多串联体论文-马现永,林映才,陈木华

多串联体论文-马现永,林映才,陈木华

导读:本文包含了多串联体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:酵母,阳性重组子,感受态细胞,串联体

多串联体论文文献综述

马现永,林映才,陈木华[1](2010)在《蟾蜍抗菌肽多串联体在酵母中的表达及鉴定》一文中研究指出目前所研究的抗菌肽中,蟾蜍抗菌肽buforinⅡ的活性较强,其杀伤力是抗菌肽magainin的2倍,是cecropin的20倍,这是蟾蜍生活在温暖潮湿的环境却不受病原菌侵袭的主要原因之一。buforinⅡ共有22个氨基酸组成,抗菌谱广,对革兰氏阴性菌、阳性菌、真菌等具有较强的杀伤力。目前已有在大肠杆菌中表达buforinⅡ的报道,利用大肠杆菌表达抗菌肽存在蛋白需进行破壁纯化、不能糖基化、进行产业化生产比较困难等一系列问题。本研究的目的是在酵母中表达抗菌肽buforinⅡ。本研究首先根据酵母偏爱的密码子对编码buforin(本文来源于《全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编》期刊2010-07-01)

苟钟勇,王劼,罗何峰,彭健[2](2006)在《猪胆囊收缩素-33基因多串联体的克隆表达》一文中研究指出胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)是一种典型的脑肠肽,可以通过中枢和外周途径共同调节采食,是一种重要的调节动物采食量的食欲饱感因子。通过注射CCK抗原直接免疫动物可以有效调节动物采食,常用的CCK抗原是通过化学合成的小分子半抗原CCK-8与大分子物质交联制成抗原。然而,化学合成的CCK-8价格昂贵,仅适用于实验室抗原制备。利用基因工程技术在大肠杆菌中表达CCK可以降低成本,容易实现产业化生产;同时构建CCK-33的多串体可以增加蛋白质的分子量,从而增强其抗原性。本试验根据NCBI上已发表的猪CCK-33基因的碱基序列,并参照大肠杆菌密码子使用数据库(Codon usage database,网址://www.kazusa.or.jp/codon),设计合成了大肠杆菌表达系统偏爱的猪CCK.33基因序列。将合成的CCK-33基因通过PCR扩增、酶切、连接、转化克隆至pRSET B质粒上,分别获得不带终止子和带终止子CCK-33基因单体pRSETB-1CCK的重组质粒。在此基础上利用限制性内切酶BamH I和 BglII是同尾酶的原理,经多次克隆最终成功构建了带终止子的pRSET B-3CCK、pRSET B-5CCK、pRSET B-7CCK、pRSET B-9CCK重组质粒。对构建好的CCK-33多串联体测序,测序结果与理论设计的完全吻合。将经过测序鉴定为阳性克隆的CCK-33七、九串联体转化到大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中,用IPTG 诱导表达,表达出的七、九串联体目的蛋白分别占菌体总蛋白的28%和35.6%。用CCK-8(购自Sigma 公司)和牛血清白蛋白交联后作为抗原免疫蛋鸡,将获得的IgY作为一抗,用辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgY作为二抗,Western-blot检测表达产物发现:7CCK、9CCK重组蛋白都能与相应的CCK抗体特异性结合。上述试验结果说明,7CCK、9CCK重具有较好的免疫原性。(本文来源于《动物营养与饲料研究——第五届全国饲料营养学术研讨会论文集》期刊2006-10-01)

多串联体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)是一种典型的脑肠肽,可以通过中枢和外周途径共同调节采食,是一种重要的调节动物采食量的食欲饱感因子。通过注射CCK抗原直接免疫动物可以有效调节动物采食,常用的CCK抗原是通过化学合成的小分子半抗原CCK-8与大分子物质交联制成抗原。然而,化学合成的CCK-8价格昂贵,仅适用于实验室抗原制备。利用基因工程技术在大肠杆菌中表达CCK可以降低成本,容易实现产业化生产;同时构建CCK-33的多串体可以增加蛋白质的分子量,从而增强其抗原性。本试验根据NCBI上已发表的猪CCK-33基因的碱基序列,并参照大肠杆菌密码子使用数据库(Codon usage database,网址://www.kazusa.or.jp/codon),设计合成了大肠杆菌表达系统偏爱的猪CCK.33基因序列。将合成的CCK-33基因通过PCR扩增、酶切、连接、转化克隆至pRSET B质粒上,分别获得不带终止子和带终止子CCK-33基因单体pRSETB-1CCK的重组质粒。在此基础上利用限制性内切酶BamH I和 BglII是同尾酶的原理,经多次克隆最终成功构建了带终止子的pRSET B-3CCK、pRSET B-5CCK、pRSET B-7CCK、pRSET B-9CCK重组质粒。对构建好的CCK-33多串联体测序,测序结果与理论设计的完全吻合。将经过测序鉴定为阳性克隆的CCK-33七、九串联体转化到大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中,用IPTG 诱导表达,表达出的七、九串联体目的蛋白分别占菌体总蛋白的28%和35.6%。用CCK-8(购自Sigma 公司)和牛血清白蛋白交联后作为抗原免疫蛋鸡,将获得的IgY作为一抗,用辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgY作为二抗,Western-blot检测表达产物发现:7CCK、9CCK重组蛋白都能与相应的CCK抗体特异性结合。上述试验结果说明,7CCK、9CCK重具有较好的免疫原性。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多串联体论文参考文献

[1].马现永,林映才,陈木华.蟾蜍抗菌肽多串联体在酵母中的表达及鉴定[C].全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编.2010

[2].苟钟勇,王劼,罗何峰,彭健.猪胆囊收缩素-33基因多串联体的克隆表达[C].动物营养与饲料研究——第五届全国饲料营养学术研讨会论文集.2006

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