刘芳:Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备论文

刘芳:Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备论文

本文主要研究内容

作者刘芳,卢婷,蔡梦迪,吴芳草,陈相好,王彩霞,崔古贞,陈峥宏(2019)在《Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备》一文中研究指出:目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术分离纯化Cas9蛋白;将纯化获得的Cas9蛋白免疫新西兰大白兔,制备Cas9蛋白多克隆抗体。结果:pET28a-Cas9重组表达载体转化的E.coli BL21(DE3)可表达Cas9蛋白,纯化的Cas9蛋白免疫家兔得到的多克隆抗体效价>1∶256 K。结论:本研究获得了高质量Cas9蛋白及多克隆抗体,为后续CRISPR-Cas9基因编辑的应用奠定了良好的基础。

Abstract

mu de :huo de gao chun du Cas9dan bai ,zhi bei Cas9dan bai te yi xing kang ti 。fang fa :yi Cas9ji yin xu lie wei mo ban ,she ji te yi xing yin wu ,PCRkuo zeng huo de Cas9ji yin quan chang xu lie ,li yong mo feng pin jie ji shu gou jian pET28a-Cas9chong zu biao da zai ti ;zhuai hua E.coli BL21(DE3),jing IPTGyou dao biao da Cas9dan bai ,bing li yong His-Tagji shu fen li chun hua Cas9dan bai ;jiang chun hua huo de de Cas9dan bai mian yi xin xi lan da bai tu ,zhi bei Cas9dan bai duo ke long kang ti 。jie guo :pET28a-Cas9chong zu biao da zai ti zhuai hua de E.coli BL21(DE3)ke biao da Cas9dan bai ,chun hua de Cas9dan bai mian yi jia tu de dao de duo ke long kang ti xiao jia >1∶256 K。jie lun :ben yan jiu huo de le gao zhi liang Cas9dan bai ji duo ke long kang ti ,wei hou xu CRISPR-Cas9ji yin bian ji de ying yong dian ding le liang hao de ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自贵州医科大学学报的刘芳,卢婷,蔡梦迪,吴芳草,陈相好,王彩霞,崔古贞,陈峥宏,发表于刊物贵州医科大学学报2019年07期论文,是一篇关于蛋白论文,蛋白表达与纯化论文,多克隆抗体论文,贵州医科大学学报2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自贵州医科大学学报2019年07期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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