导读:本文包含了核磷蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:NPM1,耐药膀胱癌,顺铂,细胞感染
核磷蛋白论文文献综述
罗陈烁,赵嫚,雷婷,张曼[1]（2019）在《核磷蛋白1稳定敲除的耐顺铂膀胱癌细胞系的建立与纯化》一文中研究指出目的旨在建立核磷蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)稳定敲除的耐顺铂膀胱癌细胞系。方法采用慢病毒感染的方式,对耐顺铂膀胱癌细胞系T24/DDP的NPM1基因进行敲除,并采用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)和Western blotting法在基因水平和蛋白水平对NPM1的敲除效果进行验证,并通过荧光显微镜验证荧光效率。采用有限稀释法对感染后的细胞进行筛选纯化,通过单克隆增殖的方法对纯化后的细胞增殖培养,建立具有NPM1稳定敲除的耐顺铂膀胱癌细胞系。结果通过基因和蛋白水平比较筛选出能够有效敲除NPM1的基因片段,并通过单克隆筛选获得了NPM1稳定敲除的耐顺铂膀胱癌细胞系。筛选后细胞系荧光效率近100%,且对NPM1有明显敲除效率。结论NPM1稳定敲除的耐顺铂膀胱癌细胞系T24/DDP具有稳定的NPM1基因敲除效果,可以作为研究膀胱癌细胞耐药的良好实验模型。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2019年09期）
沈立君,黄永平,祝学勇,刘叶,李红良[2]（2018）在《酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A对心肌细胞肥大的影响及机制研究》一文中研究指出目的探讨酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A(Anp32a)对心肌细胞肥大的作用及机制。方法通过挖掘数据库小鼠心脏假手术组及主动脉缩窄手术组芯片数据,进行差异基因分析。选取8~10周龄小鼠,随机分为模型组和假手术组(n=7或8),终末取材提取心脏组织RNA检测Anp32amRNA表达水平。构建Anp32a敲低(AdshAnp32a),Anp32a过表达(AdAnp32a)及其相应的对照组AdshRNA,AdGFP腺病毒并转染H9C2心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激H9C2心肌细胞诱导心肌细胞肥大,提取细胞RNA通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测心肌肥厚指标[心房利钠肽(AnP),脑利钠肽(Bnp),β-肌球蛋白重链(β-Mhc)]表达变化,并通过心肌细胞骨架蛋白(α-actinin)的免疫荧光染色观察Anp32a对心肌细胞大小的影响。机制研究方面,通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测Anp32a在调节心肌肥厚过程中涉及的信号通路的变化。结果 Anp32a在心肌肥厚模型中表达下调。AngⅡ刺激细胞,免疫荧光染色检测AdAnp32a组细胞明显较其对照组(AdGFP)减小,而AdshAnp32a组心肌细胞与其对照组(AdshRNA)相比显着增大。qPCR检测显示AdAnp32a组心肌肥厚基因(Anp、Bnp、β-Mhc)的mRNA表达降低,而AdshAnp32a组表达则相反。Western blot检测发现Anp32a能够抑制AngII诱导的Akt蛋白磷酸化水平的升高。结论 Anp32a通过AKT信号通路抑制心肌细胞肥大,可作为防治心肌肥厚及心力衰竭的潜在治疗靶点。(本文来源于《中国心脏起搏与心电生理杂志》期刊2018年03期）
翁洁玲,彭俊玲,符珈,汤涛,张梅芳[3]（2017）在《鼻咽癌组织中核磷蛋白表达水平与患者疗效的关系》一文中研究指出目的:探讨核磷蛋白(nucleophosmin,NPM、B23、NO38或NPM1)在鼻咽癌活检组织中的表达水平与增殖指数和患者个体化治疗后疗效的关系。方法:随机选取中山大学肿瘤防治中心2001年1月1日至2003年12月31日期间收治的157例初诊鼻咽癌患者的治疗前活检蜡块,用免疫组织化学法检测鼻咽癌活检组织中NPM1和Ki67的表达,并结合相应临床病理资料,应用统计学方法对结果进行分析。结果:NPM1的表达水平与Ki67的表达水平呈正相关(r=0.445,P<0.01),与淋巴结分期呈负相关(N0,N1,N2和N3;r=-0.235,P<0.01),但与原发灶分期(T1,T2,T3和T4;r=0.006,P>0.05)和临床分期(r=-0.74,P>0.05)无相关性。NPM1表达水平与有淋巴结转移组治疗后淋巴结情况呈负相关(r=-0.196,P<0.05),与无淋巴结转移组治疗后原发灶情况呈负相关(r=-0.349,P<0.05)。NPM1表达水平与预后无明显相关性。结论:NPM1在鼻咽癌组织中高表达并与Ki67的表达水平呈正相关,NPM1有促进细胞增殖的作用且可能作为一个评估个体化治疗疗效的评价指标。(本文来源于《中国肿瘤生物治疗杂志》期刊2017年12期）
石松林,陈兰英,刘用金,杨海波,路锟[4]（2014）在《姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡过程中核磷蛋白的表达与定位变化》一文中研究指出目的探讨核磷蛋白NPM在癌细胞诱导凋亡过程中在细胞内、细胞核基质上的定位与表达变化,以及NPM与凋亡调控相关蛋白的关系,探索其在凋亡调控中的作用。方法在姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡的基础上,以亚细胞蛋白质组学方法分析NPM在核基质中的存在与变化,并以免疫印迹法杂交实验进行确证;激光扫描共焦显微镜观察NPM在EC9706细胞凋亡过程中的定位与变化,以及NPM与Bax、Bcl-2等基因产物的共定位关系。结果 NPM存在于EC9706细胞核基质蛋白组分中,并在姜黄素处理后表达下调。NPM在EC9706细胞凋亡过程中发生显着的胞质-核之间的穿梭定位变化,并与Bax、Bcl-2等蛋白具有共定位关系,且共定位区域发生了变化。结论 NPM是一种核基质结合蛋白,在EC9706细胞凋亡中的表达与定位变化,及其与凋亡调控蛋白的共定位关系提示,它在EC9706细胞凋亡调控中具有重要作用。(本文来源于《解剖学报》期刊2014年02期）
王亚楠,金蕊,张宪,马世良,黄君健[5]（2014）在《核磷蛋白NPM1的RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建高效抑制核磷蛋白NPM1基因的短发夹RNA(shRNA)干扰载体。方法:以人NPM1基因为靶序列,设计并合成shRNA序列,将其连入RNA干扰慢病毒载体pll3.7;酶切鉴定插入shRNA序列片段的质粒,经测序正确后转染293T细胞;Western印迹检测得到抑制效果好的载体pll-shRNA,将其与慢病毒载体共转染293T细胞,进行病毒的包装,将得到的病毒感染HT1080细胞,通过RT-PCR、Western印迹等方法验证其抑制效果。结果:酶切证实构建的载体pll-shRNA中已插入外源基因片段,转染293T细胞后都有抑制效果,其中pll-shRNA2的抑制效果最好;用pll-shRNA2病毒感染HT1080细胞,RT-PCR和Western印迹检测分别在RNA和蛋白质水平证实NPM1的表达显着降低。结论:构建的RNA干扰载体pll-shRNA2能有效抑制NPM1的表达,为NPM1功能的研究提供了有力工具。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2014年01期）
余秀琴,骆丹,林秉奖,钱齐宏,王勤[6]（2013）在《黄芩苷和核磷蛋白基因沉默对人皮肤鳞癌细胞增殖的影响》一文中研究指出目的观察黄芩苷及小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默核磷蛋白(nucleophosmin,NPM)基因对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性及细胞周期的影响。方法针对NPM信使RNA(messenger RNA,mRNA)序列设计合成特异性siRNA,转染A431细胞,并加入50 mg/L黄芩苷孵育;采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(cell countingkit-8,CCK-8)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果黄芩苷孵育可使细胞增殖活性降低(P<0.05),发生S期阻滞;NPM基因沉默可明显增强黄芩苷的作用。结论黄芩苷可抑制皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖生长,其机制可能与调控NPM基因表达有关。(本文来源于《中国中西医结合皮肤性病学杂志》期刊2013年02期）
张洁,赵浩亮,贺杰峰,李辉宇[7]（2012）在《核磷蛋白小分子抑制剂NSC348884对肝癌细胞HepG2的体外抑制作用》一文中研究指出目的探讨核磷蛋白小分子抑制剂NSC348884对肝癌细胞HepG2体外生长的抑制作用及其作用机制。方法应用核磷蛋白小分子抑制剂NSC348884处理HepG2细胞,噻唑蓝法检测HepG2细胞增殖的变化,蛋白印迹检测核磷蛋白寡聚物和单体表达变化,流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率的变化。结果 HepG2细胞经NSC348884作用4 d后,药物浓度在1～10μmol/L时明显抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05),半数抑制浓度为1.4μmol/L;药物作用24 h后,核磷蛋白寡聚物表达水平明显降低,而单体表达水平明显升高(P<0.05);经1μmol/L、2μmol/L NSC348884处理后,HepG2细胞24 h凋亡率分别为(13.770±0.335)%、(19.021±0.237)%,高于对照组的(6.950±0.207)%(P<0.05)。结论 NSC348884能促进HepG2细胞核磷蛋白寡聚物向单体的转化,从而抑制肝癌HepG2细胞的体外生长。(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊2012年01期）
张群,孙自勤,魏志,刘长江,黄华[8]（2011）在《核磷蛋白在大肠癌发生发展中的表达及意义》一文中研究指出目的:探讨核磷蛋白在大肠良、恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测核磷蛋白在大肠腺瘤、大肠腺癌和癌旁正常组织中的表达情况。结果:核磷蛋白在大肠腺瘤、腺癌中阳性率分别为70.83%,76.92%;与癌旁正常组织阳性率38.46%比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。大肠腺癌核磷蛋白阳性率与腺瘤伴轻、中度不典型增生核磷蛋白阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),而与腺瘤伴重度不典型增生核磷蛋白阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。大肠癌组核磷蛋白表达强度与肿瘤Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05)。结论:核磷蛋白在大肠腺瘤和大肠癌中均表达,其参与大肠癌发生的早期阶段,并在大肠癌发展中发挥一定作用;检测核磷蛋白的表达情况可能对大肠癌早期诊断、指导治疗、改善预后有一定价值。(本文来源于《中华实用诊断与治疗杂志》期刊2011年08期）
张珍[9]（2011）在《EGCG对HaCaT细胞光损伤干预作用的蛋白组学研究及核磷蛋白功能分析》一文中研究指出研究背景中波紫外线(UVB)是导致皮肤日晒伤、光老化及皮肤癌的重要因素。表皮中的角质形成细胞是UVB照射的重要靶细胞。长期反复的UVB辐射可引起皮肤细胞,主要是表皮细胞的损伤,导致一系列皮肤不良反应如红斑、水肿、水疱、皮肤色素沉着、异常增生、光老化、癌前病变如光化性角化病等,最终将导致皮肤癌的发生。UVB引起的急性光损伤包括细胞增殖活性降低、凋亡增加,光产物嘧啶二聚体形成等。NPM1基因与DNA修复、细胞增殖、凋亡和肿瘤形成等调控密切相关,在UV辐射引起的细胞反应中起着重要的调控作用。生命科学已进入了后基因组时代,蛋白质组学是研究细胞、组织或机体在特定的时间和空间上基因组活跃表达的全部蛋白质的科学。它是在蛋白质水平定量、动态、整体的研究生物体,并由此在更深层次上获得对生理、疾病过程以及调控网络的广泛而完整的认识。RNA干扰技术属于反向遗传学研究手段,已成为研究基因功能的良好工具。相对于基因敲除技术来讲,RNA干扰整个流程设计更简便,且作用迅速,效果明显,为基因治疗开辟了一条新途径。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶主要活性成分,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等广泛的药理作用。我们已证实EGCG能减少紫外线引起的皮肤细胞(包括人角质形成细胞、人成纤维细胞等)的光损伤,减少炎症因子分泌和光产物的生成。NPM基因与DNA修复、细胞增殖、凋亡和肿瘤形成等调控密切相关。但关于EGCG对UVB照射前后表皮细胞的蛋白组变化以及NPM在光损伤中的作用目前还研究甚少。目的应用蛋白质组学双向凝胶电泳和质谱技术研究在EGCG和UVB照射干预对人表皮角质形成细胞HaCaT株差异表达蛋白的影响,以进一步阐明和探索EGCG具有的生物学活性和防光效应机制。进而通过特异性siRNA沉默NPM1基因表达,随后对细胞凋亡和增殖活性变化等进行观察分析,以明确NPM1基因在人皮肤光损伤发生进程中的功能和作用机制。方法1.细胞培养:以含10%小牛血清的RMPI-1640培养基培养HaCaT细胞(永生化人角质形成细胞株),定量接种于96孔板、6孔板或10cm培养皿中。2.药物配制:以DMSO溶解EGCG,贮存液浓度50mg/ml,分装贮存于-20℃冰箱,EGCG的实验终浓度为50μg/ml。3.紫外线照射:根据实验设计定时定量以UVB照射培养细胞并加入EGCG进行干预处理。4.固相pH梯度双向凝胶电泳技术进行分离蛋白,经ImagingMaster 2D软件分析以发现差异表达蛋白。5.对部分差异表达蛋白进行基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALD I2TOF)质谱分析,测定其肽质量指纹图谱。6.用Mascot查询软件搜寻Swiss-prot数据库鉴定蛋白质。7. Western blot方法检测30mJ/cm2UVB照射后NPM1蛋白的表达水平。8.构建NPM1的siRNA靶序列,转染细胞,实时定量PCR法检测NPM沉默效率。9. MTT法检测EGCG及siRNA干扰对UVB诱导HaCaT细胞增殖活性的变化。10.流式细胞仪检测EGCG及siRNA干扰对UVB诱导HaCaT细胞凋亡的变化。11.统计分析:实验数据用SPSS分析。当P< 0.05时差异有统计学意义。结果1.EGCG组与对照组比较发现42个差异表达蛋白点,从中随机抽取部分(16个)蛋白点进行肽质量指纹谱鉴定。其中9个点经EGCG孵育后在HaCaT细胞中高表达,4个点在EGCG孵育后的HaCaT细胞中低表达。2.在UVB辐射前后加入EGCG进行干预可明显抑制UVB辐射引起的HaCaT细胞蛋白质组变化,23个UVB下调蛋白点受EGCG作用表达上调,而30个UVB上调蛋白点受EGCG作用表达下调。3.设计合成NPM特异性siRNA片段转染至HaCaT细胞中并通过Real-time PCR法检测NPM mRNA表达水平,以NPM-915-siRNA转染48h沉默效率最高,选取该siRNA片段和转染时间点进行下一步实验。4.与对照组比较,UVB照射可明显抑制HaCaT细胞增殖活性,诱导细胞凋亡; siRNA干扰特异性沉默NPM蛋白后细胞增殖活性下调,细胞凋亡率升高;加入EGCG预处理可以改善细胞增殖活性,细胞凋亡率明显下降。结论UVB辐射可引起HaCaT细胞大量蛋白差异表达,EGCG可明显抑制UVB引起的蛋白质组差异表达变化。UVB可诱导HaCaT细胞损伤,表现为细胞生长活性被抑制。而在UVB照射后加入EGCG可有效保护HaCaT细胞免于UVB损伤进程,其具体机制可能与调控NPM基因表达有关。这些结果将为我们从全面理解UVB致表皮细胞损伤过程以及进一步研究EGCG在蛋白质分子水平的抗紫外线损伤作用机制提供了新的证据。(本文来源于《南京医科大学》期刊2011-03-01）
肖蓉[10]（2010）在《核磷蛋白与急性髓细胞白血病》一文中研究指出核磷蛋白(Nueleophosmin,NPM)是一种多功能的核仁磷酸化蛋白,有癌基因和抑癌基因双重特性。NPM1基因突变产生胞质突变蛋白NPMc+,是急性髓细胞白血病(AML)最常见基因异常。NPM1基因突变的AML有独特的特点,包括明显染色体核型正常,不同的血细胞谱系受累,特殊的基因表达,诱导化疗有较好的反应,预后良好。NPMc+突变维持野生型NPM与各种细胞蛋白联系的能力,胞质定位损害其能力。本文总结近年来有关NPM功能发现,讨论NPM1突变AML的发病机理。(本文来源于《实用医院临床杂志》期刊2010年04期）
核磷蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A(Anp32a)对心肌细胞肥大的作用及机制。方法通过挖掘数据库小鼠心脏假手术组及主动脉缩窄手术组芯片数据,进行差异基因分析。选取8~10周龄小鼠,随机分为模型组和假手术组(n=7或8),终末取材提取心脏组织RNA检测Anp32amRNA表达水平。构建Anp32a敲低(AdshAnp32a),Anp32a过表达(AdAnp32a)及其相应的对照组AdshRNA,AdGFP腺病毒并转染H9C2心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激H9C2心肌细胞诱导心肌细胞肥大,提取细胞RNA通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测心肌肥厚指标[心房利钠肽(AnP),脑利钠肽(Bnp),β-肌球蛋白重链(β-Mhc)]表达变化,并通过心肌细胞骨架蛋白(α-actinin)的免疫荧光染色观察Anp32a对心肌细胞大小的影响。机制研究方面,通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测Anp32a在调节心肌肥厚过程中涉及的信号通路的变化。结果 Anp32a在心肌肥厚模型中表达下调。AngⅡ刺激细胞,免疫荧光染色检测AdAnp32a组细胞明显较其对照组(AdGFP)减小,而AdshAnp32a组心肌细胞与其对照组(AdshRNA)相比显着增大。qPCR检测显示AdAnp32a组心肌肥厚基因(Anp、Bnp、β-Mhc)的mRNA表达降低,而AdshAnp32a组表达则相反。Western blot检测发现Anp32a能够抑制AngII诱导的Akt蛋白磷酸化水平的升高。结论 Anp32a通过AKT信号通路抑制心肌细胞肥大,可作为防治心肌肥厚及心力衰竭的潜在治疗靶点。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核磷蛋白论文参考文献
[1].罗陈烁,赵嫚,雷婷,张曼.核磷蛋白1稳定敲除的耐顺铂膀胱癌细胞系的建立与纯化[J].标记免疫分析与临床.2019
[2].沈立君,黄永平,祝学勇,刘叶,李红良.酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32家族成员A对心肌细胞肥大的影响及机制研究[J].中国心脏起搏与心电生理杂志.2018
[3].翁洁玲,彭俊玲,符珈,汤涛,张梅芳.鼻咽癌组织中核磷蛋白表达水平与患者疗效的关系[J].中国肿瘤生物治疗杂志.2017
[4].石松林,陈兰英,刘用金,杨海波,路锟.姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡过程中核磷蛋白的表达与定位变化[J].解剖学报.2014
[5].王亚楠,金蕊,张宪,马世良,黄君健.核磷蛋白NPM1的RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定[J].生物技术通讯.2014
[6].余秀琴,骆丹,林秉奖,钱齐宏,王勤.黄芩苷和核磷蛋白基因沉默对人皮肤鳞癌细胞增殖的影响[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志.2013
[7].张洁,赵浩亮,贺杰峰,李辉宇.核磷蛋白小分子抑制剂NSC348884对肝癌细胞HepG2的体外抑制作用[J].中国医学科学院学报.2012
[8].张群,孙自勤,魏志,刘长江,黄华.核磷蛋白在大肠癌发生发展中的表达及意义[J].中华实用诊断与治疗杂志.2011
[9].张珍.EGCG对HaCaT细胞光损伤干预作用的蛋白组学研究及核磷蛋白功能分析[D].南京医科大学.2011
[10].肖蓉.核磷蛋白与急性髓细胞白血病[J].实用医院临床杂志.2010