甲基赤藓糖醇论文-刘攀峰,乌云塔娜,杜兰英,吴敏,黄海燕

甲基赤藓糖醇论文-刘攀峰,乌云塔娜,杜兰英,吴敏,黄海燕

导读:本文包含了甲基赤藓糖醇论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:林木育种学,杜仲,2-甲基-D-赤藓醇-2,4-环焦磷酸合酶(MDS),基因

甲基赤藓糖醇论文文献综述

刘攀峰,乌云塔娜,杜兰英,吴敏,黄海燕[1](2014)在《杜仲2-甲基-D-赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合酶基因全长cDNA克隆与序列分析》一文中研究指出2-甲基-D-赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合酶(MDS)基因曾被认为是调控植物2-甲基-D-赤藓糖醇4-磷酸(MEP)途径的一个关键节点。为解析杜仲MDS基因序列信息和预测基因功能,以叶片cDNA为模板,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)及cDNA末端快速扩增(RACE)技术分离出杜仲MDS基因的cDNA克隆,并通过一系列生物信息学方法进行序列分析。结果表明:EuMDS基因cDNA全长976 bp,5′端非编码区长119 bp,3′端非编码区长146bp,编码236个氨基酸。推导EuMDS氨基酸序列中包含转运肽序列(A1~A56)以及多个植物MDS蛋白保守的功能位点(A84,A87,A89,A121,A213,A217,A221,A223,A228)。推导EuMDS蛋白二级结构中α-螺旋占40.3%,β-折迭占13.6%,螺环结构占46.2%。推导EuMDS蛋白叁级结构由3个亚单位组成,并相互围绕形成1个分子内腔。系统进化分析表明EuMDS蛋白与啤酒花MDS蛋白亲缘关系最为接近。预测所克隆的EuMDS基因在杜仲萜类生物合成中发挥重要功能。(本文来源于《浙江农林大学学报》期刊2014年03期)

汪建峰,熊智强,张嗣良,王勇[2](2014)在《基于2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4磷酸途径的产紫槐二烯大肠杆菌构建及其补糖策略优化》一文中研究指出2-C-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(2-methyl-D-erythritol-4-phosphate, MEP) 途径是大肠杆菌Escherichiacoli 唯一的萜类前体合成途径,研究表明它比甲羟戊酸(Mevalonate, MVA)途径具有更高的理论产率。但目前有关MEP 途径的调控所知非常有限,故单独强化MEP 途径对萜类异源合成产量的提高效果并不理想。研究中通过引入外源MEP 途径基因强化E. coli 萜类合成的遗传改造策略和发酵过程补糖控制优化,尝试更有效地释放MEP 途径的潜力,建立青蒿素前体——紫槐二烯的高密度发酵过程。研究结果表明共表达阿维链霉菌Streptomyces avermitilis dxs2 基因和枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis idi 基因可使紫槐二烯的摇瓶发酵产量比野生菌株提高12.2 倍。随后针对该菌株建立了高密度发酵过程,发现稳定期的中前期(24?72 h) 是产物合成的关键期,通过稳定期补糖速率的调整,明显改善了产物合成速度,使紫槐二烯的产量从2.5 g/L 提高到了4.85 g/L,但不影响产物积累的周期。考虑到72 h 后菌体老化可能会影响产物合成,进一步采取了调整对数期的补糖速率控制菌体生长的策略,使紫槐二烯的产量达到6.1 g/L。研究结果为基于MEP 途径的萜类异源合成工程菌构建及其发酵工艺的建立奠定了基础。(本文来源于《生物工程学报》期刊2014年01期)

高伟,程琪庆,马晓惠,何云飞,蒋超[3](2012)在《丹参2-C-甲基-D-赤藓糖醇2,4-环焦磷酸合成酶(SmMCS)基因全长克隆及其生物信息学分析》一文中研究指出目的:从丹参毛状根中克隆2-C-甲基-D-赤藓糖醇2,4-环焦磷酸合成酶(SmMCS)全长基因,并进行生物信息学分析。方法:根据丹参转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用RACE方法克隆SmMCS全长cDNA,并对SmMCS进行蛋白结构预测、序列多重比对和构建进化树等分析;同时采用实时定量PCR检测Ag+诱导子诱导丹参毛状根不同时期的SmMCS基因转录水平。结果:克隆的SmMCS全长cDNA由988个核苷酸组成,具有完整编码框,编码234个氨基酸,蛋白相对分子质量约24.6 kDa,等电点pI 8.53;实时定量PCR结果表明该基因受Ag+诱导后表达水平在12 h时急剧上升并达到最高值。结论:从丹参毛状根中克隆得到一条SmMCS全长cDNA,为进一步研究丹参酮类成分的生物合成和萜类次生代谢提供靶基因。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2012年22期)

高文运[4](2010)在《同位素标记及未标记的1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸和2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸的合成方法》一文中研究指出萜类化合物构成了最大的一个天然产物家族,结构复杂多变,且有许多重要的生理活性.2-甲基-D-赤藓糖醇4-磷酸(MEP)途径是近年来发现并建立的一条萜类化合物的生物合成途径,其中所涉及到的酶均可作为靶标来进行新抗菌素的筛选.综述了以化学合成及酶催化合成方法制备MEP途径中关键中间体1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸和2-甲基-D-赤藓糖醇4-磷酸的进展,并着重介绍了同位素标记的这两个化合物的制备方法.(本文来源于《有机化学》期刊2010年01期)

刘哲,刘毅,孙铭飞,覃宗华,袁建丰[5](2009)在《柔嫩艾美耳球虫2-甲基赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶基因的克隆表达和亚细胞定位研究》一文中研究指出以已报道的恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)和刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)非甲羟戊酸(non-mevalonate MEP)类异戊二烯合成代谢(Isoprenoid biosynthesis)途径中的关键酶2-甲基赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶(2C-Methyl-D-erythritol2,4-cyclodiphosphate Synthase,MECS)的基因为参照,对Eimeria tenalla基因组数据库进行搜索比对,发现E.tenalla基因组粗数据Contig_0003528中含有编码MECS保(本文来源于《中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第叁次国际寄生虫学学术研讨会论文摘要集》期刊2009-10-23)

刘哲[6](2008)在《柔嫩艾美耳球虫2-甲基赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶基因的克隆表达和亚细胞定位研究》一文中研究指出鸡球虫病是由艾美耳属的一种或几种球虫同时或先后寄生于鸡肠道黏膜上皮细胞所引起的疾病,造成的经济损失巨大。实践证明,抗球虫药物使用在鸡球虫的防治上具有重要作用。但抗药性问题限制了现有抗球虫药物的广泛应用,促使人们不得不寻找新的药物靶标。非甲羟戊酸(non-mevalonate MEP)类异戊二烯合成代谢(Isoprenoid biosynthesis)途径是广泛存在于植物、细菌和某些低等生物的一种重要合成代谢途径。已有的数据证明在疟原虫(Plasmodium spp)中存在MEP途径,并以此为药靶开发了膦铵霉素(fosmidomycin)这一新型抗疟药。本研究根据比较基因组学和生物信息学的原理和方法,预测出鸡球虫类异戊二烯合成代谢相关酶之一2-甲基赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶(2C-Methyl-D-erythritol 2,4-cyclodiphosphate Synthase,EtMECS)的ORF序列,进行克隆、原核表达及亚细胞定位的研究。实验具体分为以下两个部分:(1)EtMEC编码基因的生物信息学预测分析和基因克隆:分别以已报道的恶性疟原虫(P.falciparum)MECS的氨基酸序列(Gene Bank Acession Number AF279661)和刚地弓形虫(T.gondii)MECS的预测序列(55.m04628,http://www.toxodb.org)为参照,对Etenalla基因组数据库进行搜索比对,发现E.tenallaContig_0003528中含有MECS部分编码序列。以该序列编码的氨基酸序列对GeneBank数据库进行PSI-Blast分析预测EtMEC的ORF序列。以柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA为模板,用RT-PCR方法成功扩增出长261bp的EtMEC基因部分片段;在此基础之上,用RACE技术获得EtMEC基因的全长cDNA序列:测序结果表明,EtMEC全长cDNA共1625bp,5'和3'非编码区分别为27bp和380bp,EtMEC ORF长为1218bp;根据全长cDNA序列设计特异引物,成功扩增出包含整个ORF的序列片段。EtMEC的ORF编码一个由405个氨基酸组成的多肽,信号肽预测和多序列比对结果表明,其N-端包括一个由24个氨基酸组成的信号肽和128个氨基酸组成的转导肽,成熟的EtMEC蛋白共由253个氨基酸组成,分子量为37.6 KD。与其它物种MEC的氨基酸序列相似性在24-45%之间,进化树分析表明,EtMEC和TgMEC处于同一进化枝上。(2)利用DNA重组技术,选原核表达载体pET-32a(+),利用E.coli Rosseta(DE3)重组表达EtMEC的成熟基因片段,结果重组载体能够得到表达;但pET-32a(+)-EtMEC重组表达蛋白大部分以包涵体的形式存在,采用不同的温度对表达条件进行优化,结果表明在37℃时重组蛋白的可溶性略高于16℃。选用37℃时纯化pET-32a(+)-EtMEC表达的重组蛋白,制备抗体,利用激光共聚焦技术研究EtMEC在E.tenella子孢子内的免疫荧光亚细胞定位。结果显示,EtMEC定位于E.tenella子孢子的顶质体,并发现部分子孢子可能具有多个顶质体。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2008-12-07)

施文钧,张雪莲,张旻,赖旭卉,王洪海[7](2008)在《结核分枝杆菌4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓糖醇合成酶的分离纯化与酶学特性》一文中研究指出克隆并表达了结核分枝杆菌H37Rv的4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D赤藓糖醇(CDP-ME)合成酶基因,并纯化该蛋白。经HPLC和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明该蛋白为同二聚体,Mg2+为最适二价金属离子。对辅因子的底物特异性高,最适底物为胞苷叁磷酸(CTP)。CTP和2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)的Km值分别为92和43μmol/L,Vmax为7.8μmol·(min·mg)-1。(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2008年08期)

甲基赤藓糖醇论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

2-C-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(2-methyl-D-erythritol-4-phosphate, MEP) 途径是大肠杆菌Escherichiacoli 唯一的萜类前体合成途径,研究表明它比甲羟戊酸(Mevalonate, MVA)途径具有更高的理论产率。但目前有关MEP 途径的调控所知非常有限,故单独强化MEP 途径对萜类异源合成产量的提高效果并不理想。研究中通过引入外源MEP 途径基因强化E. coli 萜类合成的遗传改造策略和发酵过程补糖控制优化,尝试更有效地释放MEP 途径的潜力,建立青蒿素前体——紫槐二烯的高密度发酵过程。研究结果表明共表达阿维链霉菌Streptomyces avermitilis dxs2 基因和枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis idi 基因可使紫槐二烯的摇瓶发酵产量比野生菌株提高12.2 倍。随后针对该菌株建立了高密度发酵过程,发现稳定期的中前期(24?72 h) 是产物合成的关键期,通过稳定期补糖速率的调整,明显改善了产物合成速度,使紫槐二烯的产量从2.5 g/L 提高到了4.85 g/L,但不影响产物积累的周期。考虑到72 h 后菌体老化可能会影响产物合成,进一步采取了调整对数期的补糖速率控制菌体生长的策略,使紫槐二烯的产量达到6.1 g/L。研究结果为基于MEP 途径的萜类异源合成工程菌构建及其发酵工艺的建立奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

甲基赤藓糖醇论文参考文献

[1].刘攀峰,乌云塔娜,杜兰英,吴敏,黄海燕.杜仲2-甲基-D-赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合酶基因全长cDNA克隆与序列分析[J].浙江农林大学学报.2014

[2].汪建峰,熊智强,张嗣良,王勇.基于2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4磷酸途径的产紫槐二烯大肠杆菌构建及其补糖策略优化[J].生物工程学报.2014

[3].高伟,程琪庆,马晓惠,何云飞,蒋超.丹参2-C-甲基-D-赤藓糖醇2,4-环焦磷酸合成酶(SmMCS)基因全长克隆及其生物信息学分析[J].中国中药杂志.2012

[4].高文运.同位素标记及未标记的1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸和2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸的合成方法[J].有机化学.2010

[5].刘哲,刘毅,孙铭飞,覃宗华,袁建丰.柔嫩艾美耳球虫2-甲基赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶基因的克隆表达和亚细胞定位研究[C].中国动物学会寄生虫学专业委员会第十二次全国学术会议暨第叁次国际寄生虫学学术研讨会论文摘要集.2009

[6].刘哲.柔嫩艾美耳球虫2-甲基赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶基因的克隆表达和亚细胞定位研究[D].湖南农业大学.2008

[7].施文钧,张雪莲,张旻,赖旭卉,王洪海.结核分枝杆菌4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓糖醇合成酶的分离纯化与酶学特性[J].中国医药工业杂志.2008

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