋白基因SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5,经Primer设计的基本原则,选择合适的引物长度,模板引物的含量,发夹结构,Tm控制在50-65℃左右来设计合成合适的引物。进行对鸡致病性沙门氏菌的五个主要毒力岛核心蛋白基因:SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5的特异性进行检测。优化多重PCR反应中的条件,如退火温度、引物浓度、镁离子浓度、Taq酶、循环次数,建立多重PCR反应体系进行检测并进行敏感性测定。结果显示:对于SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5关键毒力基因特异性检测,置于梯度PCR仪中进行扩增,所得的产物片段的大小与预期目的片段的大小一致。对多重PCR反应体系中的反应条件进行优化并建立多重PCR检测方法,结果为:当引物浓度组合为引物SPI-1浓度为1.0μmol/L,引物SPI-2浓度为1.5μmol/L,引物SPI-3浓度为2.0μmol/L,引物SPI-4浓度为0.5μmol/L,引物SPI-5浓度为1.0μmol/L、退火温度53℃、镁离子浓度2.0mM/mL、Taq酶的量0.25 U、循环次数30次为最佳。多重PCR检测该菌的灵敏度为:10~1cfu/mL。3、鸡致病性沙门氏菌毒力岛核心基因多重PCR检测方法有效性评价以临床分离的4个沙门氏菌菌株、实验室保存的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的DNA作为模板,以优化后的PCR方法进行SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5的检测。分别取PCR扩增的产物4μL,配制1%琼脂糖凝胶,恒压100 V、1 h 5 min电泳进行PCR产物检测,结果可以表明SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5五种毒力岛核心蛋白基因在沙门氏菌菌株中的分布情况,验证所建立的多重PCR方法的实用性。检测结果表明,4株是阳性反应。这4株菌均能扩增出131bp、440bp、210bp、282bp、550bp片段,与禽沙门氏菌毒力岛基因SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5片段结果相符,同时大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、阴性对照均没有扩增出这些毒力岛基因片段。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2018-06-01）
王艳萍,郭时金,徐倩倩,苗立中,刘吉山[4]（2018）在《禽致病性大肠杆菌HPI毒力岛irp2蛋白表达、纯化及其间接ELISA方法建立》一文中研究指出PCR扩增irp2主要抗原表位区,构建pET-32α-irp2表达载体,转化BL21(DM3)细胞诱导表达。以纯化irp2蛋白为抗原建立ELISA检测方法,确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液与封闭条件和临界值等参数,进行ELISA性能检测及应用。结果显示,PCR扩增出约519bp特异性irp2主要抗原表位基因,经菌液PCR、双酶切及DNA测序显示成功构建pET-32α-irp2表达载体。irp2目的蛋白获得有效表达,相对分子质量大小约34 500,亲和纯化后纯度达90%以上。Western blot显示目的蛋白irp2与抗血清在约34 500出现特异性显示条带。确定ELISA抗原包被质量浓度3.25mg/L、血清稀释度1∶80,封闭液为5%脱脂奶粉,封闭条件37℃1h+4℃10h,临界值为0.320。性能检测显示,其敏感性可达1∶5 120;与鸡白痢沙门菌、鸡传染性鼻炎、鸡霉形体、鸡巴氏杆菌、HPI-大肠杆菌等血清无交叉反应特异性,批内、批间变异系数分别为3.40%~6.71%和5.20%~8.44%;与PCR方法对124份血清平行试验其符合率93.8%;对1 425份临床血清样品irp2抗体阳性检出率37.4%。结果表明,建立了可检测血清中irp2蛋白抗体的间接ELISA方法,适用于临床血清样品进行快速抗体检测,为HPI大肠杆菌的流行病学调查和致病性大肠杆菌免疫机制研究奠定基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年02期）
元振杰,王燕,夏晨阳,陈晓英,刘建枝[5]（2014）在《致犊牛腹泻大肠杆菌对小鼠致病性及LEE、HPI毒力岛的检测》一文中研究指出为了解HPI和LEE毒力岛在新疆致犊牛腹泻大肠杆菌中的流行情况,自2010年4月至8月,对新疆塔城市某集约化奶牛场10日龄内5头腹泻病死犊牛及7头严重腹泻犊牛进行病原分离鉴定,12头犊牛病料样品均分离到大肠杆菌。分离菌株进行小鼠腹腔注射均能造成小鼠发病,LD50从1.191×108~1.888×107。采用多重PCR检测LEE毒力岛的ler和eaeA基因和HPI毒力岛的irp2和fyuA基因。结果在分离的12株牛源大肠杆菌中,11株扩增出irp2+fyuA基因片段,1株扩增出fyuA+eaeA基因片段,而ler基因片段扩增均为阴性。结论:引起犊牛腹泻的致病性大肠杆菌中携带HPI毒力岛的情况非常普遍。(本文来源于《西南农业学报》期刊2014年05期）
邵颖,涂健,汪雪雁,周秀红,白灏[6]（2014）在《APEC强毒力岛核心基因irp2、fyuA敲除对其致病性影响的研究》一文中研究指出采用Red同源重组技术分别构建出APEC irp2单基因敲除株△AE17和irp2、fyuA双基因敲除株△△AE17。运用活菌计数法分别观察AE17、△AE17、△△AE17黏附鸡胚成纤维细胞DF-1的能力。并且应用Real-time PCR检测AE17、△AE17和△△AE17中的luxs,pfs,tsh,ibeA,stx2f,iss,ompA,fimC 8个毒力基因转录水平。结果成功构建出基因敲除株△AE17和△△AE17,它们黏附DF-1细胞的能力分别下降为AE17的66.04%和53.54%。同时,Real-time PCR结果显示,△AE17的luxs,iss,ompA和fimC等4个毒力基因的转录水平均极显着下降(P<0.01),△△AE17的luxs,pfs,tsh,iss,ompA和fimC等6个毒力基因的转录水平极显着的下降(P<0.01)。结果表明强毒力岛中核心基因的敲除能够减弱APEC黏附DF-1的能力,并且使其毒力基因的转录水平有所降低。irp2、fyuA双基因敲除较irp2单基因敲除对APEC的致病性影响更显着。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2014年04期）
高荣琨,王丽芳,李锐,郑明学[7]（2013）在《猪、牛和兔粪中致病性大肠杆菌LEE毒力岛的检测分析》一文中研究指出畜禽粪便中含有大量微生物,在发生传染性疾病时,粪便常常会成为重要的传染源。通过从种猪场、奶牛场和种兔场粪便中分离鉴定致病性大肠杆菌,并对分离到的大肠杆菌进行LEE毒力岛上eaeA基因的PCR检测,鉴定出含有LEE毒力岛大肠杆菌,调查携带LEE毒力岛的大肠杆菌在猪、牛和兔粪便中的存在情况。实验结果表明,猪、牛、兔粪便样品中携带LEE毒力岛的大肠杆菌检出率分别为12.9%、14.0%、22.5%。eaeA阳性的大肠杆菌应是导致仔猪、10日龄以内的初生犊牛和兔场断奶后幼兔发生腹泻症的主要细菌性病原。LEE毒力岛的检测能够作为大肠杆菌的诊断和流行分子病学调查的主要手段。(本文来源于《山西农业大学学报(自然科学版)》期刊2013年03期）
张艳英,史秋梅,高桂生,李跃,高光平[8]（2012）在《貉源致病性大肠杆菌HPI毒力岛相关基因检测及序列分析(英文)》一文中研究指出[目的]探索大肠杆菌导致仔貉腹泻的发病机理。[方法]对分离鉴定的大肠杆菌进行了血清型鉴定,采用PCR方法检测HPI毒力岛基因irp2和fyuA,扩增产物进行序列测定。[结果]分离到2株貉源大肠杆菌,血清型分别为O23和O20,2株菌均检测到HPI毒力岛irp2基因(301bp)和fyuA基因(953bp);2株菌irp2基因与GenBank中的大肠杆菌irp2基因的同源性为98.5%～99.2%,2株菌间irp2基因同源性为99.3%;2株菌fyuA基因与GenBank中的fyuA基因序列的同源性为98.9%～100%,2株菌间fyuA基因同源性为98.9%。[结论]本试验结果为大肠杆菌导致仔貉腹泻的发病机理提供了科学的实验数据,为今后该疾病的预防、诊断和治疗提供了重要参考。(本文来源于《Agricultural Science & Technology》期刊2012年11期）
刘文淼,曾瑾,王东,邓光存[9]（2012）在《银川地区鸡源致病性大肠杆菌耶尔森菌强毒力岛相关基因的检测及序列分析》一文中研究指出为了研究耶尔森菌强毒力岛(HPI)在银川地区鸡源致病性大肠杆菌中的分布情况,试验根据HPI相关基因irp2和fyuA的参考序列设计引物,采用双重PCR方法对分离的20株鸡源致病性大肠杆菌进行这两种基因的扩增和检测,以及基因克隆和核苷酸序列分析。结果表明:irp2和fyuA基因在鸡源致病性大肠杆菌分离株中的阳性率均为40%(8/20);这两种毒力岛相关基因的核苷酸序列与GenBank中报道的基因核苷酸同源性高达98%以上。说明irp2和fyuA基因具有较高的保守性。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2012年19期）
金文杰,郑志明,吉荣,钱文正,秦爱建[10]（2012）在《高致病性毒力岛Irp1介导的细菌对Vero细胞黏附作用》一文中研究指出高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现。为了解HPI-Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域。设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入原核表达载体pET32a,构建重组质粒;将获得的重组质粒转化进入菌毛阴性宿主菌BL21,获得的重组菌用IPTG诱导表达后与Vero细胞混合进行体外作用。结果表明:带有irp1-1基因片段的重组菌BL21-rpET32a-irp1-1表现出对Vero细胞较强的聚集黏附作用,空载体对照和宿主菌对照均未出现相关现象。因而推测irp1-1基因片段编码的产物在细菌对宿主致病过程中,介导了细菌与宿主细胞的相互作用。(本文来源于《扬州大学学报(农业与生命科学版)》期刊2012年03期）
高致病性毒力岛论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了解食源性单增李斯特菌分离株的毒力岛1(LIPI-1)和毒力岛2(LIPI-2)的基因及致病性。利用PCR方法对8株分离株LIPI-1和LIPI-2进行基因检测,小鼠腹腔接种分离株菌悬液5×10~7 CFU/只,进行致病性的初步试验。结果显示,LIPI-1的6个毒力基因除actA基因检出率为50.0%外,hly、prfA、plcA、plcB、mpl的检出率为100.0%;LIPI-2中inlA、inlB、inlC基因检出率为100.0%,inlD和inlE基因检出率分别为87.5%和75.0%,inlF和inlG毒力因子基因的检出率较低,分别为50.0%和37.5%。小鼠致病性试验显示,8株分离株均能致死小鼠,致死率在50.0%～100.0%。其中,LM5567和LM5570在5 d内全部死亡,致死率为100.0%,表明这2株菌对小鼠有强致病力。说明LIPI-1基因检出率高于LIPI-2的基因检出率;菌株的致病性与毒力岛基因的携带率无明显相关,但分离株对小鼠均有致病性,提示食品安全不容忽视。本研究为食源性单增李斯特菌毒力岛基因携带率与致病力的关系提供铺垫。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
高致病性毒力岛论文参考文献
[1].刘超英,蒋欢,单春兰,高洪,严玉霖.云南撒坝猪源大肠杆菌优势血清型强毒力岛的检测及其致病性[J].中国兽医学报.2019
[2].李红欢,陈朔,康立超,钱凌霄,张奇文.食源性单增李斯特菌毒力岛基因检测与致病性[J].江苏农业科学.2019
[3].李汀.鸡致病性沙门氏菌分离鉴定及毒力岛核心基因多重PCR方法建立[D].安徽农业大学.2018
[4].王艳萍,郭时金,徐倩倩,苗立中,刘吉山.禽致病性大肠杆菌HPI毒力岛irp2蛋白表达、纯化及其间接ELISA方法建立[J].中国兽医学报.2018
[5].元振杰,王燕,夏晨阳,陈晓英,刘建枝.致犊牛腹泻大肠杆菌对小鼠致病性及LEE、HPI毒力岛的检测[J].西南农业学报.2014
[6].邵颖,涂健,汪雪雁,周秀红,白灏.APEC强毒力岛核心基因irp2、fyuA敲除对其致病性影响的研究[J].中国兽医学报.2014
[7].高荣琨,王丽芳,李锐,郑明学.猪、牛和兔粪中致病性大肠杆菌LEE毒力岛的检测分析[J].山西农业大学学报(自然科学版).2013
[8].张艳英,史秋梅,高桂生,李跃,高光平.貉源致病性大肠杆菌HPI毒力岛相关基因检测及序列分析(英文)[J].AgriculturalScience&Technology.2012
[9].刘文淼,曾瑾,王东,邓光存.银川地区鸡源致病性大肠杆菌耶尔森菌强毒力岛相关基因的检测及序列分析[J].黑龙江畜牧兽医.2012
[10].金文杰,郑志明,吉荣,钱文正,秦爱建.高致病性毒力岛Irp1介导的细菌对Vero细胞黏附作用[J].扬州大学学报(农业与生命科学版).2012