刘建钗:定量PCR快速鉴别念珠菌种方法的建立论文

刘建钗:定量PCR快速鉴别念珠菌种方法的建立论文

本文主要研究内容

作者刘建钗,柳焕章,刘彦威,张鹤平,宋阔阔,李聚芹,乔铁库,吴志勇(2019)在《定量PCR快速鉴别念珠菌种方法的建立》一文中研究指出:由于禽类念珠菌种类多样,具有条件致病和感染症状非典型的特性,在临床上区分定植和感染状态并确诊何种念珠菌感染是困难的。为了快速准确地检测禽类念珠菌感染和鉴别病原种类,本研究借助Primer Express 6.0软件设计目标念珠菌基因组DNA的种特异引物,采用real-time qPCR技术,通过检测不同念珠菌种的菌株培养物而建立鉴别方法,并用人工感染鸡的血液和肝脏样本对建立的方法进行检验。结果,成功找出三种念珠菌(白色念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌)的3对特异引物和1对共用引物;特异引物分别形成相应种的特异熔解曲线,共用引物形成对应于3个种且明显分开的三条熔解曲线,与参照病原菌无交叉反应;该方法对念珠菌样本检测最低限度可达1×10~1copies/L以下,敏感度高于常规PCR约100倍以上;同种念珠菌不同模板浓度Tm值不变,同一浓度3个重复C_t值的变异系数小于2.5%,说明离散度较低,重复性好。所建方法可以通过对感染鸡的血液和肝脏样本的检测确定目标念珠菌感染和病原种类,检测周期约2~3 h。综上,通过适当的引物设计,采用定量PCR技术可以在一定范围内快速、准确、定量地检测和鉴别感染样本中的目标念珠菌种类。

Abstract

you yu qin lei nian zhu jun chong lei duo yang ,ju you tiao jian zhi bing he gan ran zheng zhuang fei dian xing de te xing ,zai lin chuang shang ou fen ding zhi he gan ran zhuang tai bing que zhen he chong nian zhu jun gan ran shi kun nan de 。wei le kuai su zhun que de jian ce qin lei nian zhu jun gan ran he jian bie bing yuan chong lei ,ben yan jiu jie zhu Primer Express 6.0ruan jian she ji mu biao nian zhu jun ji yin zu DNAde chong te yi yin wu ,cai yong real-time qPCRji shu ,tong guo jian ce bu tong nian zhu jun chong de jun zhu pei yang wu er jian li jian bie fang fa ,bing yong ren gong gan ran ji de xie ye he gan zang yang ben dui jian li de fang fa jin hang jian yan 。jie guo ,cheng gong zhao chu san chong nian zhu jun (bai se nian zhu jun 、guang hua nian zhu jun he re dai nian zhu jun )de 3dui te yi yin wu he 1dui gong yong yin wu ;te yi yin wu fen bie xing cheng xiang ying chong de te yi rong jie qu xian ,gong yong yin wu xing cheng dui ying yu 3ge chong ju ming xian fen kai de san tiao rong jie qu xian ,yu can zhao bing yuan jun mo jiao cha fan ying ;gai fang fa dui nian zhu jun yang ben jian ce zui di xian du ke da 1×10~1copies/Lyi xia ,min gan du gao yu chang gui PCRyao 100bei yi shang ;tong chong nian zhu jun bu tong mo ban nong du Tmzhi bu bian ,tong yi nong du 3ge chong fu C_tzhi de bian yi ji shu xiao yu 2.5%,shui ming li san du jiao di ,chong fu xing hao 。suo jian fang fa ke yi tong guo dui gan ran ji de xie ye he gan zang yang ben de jian ce que ding mu biao nian zhu jun gan ran he bing yuan chong lei ,jian ce zhou ji yao 2~3 h。zeng shang ,tong guo kuo dang de yin wu she ji ,cai yong ding liang PCRji shu ke yi zai yi ding fan wei nei kuai su 、zhun que 、ding liang de jian ce he jian bie gan ran yang ben zhong de mu biao nian zhu jun chong lei 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国兽医科学的刘建钗,柳焕章,刘彦威,张鹤平,宋阔阔,李聚芹,乔铁库,吴志勇,发表于刊物中国兽医科学2019年01期论文,是一篇关于特异引物论文,念珠菌论文,定量论文,熔解曲线论文,快速检测论文,中国兽医科学2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国兽医科学2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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