导读:本文包含了重组增殖型腺病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:神经干细胞,纤维蛋白支架,增殖,分化
重组增殖型腺病毒论文文献综述
孙勇,陈平波,史文涛,杨开元,毕士奇[1]（2019）在《重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架对神经干细胞增殖与分化的影响》一文中研究指出目的研究包含重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架对神经干细胞(NSCs)增殖与分化的影响。方法实验分组:FG-SHH组(将NSCs种植于重组SHH腺病毒-支架组)和对照组(controls)[以培养板、重组SHH腺病毒转染组(SHH)、纤维蛋白胶支架组(FG)为对照组];体外分离培养并鉴定NSCs,构建重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架,用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率; MMT法检测细胞增殖活力;免疫荧光和免疫印迹法检测上述各组细胞表达神经细胞相关蛋白:β微管蛋白(β-tubulinⅢ)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达状态。结果体外培养的NSCs高表达nestin;转染重组SHH腺病毒后NSCs可稳定表达SHH;FG-SHH支架促NSCs增殖能力较强,并且FG-SHH组β-tubulinⅢ及MBP阳性细胞率和蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05),FG-SHH组GFAP的阳性细胞率和蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。结论重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架可以促进NSCs的增殖及其向神经元和少突胶质细胞分化,并抑制星形胶质细胞分化。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2019年08期）
田军,刘晓红,韩林[2]（2019）在《靶向活化转录因子6的短发夹RNA重组腺病毒载体构建及对猪瓣膜间质细胞增殖与凋亡的影响》一文中研究指出目的:构建猪活化转录因子6-短发夹RNA(ATF6-shRNA)重组腺病毒干扰载体,观察其对猪瓣膜间质细胞(VIC)增殖与凋亡的影响。方法:针对猪ATF6序列设计3个shRNA干扰靶点,构建质粒,包装后进行病毒扩增,使用腺病毒转染VIC,通过定量PCR检测腺病毒对VIC中ATF6的干扰效率,通过Western blot法测定下调ATF6后VIC中胱天蛋白酶(caspase)-3的表达情况,并通过CCK-8法检测VIC增殖情况。结果:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体。腺病毒转染VIC后,腺病毒对VIC中ATF6干扰效率提高;而ATF6、 caspase-3表达显着降低;自第2天起VIC存活率升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体,通过降低VIC中ATF6的表达水平,减少VIC凋亡并促进细胞存活。(本文来源于《国际心血管病杂志》期刊2019年03期）
黄红,黄佳纯,黄宏兴,王吉利,刘少津[3]（2019）在《过表达雌激素相关受体α干预沉默Bak1、Bcl2重组腺病毒载体转染MG63细胞的增殖与分化》一文中研究指出背景:雌激素缺乏是绝经后骨质疏松症的主要发病机制,而关于雌激素相关受体α(estrogen-relatedreceptor alpha,ERRα)与骨质疏松症的相关性研究较少,ERRα在骨质疏松症中的具体作用及其机制在目前尚不明确。目的:研究过表达ERRα对沉默Bak1、Bcl2重组腺病毒载体转染的MG63细胞和相关蛋白的影响。方法:构建过表达ERRα和沉默Bak1、Bcl2腺病毒载体,将培养好的MG63细胞分成空载病毒组、Ad-shBak1组、Ad-sh Bcl2组、Ad-shBak1+shBcl2组,过表达ERRα进行干预。MTT法检测细胞增殖,考马斯亮蓝蛋白定量检测碱性磷酸酶活性,流式法测定钙离子浓度,Western blot法分析骨调节蛋白(骨形态发生蛋白4、结缔组织生长因子、骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、肿瘤坏死因子α)的表达。结果与结论:(1)与空载病毒组对比,Ad-shBak1组的细胞活性、碱性磷酸酶活性均升高,钙离子浓度降低,各骨调节蛋白除肿瘤坏死因子α降低外,其余均升高;Ad-shBcl2组细胞活性、碱性磷酸酶活性、结缔组织生长因子均降低,但无显着性意义(P> 0.05),钙离子浓度、骨形态发生蛋白4、Runt相关转录因子2均降低,骨桥蛋白、肿瘤坏死因子α显著升高(P <0.01);Ad-shBak1+shBcl2组的细胞活性、碱性磷酸酶活性稍升高,钙离子浓度稍降低,各骨调节蛋白水平均升高,但差异不明显(P> 0.05);(2)与Ad-sh Bcl2组比较,Ad-shBak1组与Ad-shBak1+shBcl2组细胞活性、碱性磷酸酶活性升高,钙离子浓度显着降低,除肿瘤坏死因子α水平显著降低外,其余骨调节蛋白水平显着升高(P <0.01或P <0.05);(3)结果提示,过表达ERRα可提高重组腺病毒Bak1转染后的MG63细胞增殖和碱性磷酸酶活性,降低钙离子浓度,且对骨调节蛋白有一定影响作用。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年07期）
杨怀才,谌崇峰,余文洁[4]（2018）在《重组腺病毒Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖》一文中研究指出目的观察重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用。方法构建重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA,鉴定后将质粒转染HEK293A细胞,得到Nucleoli-SiRNA重组腺病毒。病毒体外转染MCF-7细胞,采用Western Blot检测Nucleolin蛋白的表达情况。将细胞分正常细胞、表柔比星、Ad-SiRN-、Ad-NucleolinSiRNA、表柔比星+Ad-SiRN-、表柔比星+Ad-Nucleolin-SiRNA共6组,MTT法检测6组细胞的增殖能力。结果酶切和测序鉴定均证实重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA构建成功,插入序列正确无误。Western Blot检测结果显示,转染NucleolinSiRNA的MCF-7细胞核仁素表达明显受到抑制。与其他各组比较,应用Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星能明显抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.01)。结论重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA能增强表柔比星抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的能力。(本文来源于《临床医学工程》期刊2018年06期）
柴爽[5]（2017）在《Bcl2、Bak1重组腺病毒对MG63细胞增殖分化及相关蛋白影响的机制研究》一文中研究指出目的：通过研究雌激素相关受体α抑制剂XCT-790对Bcl2、Bak1重组腺病毒转染MG63细胞影响增殖分化及相关蛋白的调节作用，探讨Bcl2、Bak1重组腺病毒对MG63细胞增殖分化及相关蛋白影响的作用机制。方法：收集对数期MG63细胞，分为6组：A组为空载腺病毒干预组，B、C组分别采用Bcl2、Bak1重组腺病毒转染细胞，D组采用雌激素相关受体α抑制剂XCT-790干预空载腺病毒转染的细胞，E、F组分别采用XCT-790干预Bcl2、Bak1重组腺病毒转染的细胞，各组给予相应处理48h后分别消化收集细胞，采用MTT法检测细胞增殖、考马斯亮蓝蛋白定量后测定ALP活性、Western blot检测BMP4、CTGF、OPN、Runx2、TNFα蛋白的表达。结果：与A组比较，D组细胞活性降低，BMP4、CTGF、OPN、Runx2蛋白相对表达量降低，TNFα蛋白相对表达量升高，差异有统计学意义(P<0.05),ALP活性降低，差异无统计学意义(P>0.05)；与B组比较，E组细胞活性、ALP活性降低，BMP4、CTGF、OPN、Runx2蛋白相对表达量降低，TNFα蛋白相对表达量升高，差异有统计学意义(P<0.05)；与C组比较，F组细胞活性降低，BMP4、CTGF、OPN、Runx2蛋白相对表达量降低，TNFα蛋白相对表达量升高，差异有统计学意义(P<0.05);ALP活性降低，差异无统计学意义(P>0.05)。结论：过表达Bcl2、Bak1影响MG63细胞增殖分化及相关蛋白水平可能与雌激素相关受体相关。(本文来源于《2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集（中册）》期刊2017-12-06）
刘姿麟[6]（2017）在《大鼠shRNA-SIfn1重组腺病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖的影响》一文中研究指出目的:构建带有增强型荧光蛋白(EGFP)标记的针对大鼠Slfn1(Schlafen1,睡眠因子1)的shRNA(发夹状RNA)干扰载体,并进行腺病毒包装,将其转染至原代培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)48h后,观察Slfn1的沉默表达对VSMCs增殖的影响。方法:1、根据Rat Slfn1基因的转录本设计并合成3个干扰RNA靶点shRNA-Slfn1(1)、shRNA-Slfn1(2)、shRNA-Slfn1(3)和1个阴性对照序列NC-shRNA,并将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体(pDKD-CMV-U6-shRNA)的U6启动子下游,替换掉原来的ccdB基因;经菌落PCR筛选转化子,其阳性克隆进行测序验证,将正确的克隆进行高纯度质粒抽提;利用Admax系统,将3种目的穿梭质粒、1种阴性对照穿梭质粒分别与腺病毒骨架质粒共转染到HEK293细胞中重组获得病毒后进行小量扩增及病毒滴度测定;利用Slfn1过表达腺病毒质粒中目的基因携带Flag标签,通过Western Blot检测Slfn1过表达腺病毒质粒与靶点质粒共转染293T细胞中Flag的表达,观察靶点质粒对Slfn1表达的影响。2、通过组织块贴壁法原代培养VSMCs,应用倒置相差显微镜对不同培养时间的细胞进行形态学观察,使用免疫荧光法对培养细胞进行鉴定。3、使用最适感染复数的shRNA-Slfn1(1)重组腺病毒转染VSMCs 48h后,应用倒置荧光显微镜观察EGFP的表达情况,并使用流式细胞仪检测其转染效率,通过PCR检测Slfn1 mRNA的表达,最后使用CCK-8检测Slfn1的沉默表达对VSMCs增殖的影响。结果:1、经菌落PCR鉴定获得阳性克隆并进行测序验证正确,表明构建质粒成功;经腺病毒包装及病毒扩增与纯化后,shRNA-Slfn1(1)、shRNA-Slfn1(2)、shRNA-Slfn1(3)及NC-shRNA的病毒滴度分别为1.0x1011 ifu/ml,2.5x1011 ifu/ml,6.3x1010 ifu/ml,5.5x1010 ifu/ml。Western Blot证实shRNA-Slfn1(1)和shRNA-Slfn1(3)能显着降低293T细胞中Flag的表达,确定shRNA-Slfn1(1)及shRNA-Slfn1(3)为目的质粒。2、原代培养第4-6天时,部分组织块周围开始有长梭形细胞爬出;第7-9天时,组织块周围细胞爬出较少的呈网状生长,细胞爬出较多的呈漩涡状生长,致密排列呈束状;第10-14天时,细胞呈放射状、典型的“峰—谷”样结构,相互融合达80%左右即可传代,此时传代细胞相比原代细胞生长速度明显加快,细胞变大,折光性减弱。免疫荧光染色鉴定可见VSMCs特异性的α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)表达,表达的阳性细胞数在95%以上。3、shRNA-Slfn1(1)重组腺病毒转染VSMCs48h后,倒置荧光显微镜下的EGFP、流式细胞仪检测的转染效率均达80%以上;PCR结果显示:Slfn1干扰组与Slfn1干扰对照组相比,Slfn1 mRNA表达量明显减少;CCK-8结果显示:使用shRNA-Slfn1重组腺病毒载体降低VSMCs中Slfn1基因的表达后,与对照组相比促进VSMCs的增殖。结论:1、成功构建了大鼠shRNA-Slfn1的重组腺病毒载体。2、shRNA-Slfn1(1)重组腺病毒对原代大鼠VSMCs具有干扰作用且干扰效率较高,干扰VSMCs中Slfn1基因的表达促进VSMCs的增殖。(本文来源于《贵州医科大学》期刊2017-05-23）
王鑫[7]（2017）在《重组人P53腺病毒注射液联合化疗药对乳腺癌细胞株MCF-7联合抗增殖作用及机制研究》一文中研究指出目的:乳腺癌的发病率及死亡率逐年上升,女性面临着严重的健康威胁。随着医学对乳腺肿瘤的研究不断深入,及各学科不断的发展,目前对于乳腺癌有着规范及系统的治疗,即包含手术、化疗、放疗、内分泌治疗及HER2分子靶向治疗的综合治疗。而基因P53自1979年首次报道以来,一直是研究的热点,人们逐渐发现野生型P53有促进细胞凋亡、维持基因组稳定等功能,且半数以上的恶性肿瘤存在P53基因的突变。所以2003年上市了世界范围内首个基因治疗药物重组人P53腺病毒注射液(recombinant human Ad-P53,rAd-P53,又名今又生),其机制是将外源性P53以改构的5型腺病毒为载体进入增殖的肿瘤细胞内发挥其阻滞生长、促进凋亡、促进化疗及放疗疗效、抑制血管生长等作用。已被证实应用于头颈鳞癌有较好的疗效,对于乳腺癌的研究较少。本文通过研究rAd-P53与化疗药物联合应用对乳腺癌细胞株MCF-7的作用,探究两者是否有联合抗增殖、促凋亡作用,继而研究其相关基因表达变化,以了解其作用机制。此研究为rAd-P53与化疗药物联合应用治疗乳腺癌提供初步理论依据。方法:首先将rAd-P53和化疗药物阿霉素(adriamycin,ADM)、顺铂(cis-diamine dichloroplatinum,CDDP)联合作用于乳腺癌MCF-7细胞株96h后,采用水溶性四唑盐(WST)比色法在酶联免疫检测仪OD450nm处测量每孔的吸光值,通过Calcu Syn软件检测两者之间是否有协同作用,基于WST结果计算结合指数(combination index,CI)和单独成分影响(fractions affected,Fa),CI<1、CI=1、CI>1分别表达两者之间具有协同、相加、拮抗作用。选取具有协同作用的各药物浓度范围内一浓度,通过流式细胞仪检测细胞增殖的周期分布变化情况。应用实时荧光定量技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测rAd-P53和化疗药物单独及联合应用后相关促凋亡基因的变化。结果:1 rAd-P53联合化疗药物ADM及CDDP对乳腺癌细胞株MCF-7具有协同抗增殖作用。以空白对照组的存活率做为100%,各rAd-P53浓度(由低到高依次为3×102U/cell、1×103U/cell、3×103U/cell、1×104U/cell、3×104U/cell、1×105U/cell、3×105U/cell),ADM浓度(由低到高依次为0.003μM、0.01μM、0.03μM、0.1μM、0.3μM、1μM),CDDP浓度(由低到高依次为0.03μM、0.1μM、0.3μM、1μM、3μM、10μM)作用MCF-7细胞株96h后,用WST比色法检测不同药物浓度下细胞存活率及生长抑制率,绘制增殖曲线,经Calcu Syn软件分析,rAd-P53联合化疗药ADM时,Fa在0.2-0.6之间,CI<1,表明两者对乳腺癌细胞株MCF-7具有协同抗增殖作用;rAd-P53联合化疗药CDDP时,Fa在0.2-0.6之间,CI<1,表明两者对乳腺癌细胞株MCF-7也具有协同抗增殖作用。2 rAd-P53联合化疗药物ADM或CDDP诱导乳腺癌细胞株MCF-7发生细胞周期变化。以无处理组为空白对照组,分别以rAd-P53(1×104U/cell),ADM(0.2μM),CDDP(2μM)作用于乳腺癌细胞株MCF-7细胞96h后,收取、固定细胞,经流式细胞仪分析,叁组单独用药组sub G1期均较对照组增高(分别为对照组0.17%,ADM组1.37%,CDDP组0.74%,rAd-P53组0.80%),差异具有统计学意义(P<0.05)。提示在单独用药的情况下,叁种药物均具有诱导肿瘤细胞凋亡作用rAd-P53分别联合ADM或CDDP作用于乳腺癌细胞株MCF-7细胞,培养96h,收取、固定细胞,经流式细胞仪检测,联合用药各组sub G1期均较单独用药组增高(分别为ADM+rAd-P53联合用药组14.02%,CDDP+rAd-P53联合用药组10.31%),与对照组及单独用药各组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。3 rAd-P53联合化疗药物可调节乳腺癌细胞株MCF-7的P53、P21、P27、Bax、Noxa基因的表达水平。将MCF-7细胞分为6个组,分别为:对照组、rAd-P53组(1×104U/cell)、ADM组(0.2μM)、CDDP组(2μM)、rAd-P53+ADM联合用药组、rAd-P53+CDDP联合用药组,作用于乳腺癌细胞株MCF-7,培养96h,提取RNA反转录为c DNA,通过q RT-PCR检测基因P53、P21、P27、Bax、Noxa表达水平。结果显示:rAd-P53组及各个联合用药组P53基因表达水平均较对照组、ADM组及CDDP组增高(P<0.05)。各联合用药组与rAd-P53组相比基因P53表达量明显增高(P<0.05)。P21基因单独用药组相比对照组,表达均增高(P<0.05),各联合用药组均较单一用药组表达水平增高(P<0.05)。P27基因各单药组较对照组表达均增高(P<0.05),ADM+rAd-P53联合用药组、CDDP+rAd-P53联合用药组均较单独用药组表达水平增高(P<0.05)。Bax基因在CDDP+rAd-P53联合用药组、ADM+rAd-P53联合用药组中,表达水平均高于各单一用药组及对照组(P<0.05)。rAd-P53+ADM联合用药组Noxa表达水平均较对照组及ADM组高(P<0.05),CDDP+rAd-P53联合用药组Noxa表达水平均较对照组及CDDP组高(P<0.05)。结论:rAd-P53联合化疗药物ADM或CDDP对乳腺癌细胞株MCF-7具有协同抗增殖作用,其作用机理为诱导细胞周期中sub G1期增加并上调乳腺癌细胞中基因P53、P21、P27、Bax、Noxa的表达水平,rAd-P53可强化化疗药的诱导凋亡作用。(本文来源于《河北医科大学》期刊2017-03-01）
万雷,黄宏兴,黄红,柴生颋,张志海[8]（2016）在《沉默DKK1、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63细胞增殖、ALP活性和钙离子浓度影响研究》一文中研究指出目的构建Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因沉默重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和钙离子浓度影响作用。方法设计出特异性针对DKK1、Sost和无关对照序列(Scr),构建DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,用q PCR法和蛋白印记(Western blot)法选出沉默效率最好的扩增DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,并用荧光显微镜观察计算病毒滴度。MG63细胞被分成空白对照组、沉默DKK1(Ad-sh DKK1)组、沉默Sost(Ad-sh Sost)组、沉默DKK1+Sost(Ad-sh DKK1+Ad-sh Sost)组4组,分别用优选出的沉默效率最好的sh DKK1和sh Sost腺病毒载体转染MG63细胞,采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)检测观察细胞增殖、考马斯亮蓝蛋白定量法测定ALP活性、流式分析法测定钙离子浓度。结果 1DKK1 p Ad-sh DKK1-1和Sost p Ad-GFP-shRNA-2沉默效率最高;2与空白对照组对比,沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默DKK1+Sost组的细胞光吸收值(OD)、ALP活性测定值均升高,而钙离子浓度均降低,以沉默DKK1+Sost组变化最明显,组间比较具有统计学差异(P<0.01和P<0.05)。结论 DKK1、Sost沉默可促进MG63细胞增殖、提高ALP活性,降低钙离子浓度,尤以二者同时沉默时的作用最强。(本文来源于《中国骨质疏松杂志》期刊2016年11期）
张馨,周琳,张晓雷[9]（2016）在《重组腺病毒介导突变型低氧诱导因子1α基因转染脂肪间充质干细胞并促进其增殖》一文中研究指出背景:为了提高移植组织的存活率,多数学者把研究的焦点放在了细胞治疗上,特别是经细胞辅助的脂肪移植领域。目的:分析叁点突变型低氧诱导因子1α转染脂肪间充质干细胞后促进脂肪移植成活率的作用。方法:(1)利用目的片段重组叁点突变型低氧诱导因子1α基因入腺病毒pA dE asy-1系统,包装病毒并测定滴度;(2)人脂肪间充质干细胞的培养传代及鉴定;(3)以3种病毒液连同空白组共分4组进行后续实验(实验组含叁点突变型低氧诱导因子1α基因;阳性对照组;阴性对照组;空白组);将病毒液转染入脂肪间充质干细胞内,通过示踪因子增强型绿色荧光蛋白观察病毒转染效率,检测各组细胞中低氧诱导因子1α基因m RNA和蛋白表达情况;(4)通过MTT法检测各组脂肪间充质干细胞的增殖情况。结果与结论:(1)腺病毒重组体构建成功并包装成功,符合转染要求;(2)通过成脂诱导、成骨诱导及成软骨诱导鉴定证明脂肪间充质干细胞培养成功,可以作为后续实验的种子细胞;(3)RT-PCR结果显示,实验组和阳性对照组细胞内低氧诱导因子1αmR NA表达量均明显高于另外2组(P<0.05);(4)Western blot检测显示,实验组蛋白表达相对吸光度值明显高于其他3组(P<0.05);(5)实验组转染脂肪间充质干细胞后分裂增殖程度显着增加,组间比较差异有显着性意义(P<0.05);(6)结果提示腺病毒介导的叁点突变型低氧诱导因子1α基因转染脂肪间充质干细胞后不仅可以在常氧条件下持续表达目的蛋白,同时也能促进脂肪间充质干细胞的显着增殖,达到一种双赢的效果。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年23期）
陈哲[10]（2016）在《重组腺病毒介导HLA-G基因转染恒河猴树突状细胞对T细胞增殖的作用》一文中研究指出[目的]将介导HLA-G基因的重组腺病毒转染恒河猴未成熟树突状细胞,鉴定基因进入细胞中并稳定表达；探讨恒河猴HLA-G重组腺病毒载体感染的恒河猴imDC对刺激T细胞增殖的作用。[方法]使用氯胺酮麻醉恒河猴,用穿刺针穿刺恒河猴髂后上嵴。待获得新鲜的骨髓血后置入冰盒低温保存。猴淋巴细胞分离液能够有效分离单个核细胞与骨髓血中的其他细胞,免疫法获得纯度较高的CD34~+细胞。在体外成功获取大量DC的关键则是添加两种小剂量的细胞因子,即GM-CSF联合IL-4。因此通过添加RPMI1640培养基给予细胞营养进行体外培养的同时添加两类细胞因子,诱导CD34~+细胞分化。用细胞计数板计数生长良好的imDC,按细胞数量接种于细胞培养板的不同培养孔中,同时根据不同MOI值分别加入腺病毒病毒液,同时添加细胞因子和培养基,48小时后观察细胞绿色荧光色素蛋白的表达情况。HLA-G重组腺病毒感染imDC,成功提取蛋白后,运用Western Blot检测技术检测目的蛋白表达的情况,对腺病毒感染imDC组和阴性对照组的灰度值比较分析。以刺激细胞和反应细胞来进行细胞混合淋巴细胞反应,根据不同的细胞组合和培养方式,将刺激细胞分为5组,各组分别进行诱导培养。各刺激细胞组分别依次刺激T细胞,按照不同的刺激细胞：反应细胞比例,获取各组的刺激指数(stimulation index, SI)。运用统计学软件分析各组刺激T细胞增殖的作用。[结果]免疫磁珠法获得纯度较高的CD34~+阳性细胞,进而运用细胞因子联合诱导获得imDC。当MOI不同的情况下,重组腺病毒介导HLA-G,成功转染了生长良好的imDC,载体在imDC中的稳定表达。Western blot检测发现,出现的特异性条带与HLA-G表达的蛋白大小一致,在36kD见GADPH内参蛋白表达,两组重组腺病毒感染组较阴性对照组表达水平上升85.77%和86.57%,推断表明HLA-G基因进入恒河猴imDC,在imDC中稳定表达。混合淋巴细胞培养,通过配对t检验分析得出结论：重组腺病毒感染imDC处理组对刺激T细胞增殖的能力显着降低。[结论](一)重组腺病毒介导HLA-G基因转染恒河猴imDC, HLA-G在imDC中稳定表达；(二)LPS诱导的炎症条件能够促进imDC成熟,增强DC的抗原呈递作用,促进T细胞增殖；(叁) HLA-G能够有效抑制恒河猴T细胞的增殖,同时也能在炎症条件下抑制T细胞增殖。(本文来源于《昆明医科大学》期刊2016-05-01）
重组增殖型腺病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建猪活化转录因子6-短发夹RNA(ATF6-shRNA)重组腺病毒干扰载体,观察其对猪瓣膜间质细胞(VIC)增殖与凋亡的影响。方法:针对猪ATF6序列设计3个shRNA干扰靶点,构建质粒,包装后进行病毒扩增,使用腺病毒转染VIC,通过定量PCR检测腺病毒对VIC中ATF6的干扰效率,通过Western blot法测定下调ATF6后VIC中胱天蛋白酶(caspase)-3的表达情况,并通过CCK-8法检测VIC增殖情况。结果:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体。腺病毒转染VIC后,腺病毒对VIC中ATF6干扰效率提高;而ATF6、 caspase-3表达显着降低;自第2天起VIC存活率升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:成功构建靶向ATF6的shRNA重组腺病毒载体,通过降低VIC中ATF6的表达水平,减少VIC凋亡并促进细胞存活。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组增殖型腺病毒论文参考文献
[1].孙勇,陈平波,史文涛,杨开元,毕士奇.重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架对神经干细胞增殖与分化的影响[J].基础医学与临床.2019
[2].田军,刘晓红,韩林.靶向活化转录因子6的短发夹RNA重组腺病毒载体构建及对猪瓣膜间质细胞增殖与凋亡的影响[J].国际心血管病杂志.2019
[3].黄红,黄佳纯,黄宏兴,王吉利,刘少津.过表达雌激素相关受体α干预沉默Bak1、Bcl2重组腺病毒载体转染MG63细胞的增殖与分化[J].中国组织工程研究.2019
[4].杨怀才,谌崇峰,余文洁.重组腺病毒Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖[J].临床医学工程.2018
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