导读:本文包含了目的基因表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:靶向趋化因子受体4,siRNA,MDA-MB-231细胞,脂质体2000
目的基因表达论文文献综述
姜廷军,李丽,曹学良,栾厦,付鹏[1]（2018）在《~(99m)Tc标记的CXCR4小干扰RNA对人乳腺癌目的基因表达的影响》一文中研究指出目的探讨以靶向趋化因子受体4(CXCR4)为靶点的~(99m)Tc标记小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞目的基因表达的影响,为后续的乳腺癌CXCR4-siRNA基因显像奠定基础。方法人工设计合成叁段针对CXCR4 mRNA的siRNA,同时设计出阴性对照序列,质体分别包裹叁段干扰序列,转染MDA-MB-231细胞,24 h后进行PCR实验,检测CXCR4 mRNA的表达情况,在48 h后进行Western blot实验,检测CXCR4蛋白的表达,综合分析,选出最佳干扰序列。使用螯合剂HYNIC对干扰效果最好siRNA序列及siRNA(阴性对照)进行放射性~(99m)Tc标记,分别检测其标记率、放射性化学纯度、稳定性及干扰活性。多组间计量资料比较用方差分析进行比较,两组间计量资料比较用LSD-t检验进行比较。结果叁段不同序列siRNA作用于MDA-MB-231细胞后,CXCR4 siRNA1作用后的CXCR4 mRNA及蛋白表达量减少的情况与其它两条干扰序列差异有统计学意义。~(99m)Tc-HYNICCXCR4 siRNA1的标记率为(61. 26±2. 47)%(n=5),阴性对照~(99m)Tc-HYNIC-CXCR4 siRNA的标记率为(60. 85±2. 76)%(n=5)。~(99m)Tc-HYNIC-CXCR4 siRNA1的稳定性好,放射性化学纯度均能达到90%。~(99m)Tc标记前后CXCR4 siRNA干扰活性无差别。结论 CXCR4 siRNA探针能与CXCR4 mRNA上的目的序列结合,抑制目的基因的表达。合成的探针分子稳定性好,具备活体乳腺癌显像的基础条件,有望为乳腺癌精准诊疗提供一条新路径。(本文来源于《哈尔滨医科大学学报》期刊2018年03期）
李冬雪,田崇兵,刘长华,李荣田[2]（2017）在《转cry1C~*基因抗虫超级粳稻田间目的基因表达及抗螟虫性研究》一文中研究指出为了研究转基因抗虫超级粳稻田间目的基因表达及抗螟虫性,将10个来自于不同独立抗性愈伤组织的转cry1C*基因抗虫超级粳稻品系种植于田间,利用实时荧光定量PCR方法检测孕穗期叶片、茎鞘和幼穗等器官目的基因mRNA,利用酶联免疫吸附(ELISA)法检测孕穗期叶片、茎鞘和幼穗及收获后糙米的Cry1C蛋白,利用田间目测调查二化螟危害的白穗率。结果显示,转基因超级粳稻不同品系及不同器官cry1C*基因田间表达量明显不同,cry1C*基因mRNA表达量:叶片>茎鞘>幼穗,蛋白质表达量:叶片>茎鞘>幼穗>糙米。转基因超级粳稻田间目的基因表达,在mRNA水平和蛋白质水平,不同器官间存在正相关关系,各器官Cry1C蛋白质含量和糙米Bt蛋白质含量呈正相关。在本研究范围内,不论转基因粳稻植株Cry1C蛋白质含量高或低的品系,田间均表现为高抗二化螟。培育转基因抗虫粳稻品种时,应注意对目的基因适量表达的抗虫基因型的选择。(本文来源于《中国农学通报》期刊2017年36期）
刘长华,田崇兵,马淑梅,李荣田[3]（2017）在《转Bt基因水稻田间目的基因表达情况及抗螟虫性》一文中研究指出为了研究转Bt基因水稻在田间目的綦因crylC~*的表达及对螟虫的抗性,本研究以10份转CrylC~*基因的抗虫水稻品系为材料,在水稻抽穗期,利用实时荧光定量PCR方法检测叶片、茎鞘和幼穗等器官目的基因mRNA,利用酶联免疫吸附(ELISA)法检测叶片、茎鞘和幼穗中及收获后糙米的CrylC蛋白,利用田间目测调查二化螟危害的白穗率。结果显示,转基因水稻抽穗期不同品系及不同器官crylC~*基因旧间表达量明显不同,crylC~*基因mRNA表达量叶片>茎鞘>幼穗,Bt蛋白质表达量叶片>茎鞘>幼穗>糙米。转基因水稻田间目的基因表达,抽穗期叶片、茎鞘和幼穗目的基因mRNA表达量与对应器官蛋白质表达量间存在极显着正相关关系,相关系数依次为r_(叶茎)0.823、r_(叶穗)0.878及r_(茎穗)0.874;叶片、茎鞘和幼穗的Cry1C蛋白质含量和糙米Bt蛋白质含量也呈显着或极显着正相关,相关系数分别是r_(叶米)0.878、r_(茎米)0.646、r_(穗米)0.653。在本研究范围内,不论转基因粳稻植株Cry1C蛋白质含量高或低的品系,田间均表现为高抗二化螟。(本文来源于《中国作物学会作物种子专业委员会2017年学术年会论文摘要集》期刊2017-08-18）
龙玲珑[4]（2017）在《DNMT1对目的基因mRNA表达水平影响的初步研究》一文中研究指出背景 在HPV相关肿瘤中,高危型HPV感染,是受染细胞发生恶性转化的必要条件。超过一半的HPV相关肿瘤与HPV 16相关。本课题组前期试验证明人类乳头瘤病毒HPV16E6、E7与DNA甲基转移酶(DNMTs)相关,引起6种抑癌基因(SPARC、TFPI2、RRAD、SFRP1、MT1G 和 NMES1)甲基化发生相应的改变,进而引起基因表达改变,最终可能参与细胞的恶性转化过程。DNMTs主要包括DNMT1和DNMT3,前者主要参与甲基化状态的维持,也是非CpG位点从头甲基化所必需,并与甲基化状态的延伸有关;后者包括DNMT3a、DNMT 3b和DNMT3L。DNMT3a和3b是主要的从头甲基化酶。人们认为DNMT3L不直接参与DNA甲基化,但其与DNMT3a和3b相互作用,可能在转录抑制中发挥作用。。前期研究中我们发现,将SiHa细胞株(HPV16阳性)中的E6、E7基因分别沉默后,4种DNMTs的表达水平均有所下降,但下降程度存在明显差异。而将HPV16 E6、E7同时转入原代角质形成细胞后,在细胞永生化的过程中,4种DNMTs的表达水平也存在不同程度的升高。我们据此假设,除了传统认为的不同功能之外,DNMTs在调控目的基因的甲基化状态时,可能有(相对)关键的DNMT存在。目的本研究拟采用SiHa细胞,应用特异性siRNA沉默DNMT1,观察DNMT1和6种抑癌基因的mRNA表达水平以及DNMT1蛋白表达水平的变化。方法应用针对DNMT1的siRNA,沉默DNMT1。应用qPCR比较沉默前后不同时间点DNMT1的mRNA和蛋白表达的变化,以及6种目的基因的mRNA表达水平的变化。结果转染siRNA后,DNMT1 mRNA和蛋白水平表达下调(p<0.05)。6种目的基因的mRNA表达上调(p<0.05)结论DNMT1对SiHa细胞中的6种目的基因的mRNA表达可能起抑制作用。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2017-05-01）
[5]（2016）在《低氧诱导因子及其目的基因在糖尿病膀胱中的表达以及与氧化应激关系》一文中研究指出目的:探讨糖尿病膀胱的发生发展问题,对于糖尿病膀胱的发病机制问题可提供一种更深入的解释,在临床治疗方面,也能为防治该病提供一条新的途径。方法:健康成年雄性Wistar大鼠70只,体重250克左右,随机分为两组:对照组(n=10),糖尿病组(n=60)。从糖尿病大鼠模型建立之日起,于1周,2周,4周,6周,8周,10周后分别摘取10只糖尿病大鼠膀胱组织。分别检测HIF-(本文来源于《中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会第十四次全国学术会议暨2016年广东省中西医结合学会泌尿外科专业委员会学术年会论文集》期刊2016-09-09）
陈犹白,张启旭,Butler,C,E,吴叶文,张丽萍[6]（2016）在《DOTAP脂质体介导VEGF基因转染人脂肪干细胞及目的基因的表达》一文中研究指出目的:研究脂质体介导的血管内皮生长因子(VEGF)基因转染人脂肪干细胞(hASCs)及VEGF的表达。方法:胶原酶消化吸脂术脂肪,收获细胞沉淀,培养至第4代时利用流式细胞术检测细胞表型,并诱导其成脂成骨分化,鉴定为hASCs。转染组利用DOTAP脂质体将pIRES2-EGFP-VEGF质粒转入hASCs,对照组为脂质体空载。免疫荧光染色检测hASCs内VEGF的表达,ELISA检测上清液中VEGF浓度的变化。结果:1ml吸脂术脂肪可得到(4.38±0.21)×10~5个细胞,第4代时hASCs高表达CD90(81.49%),低表达CD19(6.37%)、CD31(14.91%)、CD34(17.56%)和CD45(15.39%),诱导分化后油红O和茜素红染色均呈阳性。分光光度计显示质粒DNA浓度为595ng/μl。转染组hASCs表达GFP和VEGF,转染效率为(43.69±18.53)%;对照组不表达GFP,但表达较低的VEGF。转染组VEGF的光密度是对照组的2.13倍,其上清液中的VEGF浓度随时间显着上升,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DOTAP脂质体可成功将pIRES2-EGFP-VEGF质粒转入hASCs,转染后的VEGF表达和分泌水平显着提高。(本文来源于《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》期刊2016年12期）
吴志伟,徐立新,佟金,陈玉香[7]（2016）在《多拷贝策略在增强目的基因表达中的应用》一文中研究指出作为基因工程领域增强目的基因表达的一种有效手段,多拷贝策略日益受到分子生物学研究者的青睐。该策略分为3种方式:表达盒多拷贝、目的基因多拷贝和启动子多拷贝,目前基因工程领域3种方式均有运用。实现多拷贝的方法有5种,分别是随机定向串联法、PCR扩增串联法、接头连接法、同尾酶法和化学合成法。多拷贝策略是通过分子生物学手段对基因工程菌目的蛋白质表达进行改良的一种方法,已有多项研究证明了该策略的可行性,该策略对基因工程起到了良好的补充作用,使得转基因产物产量更符合工业生产的需要。(本文来源于《生命科学研究》期刊2016年02期）
田崇兵[8]（2016）在《转Bt基因抗虫早粳稻品系目的基因整合及其表达》一文中研究指出水稻(Oryza sativa)是我国重要的粮食和经济作物,也是东北地区叁大主要农作物之一。我国有65%以上的人口以稻米为主食,稻米的生产安全关乎国计民生。现今虫害对稻米的生产安全构成了严重的威胁,每年水稻因虫害造成的经济损失高达115亿元。传统农业生产对害虫的防治主要依赖于化学试剂,但化学试剂的长期大量使用不仅浪费人力、物力和财力,还会造成环境污染、害虫再猖獗等问题。因此,培育抗虫水稻至关重要。目前,水稻转基因技术已经趋于成熟并培育出多种具有抗虫作用的转Bt基因水稻。本研究以转Bt基因抗虫早粳稻空育131和超级稻松粳9号为材料,利用常规PCR、试纸条、实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附实验(ELISA)、Southern blot和全基因组重测序等检测方法,从DNA水平、mRNA水平、蛋白水平及Bt基因转录水平与表达水平的相关性进行研究,从中选育出外源基因遗传稳定性强、转录水平和表达水平高、拷贝数低且插入位点未破坏水稻内源基因的抗虫Bt水稻植株。主要结果如下:1、利用Basta筛选、试纸条和常规PCR检测等方法,经过T0~T9代筛选,成功获得了Bt早粳稻空育131和Bt超级稻松粳9号,其中HD1(转cry1C*基因空育131)22个,HD2(转cry2A*基因空育131)10个,HD3(转cry1C*基因松粳9号)45个,HD4(转cry2A*基因松粳9号)26个。2、利用real time PCR方法检测Bt水稻分蘖期和抽穗期各组织中Bt基因转录水平。检测结果表明:同一品系不同株系同一生长期相同组织间Bt基因转录水平存在差异;相同株系同一生长期不同组织间Bt基因转录水平存在明显差异,由高到低依次为叶片>幼穗>茎鞘;相同株系不同生长期相同组织间Bt基因转录水平也存在明显差异,表现为抽穗期>分蘖期。3、利用ELISA方法检测Bt水稻分蘖期、抽穗期、灌浆期和完熟期各组织中Bt蛋白的表达量。检测结果表明:同一品系不同株系同一生长期相同组织间Bt蛋白的表达量存在差异;相同株系同一生长期不同组织间Bt蛋白的表达量存在明显差异,在分蘖期表现为叶片>茎鞘,抽穗期表现为叶片>幼穗>茎鞘,灌浆期表现为叶片>茎鞘>幼穗,且都高于完熟期糙米中Bt蛋白的表达量;相同株系不同生长期相同组织间Bt蛋白的表达量也存在明显差异,在HD1、HD3品系的叶片和茎鞘中表现为灌浆期>抽穗期>分蘖期,在HD2、HD4品系的叶片和茎鞘中表现为灌浆期≈抽穗期>分蘖期,在各品系的幼穗中表现为抽穗期≥灌浆期,且都高于完熟期Bt蛋白的表达量。4、利用SPSS软件分析Bt水稻中Bt基因转录水平与翻译水平相关性。分析结果表明:在HD1、HD2、HD3和HD4品系的叶片、茎鞘和幼穗中Bt基因转录水平与翻译水平均在0.01或0.05水平上表现出显着的正相关性。5、利用Southern blot检测Bt水稻中筛选标记基因和目的基因拷贝数。检测结果表明:经过连续传代后,筛选标记基因和目的基因的遗传趋于稳定,各株系间拷贝数虽有所不同,但都介于1~2拷贝数之间。6、利用植物全基因组重测序技术对优势Bt水稻植株HD1-3、HD2-2、HD3-2和HD4-3进行Bt基因插入位点测定。结果表明:Bt基因分别插入在各Bt水稻植株的第3号、第7号、第8号和第1号染色体上。(本文来源于《黑龙江大学》期刊2016-03-28）
高笑宇,刘东军,梁浩,仓明,郭旭东[9]（2015）在《全身性过表达和表皮特异性过表达胸腺素β4小鼠皮肤中目的基因表达差异分析》一文中研究指出胸腺素β4(Thymosinβ4,Tβ4)能够促进毛发生长.旨在构建CAG启动子指导的全身性过表达Tβ4小鼠(CTP小鼠)和角蛋白14(Keratin14,Krt14)启动子指导的表皮特异性过表达Tβ4小鼠(KTP小鼠),比较两种转基因小鼠模型的Tβ4表达情况,为进一步研究Tβ4对毛发生长的影响以及其作用机制奠定基础.首先构建CAG启动子指导的全身性过表达载体pODsRed-CTP,然后用pODsRed-CTP和Krt14启动子指导的pODsRed-KTP表达载体,通过原核注射技术制作转Tβ4基因小鼠.PCR鉴定得到CTP小鼠2只,阳性率1.6%;KTP小鼠4只,阳性率8%.通过Real-time PCR检测Tβ4基因mRNA水平表达量,结果显示Tβ4在CTP小鼠皮肤中mRNA水平表达量是对照小鼠的1.24和1.13倍,在KTP小鼠皮肤中mRNA水平表达量分别是对照小鼠的4.22、1.84、4.60和2.74倍.Western blotting检测Tβ4在蛋白水平的表达,发现CTP小鼠皮肤中Tβ4蛋白的表达量没有显着变化,而KTP小鼠皮肤中Tβ4蛋白表达水平显着升高.与CTP小鼠相比,KTP小鼠更适合作为Tβ4过表达小鼠模型,深入研究Tβ4对毛发的影响以及作用机制.(本文来源于《内蒙古大学学报(自然科学版)》期刊2015年05期）
海玲,富红丹,赵静[10]（2015）在《携pEGFP-C1的目的基因真核表达载体的构建方法研究》一文中研究指出目的提高构建携pEGFP-C1的目的基因真核表达载体的成功率。方法通过理论研究结合实验操作经验。结果利用该方法可以高效率的成功构建真核表达载体。结论文章提出的方法简便、通用、高效,可以解决重组DNA载体构建技术中的一系列关键问题,为相关研究提供了必要的理论和技术支持。(本文来源于《疾病监测与控制》期刊2015年05期）
目的基因表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究转基因抗虫超级粳稻田间目的基因表达及抗螟虫性,将10个来自于不同独立抗性愈伤组织的转cry1C*基因抗虫超级粳稻品系种植于田间,利用实时荧光定量PCR方法检测孕穗期叶片、茎鞘和幼穗等器官目的基因mRNA,利用酶联免疫吸附(ELISA)法检测孕穗期叶片、茎鞘和幼穗及收获后糙米的Cry1C蛋白,利用田间目测调查二化螟危害的白穗率。结果显示,转基因超级粳稻不同品系及不同器官cry1C*基因田间表达量明显不同,cry1C*基因mRNA表达量:叶片>茎鞘>幼穗,蛋白质表达量:叶片>茎鞘>幼穗>糙米。转基因超级粳稻田间目的基因表达,在mRNA水平和蛋白质水平,不同器官间存在正相关关系,各器官Cry1C蛋白质含量和糙米Bt蛋白质含量呈正相关。在本研究范围内,不论转基因粳稻植株Cry1C蛋白质含量高或低的品系,田间均表现为高抗二化螟。培育转基因抗虫粳稻品种时,应注意对目的基因适量表达的抗虫基因型的选择。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
目的基因表达论文参考文献
[1].姜廷军,李丽,曹学良,栾厦,付鹏.~(99m)Tc标记的CXCR4小干扰RNA对人乳腺癌目的基因表达的影响[J].哈尔滨医科大学学报.2018
[2].李冬雪,田崇兵,刘长华,李荣田.转cry1C~*基因抗虫超级粳稻田间目的基因表达及抗螟虫性研究[J].中国农学通报.2017
[3].刘长华,田崇兵,马淑梅,李荣田.转Bt基因水稻田间目的基因表达情况及抗螟虫性[C].中国作物学会作物种子专业委员会2017年学术年会论文摘要集.2017
[4].龙玲珑.DNMT1对目的基因mRNA表达水平影响的初步研究[D].北京协和医学院.2017
[5]..低氧诱导因子及其目的基因在糖尿病膀胱中的表达以及与氧化应激关系[C].中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会第十四次全国学术会议暨2016年广东省中西医结合学会泌尿外科专业委员会学术年会论文集.2016
[6].陈犹白,张启旭,Butler,C,E,吴叶文,张丽萍.DOTAP脂质体介导VEGF基因转染人脂肪干细胞及目的基因的表达[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志.2016
[7].吴志伟,徐立新,佟金,陈玉香.多拷贝策略在增强目的基因表达中的应用[J].生命科学研究.2016
[8].田崇兵.转Bt基因抗虫早粳稻品系目的基因整合及其表达[D].黑龙江大学.2016
[9].高笑宇,刘东军,梁浩,仓明,郭旭东.全身性过表达和表皮特异性过表达胸腺素β4小鼠皮肤中目的基因表达差异分析[J].内蒙古大学学报(自然科学版).2015
[10].海玲,富红丹,赵静.携pEGFP-C1的目的基因真核表达载体的构建方法研究[J].疾病监测与控制.2015
标签：靶向趋化因子受体4; siRNA; MDA-MB-231细胞; 脂质体2000;