导读:本文包含了体内外降解论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:细胞外基质,体内外降解,力学性能,动物实验
体内外降解论文文献综述
樊立涛,杨利霞,王云泽,谢美娜,杨国峰[1]（2019）在《脱细胞猪皮基质材料的体内外降解研究》一文中研究指出细胞外基质(ECM)作为一种特殊的天然生物衍生材料,为细胞提供了生物物理机械性支持,并且可为组织的再生提供良好的微环境.通过使用Ⅰ型胶原酶以及植入动物实验对脱细胞猪皮基质材料进行体内外降解研究,分析脱细胞猪皮基质材料的降解规律以及力学性能.结果显示:脱细胞猪皮基质材料在Ⅰ型胶原酶中20 h降解率为(78±2.7)%,拉伸强度为789±14 kPa;24 h降解率为(92±2.3)%,样品已碎裂成小块儿;28 h样品已基本降解完全.植入动物实验显示样品植入24周后可完全降解,表明猪皮细胞外基质具有良好的可降解性能,为其可控性降解研究提供相关依据.(本文来源于《河北师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）
杨佑飞[2]（2019）在《应力作用下骨植入镁合金体内外降解行为研究》一文中研究指出镁合金具有可降解性、良好的生物相容性和力学相容性、骨诱导作用等,近年来成为骨植入材料的研究热点。但是,镁合金降解速率过快,与骨愈合速率不匹配,在骨损伤未完全愈合时,镁合金由于降解导致力学性能迅速衰减而无法起到支撑作用,从而致使植入失败。因此,解决镁合金降解速率与骨愈合速率不匹配的问题将是镁合金大规模投入临床医用的关键。本文采用课题组自主开发的力学性能和耐蚀性能良好的Mg-Zn-Y-Nd-Zr挤压态合金,首先对其在体外SBF中和体内SD大鼠胫骨骨髓腔内的降解行为及由于降解而导致的力学性能的变化进行研究,以了解镁合金的力学性能演变规律;而后研究了其在SBF中的应力腐蚀断裂行为,以考察本文所用镁合金的应力腐蚀断裂敏感性;最后研究了该合金在流动的SBF中轴向循环压应力下的降解行为并验证了轴向循环压应力对骨愈合的促进作用。该研究为解决镁合金的降解速率与骨愈合速率不匹配的难题提供了新的解决思路。(1)镁合金在SBF中浸泡不同时间的降解产物的形状都是块状的,降解产物中均含有C、O、Ca、P、Mg、Zn、Nd元素,浸泡前14d内,镁合金表面的点蚀坑尺寸相对较小、分布均匀,抗拉强度和延伸率与未浸泡的参照样相比没有出现明显的下降,浸泡14d后抗拉强度和延伸率分别下降17.4%和17.6%,浸泡21d后镁合金表面的小点蚀坑发展成为尺寸更大、深度更深的腐蚀坑,由此导致其力学性能迅速衰减,浸泡28d后腐蚀坑进一步扩大,浸泡28d后抗拉强度和延伸率分别下降了 24.8%和60%。断裂类型由前14d的韧性断裂为主的混合型断裂转变为浸泡21d和28d后的准解理断裂为主的混合型断裂。(2)镁合金在SD大鼠骨髓腔内的降解与在SBF中相比更加均匀,植入28d后表面仍未见大的腐蚀坑,其降解速率比在体外SBF中的小3到5倍,最大弯曲载荷随植入时间的延长而逐渐均匀的减小,植入28d后下降39.8%。(3)本文所用Mg-Zn-Y-Nd-Zr挤压态合金在SBF中对应力降解断裂敏感性不高,作为骨植入材料在植入期间无需重点防护其应力腐蚀断裂。(4)轴向循环压应力没有改变镁合金在SBF中的降解产物形貌;在前14d应力对镁合金降解速率的影响较大,21d后影响减弱;实验28d后,叁个应力(1500με、3000με、4500με)下镁合金的抗拉强度分别下降了 25.5%、38.3%和29.4%,延伸率分别下降了58.6%、69.3%和65.6%。(5)将镁合金骨髓针植入到SD大鼠胫骨骨折部位,不受力组术后28d骨折线仍清晰可见,愈合缓慢,而受力组术后7d已有明显的骨痂生成,骨折线模糊,随着受力时间的累积,骨痂进一步生长,应力促进了骨折的愈合。本研究从提高骨愈合速率的角度出发,采用施加应力的手段来解决镁合金的降解速率与骨愈合速率不匹配的问题,为镁合金的临床应用提供了新的解决思路,并为在模拟生理应力下镁合金的降解提供了理论指导。(本文来源于《郑州大学》期刊2019-05-01）
李萍,周宁玲,邱华,Manfred,F,Maitz,王娟[3]（2018）在《生物可降解镁基支架细胞相容性的体内外评价:综述（英文）》一文中研究指出生物可降解镁基血管支架具有临时支撑血管的作用,用来治疗血管狭窄病变,维持正常血流.目前许多研究者已经报道了关于体内外评价镁基支架或其相关材料的生物安全性和应用可行性,其中,细胞相容性在这些评价系统中是一项非常重要的基本参数.本文总结了包括直接法和间接法在内的体外评价方法的应用和缺陷,以及表征细胞毒性的方法,如MTT和XTT等.我们也讨论了体外细胞毒性的一些影响因素,在直接培养法中包括样品表面粗糙度、样品表面预处理、所采用的细胞类型等;在间接法中有样品表面积和浸提溶液体积比值、培养基中的血清浓度、浸提液中的离子积累.此外,我们也列出了目前关于镁基支架的体内动物实验和临床试验及其相关的结果.本综述的目的是希望能为将来镁基支架的研发和所涉及到的评价方法提供有意义的参考.(本文来源于《Science China Materials》期刊2018年04期）
顾雪楠,王凡,谢鑫荟,郑明毅,李萍[4]（2018）在《挤压态Mg-5.25wt.%Zn-0.6wt.%Ca可降解镁合金的体内外研究（英文）》一文中研究指出可降解医用镁合金在骨科领域显示出良好的应用前景.为了保证镁合金的生物相容性,本文设计了全营养元素组成的Mg-Zn-Ca合金,研究了其体内外腐蚀及生物相容性.Mg-Zn-Ca合金在五种模拟体液中的腐蚀测试结果表明在Hank’s和MEM中添加血清能够降低合金腐蚀速度,并提高腐蚀均匀性.血清浓度越高,合金腐蚀速率越低.Mg-Zn-Ca合金在MEM+10%FBS溶液中腐蚀速率低,腐蚀形貌均匀.直接法和间接法的细胞实验结果均显示Mg-Zn-Ca合金具有良好的细胞相容性.动物实验结果表明,Mg-Zn-Ca合金在小鼠骨髓腔内逐步降解,4周后残余40 vol.%.micro-CT和组织学观察显示植入体周围有新骨形成,且随着植入时间延长,皮质骨厚度增加.因此,挤压态Mg-Zn-Ca合金具有良好的生物相容性,有望用作骨科植入材料,但是其体内降解速率还应进一步降低.(本文来源于《Science China Materials》期刊2018年04期）
吴唯伊,李博文,刘玉华,王新知[5]（2017）在《复层猪小肠黏膜下层可吸收膜体内外降解性能的研究》一文中研究指出目的:通过采用体内和体外降解实验的方法研究复层猪小肠黏膜下层(Multilayered Small intestinal submucosa,以下简称mSIS)可吸收膜的有关降解性能,为探讨mSIS是否符合引导性骨组织再生术降解性能要求提供实验依据。方法:本实验对8层结构的猪小肠黏膜下层分别采用体内皮下埋植和体外降解实验的方法。皮下埋植实验是采用3只新西兰兔,每只背部皮下对称植入4个mSIS样本,分别于术后4、8、12周取材,进行(本文来源于《第十一次全国口腔修复学学术会议论文汇编》期刊2017-10-22）
邹伟龙[6]（2016）在《新型可注射、可降解、抗骨质疏松多功能骨水泥的体内外研究》一文中研究指出背景骨质疏松性骨折常发生胸腰椎椎体、老年髋部或桡骨远端骨质等,骨质疏松性骨折的风险跟年龄有很大的相关性,所以中国社会骨质疏松相关性骨折的患病率将随我国日益加重的老年化而变得越来越严重。辛伐他汀(simvastatin,SIM)不仅具有调脂作用,文献报道还具有抗骨质疏松作用,但其抗骨质疏松效益还没充分挖掘出来,口服SIM需经肝肾代谢,患者长期服用不方便依从性差,而且到达骨组织的药物较少,不能达到药物最低有效浓度,因此,找寻一种合适的药物载体,改变骨科相关疾病的单一给药方式,成为了目前国内外学者研究的一个热点。磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)因其自固化、可降解、不产热、具有骨传导性及良好的组织相容性等优点被用于骨质疏松性椎体压缩骨折的治疗,然而其降解速度慢及无抗骨质疏松作用限制了其临床应用。通过聚左旋乳酸(Poly-L-lactic acid,PLLA)制作载药微球后与CPC混合,能更好的控制药物的缓释,实现SIM的靶向缓释治疗,能大大提高SIM的生物利用率,增强CPC在骨质疏松性骨折的功效,在骨质疏松性脊柱压缩性骨折中实现材料降解与骨生成率匹配及抗骨质疏松功效,实现骨质疏松椎体压缩性骨折的生理性愈合,拓宽了CPC材料的应用途径。本实验对SIM-PLLA-CPC多功能骨水泥进行材料学研究细胞学研究及兔骨质疏松模型在体实验,在体动物实验抗骨质疏松分析,为进一步的临床研究提供基础数据支持,为临床应用打下基础。目的通过将SIM-PLLA载药微球与CPC混合,优化最佳材料复合比,构建一种新型SIM-PLLA-CPC多功能骨水泥材料,并通过材料学研究、细胞学实验及动物在体实验等方面对多功能骨水泥材料进行评估,为骨质疏松椎体压缩骨折的临床治疗提供又一选择。方法1、SIM-PLLA微球的制备：通过快速膜乳化法制备微球；2、多功能骨水泥的制备：分别制备含载药PLLA微球质量分数为0%、5%和10%磷酸钙骨水泥粉末：分别为对照组(单纯CPC组)、SIM-PLLA-CPC(?)剂量组及SIM-PLLA-CPC高剂量组,用物理共混的方法载药SIM-PLLA微球与CPC固相粉剂混合,对照组不加入载药微球,获得多功能骨水泥粉剂；3、通过SEM观察SIM-PLLA微球的表征；4、SIM-PLLA微球的包封率及载药率测量：取微球溶解进行紫外测量,计算微球中的药物质量。计算包封率和载药率。5、复合骨水泥的理化性质：测定材料的可注射性、凝固时间、力学强度、X线衍射分析及体外降解率。6、SIM-PLLA微球体外药物释放规律检测称量微球到透析袋放入PBS溶液中,在37℃下释放；观察药物释放情况。7、多功能骨水泥细胞学实验：把刚出生的SD大鼠取颅骨用组织块培养法培养成骨细胞,接种于材料试样表面共培养一定时间后,进行电镜观察细胞在材料表面的粘附情况,用CCK8方法检测复合材料对成骨细胞粘附及增殖的影响,应用ALP试剂盒检测材料对成骨细胞分化的影响。8、骨质疏松模型的构建按张堃等的方法建立兔骨质疏松模型,即去势+地塞米松处理的方法。9、动物分组及动物在体实验：将造模成功的新西兰大耳白兔,随机分为3组,即CPC组,SIM-PLLA-CPC低剂量组和SIM-PLLA-CPC高剂量组。取兔子股骨髁外侧切口,用电钻开出圆柱状骨缺损,植入骨水泥材料。10、Micro-CT分析：在术后4、12周两个时间点每组分别随机处死6只兔子,把股骨远端分离,Micro-CT扫描,通过分析软件得出标本中剩余材料的体积比(RMVF)和新骨长入的体积分数(BVF)以及材料周围骨小梁的立体测量学指标,如骨小梁的厚度、数量及密度等。结果1、SEM下可见微球均匀球状结构,分散性好,微球间无黏连。粒径大小均匀,表面较多褶皱。2、SIM-PLLA微球的包封率及载药率测量：计算得到SIM-PLLA微球的载药率是9.3%,包封率是36.1%。3、体外复合材料理化性质测定：3.1、可注射性能、凝固时间及力学强度检测：注射性：前4min时,单纯CPC组和含PLLA微球组的注射性能无明显差异,8min后,含PLLA微球组可注射性均大于单纯CPC组比较,注射性有所改善,未见复合骨水泥材料出现固液分离现象,叁组材料间比较差异有统计学意义(P<0.05),而含微球组高低剂量组间的比较无统计学差异(P>0.05)。凝固时间：CPC组和两个含PLLA微球组比较,微球组凝固时间延长,但差异无统计学意义(P>0.05)。力学强度：可见,各材料组力学强度在1d、7d时间点,各组间比较无统计学差异(P>0.05)。3.2 X射线衍射分析(XRD)：单纯CPC组和SIM-PLLA-CPC组样品的XRD谱线与标准羟基磷灰石谱线相同,两组材料XRD主峰位于30°附近,没有发现其它衍射峰。3.3、复合SIM-PLLA骨水泥材料表征SEM结果见复合材料表面较为致密,在放大1000倍条件下,局部可见70～80μm大小的孔径,表面可见较多结晶体,可见部分微球分布,在5000倍放大条件下,可见较多褶皱微球嵌入材料里面,均匀的在材料间分布,微球结构保持完整视野中微球粒径大小在1～3μn左右。4、药物释放检测：由图3可见,药物缓释观察时间周期25天,SIM-PLLA微球在前5天时间里有明显的突释现象,第10天后,释放率达51.25±4.35%,10天以后SIM-PLLA微球药物缓释平稳,直到25天时达到69.75±4.79%。5、CPC和SIM-PLLA-CPC材料表面成骨细胞黏附实验在培养4h后,各组的粘附性均无差异(P>0.05),随着培养时间的延长,低、高剂量SIM-PLLA-CPC组细胞的黏附性提高,并与单纯CPC比较有统计学差异P<0.05,高剂量SIM-PLLA-CPC组OD值比低剂量组高,但其差异无统计学意义P>0.05,细胞在材料表面培养12h后,低、高剂量SIM-PLLA-CPC组黏附性指标更高,与单纯CPC材料比较有统计学差异P<0.05。6、CPC和SIM-PLLA-CPC材料表面成骨细胞增殖实验：在1、3、5、7天时CCK-8方法所测得的吸光度值,在第1天时,低、高剂量SIM-PLLA-CPC组比单纯CPC组OD值更高,但只有高剂量组与单纯CPC组比较有统计学差异P<0.05,培养的第3天,两组SIM-PLLA-CPC均比CPC高且有统计学意义,OD值随SIM-PLLA-CPC微球含量的增高而增高,说明载药微球对细胞无毒副作用,生物相容性好,并表现出与SIM剂量相关的活性。7、CPC和SIM-PLLA-CPC材料表面成骨细胞分化实验：单纯CPC和低、高剂量SIM-PLLA-CPC材料表面接种细胞后7天检测ALP活性结果,可见含高剂量SIM组ALP活性比单纯CPC和低剂量组高,其差异有统计学意义P<0.05,低剂量SIM-PLLA-CPC酶活性比单纯CPC的高,但无统计学差异P>0.05。8、Micro-CT分析结果：单纯CPC组RMVF从4w的91.6±0.13%到12w的84.32±2.03,而高剂量材料组从4w的84.5±0.73%到12w时的75.6±2.11%,说明高剂量组材料的降解速度明显快于单纯CPC组(P<0.05),而低剂量组材料降解速度介于单纯CPC和高剂量组之间(P<0.05),说明不同剂量载药微球对材料降解速度有剂量相关性。新骨长入的体积分数(BVF),各组材料均有随时间推移,新骨生成率增加的趋势,其中高剂量SIM-PLLA-CPC组新骨生成速度最快,在12w时达到了17.8±1.49%,远大于单纯CPC的9.72±0.75%(P<0.05)。而低剂量组材料中新骨生长速度介于单纯CPC和高剂量组之间(P<0.05),并且低剂量组和高剂量组间比较有统计学差异(P<0.05),说明不同剂量载药微球对材料促进骨生长速度有剂量相关性。Micro-CT叁维重建图及截面重建图：可见叁组材料均出现随4w、12w时间推移材料进一步降解,新生骨逐渐长入的情况。单纯CPC组材料叁维重建及横截面4w与12w的影像图无明显改变,低剂量SIM-PLLA-CPC组12w的材料与4w比较,材料随时间推移降解明显,4w时可见新生骨呈星点状生长,12w时复合材料进一步降解,材料降解出来的空间有新骨长入内部。高剂量组与低剂量组材料比较,上述随时间变化的趋势更加明显,叁维重建可见材料12w时已经呈疏松多孔结构,可见高剂量组材料周边与骨组织切合紧密,新生成的骨组织由周边往材料深面生长,新骨长入范围也更广。植入材料术后4w时材料周围的骨小梁参数,可以看出各组差异不显着P>0.05,仅仅高剂量SIM-PLLA-CPC组骨小梁数量1.95±0.18 mm-1,高于其它两组P<0.05；表X2显示12周时情况,12w时高剂量组(BV/TV)、Tb.N、Tb.Sp均比单纯CPC组有改善(P<0.05),12w时CPC组各参数BV/TV、Tb.N还比4w时指标下降了,但无统计学差异(P>0.05)。而高剂量组各指标均比4w时有所改善。结论1)通过快速膜乳化法成制作载药微球SIM-PLLA,粒径大小为(1.63±0.54)μm,表面褶皱,球型饱满。2)复合SIM-PLLA微球的SIM-PLLA-CPC材料表面较为紧密,SIM-PLLA微球均匀分布在材料内部,XRD反映材料结晶仍主要为羟基磷灰石,表面SIM-PLLA微球对自固化过程无明显干扰,复合材料在注射性能、凝固时间、力学性能等方面无明显差异；3)体外缓释方面,药物缓释观察时间周期25天,SIM-PLLA微球在前5天时间里有明显的突释现象,第10天后,释放率达51.25±4.35%,10天以后SIM-PLLA微球药物缓释平稳,直到25天时达到69.75±4.79%。4)SIM-PLLA-CPC复合材料可促进成骨细胞黏附、增殖及分化,有一定的剂量相关性,体外细胞实验也证实复合材料也有与单纯CPC或PLLA材料相媲美的生物相容性,并且具有更强的促骨代谢作用。5)SIM-PLLA-CPC复合材料1个月的体外PH值变化稳定,与单纯CPC组比较无差异,说明PLLA与CPC复合可抑制PLLA降解产酸造成的PH值明显降低效应。6)SIM-PLLA-CPC复合材料在骨质疏松兔股骨髁缺损部具有合适的力学强度、中后期更高的材料降解率及新骨生成率；7)SIM-PLLA-CPC复合材料在骨质疏松兔模型中具有改善局部骨质的效果,可实现即时力学支撑和局部抗骨质疏松相结合；综上所述,本实验通过将SIM-PLLA微球与CPC骨水泥复合构建的SIM-PLLA-CPC复合骨水泥材料具有良好的生物相容性好、可注射性能及合适的力学强度,对兔骨质疏松模型有明显的成骨活性及抗骨质疏松效果,有望成为治疗骨质疏松性椎体压缩骨折的及不规则骨缺损的新型生物复合材料。(本文来源于《南方医科大学》期刊2016-06-30）
赵昱,段王平,卢剑功,甄俊平,段志青[7]（2016）在《海藻酸钠凝胶球复合软骨细胞体内外降解对比分析》一文中研究指出[目的]对比分析复合软骨细胞的海藻酸钠凝胶球在体内外的降解特点。[方法]取2个月龄新西兰兔5只,酶解消化获取膝关节软骨细胞,与海藻酸钠混合制成细胞密度为5.8×106/ml的混悬液,制成体积为25μl软骨细胞-海藻酸钠凝胶球,在6孔板中进行体外培养对照;体内组取4个月龄新西兰兔36只,双侧股骨滑车行直径4 mm的全层软骨缺损,并将软骨细胞-海藻酸钠凝胶球置入缺损处并经MRI评估缺损模型。分别于1、2、4、6周,通过倒置显微镜观察体外对照海藻酸钠降解情况;通过MRI、大体显微镜和番红O染色观察体内组中海藻酸钠凝胶球体内降解过程。[结果]大体显微观察体外对照组中1周海藻酸钠凝胶球边界清楚,4周凝胶球边界模糊不清,6周藻酸钠边界消失且成糊状。体内组中Roberts MRI评价修复效果显示4周(2.25±0.500)与1周(1.00±0.817)相比差异有统计学意义(t=2.611 P=0.0401),与2周(1.25±0.500)相比差异有统计学意义(t=2.828,P=0.0300),与6周(2.75±0.500)相比差异无统计学意义(t=1.416,P=0.2070);大体观察1周时凝胶球开始液化,4周时海藻酸钠完全消失,且随着凝胶球的降解,缺损以组织修复;番红O染色示实验组修复1、2、4、6周后分别表现为无修复、部分纤维修复、大部分修复、完全纤维修复。[结论]与体外对比,复合软骨细胞的海藻酸钠凝胶球在兔膝关节内生物相容性较好,降解时间明显缩短,大约4周吸收完全,可以为临床应用提供理论依据。(本文来源于《中国矫形外科杂志》期刊2016年12期）
贾均平[8]（2016）在《骨螺钉用m-MgO/PLLA复合材料结晶动力学及其体内外降解性能研究》一文中研究指出左旋聚乳酸(Poly(L-lacticacid),PLLA)因其良好的生物相容性和生物可降解性而被广泛认可,并得到美国FDA食品医药临床认证。因PLLA分子链结构的影响,结晶能力较差,初期降解速率过快导致力学性能损失大。而且聚乳酸材料直接作为体内植入物,易引发基体无菌性炎症反应,这是聚乳酸于体内降解产生的酸性中间体导致的。这些问题限制了PLLA在临床上的广泛应用。研究表明无机纳米粒子在聚合物结晶过程中,作为异相成核剂能有效提高其结晶能力,提高结晶速率和相对结晶度从而提高基体的机械性能;同时,氧化镁作为一种极性纳米粒子能有效增加PLLA的亲水性,调控降解性能;中和聚乳酸降解酸性中间产物,缓解人体无菌炎症反应。因此,通过引入氧化镁添加剂,在改善PLLA结晶行为、提高机械性能的同时,对进一步调控其水解行为和生物活性具有重要研究价值。本文采用化学方法,于氯化镁溶液中添加草酸制备符合纳米尺寸要求的氧化镁颗粒。逐滴添加碳酸钠溶液获得具有较大长径比的氧化镁晶须。采用苹果酸-oligo-聚乳酸共聚改性纳米氧化镁颗粒,利用硬脂酸对氧化镁晶须表面处理,借以提高无机粒子于聚乳酸基体中的分散性和界面结合性。本次研究中我们着重研究了纳米氧化镁颗粒改性前后对聚乳酸结晶动力学的影响,以及聚乳酸复合材料机械性能、体内外降解性能。研究结果表明:1.质量分数仅为0.5wt.%的纳米氧化镁颗粒就能有效提高聚乳酸的结晶性能,聚乳酸复合材料的结晶速率和相对结晶度均有大幅度提高。聚乳酸晶粒细化,拉伸强度和断裂伸长率呈倍数增长。进一步增加纳米氧化镁颗粒的浓度对聚乳酸的结晶依然有促进作用,但浓度过高不利于纳米氧化镁颗粒的均匀分散、聚乳酸晶体结构的完善,聚乳酸纳米复合材料相对结晶度相应降低。2.改性纳米氧化镁颗粒良好的分散性能使聚乳酸成核位点大幅提高,对聚乳酸结晶速率促进作用显着。晶体颗粒均匀细化,聚乳酸球晶生长不完善,结晶度降低,但力学性能得到优化,断裂伸长率和拉伸强度显着提高。3.氧化镁添加剂能有效调控聚乳酸的体内外降解行为,中和聚乳酸降解产生的酸性中间产物。聚乳酸亲水性的提高,加速了聚乳酸复合材料初期降解速率。但随着降解时间的延长,氧化镁晶须的添加能有效抑制聚乳酸降解过程中的自催化作用,从而缓解降解速率。4.PLLA/MgO复合薄膜对小鼠L929细胞无毒性,甚至对细胞增殖有少许的促进作用。氧化镁晶须的添加能提高聚乳酸生物相容性,促进新生骨的生成。(本文来源于《天津理工大学》期刊2016-03-01）
刘晓亚[9]（2016）在《Arkadia对肝纤维化SnoN蛋白降解作用的体内外实验研究》一文中研究指出背景与目的:肝纤维化是多种慢性肝病发展成肝硬化及肝功能失代偿的共同阶段,但其发病机制至今尚未完全阐明,且总体疗效仍不理想。因此需要进一步深入探讨肝纤维化发生发展的分子机制,为寻找干预肝纤维化进展和逆转肝纤维化的有效靶点提供实验依据。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是目前公认促肝纤维化最有效、最有力的细胞因子,Smad信号是其发挥作用的主要通路。而Sno N蛋白能阻断TGF-β1/Smad信号,抑制肝纤维化。我们前期研究发现,不同肝纤维化动物模型及病人纤维化肝组织中,Sno N蛋白减少,而Sno N基因转录水平未改变,可能与泛素化降解Sno N蛋白的关键酶Arkadia有关,但其作用和机制尚不清楚。因而本研究从体内及体外两方面着手,探Arkadia降解Sno N的分子机制。本研究将有利于深入阐明肝纤维化发病机制。方法:(1)体内研究:大鼠适应性饲养(标准饲料,自由饮水)1周,采用随机数值表法进行分组,CCl4(carbon tetrachloride)肝纤维化模型组(model)43只,腹腔注射50%的CCl4橄榄油溶液0.15 ml/100 g体重,2次/周,共8周,8周后停止注射,继续饲养4周,建立肝纤维化逆转模型,大鼠分别于第2、4、6、8、10、12周处死;对照组7只大鼠腹腔注射等量生理盐水,于第8周一并处死,并留取肝脏标本,心脏取血,收集血清。大体标本观察、HE染色、Masson染色和血清生化检测确定大鼠肝纤维化模型是否成功,通过Western Blot技术检测Arkadia、Sno N、FN、TGF-β1、Collagen-Ⅰ、α-SMA等的表达。实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,q RT-PCR)检测Arkadia、FN的表达。免疫组织化学检测Arkadia、Sno N、FN的表达。(2)体外研究:用10 ng/ml的TGF-β1刺激肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC),分别在2、6、12、24及48小时(hour,h)收集细胞。用不同浓度(0ng/ml、1 ng/ml、2 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml)的TGF-β1刺激HSC细胞,12h后收集细胞。细胞免疫荧光法定位检测Arkadia、Sno N、FN的表达。Western blot及实时荧光定量PCR检测Arkadia、FN的表达。结果:大体标本观察、HE染色、Masson染色和血清生化检测结果提示CCl4导致的化学性肝纤维化大鼠模型及其逆转模型复制成功;纤维化肝组织中FN等m RNA表达上调;随纤维化病程进展FN、TGF-β1、Collagen-Ⅰ、α-SMA等表达增加。Sno N蛋白在肝纤维化组织中表达减少,Arkadia蛋白则表达增多。TGF-β1刺激的HSC-T6细胞中,Arkadia及FN随着刺激浓度的升高及时间的延长,表达逐渐增多,并在浓度为10ng/ml及12h时,表达最多。结论:Arkadia蛋白在纤维化肝组织中表达增多,Sno N蛋白表达减少。肝纤维化在停止损伤因素后可发生逆转,且Arkadia及Sno N蛋白的表达也会发生相应变化。(本文来源于《首都医科大学》期刊2016-02-01）
台宗光[10]（2015）在《可细胞内降解的硬脂酰多肽聚合物基因载体的构建及体内外评价》一文中研究指出基因治疗(gene therapy)是指将外源基因(RNA或pDNA)导入到特定细胞中,以纠正因基因异常或补偿因基因缺陷而引起的各种异常,发挥治疗疾病的作用。目前来看,基因治疗技术在临床上还不够成熟,尚未能够应用于临床。外源基因片段不能主动进入细胞,需要载体的辅助才能进入细胞发挥作用,基因治疗应用于临床面临的一个最大障碍就是缺乏合适的基因载体(gene vector),高效和安全是基因载体的两项基本要求。因此开发新型基因载体具有非常重要的意义。本课题基于细胞穿透肽跨膜转运的原理,结合相关研究报道,设计了一种可降解多肽基因载体SHRss,该载体由硬脂酰化的含精氨酸、组氨酸、半胱氨酸多肽经二硫键桥连而成。体内外评价结果表明,载体具有较高的siRNA递送效率,同时保持了较低的细胞毒性。本课题的第一部分利用多肽固相合成法合成了多肽H3CR5C,并以同样的方法将硬脂酰基团连接到多肽上得到stearyl-H3CR5C,利用制备高效液相对其进行了纯化,HPLC法检测多肽和硬脂酰多肽的纯度在95%以上,HPLC-MS对多肽和硬脂酰多肽进行了鉴定。利用低浓度过氧化氢氧化法,将硬脂酰多肽中的巯基氧化成二硫键将其桥连起来得到SHRss,并用半胱氨酸控制桥连程度,H-NMR和GPC结果表明SHRss成功合成。本课题的第二部分对可降解多肽基因载体SHRss进行了体外评价。SHRss/siRNA纳米复合物在N/P=10时的粒径最小,粒径在150-300nm之间,电位在25-40mV之间,透射电镜观察到的纳米复合物近似球形,结构完整。SHRss2在N/P=5可以完全包裹住siRNA,并增加siRNA在血清中的稳定性。Luc-Hela细胞对SHRss/siRNA纳米复合物具有有非常高的细胞摄取。SHRss/si RNA纳米复合物在Luc-Hela细胞和mCherry-HEK293细胞中均表现出较高的siRNA递送效率。入胞机制研究结果表明,SHRss/siRNA纳米复合物的入胞途径主要为网格蛋白介导的内吞和质膜微囊介导的内吞。激光共聚焦显微镜观察发现,SHRss/Cy3-siRNA纳米复合物在入胞后可以成功的从内涵体逃逸,均匀的分布于细胞质。SHRss的细胞毒性小于Lipofectamine2000和PEI 25kDa,具有良好的生物相容性,二硫键的引入没有明显增加载体的毒性。本课题的第叁部分对四种可降解多肽基因载体在体外评价中表现最佳的SHRss2进行了荷瘤裸鼠递送siRNA的体内研究。结果表明SHRss2/si RNA纳米复合物在尾静脉注射后可以较多的累积在荷瘤裸鼠的肿瘤组织中。SHRss2/si RNA纳米复合物对肿瘤组织中相关基因的表达有比较强干扰作用。(本文来源于《第二军医大学》期刊2015-05-01）
体内外降解论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
镁合金具有可降解性、良好的生物相容性和力学相容性、骨诱导作用等,近年来成为骨植入材料的研究热点。但是,镁合金降解速率过快,与骨愈合速率不匹配,在骨损伤未完全愈合时,镁合金由于降解导致力学性能迅速衰减而无法起到支撑作用,从而致使植入失败。因此,解决镁合金降解速率与骨愈合速率不匹配的问题将是镁合金大规模投入临床医用的关键。本文采用课题组自主开发的力学性能和耐蚀性能良好的Mg-Zn-Y-Nd-Zr挤压态合金,首先对其在体外SBF中和体内SD大鼠胫骨骨髓腔内的降解行为及由于降解而导致的力学性能的变化进行研究,以了解镁合金的力学性能演变规律;而后研究了其在SBF中的应力腐蚀断裂行为,以考察本文所用镁合金的应力腐蚀断裂敏感性;最后研究了该合金在流动的SBF中轴向循环压应力下的降解行为并验证了轴向循环压应力对骨愈合的促进作用。该研究为解决镁合金的降解速率与骨愈合速率不匹配的难题提供了新的解决思路。(1)镁合金在SBF中浸泡不同时间的降解产物的形状都是块状的,降解产物中均含有C、O、Ca、P、Mg、Zn、Nd元素,浸泡前14d内,镁合金表面的点蚀坑尺寸相对较小、分布均匀,抗拉强度和延伸率与未浸泡的参照样相比没有出现明显的下降,浸泡14d后抗拉强度和延伸率分别下降17.4%和17.6%,浸泡21d后镁合金表面的小点蚀坑发展成为尺寸更大、深度更深的腐蚀坑,由此导致其力学性能迅速衰减,浸泡28d后腐蚀坑进一步扩大,浸泡28d后抗拉强度和延伸率分别下降了 24.8%和60%。断裂类型由前14d的韧性断裂为主的混合型断裂转变为浸泡21d和28d后的准解理断裂为主的混合型断裂。(2)镁合金在SD大鼠骨髓腔内的降解与在SBF中相比更加均匀,植入28d后表面仍未见大的腐蚀坑,其降解速率比在体外SBF中的小3到5倍,最大弯曲载荷随植入时间的延长而逐渐均匀的减小,植入28d后下降39.8%。(3)本文所用Mg-Zn-Y-Nd-Zr挤压态合金在SBF中对应力降解断裂敏感性不高,作为骨植入材料在植入期间无需重点防护其应力腐蚀断裂。(4)轴向循环压应力没有改变镁合金在SBF中的降解产物形貌;在前14d应力对镁合金降解速率的影响较大,21d后影响减弱;实验28d后,叁个应力(1500με、3000με、4500με)下镁合金的抗拉强度分别下降了 25.5%、38.3%和29.4%,延伸率分别下降了58.6%、69.3%和65.6%。(5)将镁合金骨髓针植入到SD大鼠胫骨骨折部位,不受力组术后28d骨折线仍清晰可见,愈合缓慢,而受力组术后7d已有明显的骨痂生成,骨折线模糊,随着受力时间的累积,骨痂进一步生长,应力促进了骨折的愈合。本研究从提高骨愈合速率的角度出发,采用施加应力的手段来解决镁合金的降解速率与骨愈合速率不匹配的问题,为镁合金的临床应用提供了新的解决思路,并为在模拟生理应力下镁合金的降解提供了理论指导。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体内外降解论文参考文献
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[2].杨佑飞.应力作用下骨植入镁合金体内外降解行为研究[D].郑州大学.2019
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[10].台宗光.可细胞内降解的硬脂酰多肽聚合物基因载体的构建及体内外评价[D].第二军医大学.2015