蔗糖代谢基因论文-程金云

蔗糖代谢基因论文-程金云

导读:本文包含了蔗糖代谢基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:兰州百合,蔗糖合成酶,可溶性酸性转化酶,基因

蔗糖代谢基因论文文献综述

程金云[1](2017)在《兰州百合蔗糖代谢关键酶基因的克隆及原核表达》一文中研究指出淀粉含量是决定百合种球质量的最关键因素。蔗糖作为百合鳞茎中可溶性碳水化合物的主要形态,可在蔗糖合成酶(Sucrose Synthase,SuSy)和可溶性酸性转化酶(Soluble Acid Invertase,SAI)调控下参与淀粉合成。为探究百合SuSy和SAI的基因功能及其在蔗糖-淀粉代谢途径中的调节机理,本研究首先克隆得到兰州百合(Lilium davidiivar.unicolor)两个SuSy基因SuSy1和SuSy2的全长cDNA序列,并对其序列进行了生物信息学分析,将其过表达载体和RNAi载体通过农杆菌介导转化兰州百合。而后构建了兰州百合SuSy及SAI基因的原核表达载体,并在适宜条件诱导融合蛋白表达,为进一步研究百合SuSy和SAI基因功能奠定了基础。主要研究结果如下:1.SuSy1和SuSy2基因cDNA全长克隆及生物信息学分析以兰州百合扦插鳞片的总RNA为模板,采用RT-PCR及RACE法成功克隆获得SuSy基因SuSy1和SuSy2全长cDNA序列,其长度分别为2,877 bp和2,865 bp.序列分析结果显示,基因SuSy1和SuSy2的同源性为85.73%,与同科植物同源性为65%-88%,分别编码807和810个氨基酸,其蛋白等电点均为6.10.结构域分析表明,SuSy1和SuSy2均编码含有188个氨基酸的保守结构域,其中包含一个糖基转移酶结构域,与糖基转化酶家族GT1有很高的相似性。2.SuSy基因转化兰州百合研究利用农杆菌介导转化法,将带有兰州百合SuSy1和SuSy2基因的过表达载体和RNAi载体导入兰州百合。为优化遗传转化过程,进行了兰州百合小鳞片对潮霉素(Hyg)和头孢霉素(Cef)浓度敏感试验,并对影响转化的各因素进行筛选。获得最适条件为:20 mg L-1 Hyg为抗性芽筛选的适宜浓度;300 mg L-1 Cef为最适抑菌浓度;预培养2 d,农杆菌菌液培养至OD600为0.6,侵染鳞片20 min,重悬液和共培养基中加入终浓度为100 μM的乙酿丁香酮(AS),共培养3 d.最终获得了 3株带有基因SuSy2片段的RNAi载体的转基因抗性苗,目前正处于筛选阶段。3.构建原核表达载体及基因原核表达利用双酶切法,将兰州百合SuSy基因SuSy1、SuSy2和SAI基因SAI的ORF序列与原核表达载体pET28a酶切并连接,构建了原核表达载体pET-28a-SuSy1、pET-28a-SuSy2和pET-28a-SAI.将获得的重组质粒转化入原核表达菌株BL21(DE3),加入IPTG诱导,且从诱导温度和IPTG浓度方面获得适宜诱导条件,经SDS-PAGE电泳检测,结果表明,目的基因得到的融合蛋白与试验预期的大小相一致,可以初步认定SuSy和SAI基因在原核中获得表达。(本文来源于《沈阳农业大学》期刊2017-06-01)

张玲[2](2017)在《草莓蔗糖代谢与转运相关基因对果实糖分积累的影响机理》一文中研究指出糖分不仅作为能源物质参与植物生长发育、形态建成,还被认为是一种信号分子响应环境胁迫、调控植物生长发育,进而影响果实品质形成。草莓是世界着名的浆果,果实中糖分积累对品质具有极其重要的影响。本研究通过研究不同草莓品种中糖代谢及转运相关基因与果实糖含量和组分、糖代谢酶活性及与糖含量相关性,及其进化、表达和对多种激素、外源糖及病原真菌的响应,明确其对草莓糖分积累的分子机制。主要结果如下:(1)草莓果实可溶性糖由葡萄糖、果糖和蔗糖构成,其中糖分积累以蔗糖为主;有机酸主要由柠檬酸和苹果酸构成,其中柠檬酸的含量是苹果酸的3-4倍;果实发育过程中蔗糖的积累与碱性/中性转化酶活性呈显着负相关;(2)草莓碱性/中性转化酶基因(Fa.A/N-Invs)家族由8个成员组成,在本研究分析的样品中检测到其中4个成员(Fa.A/N-Inv A,Fa.A/N-Inv B,Fa.A/N-Inv C,Fa.A/N-Inv E)转录表达;(3)Fa.A/N-Invs在各个组织中均有表达,成熟叶片中表达最显着,表明碱性/中性转化酶能够参与植物多种发育过程;果实发育过程中,Fa.A/N-Invs表达模式与酶活性变化吻合,说明该家族基因转录水平的调控是果实品质调节的重要环节之一;(4)Fa.A/N-Invs能响应外源IAA、GA和6-BA;在蔗糖碱性/中性转化酶酶促反应中,蔗糖和葡萄糖分别作为底物和产物,对Fa.A/N-Invs表达起促进和反馈抑制作用,蔗糖类似物松二糖也能诱导Fa.A/N-Invs差异表达,说明草莓碱性/中性转化酶基因参与多种激素和糖分相关信号通路;(5)草莓叶片受炭疽病病原菌C.fructicola侵染后Fa.A/N-Invs的表达量上调、A/N-Inv活性升高,其中Fa.A/N-Inv B/E对病原菌的早期响应最敏感,说明草莓碱性/中性转化酶能通过影响碳水化合物分配参与草莓对病原真菌的防卫响应;(6)"红颜"果实自白果期开始蔗糖含量迅速增加,"申阳"果实蔗糖积累缓慢,果实成熟时"红颜"果实蔗糖含量(50.74mg·g-1FW)约为"申阳"果实的2倍(23.18mg·g-1FW),进行蔗糖转运蛋白家族基因(FaSUTs)的表达分析表明,"红颜"草莓随着果实发育FaSUT1、FaSUT6的表达量呈现上升趋势,FaSUT2稳定表达,FaSUT7仅在成熟果实中表达,"申阳"草莓中FaSUTs在成熟果实中几乎不表达,说明FaSUT1-2、FaSUT6-7在成熟期果实的转录表达差异可能是导致两个品种果实蔗糖含量差异的原因之一。本研究表明:草莓碱性/中性转化酶在幼果期通过分解光合产物促进碳水化合物再分配进而影响果实发育;果实进入膨大期碱性/中性转化酶活性下降,果实糖分开始迅速积累;果实成熟时,蔗糖代谢酶净活性趋于零,蔗糖转运蛋白家族基因转录产物积累上调,调控果实蔗糖输入,促进果实蔗糖积累。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2017-06-01)

欧阳平,刘浩,林梦飞,李涛,吴智勇[3](2017)在《小鼠成纤维细胞在低氧状态下蔗糖和淀粉代谢相关基因表达变化》一文中研究指出目的检测低氧24h小鼠成纤维细胞L929中蔗糖和淀粉代谢相关基因mRNA的表达变化。方法 L929细胞分别在20%O_2和1%O_2下培养24h,收集细胞并提取总RNA,芯片检测差异表达基因,分析与蔗糖和淀粉代谢相关的显着差异基因。结果与对照组相比,低氧诱导后与蔗糖和淀粉代谢相关的显着差异基因有10个(Pgm~2、Sis、Gbe1、Pygl、Gusb、Mgam、Gys1、Gaa、Hk2和Hk1),表达改变在2.05-7.75倍,其中8个表达上调。结论低氧能够影响小鼠成纤维细胞L929蔗糖和淀粉代谢相关基因的表达。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2017年05期)

郭雪冬[4](2016)在《粳稻超亲变异系胚乳淀粉积累及AGPase基因表达特性与蔗糖代谢和氮素关系研究》一文中研究指出稻米品质与产量形成机理研究一直是国内外水稻研究的重点和热点之一,而有性杂交仍为培育作物新品种的主要方法,有性杂交后代出现超亲变异是普遍现象,为选育作物新品种提供重要物质基础。淀粉是水稻胚乳中最主要的贮藏物质,占胚乳干重的80%-90%,其组分含量直接影响稻米蒸煮食味品质和产量,淀粉是在一系列酶促反应下被合成积累。参与淀粉合成的酶较多,ADPG焦磷酸酶是其中的关键酶之一,而蔗糖合成酶是参与淀粉合成前体物蔗糖合成积累的关键酶。因此,本研究对灌浆过程中粳稻超亲变异系胚乳ADPG焦磷酸化酶基因表达特性及其与蔗糖代谢关键酶活性和氮素营养间关系进行系统分析,旨在为阐明淀粉组分形成的前因后果及其相关基因和酶活性的调控机理及其对外界环境的响应机制提供理论依据,这对深入了解淀粉品质及产量形成的分子调控机制均有重要的理论指导意义。本研究选用在东农423(H4)×藤系180(L11)(组合Ⅰ)和系选1号(H16)×通769(L20)(组合Ⅱ)杂交组合中,从F2代起逐代按高低两个方向以胚乳直链淀粉含量(AC)为指标,连续定向选择至F12代,从中挑选胚乳直链淀粉含量具有显着差异的超亲变异系各两个(H6、L12为组合Ⅰ;H1、L24为组合Ⅱ),以后继续加代提纯获得遗传上稳定的株系,通过盆栽试验对灌浆过程中亲本及超亲变异系胚乳直链淀粉和总淀粉含量、AGPase基因的mRNA表达量动态变化、蔗糖代谢关键酶活性变化及其对氮素营养的响应和AGPase与淀粉含量、蔗糖代谢关键酶之间的关系进行系统分析,研究结果如下:在淀粉积累上,抽穗后10d至25d是各品种胚乳直链淀粉和总淀粉积累快速增长时期,随后增速缓慢;在灌浆过程中直链淀粉含量高的基因型其直链淀粉和总淀粉含量始终显着高于直链淀粉含量低的基因型,说明影响直链淀粉含量高低与积累速率的主要因素是基因型;齐穗期增施氮肥能够降低直链淀粉含量,但影响较微弱,无显着差异;总淀粉含量对氮素处理的响应因品种不同而异,高直链淀粉含量材料其总淀粉含量的增长达到显着水平,低直链淀粉含量材料前期总淀粉含量差异较小,而后期差异显着。直链淀粉含量差异显着的超亲变异系间蛋白质含量差异也显着,抽穗期施氮肥对蛋白质含量的影响不因直链淀粉含量差异而异;在氮素处理下显着增加组合Ⅰ的蛋白质含量和千粒重;低直链淀粉含量材料在氮素处理下食味值降低,但并不显着,高直链淀粉含量材料的食味值却增加,达到显着水平;抽穗期增施氮肥能够降低最高粘度、最低粘度以及最终粘度,但影响幅度因材料不同而异,有些材料达到显着水平;无论蛋白质含量高低,直链淀粉含量低的亲本和超亲变异系,其味度值和淀粉谱特性中的粘度值均较高,而粘滞峰消减值和最终粘度均较低,说明蒸煮食味品质性状受籽粒直链淀粉含量的影响要高于蛋白质含量。Su Sy与AI活性与蔗糖含量在灌浆过程中呈单峰曲线变化,Su Sy活性在抽穗后10天到15天时明显上升,峰值出现在抽穗后15天到20天之间,不同直链淀粉含量材料间酶活性有显着差异;在氮素处理下以上两种酶活性以及蔗糖含量提升较为明显,达到显着水平,说明此两种酶活性以及蔗糖含量受氮肥的调控比较明显,且不因材料不同而异。灌浆过程中胚乳SPS活性变化在高直链淀粉含量亲本和子代呈单峰曲线变化,峰值出现在抽穗后15天,在低直链淀粉含量亲本与子代呈缓慢下降变化,相同时期不同直链淀粉含量材料间SPS活性有显着差异;在氮素处理下,SPS活性均显着降低,在灌浆不同时期Su Sy活性均较SPS和AI高。胚乳OsAGPS2a、Os AGPS2b、OsAGPL1、OsAGPL3基因在灌浆进程中mRNA表达量逐渐上调,达到峰值后又逐渐衰减,呈单峰曲线变化,抽穗后15-20d达到峰值;Os AGPS1基因在灌浆过程中mRNA表达量甚少,而Os AGPL2基因在灌浆过程中m RNA表达量均最大,且随灌浆进程表达量直线上升,OsAGPL2、Os AGPS2a、Os AGPS2b基因是在灌浆过程中胚乳上主要表达的基因;灌浆始期直链淀粉含量低的超亲变异系胚乳AGPase同功型基因的m RNA表达量要比低亲显着低,但灌浆中期开始各同工型基因的mRNA表达量变化较复杂,既有比亲本高的基因,也有比亲本低的基因;在氮素处理下胚乳Os AGPS2a、Os AGPS1、Os AGPL1基因的mRNA表达量均显着上调,而且灌浆后期各基因仍有较高的表达;Os AGPS2b、Os AGPL2、OsAGPL3基因的mRNA表达量是随氮素营养的增加而普遍显着下调。相关分析表明,除Os AGPS1的mRNA表达量与直链淀粉和总淀粉含量呈不显着的负相关外,其它同工型基因均呈正相关,其中Os AGPS2a基因mRNA表达量与直链淀粉和总淀粉含量间的相关以及OsAGPS2b和Os AGPL2基因m RNA表达量与总淀粉含量间的相关均达到显着水平;酶活性相关分析表明:蔗糖含量与直链淀粉以及总淀粉含量成不显着负相关,与Su Sy,SPS,AI活性呈正相关,Su Sy,AI活性与Os AGPS2b,Os AGPL1,Os AGPL3呈负相关,而与OsAGPS2a、Os AGPL1,Os AGPS1基因的表达量均为正相关,其中除Su Sy与Os AGPS1呈不显着正相关外,其余均达到极显着正相关,SPS活性与Os AGPS2a、OsAGPS2b,Os AGPL3呈不显着负相关,而与Os AGPS1、Os AGPL1,Os AGPL2基因呈不显着正相关关系,但总体相关性不如其它两种酶。(本文来源于《东北农业大学》期刊2016-06-01)

朱晋恒[5](2016)在《橡胶树叶片蔗糖代谢关键酶的酶学和基因表达特性研究》一文中研究指出天然橡胶是重要的工业原料,主要来自橡胶树。橡胶树以蔗糖为原料,在特化的乳管(细胞)中合成天然橡胶,乳管蔗糖的代谢调控是影响胶乳再生和橡胶产量的关键因素。乳管中的蔗糖来自橡胶树叶片,在橡胶生产中已发现叶片物候和发育状态直接影响胶乳产量,有关橡胶树叶片中蔗糖代谢调控的研究很少。本课题利用本实验已克隆的橡胶树中和中碱性转化酶(NIN)、液泡转化酶(VIN)、细胞壁转化酶(CWI)、蔗糖合成酶(Sus)和磷酸蔗糖合成酶(SPS)等基因家族,系统分析了它们在不同发育时期叶片样品中的表达模式,同时分析了叶片中的可溶性糖和淀粉含量,以及NIN、VIN、CWI、SPS和Sus(合成及分解方向)酶活性的变化,主要结果如下:(1)建立了用橡胶树叶片粗酶液测定NIN、VIN、CWI、SPS和Sus等蔗糖代谢关键酶酶活性的方法;(2)探索了 NIN、VIN、CWI、SPS、Sus(合成和分解方向)活性的最适pH值、最适温度、底物Km值、Vmax和酶稳定性,发现CWI可能在橡胶树叶片的蔗糖代谢调控中发挥关键作用;(3)研究了利用HPLC-ELSD测定橡胶树叶片中主要可溶性糖(蔗糖、葡萄糖和果糖)含量的条件,确定了最佳测定体系:柱温30℃,漂移管温度82℃,氮气流速2L/min,乙腈流动相比例75%。利用该体系,可很好的将不同组分分开,提高了分析精确度和效率;(4)利用优化的HPLC-ELSD体系,测定了不同发育时期叶片中可溶性糖和淀粉的含量,发现橡胶树叶片属于典型的糖型叶,以蔗糖为主要储藏物质,蔗糖含量是淀粉含量的10倍以上;(5)筛选出适于不同发育时期叶片基因表达qPCR分析的内参基因RH8,UBC2a和YLS8;(6)利用qPCR分析了HbNIN、HbVIN、HbCWI、HbSPS和HbSus在叶片发育过程中的表达模式,除HbSPS外的其它四个家族中都有基因成员与相应类型酶的酶活变化趋势正相关。本文首次从生化和分子水平上分析了蔗糖代谢关键酶(基因)在橡胶树叶片不同发育时期中的动态变化,结果有助于深入了解橡胶树叶片蔗糖代谢途径与发育调控,为进一步解析影响胶乳再生的“源(叶片)—库(乳管)”分子互作奠定了基础。(本文来源于《海南大学》期刊2016-05-01)

张志凯,汤宏赤,樊少林,尹金阳,林丽华[6](2016)在《酿酒酵母蔗糖关键代谢途径suc2基因的敲除及其蔗糖代谢特性的变化分析》一文中研究指出蔗糖基生物质是热带和亚热带地区重要的生物质材料,因而在微生物发酵和微生物代谢原料中具有重要的地位。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)具有以蔗糖为原料进行代谢的能力,在酿酒酵母的基因组中蔗糖水解酶基因共有6个结构基因。本研究以酿酒酵母INVSC1为出发菌株,首先利用基因敲除技术构建suc2基因缺失菌株,然后将suc2基因回补,从而研究suc2基因对酿酒酵母蔗糖关键代谢途径及蔗糖代谢特性的影响。以蔗糖为碳源的发酵培养基中,在静置条件下发酵,suc2基因缺失菌株失去了利用蔗糖代谢的能力,回补菌株则恢复了对蔗糖的代谢;而且回补菌株对蔗糖的利用率及乙醇产量均比出发菌株有所提高。suc2基因是酿酒酵母蔗糖代谢的关键基因,对蔗糖的代谢具有决定性作用,可以作为蔗糖代谢途径改造的一个关键点。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2016年03期)

彭廷,万建伟,王琳琳,杜彦修,张静[7](2015)在《复配化学调节剂对水稻子粒灌浆充实和蔗糖-淀粉代谢关键基因表达的影响》一文中研究指出采用大田试验,以大穗型水稻品种新丰2号为试验材料,研究了抽穗期喷施复配化学调节剂对水稻子粒灌浆充实、稻米品质和蔗糖-淀粉代谢关键基因表达的影响。结果表明,外源喷施复配化学调节剂IV和V可增加水稻强势粒和弱势粒的起始灌浆势、相对起始势,提高最大灌浆速率和平均灌浆速率,缩短达到最大灌浆速率所需时间,显着改善强势子粒的外观品质和碾磨品质,提高水稻弱势子粒的千粒重,且强势粒和弱势粒中蔗糖-淀粉代谢关键酶基因的表达均得到显着提高。因此,外源喷施复配化学调节剂IV和V可通过增加强势粒和弱势粒中蔗糖-淀粉代谢关键酶基因的表达,进而提高水稻强势粒和弱势粒的灌浆充实、增加产量、改善稻米品质。(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2015年05期)

李雪艳[8](2015)在《基于RNA-Seq的兰州百合鳞茎淀粉-蔗糖代谢关键酶SuSy和INV基因的挖掘》一文中研究指出淀粉是百合鳞茎中碳水化合物的重要贮藏形式,而蔗糖是百合鳞茎中糖分运转的主要形式,淀粉-蔗糖代谢在百合生长发育中起重要作用。蔗糖在蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, SuSy)和转化酶(Invertase, INV)调控下参与淀粉的合成,而SuSy和INV基因家族都有多个成员组成,而在不同植物中不同成员功能也不尽相同。因此,明确百合SuSy和INV的生理作用、基因功能成为进一步弄清淀粉合成途径及小鳞茎形成与发育机制的首要任务。为阐明百合SuSy和INV基因调控蔗糖进入淀粉合成途径的机制,本研究在转录组水平筛选在百合鳞茎发育过程中差异表达的SuSy和INV基因,并构建其过表达与RNAi载体。本研究的主要研究结果如下:1.采用改良CTAB、SDS法与TRIzol法,提取百合鳞茎中的总RNA。结果表明,SDS法和CTAB法经改良后,均可从外、中、内层鳞片中提取出电泳条带清晰、28S条带亮度约为18S条带亮度2倍、A260/A280在1.8-2.2之间的总RNA; TRIzol法虽然快捷易操作,但不能有效去除多糖污染。经RT-PCR检验,叁种方法提取的RNA反转录后的cDNA,TRIzol法扩增后无条带出现,SDS法扩增得到的条带亮度较弱,而改良CTAB法能够扩增得到亮度很高的目的条带,并且CTAB法经验证可用于鳞茎不同部位(外层鳞片、中层鳞片、内层鳞片、顶芽和鳞茎盘)RNA的提取。2.对百合小鳞茎形成与发育过程进行转录组测序,选取鳞片扦插0 d、15d(小鳞茎出现)和35 d(小鳞茎基本形成)叁个阶段,最终得到52901个unigene,平均长度为630 nt,N50为926 nt。对获得的unigene进行BLAST比对,共有37 385条unigene成功注释,占转录组数据的70.67%。通过COG比对,有11 150条unigene成功比对,根据功能分为24类,涉及了大多数的生命活动,其中一般功能预测(general function prediction only) unigene数目最多。利用BLAST2GO,最终有26 333条unigene得到注释,在所有功能分类中,有多个参与碳水化合物代谢。SSR分析得到1 596个SSR序列,主要为单碱基重复。3.选用百合小鳞茎形成与发育叁个阶段转录组中表达比较稳定的11个内参基因,其中包括9个传统内参基因(α-TUB、β-TUB、ACT、elF、GAPDH、UBQ、UBC和60S)和3个新型候选基因(AP4、FP和RH2),另外选择在百合qRT-PCR中应用较多的18S基因,使用geNorm软件、Normfinder软件、Bestkeeper软件和ACt法评价其在不同试验条件下的稳定性,最终通过RefFinder软件进行综合评价。结果表明,在不同组织器官中,ACT、GAPDH和UBQ叁个内参基因的稳定性最高;在不同发育过程中,叶片中表达稳定的内参基因是ACT、AP4和RH2,而鳞片中表达最稳定基因的是GAPDH、ACT和FP;低温、高温及盐胁迫等逆境处理后,FP、UBC和UBQ在叶片中的表达最稳定,ACT, FP和AP4在鳞片中表达最稳定,而AP4、UBC和RH2在根中的表达要比其他基因稳定;在所有样品中,表达最稳定的基因是FP、AP4和GAPDH。4.利用数字化表达谱测序,在小鳞茎形成与发育转录组测序基础上,通过生物学分析筛选不同样品中的差异表达基因,对其进行代谢富集分析,并对差异表达的淀粉-蔗糖代谢关键酶的基因表达模式进行分析,探讨淀粉-蔗糖代谢在小鳞茎形成与发育中的作用。结果发现,小鳞茎出现阶段(15 d)代谢比较活跃,差异表达基因数目最多。对差异表达基因的GO分析表明,细胞组分功能中以细胞(cell)为主,分子功能中大多数基因富集到催化活性(binding activity),在生物学过程中代谢过程(metabolic processes)参与的基因最多。代谢通路分析表明,淀粉-蔗糖代谢占主要位置。碳水化合物含量测定结果表明,母鳞片中淀粉含量呈下降趋势,而小鳞茎中淀粉含量呈上升趋势;母鳞片中蔗糖含量在小鳞茎出现与形成阶段及42 d后急剧下降,而小鳞茎中蔗糖含量在小鳞茎出现与形成阶段增加,此后变化幅度较小。小鳞茎出现与形态建成阶段蔗糖降解方向相关酶(SuSy和INV)在母鳞片中的基因表达量要高于小鳞茎,而小鳞茎膨大阶段则主要在小鳞茎中表达;蔗糖合成方向相关酶(SPS)在母鳞片中的基因表达量呈下降趋势,而在小鳞茎中的表达量在形态建成阶段较高。淀粉合成相关酶在小鳞茎中的表达丰度要高于母鳞片中的表达丰度,且以支链淀粉合成相关酶为主;而淀粉分解相关酶的基因表达量在母鳞片中较高。5.构建在百合小鳞茎形成与发育过程中差异表达的SuSy家族基因SuSy1、SuSy2、 SuSy3和INV家族基因SAI的过表达载体与RNAi载体。最终利用Gateway技术,成功构建得到SuSy3的过表达载体pMDC-SuSy3和RNAi载体pB7WIWG-SuSy3;利用Gibson Assembly技术成功构建得到SuSy1、SuSy2和SAI的过表达载体pCAMBIA-S1、 pCAMBIA-S2和pCAMBIA-SAI;利用双酶切法成功构建得到SuSy1、SuSy2和SAI的RNAi载体pTCK-S1、pTCK-S2和pTCK-SAI,为通过转基因技术探讨SuSy1、SuSy2、 SuSy3和SAI的功能奠定基础。总之,本研究在RNA-seq基础上挖掘百合小鳞茎形成与发育过程中差异表达的淀粉-蔗糖关键酶SuSy和IN,探讨其在小鳞茎发育不同阶段的表达模式,并构建其过表达与RNAi载体,为明确SuSy和INV的生理作用及基因功能奠定基础,从而为弄清百合鳞茎淀粉合成途径、生产优质种球提供依据。(本文来源于《沈阳农业大学》期刊2015-06-12)

马俊红,李军营,马二登,卢秀萍[9](2015)在《烤烟不同生育期蔗糖代谢关键酶基因的表达》一文中研究指出为了研究烤烟不同生育期蔗糖代谢的分子特点,采用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR法对云烟87在不同生育期的3种蔗糖代谢关键酶基因——转化酶(invertase,Inv)、蔗糖合成酶(sucrose synthase,Su Sy)和蔗糖磷酸合成酶(sucrose phosphate synthase,SPS)基因的表达水平进行分析。结果表明:在烟叶发育前期(团棵期、旺长期)Inv酶基因的表达量较高;Su Sy酶基因的在烤烟不同生育期的表达量变化呈单峰曲线,在打顶后表达量最高,之后又降低。SPS酶基因的表达量在烤烟生长发育后期较高,说明烤烟蔗糖的累积主要在发育后期进行。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2015年05期)

王宝山[10](2015)在《小麦近等基因系光合速率、蔗糖代谢和淀粉积累的研究》一文中研究指出本试验供试小麦材料为小偃54和8602杂交后代,利用光合速率作为筛选条件,从高代分离品系中筛选得到光合速率有明显差异的两个近等基因系,154和212。其中154为高光合速率品系,212为低光合速率品系。在幼苗期测定了幼苗光合放氧速率和希尔反应活力,在开花灌浆期测定了旗叶气体交换参数、Pn-Ci曲线、抗氧化酶活性、抗氧化剂含量、叶绿体超微结构的观察、叶绿素含量以及蔗糖淀粉代谢相关关键酶活性、代谢物含量和大田产量性状。研究了两小麦品系光合速率差异与叶绿体结构、抗氧化酶活性和抗氧化剂含量、蔗糖淀粉代谢之间的关系。主要结果如下:(1)在幼苗期,高光合速率冬小麦品系154具有较高的光合放氧速率和希尔反应活力。(2)在开花灌浆期,高光合速率冬小麦品系154的旗叶净光合速率(Pn)呈上升趋势,花后10天左右开始下降,154品系光合速率值在整个开花灌浆期均高于212品系。两品系随着Pn的下降,胞间CO2浓度(Ci)上升,气孔限制值(Ls)降低,表明两小麦近等基因系光合速率下降的原因主要为非气孔因素。(3)从两小麦品系在饱和光强下的Pn-Ci曲线图中可以看出两小麦品系Pn均随Ci的增加而增大,154增幅始终大于212。两近等基因系的RuBP最大羧化效率(Vcmax)存在显着差异。(4)在整个灌浆过程中,两品系小麦旗叶SOD的活性都是先上升后下降。灌浆后期SOD活性开始下降。与低光合品系212相比,154品系在整个开花灌浆期的旗叶SOD活性始终相对较高。高光合品系154在整个时期其CAT活性始终高于低光合速率品系212,且在花后第9天和第11天达到显着水平。两品系间旗叶APX与POD活性在开花灌浆期的变化与SOD活性变化趋势基本一致,于花后第11天左右达到最高值后开始下降。在开花灌浆期高光合速率品系154旗叶APX与POD活性始终高于212品系。(5)两品系旗叶AsA含量在整个开花灌浆期呈下降趋势,高光合速率品系154旗叶的AsA含量始终高于212品系。DHA及总抗坏血酸的含量两品系几乎维持不变。在整个开花灌浆期高光合速率品系154的AsA/DHA的比值始终高于低光合速率品系212,且在花后第15天达到极显着水平。两品系GSH含量在花后呈先上升后下降的趋势,在整个时期高光合速率品系154的GSH含量始终高于212品系。GSSG含量及总谷胱甘肽含量呈缓慢增加趋势。两冬小麦品系GSH/GSSG的比值在开花灌浆期呈先上升后下降的趋势,且在整个时期高光合速率品系154的GSH/GSSG的比值始终高于212品系,但未达到显着水平。(6)旗叶叶绿体电镜结果显示154品系在基粒数/叶绿体和片层数/基粒方面存在显着差异,在叶绿体数/细胞方面差异不显着,表明154品系较212品系具有较多的基粒数,类囊体垛迭程度较高。两品系旗叶叶绿素含量在花后第11天左右达到最大值,然后开始下降,高光合速率品系154的旗叶叶绿素含量在整个时期均高于212品系。(7)蔗糖淀粉代谢相关关键酶活性、代谢物含量的测定结果表明,高光合速率品系154具有较高的旗叶SPS活性、籽粒SS活性和AGPase活性以及高的旗叶蔗糖含量、籽粒蔗糖和淀粉含量,这有利于154品系光合产物能及时有效地从叶片运输到籽粒中,并在籽粒中及时转化为淀粉,从而减缓了可能存在的终产物代谢对叶片光合作用的反馈抑制作用,这也有利于高光合速率品系154高光合速率的维持。(本文来源于《山东农业大学》期刊2015-05-10)

蔗糖代谢基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

糖分不仅作为能源物质参与植物生长发育、形态建成,还被认为是一种信号分子响应环境胁迫、调控植物生长发育,进而影响果实品质形成。草莓是世界着名的浆果,果实中糖分积累对品质具有极其重要的影响。本研究通过研究不同草莓品种中糖代谢及转运相关基因与果实糖含量和组分、糖代谢酶活性及与糖含量相关性,及其进化、表达和对多种激素、外源糖及病原真菌的响应,明确其对草莓糖分积累的分子机制。主要结果如下:(1)草莓果实可溶性糖由葡萄糖、果糖和蔗糖构成,其中糖分积累以蔗糖为主;有机酸主要由柠檬酸和苹果酸构成,其中柠檬酸的含量是苹果酸的3-4倍;果实发育过程中蔗糖的积累与碱性/中性转化酶活性呈显着负相关;(2)草莓碱性/中性转化酶基因(Fa.A/N-Invs)家族由8个成员组成,在本研究分析的样品中检测到其中4个成员(Fa.A/N-Inv A,Fa.A/N-Inv B,Fa.A/N-Inv C,Fa.A/N-Inv E)转录表达;(3)Fa.A/N-Invs在各个组织中均有表达,成熟叶片中表达最显着,表明碱性/中性转化酶能够参与植物多种发育过程;果实发育过程中,Fa.A/N-Invs表达模式与酶活性变化吻合,说明该家族基因转录水平的调控是果实品质调节的重要环节之一;(4)Fa.A/N-Invs能响应外源IAA、GA和6-BA;在蔗糖碱性/中性转化酶酶促反应中,蔗糖和葡萄糖分别作为底物和产物,对Fa.A/N-Invs表达起促进和反馈抑制作用,蔗糖类似物松二糖也能诱导Fa.A/N-Invs差异表达,说明草莓碱性/中性转化酶基因参与多种激素和糖分相关信号通路;(5)草莓叶片受炭疽病病原菌C.fructicola侵染后Fa.A/N-Invs的表达量上调、A/N-Inv活性升高,其中Fa.A/N-Inv B/E对病原菌的早期响应最敏感,说明草莓碱性/中性转化酶能通过影响碳水化合物分配参与草莓对病原真菌的防卫响应;(6)"红颜"果实自白果期开始蔗糖含量迅速增加,"申阳"果实蔗糖积累缓慢,果实成熟时"红颜"果实蔗糖含量(50.74mg·g-1FW)约为"申阳"果实的2倍(23.18mg·g-1FW),进行蔗糖转运蛋白家族基因(FaSUTs)的表达分析表明,"红颜"草莓随着果实发育FaSUT1、FaSUT6的表达量呈现上升趋势,FaSUT2稳定表达,FaSUT7仅在成熟果实中表达,"申阳"草莓中FaSUTs在成熟果实中几乎不表达,说明FaSUT1-2、FaSUT6-7在成熟期果实的转录表达差异可能是导致两个品种果实蔗糖含量差异的原因之一。本研究表明:草莓碱性/中性转化酶在幼果期通过分解光合产物促进碳水化合物再分配进而影响果实发育;果实进入膨大期碱性/中性转化酶活性下降,果实糖分开始迅速积累;果实成熟时,蔗糖代谢酶净活性趋于零,蔗糖转运蛋白家族基因转录产物积累上调,调控果实蔗糖输入,促进果实蔗糖积累。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

蔗糖代谢基因论文参考文献

[1].程金云.兰州百合蔗糖代谢关键酶基因的克隆及原核表达[D].沈阳农业大学.2017

[2].张玲.草莓蔗糖代谢与转运相关基因对果实糖分积累的影响机理[D].甘肃农业大学.2017

[3].欧阳平,刘浩,林梦飞,李涛,吴智勇.小鼠成纤维细胞在低氧状态下蔗糖和淀粉代谢相关基因表达变化[J].世界最新医学信息文摘.2017

[4].郭雪冬.粳稻超亲变异系胚乳淀粉积累及AGPase基因表达特性与蔗糖代谢和氮素关系研究[D].东北农业大学.2016

[5].朱晋恒.橡胶树叶片蔗糖代谢关键酶的酶学和基因表达特性研究[D].海南大学.2016

[6].张志凯,汤宏赤,樊少林,尹金阳,林丽华.酿酒酵母蔗糖关键代谢途径suc2基因的敲除及其蔗糖代谢特性的变化分析[J].基因组学与应用生物学.2016

[7].彭廷,万建伟,王琳琳,杜彦修,张静.复配化学调节剂对水稻子粒灌浆充实和蔗糖-淀粉代谢关键基因表达的影响[J].河南农业大学学报.2015

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蔗糖代谢基因论文-程金云
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