导读:本文包含了钙调蛋白磷酸酶亚基论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:钙调蛋白磷酸酶B亚基,生物活性,方法建立,方法验证
钙调蛋白磷酸酶亚基论文文献综述
史新昌,杨欢,徐莉,李翔,黄宗文[1]（2016）在《钙调蛋白磷酸酶B亚基生物学活性检测方法建立》一文中研究指出建立钙调蛋白磷酸酶B亚基(calcineurin subunit B,CNB)生物活性检定方法用以质量控制.CNB能促进钙调蛋白磷酸酶A亚基(CNA)的突变体CNAΔ316的活性,增强其分解底物对硝基苯磷酸二钠(p-nitrophenylphosphate,p NPP)的能力.采用四参数方程对不同浓度CNB和相应的p NPP最大分解速率进行拟合,用平行线分析法对供试品和参考品进行量值传递,得到供试品的活性值.然后对该方法的准确度、精密度、线性、线性范围、灵敏度、特异性和耐久性进行验证.回收率结果均在98%以上,板内精密度为6.7%,板间精密度为10.8%,决定系数大于0.98,线性范围为0.05~50μg/m L,灵敏度为50μg/m L.部分细胞因子无法促进CNAΔ316分解底物p NPP的能力.在一定范围内,CNAΔ316浓度对检测结果没有影响.(本文来源于《中国科学:生命科学》期刊2016年06期）
周楠,雷秉坤,周幸,余垚,吕红[2]（2013）在《裂殖酵母SAGA复合物亚基Spt20参与钙调蛋白磷酸酶调节的Cl~-胞内平衡》一文中研究指出SAGA(Spt-Ada-Gcn5acetyltransferase)复合物是真核生物中高度保守的蛋白复合体,参与转录激活、mRNA转运等诸多生物学过程。为了探究SAGA复合物亚基的潜在生物学功能,文章以裂殖酵母(Schizosac-charomyces pombe)SAGA复合物核心结构亚基Spt20为诱饵蛋白进行酵母双杂交筛选,获得了Ppb1蛋白。Ppb1是真核生物重要信号分子-钙调蛋白磷酸酶的催化亚基。酵母双杂交验证及免疫共沉淀实验均表明Spt20与Ppb1可以在体内发生蛋白相互作用。裂殖酵母ppb1+缺失突变体对高浓度Cl敏感,而spt20+缺失突变体则能抵抗高浓度的外源Cl,维持细胞的正常生长。荧光共定位分析表明,当外源Cl浓度升高时,Ppb1蛋白能够从细胞质迁移入核,与Spt20蛋白在细胞核内发生共定位。遗传分析显示,spt20+缺失可以抑制ppb1+缺失突变体对Cl高度敏感的表型,spt20+与ppb1+处于Cl平衡调节的同一通路,且spt20+位于ppb1+的下游。上述结果表明,spt20+缺失突变体耐受外源高浓度Cl,Spt20参与了钙调蛋白磷酸酶调节的Cl胞内平衡。在高等生物中胞内Cl浓度异常升高与心肌缺血/再灌注损伤等疾病的发生密切相关。鉴于Spt20在真核生物中高度保守,Spt20可能成为潜在的药物靶点应用于Cl失衡相关疾病的防治中。(本文来源于《遗传》期刊2013年09期）
周文昌[3]（2008）在《钙调蛋白磷酸酶活性中心及催化亚基结构的分子模拟研究》一文中研究指出钙调蛋白磷酸酶CN和I型蛋白磷酸酶PP1同属于丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶家族,在蛋白的去磷酸化过程中发挥重要的作用。用分子力学方法和经典的分子动力学模拟研究钙调蛋白磷酸酶和PP1,可以从原子水平揭示它们的结构与功能之间的关系。由于目前现有的分子力场缺少和过渡金属相关的参数,我们决定对CN和PP1的活性中心进行分子力场的参数拟合。在本研究中,我们用量子化学计算的方法对CN和PP1的活性中心进行了结构优化和振动频率计算。从振动频率计算的结果文件中我们得到了和金属原子相关的Hessian矩阵,根据Hessian矩阵对角线上的值我们通过原子单位的转换得到了和金属原子相关的键长键角以及二面角的力常数,键长键角的平衡值从优化后的结构得到。我们将得到的键长键角的分子力场参数和文献值作了比较,比较之后发现得到的参数和文献值是比较吻合的。这样我们便初步得到了一套能够用于分子动力学模拟的分子力场参数。CNB是钙调蛋白磷酸酶的调节亚基,也是EF-hand钙离子结合蛋白家族的一员。在本研究中,我们用分子动力学模拟的方法对钙离子介导的CNB的构象变化作了研究。对结合有四个钙离子(Holo-CNB)和没有结合钙离子(Apo-CNB)的体系进行了20 ns的长时间动力学模拟,Holo-CNB的初始结构取自和钙调蛋白磷酸酶A亚基相结合的晶体结构。分析动力学模拟得到的轨迹我们发现,Holo-CNB和Apo-CNB的结构在动力学模拟过程中没有发生剧烈的变化。这两个体系之间小幅度的不同体现在由四个EF-hand形成的螺旋间角和疏水槽溶剂可及面积的不同上。在模拟过程中,Holo-CNB和Apo-CNB的疏水槽都还比较完整,这暗示我们无论钙离子是否和CNB结合,CNB都能和A亚基结合,但结合能力上可能会有所不同。结合实验室之前的工作,我们可以把疏水槽疏水残基的暴露程度和CNB与CNA的结合能力联系起来,进而揭示CNB调控CN活性的结构原因。CNB是钙调蛋白磷酸酶的调节亚基,也是EF-hand蛋白结合家族的一员。CNB的疏水结构域是它发挥调控功能的重要的结构基础,该疏水结构域由CNB的4个EF-hand组成。晶体结构显示,免疫抑制剂FK506与CN相互作用的主要位点位于CNB的和CNA的BBH界面的疏水缝隙。CNB疏水性结构域的残基突变实验显示,突变使得CN酶活性显着下调,为野生型CNB调节的CN酶活的10%以下;ANS荧光也有较大改变,M118位点的系列突变体表现明显的减弱;对H22腹水瘤小鼠的预防治疗作用也降低。在本研究中,对野生型B亚基(CNB),Met118突变成Glu的突变体(M118E-CNB)和Met118突变成Lys的突变体(M118K-CNB)进行了10 ns的分子动力学模拟。分析动力学模拟得到的轨迹我们发现,突变破坏了B亚基C端的疏水结构域,使其变得不再完整,疏水残基的暴露减少。由于突变体的C端疏水槽疏水残基的暴露减少,调控免疫细胞中CD14的转录水平降低,阻碍CNB参与机体的先天免疫系统的活化。从对H22腹水瘤小鼠的存活率数据来看,疏水性结构域位点的突变体降低了对H22腹水瘤小鼠的预防治疗作用,这可能是先天免疫系统的活化受阻引起CNB的抗癌功能下降造成的。(本文来源于《北京师范大学》期刊2008-06-01）
姚立[4]（2008）在《钙调蛋白磷酸酶A亚基C末端片段与钙调素溶液中相互作用的结构性质研究》一文中研究指出钙调蛋白磷酸酶是唯一一个受钙调素调节的蛋白磷酸酶,有着重要的生理功能作用,然而它的CaM结合区及自抑制区的结构信息却长期处于未知状态。不完善的CN晶体结构阻碍了人们对CNA与CNB、CaM之间,以及CN与底物、调节因子、免疫抑制剂等相互作用机理的深入了解,增加了研究CN在细胞信号传导等过程中所起作用的难度,从而将影响针对包括阿尔茨海默病(AD)、自身免疫性疾病等与CN相关疾病的药物设计与改造。本研究承接实验室以前的结构生物学研究成果,试图通过构建、表达和纯化具有典型意义的CaM作用靶肽Ci,在天然状态下观测其与CaM的复合情况,用圆二色性、核磁共振等生物物理方法测定溶液结构性质,以揭开这一谜团。研究结果揭示天然状态下CaM与Ci在Ca2+存在时很容易结合,且以1∶1的比例复合完全。Ci在自由状态下构象杂乱无章,无规卷曲成分很高,单独测定其叁维结构是不现实的;而结合了CaM后Ci结构发生了规则变化,从结合前到结合后可能处于一种卷曲—螺旋的构象跃迁状态之中。结合了Ci的CaM构象较之于其自由状态发生很大改变,经化学位移指认、微扰实验和解离平衡常数计算后可以初步确定两者的结合位点以及作用模式,支持了CaM与CNA C末端片段以对称的同二聚体形式(命名为(CaM·Ci)2)复合的猜想,推断出“NewCBD”可能存在于430-450区间,对现有的C末端功能区划分作出了一些改进。溶液中反映的天然作用信息必然会有助于为困扰多年的CN结构生物学研究提供新的视角,也必然有助于丰富CaM与其靶蛋白相互作用的结构理论。(本文来源于《北京师范大学》期刊2008-05-01）
于大禹,佟丽,宋高洁,张来群,白薇[5]（2008）在《钙调蛋白磷酸酶双亚基、钙调素与tau蛋白新颖的相互作用》一文中研究指出钙调蛋白磷酸酶(Calcineurin,CN,也称 PP2B)是由催化亚基 A(CNA)和调节亚基 B(CNB)组成的异二聚体,其活性依赖于 Ca~(2+)和钙调素(CaM)。CN 是脑内作用于 tau 蛋白的一种重要的蛋白磷酸酶,而tau蛋白的异常磷酸化已经被证明是早(本文来源于《第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会论文摘要集》期刊2008-05-01）
钙调蛋白磷酸酶亚基论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
SAGA(Spt-Ada-Gcn5acetyltransferase)复合物是真核生物中高度保守的蛋白复合体,参与转录激活、mRNA转运等诸多生物学过程。为了探究SAGA复合物亚基的潜在生物学功能,文章以裂殖酵母(Schizosac-charomyces pombe)SAGA复合物核心结构亚基Spt20为诱饵蛋白进行酵母双杂交筛选,获得了Ppb1蛋白。Ppb1是真核生物重要信号分子-钙调蛋白磷酸酶的催化亚基。酵母双杂交验证及免疫共沉淀实验均表明Spt20与Ppb1可以在体内发生蛋白相互作用。裂殖酵母ppb1+缺失突变体对高浓度Cl敏感,而spt20+缺失突变体则能抵抗高浓度的外源Cl,维持细胞的正常生长。荧光共定位分析表明,当外源Cl浓度升高时,Ppb1蛋白能够从细胞质迁移入核,与Spt20蛋白在细胞核内发生共定位。遗传分析显示,spt20+缺失可以抑制ppb1+缺失突变体对Cl高度敏感的表型,spt20+与ppb1+处于Cl平衡调节的同一通路,且spt20+位于ppb1+的下游。上述结果表明,spt20+缺失突变体耐受外源高浓度Cl,Spt20参与了钙调蛋白磷酸酶调节的Cl胞内平衡。在高等生物中胞内Cl浓度异常升高与心肌缺血/再灌注损伤等疾病的发生密切相关。鉴于Spt20在真核生物中高度保守,Spt20可能成为潜在的药物靶点应用于Cl失衡相关疾病的防治中。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钙调蛋白磷酸酶亚基论文参考文献
[1].史新昌,杨欢,徐莉,李翔,黄宗文.钙调蛋白磷酸酶B亚基生物学活性检测方法建立[J].中国科学:生命科学.2016
[2].周楠,雷秉坤,周幸,余垚,吕红.裂殖酵母SAGA复合物亚基Spt20参与钙调蛋白磷酸酶调节的Cl~-胞内平衡[J].遗传.2013
[3].周文昌.钙调蛋白磷酸酶活性中心及催化亚基结构的分子模拟研究[D].北京师范大学.2008
[4].姚立.钙调蛋白磷酸酶A亚基C末端片段与钙调素溶液中相互作用的结构性质研究[D].北京师范大学.2008
[5].于大禹,佟丽,宋高洁,张来群,白薇.钙调蛋白磷酸酶双亚基、钙调素与tau蛋白新颖的相互作用[C].第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会论文摘要集.2008
标签：钙调蛋白磷酸酶B亚基; 生物活性; 方法建立; 方法验证;