余志荣云南省楚雄州大姚县疾病预防控制中心云南大姚675400
【摘要】能力验证是利用实验室间比对来确定实验室检测/校准能力的活动，它是为确保实验室能维持较高的检测/校准水平而对其能力进行考核、监督和确认的验证活动，是评价实验室出具的数据、报告的准确性、可靠性、客观性的重要依据，通过参加实验室能力验证活动，可发现、识别实验室自身存在的问题，为实验室制定相应的补救措施和从事内审、管理评审活动提供依据。2012年至2014年，我单位连续参加了由国家、省、州级相关部门组织的能力验证活动，主要有加碘食盐碘离子含量检测，水质硝酸盐氮、氨氮、氯化物、氟化物、砷、硫酸盐、铬（六价）测定，微生物检验方面的盲样菌株鉴定，生化检验方面的麻疹、风疹、乙脑病毒IgM抗体测定、梅毒血清学检测等，范围基本涵盖了卫生检验的各个方面，取得了较为满意的结果，大大提高了我单位实验室检测能力和业务人员的技术水平。
【关键词】实验室能力验证工作思路体会
【中图分类号】R817-33【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-03-255-02
定期对实验室开展能力验证的室间比对工作是实验室资质认定的特定要求，可以为实验室提供一个评估和证明实验室所出具数据可靠性的客观手段，是实验室相应技术能力的有效证明。2012～2014年，我单位参加了由国家、省、州相关部门组织的能力验证活动，考核项目有碘盐中碘离子含量测定，水质氨氮、氯化物、氟化物、硝酸盐氮、砷、硫酸盐、铬（六价）测定，麻疹、风疹、乙脑病毒IgM抗体测定、梅毒血清学检验等内容，考核结果如下：
在2014年我单位计量认证复评审中，能力验证项目砷、硫酸盐、六价格盲样检测，砷、六价格测定成绩优良，硫酸盐测定结果为合格。参与检测的工作人员以高度负责和严肃认真的态度按时限要求完成了盲样检测工作，结果反馈较为满意，体现了业务人员较强的素质和工作能力。
能力验证的作用和目的主要是为确保实验室维持较高的校准和检测水平而进行的的一项对其能力进行考核、监督和确认的一种实验活动，通过参与此项活动，可以看出一个实验室技术工作开展情况，实验室管理以及人员技术水平和素质、设备校准状况等，是对实验室工作的综合检阅.我单位连续三年参与的实验室能力验证工作，取得结果较为满意，说明业务人员技术水平、专业素质较强，实验室各项检测工作开展较为满意。通过参与多年能力验证活动，我们有如下思路及体会：
1理化检验能力验证：
1.1自接到能力验证样品及文件后，应仔细阅读文件，清楚盲样的作业要求，详细登记样品名称、编号、数量、规格、保存条件、来样单位等，并认真填写样品接收、流转交接单，相关检测人员应做好检测前的各项准备工作，清楚检测过程中的要点、难点；
1.2对涉及的检测仪器应查清是否经过检定、校准、期间核查，保证设备处于完好可用状态，标准物质、质控品是否在效期内，化学试剂是否过期，级别是否达到实验要求，对需使用的各种器材（容量瓶、吸管、滴定管、锥形瓶、烧杯、滴管、试管、比色管等）应按要求进行清洁备用，对需使用的化学试剂最好临用现配，并保证配制质量，检测过程中应控制好实验室温湿度及实验室环境；
1.5对如何做好盲样检测，相关检测人员针对检测项目应有一个完整计划，按时限要求，何时准备，何时检测，何时完成记录报告等，事先都要计划考虑，并在检测中根据出现的情况不断修正思路；
1.6检测工程中要做好质量控制，如环境标准样品、标样测定、加标回收率等，先将质控品检测准确，再进行盲样检测，并反复多次测试，直至满意，测试完毕，查验测试记录单，无误后，认真填写原始记录，按要求报告检测结果。
2对于微生物盲样检测样品
2.1收到盲样后，需首先仔细阅读能力验证组织者提供的文件、检测作业要求，明确工作任务和要求。相关检测人员应认真查对样本形状、包装、数量，并按要求保存好样本，防止待检菌死亡，详细做好样本接收登记，做好菌株鉴定前的准备工作，如清查检验器材，各类所需培养基，生化鉴定管、诊断血清等。
2.3要有一个清晰的检验鉴定思路，对鉴定工作如何开展、何时开展要有计划，然后实施；
2.4将待检菌株首先直接涂片染色镜检，根据形态染色结果，大致确定待检菌可能存在的范围（如是球菌、杆菌、弧菌、染色情况等），根据大致确定范围，配制适宜的各类增菌液、分离培养基，显色培养基、琼脂斜面等，为缩短检测时间，可进行待检菌的直接分离（如直接进行平板分离、显色培养基、三糖铁琼脂斜面等）和增菌后分离，并行涂片染色菌检，详细记录培养结果，对培养结果进行仔细分析排查，至此，待检菌株大致属于哪一科属细菌可以初步确定，涂片染色形态学观察，普通琼脂和分离培养基、选择性平板上的菌落特征、显色培养基（平板）上的特征，以及三糖铁上的生化特征是细菌鉴定最为关键的步骤，是待检菌属于哪一科属的分水岭，应掌握每种待检菌特征，鉴定的关键点，接下来是进行待检菌的纯分、相应各种生化试验以及血清学甚至动物试验等，可将待检菌确定至“种”，最终报告菌种名称。需要注意的是，生化反应的生化管种类及血清学试验的因子血清应尽可能的全，否则可能出现只能将待检菌鉴定到属、种不能确定的情况，试验过程中应详细做好鉴定记录并分析，及时调整检验思路，尽可能在较短的时间内得出鉴定结果；
2.5必须注意无菌操作，无菌操作在整个盲样菌株鉴定过程中非常重要，因为如果混入杂菌，将会给菌株鉴定带来困难，延长鉴定时间，干扰鉴定思路，还可能带来不正确的鉴定结果；
2.6宜选用多种选择性增菌液和分离培养基对菌株作直接分离和增菌分离，应保证能得到单个菌落。重视染色结果在盲样菌株鉴定中的作用，生化试验、血清学试验以营养琼脂平板上的纯分菌落为佳，因为营养琼脂上生长的菌落能最大限度还原细菌的原始特征。
2.6在鉴定过程中应做好质量控制，所用器材应洁净，各种培养基、生化试剂、诊断血清应在效期内，且按要求保存，质量经检验合格。菌株鉴定完成后，书写原始记录应条理清晰，完整记录菌株鉴定过程，并按试验顺序填写。
微生物实验室参与能力验证活动，它要求检验人员拥有广泛的微生物检验理论知识和扎实的实践操作技能，并在微生物鉴定过程中根据情况不断修正检验思路，最终鉴定出正确的结果。
3生化检验能力验证
收到样本后，除做好样本接收外，检测试剂盒宜选用有批准文号，经过验证，敏感性和特异性均较高的试剂盒，必须在效期内使用，加样枪必须校准，加样量须准确，样本量较多时，先加样本，后加标准品，严格控制好实验温、湿度、实验反应时间，洗板干净，比色、结果计算正确，有疑问复测。
以上是我们参与实验室能力验证活动的体会和对于如何做好盲样检测的思路、经验。通过多年参与实验室能力验证活动，大大提高了我单位的检测能力和工作人员的业务技术水平。
参考文献：
[1]国家认证认可监督管理委员会编.实验室资质认定工作指南（第二版）[M].中国计量出版社
作者简介：余志荣（1965年12月-）汉族，云南大姚，中专，主管检验师，主要从事卫生检验31年。