导读:本文包含了免疫化学鉴定论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:新孢子虫,分离鉴定,HE染色,免疫组织化学
免疫化学鉴定论文文献综述
王琪[1]（2017）在《新孢子虫病原分离鉴定及免疫化学检测方法的建立》一文中研究指出新孢子虫病(Neosporosis)是一种原虫病,它是由犬新孢子虫(Neospora caninum)寄生在多种动物体内引起的,该病会引起家畜的死亡。犬新孢子虫是一种原生性寄生虫,其宿主种类繁多,如今已经证明犬科动物是新孢子虫的终末宿主,其中间宿主范围非常广泛,如牛、马、羊、梅花鹿、野牛、猪、豚鼠、沙鼠、家猫等均可感染。宿主的多种细胞和组织脏器内均有虫体的寄生;该病会造成孕畜流产和死胎等,给畜牧业造成巨大经济损失,且目前无特效的药物及疫苗来治疗和预防该病,因此,快速诊断出患病动物、对病畜实施隔离和淘汰仍然是消灭、防控本病的最具有成效的办法。目前,国内外学者针对新孢子虫检测技术已经做了很多研究,本研究通过人工感染试验动物,采用Vero细胞从感染动物的脑组织分离新孢子虫的检测方法,利用HE染色观察病理变化;同时建立免疫组化和间接免疫荧光方法来检测新孢子虫病。1、本研究建立新孢子虫细胞病原分离方法。首先将疑似因感染新孢子虫而流产的牛胎儿脑组织匀浆,接种到培养好的均匀生长的单层Vero细胞中,同时腹腔注射接种到大鼠体内,每天在显微镜下观察细胞状态,同时观察大鼠的精神状态和临床症状。接种细胞后在显微镜下可见弯月形虫体,提取细胞中虫体DNA和出现症状的大鼠主要实质器官的DNA,用根据GenBank中登录的NcSRS2基因设计合成的引物进行扩增,并测序,结果显示同源性为99%,成功分离到新孢子虫。2、为了更好地观察宿主感染新孢子虫后的临床症状及各组织脏器的损伤程度,将虫体大量增殖,收集并纯化虫体,腹腔注射人工感染大鼠,对其出现的临床症状进行观察,同时取各组织器官制作石蜡切片并用HE染色方法对其进行染色,观察各组织器官的损伤程度。大鼠接种新孢子虫3d后精神萎靡,食欲下降,前期饮欲增强,随后出现见人恐惧,将身体蜷缩成一团的症状,进而饮欲也下降,后期很少进食。剖检可见肾脏肿胀,脑膜充血,肺脏上有红色的病灶。取各组织脏器制作石蜡切片经HE染色观察其病理变化,可见各脏器广泛出血,心肌纤维坏死,心肌细胞排列紊乱;肝细胞索排列紊乱,肝细胞核边缘化,肝细胞肿大;脾窦充血,中央动脉管壁增厚;肺泡间质增宽,形态逐渐消失,有大量炎性细胞浸润;肾小球形态逐步消失,肾淤血,肾小管萎缩;脑神经元肿胀变性,脑组织出血。3、建立免疫组织化学方法检测新孢子虫。本研究通过对一抗、二抗的工作浓度、孵育时间和抗原的修复方式等条件进行优化,成功建立了新孢子虫的免疫组织化学检测方法,当一抗进行400倍稀释,二抗进行100倍稀释时,效果最好,背景染色浅,阳性细胞染色深,用该方法可以在感染的大鼠的脑组织中检测到包囊。对人工感染弓形虫和牛双芽巴贝斯虫的大鼠的脑组织进行免疫组化检测,未检测到包囊,结果呈阴性,证明该方法具有较好的特异性。4、将新孢子虫速殖子作为已知抗原,对抗体的工作浓度进行优化筛选,在一抗400倍稀释、荧光素标记的二抗200倍稀释时,非特异性荧光最弱,虫体形态最清晰,发出较亮的荧光呈黄绿色,成功建立了间接免疫荧光方法用于新孢子虫的检测。用建立的方法对弓形虫和牛双芽巴贝斯虫的标准阳性血清实施检测,结果呈阴性,无荧光,表明此方法具有较好的特异性;从中随机抽取血清进行3次重复性检测,3次检测结果没有明显的差异,表明该方法具有较好的重复性和稳定性。用建立的方法检测从吉林省多个牛场采集的236份血清样本,有38份血清样本呈阳性,阳性率为16.1%。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2017-06-01）
马良宏,丁强,王翔,汪洋,谭德炎[2]（2006）在《精原细胞分离纯化方法的建立及其免疫化学鉴定》一文中研究指出我们通过程序性复合酶消化结合差速贴壁及非连续性Percoll密度梯度离心的方法纯化精原细胞,探讨精原细胞的分离纯化方法,并对纯化后细胞进行免疫化学鉴定。一、材料和方法 1．精原细胞的分离:选10日龄SD(本文来源于《中华实验外科杂志》期刊2006年03期）
吴玮,阎隆飞[3]（1997）在《玉米花粉中凝溶胶蛋白的免疫化学鉴定》一文中研究指出肌动蛋白广泛存在于各种真核细胞中,参与细胞内多种运动过程。在正常生理条件下,肌动蛋白以两种形式存在:单体（G-actin）及聚合体（F-actin）,两者在细胞内通过聚合解聚作用维持动态平衡。F-肌动蛋白为双股螺旋丝,它能进一步形成更有序的微丝束或网状结构,以维持细胞正常生命活动所需的空间结构和胞内物质的定向运动。细胞能在特定的时间、空间调节肌动蛋白的聚合解聚过程,能与肌动蛋白结合并调节其聚合解聚作用的一类蛋白统称为肌动蛋白结合蛋白（Actin-binding proteins,简称ABPs）,目前生物界已发现了几十种ABP。凝溶胶蛋白（Gelsolin）是研究较为清楚的一种ABP,最早Yin和Stossel于1979年从兔肺巨噬细胞提取液中分离得到,以后证明它普遍存在于低等的真核生物到高等哺乳动物中,依其来源可分(本文来源于《科学通报》期刊1997年16期）
周承,温廷桓[4]（1996）在《太湖德永摇蚊变应原免疫化学特征鉴定》一文中研究指出目的：研究太湖德永摇蚊（ＴｏｋｕｎａｇａｙｕｓｕｒｉｋａｔａｉｈｕｅｎｓｉｓＷｅｎｅｔａｌ．，１９９４）变应原组成和生物活性，进行免疫化学特征鉴定。方法：太湖德永摇蚊浸液（Ｔｏｋｔ）经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０凝胶过滤，作等电聚焦（ＩＥＦ）分析蛋白质组分及其等电点、放射变应原吸附抑制试验（ＲＡＳＴ－ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，ＲＩ）测定各组分的变应原活性、建立兔抗Ｔｏｋｔ血清库以作交叉免疫电泳（ＣＩＥ）和不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），测定各组分中的免疫原性和主要变应原的分子量。结果：Ｔｏｋｔ经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０得２个蛋白洗脱峰（ｔ１，ｔ３）；ＩＥＦ至少可分离出１５种组分，在ｐＩ４．０－８．７５之间，大部分是酸性蛋白质，ｐＩ５．４－７．５，其中主要组分为ｔ１；ＲＩ检测凝胶过滤４种组分（ｔ１－ｔ４）变应原活性，以ｔ１最高而向ｔ４逐一下降，在ＩＥＦ各组分中有３种＞２５％，４种１０％－１５％；ＣＩＥ分析Ｔｏｋｔ显示至少含２０条沉淀线，其主要组分亦位于ｔ１。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得ＭＷ４０－１０６ｋＤａ。结论：太湖德永摇蚊Ｔｏｋｔ变应原组成复杂，至少有６－７种不同等电点的蛋白质具有变应原活性，ｐＩ４－５?(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊1996年02期）
舒衡平[5]（1994）在《恶性疟原虫与红细胞膜联合的两种300kDa蛋白质,PfEMP1及PfEMP3的免疫化学鉴定及鉴别》一文中研究指出恶性疟原虫感染红细胞(PRBC)粘连于内皮细胞,导致PRBC堆积于微血管中,增强了原虫的毒力和致病性。干扰细胞粘连可能在抗恶性疟原虫中提供保护,因之,有关粘连受体就成为人们感兴趣的候选疫苗或药物靶子,迄今已认识有3个可能的受体:(本文来源于《国外医学(寄生虫病分册)》期刊1994年04期）
董志扬,阎隆飞[6]（1994）在《多头绒泡菌中动蛋白的免疫化学鉴定》一文中研究指出动蛋白(kinesin)是一种微管系统的运动蛋白(motor protein),它能通过水解ATP将化学能转化为机械能,推动微管产生运动.微管系统作为一种主要的细胞骨架存在于所有真核细胞中,它们对于维持细胞形态,细胞的分裂,染色体的运动及细胞内的物质运输起着重要作用.细胞质力蛋白(dynein)和动蛋白是公认的推动这类运动的运动蛋白.自从1985年Vole首次在鱿鱼大轴突(squidgiant axon)中发现动蛋白以来,人们先后在许多种动物细胞中发现有动蛋白存在,甚至在低等真核生物棘状变形虫,盘基网柄茵和高等植物烟草花粉管中发现有动蛋白的存在.研究结果表明,动蛋白参与了真核细胞中的许多重要生命活动,如细胞中的细胞器及囊泡的运动,染色体排裂和分离等运动.动蛋白很可能是普通存在于所有真核细胞中的一种运动蛋白.多头绒泡菌(Physarum poly-cephalum)属于粘菌纲(Myxomycetes)的一种低等真核生物,它表现出许多显着的细胞运动特征如原生质团迁移,细胞质的穿梭运动(shuttle streaming)等,是研究非肌细胞运动和收缩蛋白的经典材料.在多头绒泡菌胞质中也具有微管系统,它们构成其纺锤丝等,参与染色体的运动及其它胞质运动,但至今国内外尚无人证明其中有与微管作用的运动蛋白——动蛋白的存在,作者利用抗牛脑动蛋白的单克隆抗体,(本文来源于《微生物学报》期刊1994年02期）
钟建敏,温廷桓[7]（1993）在《粉尘螨Der fI变应原的免疫化学特征鉴定》一文中研究指出作者在原制备Der f Ⅰ变应原基础上进行其免疫化学特征鉴定。Der fⅠ的交叉免疫电泳(CIE)结果证实提纯的Der f Ⅰ为均质性。Der f Ⅰ氨基酸组成与Dandeu(1982)、Heymann(1986)报道的Der f Ⅰ相应结果相关性比较表明,叁者在氨基酸组成上有相似性。采用放射性变应原吸附试验(RAST)检测55份螨过敏性患者血清抗Der f ⅠIgE抗体水平,其中49.09％病人RAST阳性,平均阳性特异性IgE水平为6.58±3.90百分结合率。结果表明Der f Ⅰ是粉尘螨主要的变应原。(本文来源于《上海医科大学学报》期刊1993年05期）
许阿莲,周晓音,王炳夫,Donald,A,Harn[8]（1992）在《抗日本血吸虫卵单克隆抗体的制备和免疫化学的鉴定》一文中研究指出用可溶性日本血吸虫卵抗原(SEA)免疫小鼠制备单克隆抗体,获得5株特异的抗日本血吸虫卵单抗。免疫球蛋白亚类鉴定均为IgG_1。免疫印迹法结果表明其所识别的日本血吸虫卵抗原的分子量分别为>200kDa、116kDa和22kDa。经两维免疫印迹法(2-Dimensional Western Blot),显示被单抗IE1识别的22kDa SEA等电点pI4.6—6之间至少有3个以上同晶型体(isomorphs)。放射免疫沉淀试验表明IE1可识别30kDa抗原。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊1992年01期）
徐崇,Hill,J,A,Anderson,D,J[9]（1990）在《用单克隆抗体免疫化学技术鉴定不育妇女子宫内膜中白细胞成分》一文中研究指出用白细胞亚类特异性单克隆抗体研究了不育妇女子宫内膜中白细胞成分。发现NKH—1阳性细胞为其主要成分,占50～75%,巨噬细胞次之。整个月经周期中T协助细胞始终多于T抑制细胞,其比例有波动。B淋巴细胞和粒细胞罕见。讨论了不育妇女子宫内膜中NKH—1阳性细胞和巨噬细胞的存在以及T_H/T_s比例在月经周期中波动的可能意义。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊1990年05期）
王育东,阎隆飞[10]（1990）在《蚕豆叶细胞质膜中红膜肽的免疫化学鉴定》一文中研究指出近年来的研究证明,红细胞膜上存在一个膜骨架系统,由红膜肽(spectrin)、连接蛋白(ankyrin)、带4.1蛋白和肌动蛋白(actin)等组成。最近在动物多种器官的细胞内也发现了膜骨架蛋白,特别是红膜肽的存在。我们在文献[3,4]中用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析了蚕豆叶细胞质膜蛋白的组成,并与人红细胞膜骨架蛋白作了比较。结果表明,蚕豆叶细胞质膜蛋白中的245和228 kD两种蛋白质可能即是人红细胞质膜上的红膜肽α和红膜肽β。本文目的在于用免疫化学方法鉴定蚕豆叶细胞质膜中的红膜肽,进一步证明植物细胞质膜中膜骨架的存在。研究结果表明,在植物细胞中确实存在着红膜肽α及β。(本文来源于《科学通报》期刊1990年17期）
免疫化学鉴定论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
我们通过程序性复合酶消化结合差速贴壁及非连续性Percoll密度梯度离心的方法纯化精原细胞,探讨精原细胞的分离纯化方法,并对纯化后细胞进行免疫化学鉴定。一、材料和方法 1．精原细胞的分离:选10日龄SD
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫化学鉴定论文参考文献
[1].王琪.新孢子虫病原分离鉴定及免疫化学检测方法的建立[D].吉林农业大学.2017
[2].马良宏,丁强,王翔,汪洋,谭德炎.精原细胞分离纯化方法的建立及其免疫化学鉴定[J].中华实验外科杂志.2006
[3].吴玮,阎隆飞.玉米花粉中凝溶胶蛋白的免疫化学鉴定[J].科学通报.1997
[4].周承,温廷桓.太湖德永摇蚊变应原免疫化学特征鉴定[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.1996
[5].舒衡平.恶性疟原虫与红细胞膜联合的两种300kDa蛋白质,PfEMP1及PfEMP3的免疫化学鉴定及鉴别[J].国外医学(寄生虫病分册).1994
[6].董志扬,阎隆飞.多头绒泡菌中动蛋白的免疫化学鉴定[J].微生物学报.1994
[7].钟建敏,温廷桓.粉尘螨DerfI变应原的免疫化学特征鉴定[J].上海医科大学学报.1993
[8].许阿莲,周晓音,王炳夫,Donald,A,Harn.抗日本血吸虫卵单克隆抗体的制备和免疫化学的鉴定[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.1992
[9].徐崇,Hill,J,A,Anderson,D,J.用单克隆抗体免疫化学技术鉴定不育妇女子宫内膜中白细胞成分[J].中国免疫学杂志.1990
[10].王育东,阎隆飞.蚕豆叶细胞质膜中红膜肽的免疫化学鉴定[J].科学通报.1990