结构域包含蛋白论文-李璐璐,孙勇虎,刘红

结构域包含蛋白论文-李璐璐,孙勇虎,刘红

导读:本文包含了结构域包含蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:ZMIZ1基因,自身免疫,性腺,肿瘤

结构域包含蛋白论文文献综述

李璐璐,孙勇虎,刘红[1](2018)在《锌指蛋白结构域MIZ-1型包含蛋白基因研究进展》一文中研究指出锌指蛋白结构域MIZ-1型包含蛋白基因是激活的STAT蛋白抑制剂基因家族中的一员,主要表达于原始T淋巴细胞和性腺等,对免疫系统及性腺的发育具有非常重要的作用。随着全基因组关联技术的应用,多项研究发现该基因与多种自身免疫性皮肤病、皮肤肿瘤及某些自身免疫性疾病的发病显着相关。本文针对MIZ-1型包含蛋白基因的结构、功能及与疾病的关系予以综述。(本文来源于《中国麻风皮肤病杂志》期刊2018年08期)

张学思[2](2015)在《溴结构域包含蛋白2在小鼠脑内的表达及其对皮质神经元突起发育的影响》一文中研究指出大脑皮质神经元在机体活动中发挥多种重要的生理功能,是大脑发挥调节作用的基本结构和功能单位。大脑皮质的发育形成是一个多步骤、复杂的渐进过程,在许多因素的严谨调控下,分步骤、有次序地进行。在皮质的发育过程中,内源性因素或外源性因素会通过影响神经干细胞的增殖分化、神经元的迁移定位以及神经突起的数量、分支、形态、方向等对皮质的发育造成影响,从而改变正常机体的生理功能。因此,对大脑皮质发育各环节参与的分子机制研究尤为重要。溴结构域包含蛋白2(Bromodomain containing protein 2,Brd2)是溴结构域包含蛋白家族成员之一,其作为主要的表观遗传调节因子在一些临床疾病,如癌症、肥胖、2型糖尿病以及神经精神性疾病中发挥重要作用。此外,Brd2亦通过调控多种靶蛋白的转录,对细胞增殖、分化、细胞周期甚至凋亡进行调控。既往研究表明Brd2在神经系统胚胎的早期发育过程中具有丰富的表达,神经元增殖后,Brd2能够利用基因调控丰富新生神经元的细胞种类;而如果缺失Brd2,将会引起神经前体细胞的增殖变多,更严重的会导致神经管延迟闭合。这些研究表明,Brd2在神经系统的发育过程中作用明显。然而,当前关于Brd2在哺乳动物神经系统正常发育中的分布及作用机制的研究还比较匮乏,亟需开展研究。因此本文通过综合应用发育神经生物学研究方法和形态学方法,探讨Brd2在中枢神经系统中的定位分布以及其细胞化学特点,探究Brd2对皮质神经元发育的影响及其机制,为进一步阐明Brd2在大脑发育过程中的调控提供有力的研究证据。1.Brd2在成年小鼠大脑皮质的定位分布及细胞化学特点运用荧光原位杂交技术观察了成年小鼠脑内Brd2基因的分布模式;借助荧光原位杂交技术联合免疫荧光染色技术,对Brd2阳性细胞的细胞化学特点进行了观察。结果如下:1)荧光原位杂交组织化学结果显示在成年小鼠脑内,Brd2 m RNA杂交信号在前脑主要表达于大脑皮质、尾壳核、海马、基底外侧杏仁核,在缰核、丘脑以及下丘脑等区域也有部分表达;在中脑主要表达于导水管周围灰质;在后脑及延髓主要表达于孤束核、小细胞网状核以及小脑皮质等。2)荧光原位杂交联合免疫荧光标记技术结果显示,在成年小鼠大脑皮质中,brd2mrna阳性信号分布较广泛,主要分布于大脑皮质ii-iii层和v-vi层,在i层和iv层亦有少量分布。其中大多数阳性信号与神经元标志物neun共存,而与星形胶质细胞标志物gfap不共存。提示在成年大脑皮质中brd2主要表达于神经元中,可能对神经元的发育调控发挥作用。3)借助brd2mrna荧光原位杂交联合免疫荧光标记技术,我们观察了大脑皮质中brd2阳性神经元与gaba能中间神经元及其亚类(pv,som,cb)的共存关系。结果显示brd2/gaba双标记神经元约占brd2阳性神经元的21%,约占gaba阳性神经元的68%;brd2/pv双标记神经元约占brd2阳性神经元的12%,约占pv阳性神经元的27%;brd2/som双标记神经元约占brd2阳性神经元的15%,约占som阳性神经元的92%;brd2/som双标记神经元约占brd2阳性神经元的23%,约占cb阳性神经元的72%。2.下调brd2对体外培养皮质神经元突起形态的影响从体外培养皮质神经元的转染率、神经元活性以及树突分支情况角度对非病毒基因转染技术进行了对比,表明脂质体转染优于电穿孔转染。之后借助优化的脂质体转染体系,观察下调brd2对体外培养皮质神经元形态的影响。结果如下:1)电穿孔转染对神经元的存活率影响较小,而神经元存活率随着用于转染脂质体的体积增加而减少。2)sholl分析结果显示树突分支的复杂性具有距离依赖性,在20-50μm为半径的圆轨迹内存在最复杂的树枝状分支;不同转染条件显着影响树突分支,在距胞体相同距离的情况下,神经元突起与同心圆交点个数最多的实验组为4μl脂质体转染组,最少的实验组为电穿孔转染组。此外还观察到不同组别的树突总长度有显着不同。实验组中4μl脂质体转染组神经元突起总长度最长,最短实验组为电穿孔转染组。3)借助3μl脂质体转染体系,针对原代培养皮质神经元给予brd2shrna下调质粒,pcr结果显示下调效率约为57%。免疫荧光染色结果显示下调brd2可以增加离体培养皮质神经元的突起总长度,提示brd2对神经元的突起生长具有抑制作用。3.体内电转下调brd2对皮质神经元突起形态的影响采用子宫内胚胎电转技术,借助brd2shrna重组质粒,在体观察下调brd2对皮质神经元突起形态的影响。结果如下:1)E15电转Brd2 shRNA重组质粒分别至胎鼠感觉皮质或前额叶皮质附近,出生后3周进行灌注取材,免疫荧光结果表明电转细胞在皮质中主要分布于V/VI层,在II/III层亦有分布。电转细胞在皮质各层的分布比例同对照组相比无统计学差异(P>0.05)。提示E15下调Brd2对皮质神经元的迁移可能没有影响。2)E15电转乱序质粒至胎鼠感觉皮质或前额叶皮质附近,出生后3周进行灌注取材,免疫荧光结果可见V层中电转神经元胞体多为锥形,胞体大小、细胞形态等类似,且均发出长长的顶树突指向皮质表层。而电转Brd2 sh RNA重组质粒时可见大量迂曲样短突起。这就提示,E15下调Brd2可影响皮质神经元突起的发育。但是,Brd2具体是通过什么机制来调控皮质神经元突起的发育还有待进一步实验探明。综上所述,本文获得了以下主要结论:1)Brd2基因在成年小鼠脑内广泛表达,在成年大脑皮质中Brd2主要表达于神经元中,可能对神经元的发育调控发挥作用。2)对于体外培养皮质神经元突起形态的研究来说,脂质体转染优于电穿孔转染。下调Brd2可以增加离体培养皮质神经元的突起总长度。3)在体胚胎电转Brd2 sh RNA重组质粒对皮质神经元的迁移可能影响不大,但可影响皮质神经元突起的发育。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2015-10-01)

冉永红,黄婷,郝友进,陈斌,何正波[3](2015)在《东亚飞蝗UBX结构域包含蛋白基因LmUBX2的克隆和表达分析(英文)》一文中研究指出【目的】UBX结构域包含蛋白是p97/CDC48的辅助因子。p97在泛素化相关的多种细胞过程中起着重要的作用,如依赖泛素-蛋白酶体系统的蛋白质降解和同型膜融合等。本研究旨在克隆东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis(Meyen)的UBX结构域包含蛋白基因,分析其组织和发育表达格局,为进一步研究UBX结构域包含蛋白基因的功能奠定基础。【方法】通过分析东亚飞蝗的转录组数据克隆UBX结构域包含蛋白基因,采用实时定量PCR技术分析该基因在不同发育时期和成虫不同组织中的表达水平。【结果】克隆到东亚飞蝗的一个UBX结构域包含蛋白基因,命名为LmU BX2。LmU BX2开放阅读框长1 020 bp,编码399个氨基酸,预测分子量和等电点分别为37.8 kD a和6.03,与其他UBX结构域包含蛋白的氨基酸一致性为37%~64%,N端和C端分别有一个保守的UBA结构域和UBX结构域。序列比较和系统发育分析发现LmU BX2属于SAKS1亚家族。定量分析发现,LmU BX2在整个生命周期中都有表达,但成虫期的表达水平最高;在检测的所有组织中都有表达,但在精巢和卵巢中表达水平最高。【结论】研究结果说明LmU BX2可能参与东亚飞蝗多种生理过程,尤其可能与东亚飞蝗的生殖有关,但还需深入研究。(本文来源于《昆虫学报》期刊2015年04期)

龙璐,王堃,陈贞,朱乐攀,易斌[4](2015)在《叁结构域包含蛋白29对鼻咽癌细胞生长和迁移的影响》一文中研究指出目的研究叁结构域包含蛋白(TRIM 29)、死骨片蛋白-1(SQSTM 1)、根蛋白(RDX)基因在不同转移潜能鼻咽癌细胞系中的表达水平,了解其与鼻咽癌细胞侵袭转移的关系,揭示TRIM 29在鼻咽癌细胞侵袭转移中的作用。方法 1采用q RT-PCR(quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction)和蛋白印迹法(Western blot)检测高转移潜能鼻咽癌细胞系5-8F和低转移潜能鼻咽癌细胞系6-10B中TRIM 29、SQSTM 1、RDX基因的m RNA和蛋白表达水平;2脂质体转染法将TRIM 29特异性si RNA载体和空白载体转染5-8F细胞,建立稳定转染细胞系;3采用Western blot检测细胞中TRIM 29蛋白表达水平的变化,MTT法检测细胞增殖能力的变化,流式细胞仪检测细胞周期分布的变化,划痕实验观察细胞迁移能力的变化。结果 15-8F细胞中TRIM 29、SQSTM 1的表达水平明显高于6-10B细胞,而RDX的表达水平低于6-10B细胞;2建立了TRIM 29低表达的5-8F细胞系及其空白载体稳定转染细胞系;3与空白载体转染的5-8F细胞和未转染5-8F细胞比较,特异性si RNA转染的TRIM 29低表达5-8F细胞的增殖能力降低,G0/G1细胞增加,而S期细胞减少,细胞迁移能力降低。结论 1si RNA干扰TRIM 29表达抑制鼻咽癌5-8F细胞的生长和迁移;2TRIM 29、SQSTM 1与鼻咽癌转移密切相关,有望成为预警鼻咽癌转移的分子标志物,但RDX与鼻咽癌转移关系不确定。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2015年02期)

徐晓杰,周鸣,李桂源[5](2011)在《bromodomain结构域对溴区包含蛋白7亚细胞定位的影响》一文中研究指出目的:探讨溴区包含蛋白7(BRD7)的亚细胞定位以及bromodomain结构域对BRD7亚细胞定位的影响。方法:首先采用GFP介导的亚细胞定位方法,在非洲绿猴肾COS7细胞中考察BRD7的亚细胞定位;然后分别构建bromodomain缺失型的BRD7重组体pCMV-Myc/BRD7△brd和pEGFP-C2/BRD7△brd,并通过GFP介导的亚细胞定位方法和间接免疫荧光方法,分别在COS7中考察bromodomain缺失型BRD7的亚细胞定位,从而探讨BRD7的bromodomain结构域对其亚细胞定位的影响。结果:成功构建了pCMV-Myc/BRD7△brd和pEGFP-C2/BRD7△brd。BRD7及bromodomain缺失型BRD7在COS7中均主要定位在细胞核,与染色质的分布存在一定程度的相似性。结论:bromodomain结构域的缺失并不影响BRD7的细胞核分布,但是在核内的分布模式发生了一定的改变。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2011年04期)

结构域包含蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

大脑皮质神经元在机体活动中发挥多种重要的生理功能,是大脑发挥调节作用的基本结构和功能单位。大脑皮质的发育形成是一个多步骤、复杂的渐进过程,在许多因素的严谨调控下,分步骤、有次序地进行。在皮质的发育过程中,内源性因素或外源性因素会通过影响神经干细胞的增殖分化、神经元的迁移定位以及神经突起的数量、分支、形态、方向等对皮质的发育造成影响,从而改变正常机体的生理功能。因此,对大脑皮质发育各环节参与的分子机制研究尤为重要。溴结构域包含蛋白2(Bromodomain containing protein 2,Brd2)是溴结构域包含蛋白家族成员之一,其作为主要的表观遗传调节因子在一些临床疾病,如癌症、肥胖、2型糖尿病以及神经精神性疾病中发挥重要作用。此外,Brd2亦通过调控多种靶蛋白的转录,对细胞增殖、分化、细胞周期甚至凋亡进行调控。既往研究表明Brd2在神经系统胚胎的早期发育过程中具有丰富的表达,神经元增殖后,Brd2能够利用基因调控丰富新生神经元的细胞种类;而如果缺失Brd2,将会引起神经前体细胞的增殖变多,更严重的会导致神经管延迟闭合。这些研究表明,Brd2在神经系统的发育过程中作用明显。然而,当前关于Brd2在哺乳动物神经系统正常发育中的分布及作用机制的研究还比较匮乏,亟需开展研究。因此本文通过综合应用发育神经生物学研究方法和形态学方法,探讨Brd2在中枢神经系统中的定位分布以及其细胞化学特点,探究Brd2对皮质神经元发育的影响及其机制,为进一步阐明Brd2在大脑发育过程中的调控提供有力的研究证据。1.Brd2在成年小鼠大脑皮质的定位分布及细胞化学特点运用荧光原位杂交技术观察了成年小鼠脑内Brd2基因的分布模式;借助荧光原位杂交技术联合免疫荧光染色技术,对Brd2阳性细胞的细胞化学特点进行了观察。结果如下:1)荧光原位杂交组织化学结果显示在成年小鼠脑内,Brd2 m RNA杂交信号在前脑主要表达于大脑皮质、尾壳核、海马、基底外侧杏仁核,在缰核、丘脑以及下丘脑等区域也有部分表达;在中脑主要表达于导水管周围灰质;在后脑及延髓主要表达于孤束核、小细胞网状核以及小脑皮质等。2)荧光原位杂交联合免疫荧光标记技术结果显示,在成年小鼠大脑皮质中,brd2mrna阳性信号分布较广泛,主要分布于大脑皮质ii-iii层和v-vi层,在i层和iv层亦有少量分布。其中大多数阳性信号与神经元标志物neun共存,而与星形胶质细胞标志物gfap不共存。提示在成年大脑皮质中brd2主要表达于神经元中,可能对神经元的发育调控发挥作用。3)借助brd2mrna荧光原位杂交联合免疫荧光标记技术,我们观察了大脑皮质中brd2阳性神经元与gaba能中间神经元及其亚类(pv,som,cb)的共存关系。结果显示brd2/gaba双标记神经元约占brd2阳性神经元的21%,约占gaba阳性神经元的68%;brd2/pv双标记神经元约占brd2阳性神经元的12%,约占pv阳性神经元的27%;brd2/som双标记神经元约占brd2阳性神经元的15%,约占som阳性神经元的92%;brd2/som双标记神经元约占brd2阳性神经元的23%,约占cb阳性神经元的72%。2.下调brd2对体外培养皮质神经元突起形态的影响从体外培养皮质神经元的转染率、神经元活性以及树突分支情况角度对非病毒基因转染技术进行了对比,表明脂质体转染优于电穿孔转染。之后借助优化的脂质体转染体系,观察下调brd2对体外培养皮质神经元形态的影响。结果如下:1)电穿孔转染对神经元的存活率影响较小,而神经元存活率随着用于转染脂质体的体积增加而减少。2)sholl分析结果显示树突分支的复杂性具有距离依赖性,在20-50μm为半径的圆轨迹内存在最复杂的树枝状分支;不同转染条件显着影响树突分支,在距胞体相同距离的情况下,神经元突起与同心圆交点个数最多的实验组为4μl脂质体转染组,最少的实验组为电穿孔转染组。此外还观察到不同组别的树突总长度有显着不同。实验组中4μl脂质体转染组神经元突起总长度最长,最短实验组为电穿孔转染组。3)借助3μl脂质体转染体系,针对原代培养皮质神经元给予brd2shrna下调质粒,pcr结果显示下调效率约为57%。免疫荧光染色结果显示下调brd2可以增加离体培养皮质神经元的突起总长度,提示brd2对神经元的突起生长具有抑制作用。3.体内电转下调brd2对皮质神经元突起形态的影响采用子宫内胚胎电转技术,借助brd2shrna重组质粒,在体观察下调brd2对皮质神经元突起形态的影响。结果如下:1)E15电转Brd2 shRNA重组质粒分别至胎鼠感觉皮质或前额叶皮质附近,出生后3周进行灌注取材,免疫荧光结果表明电转细胞在皮质中主要分布于V/VI层,在II/III层亦有分布。电转细胞在皮质各层的分布比例同对照组相比无统计学差异(P>0.05)。提示E15下调Brd2对皮质神经元的迁移可能没有影响。2)E15电转乱序质粒至胎鼠感觉皮质或前额叶皮质附近,出生后3周进行灌注取材,免疫荧光结果可见V层中电转神经元胞体多为锥形,胞体大小、细胞形态等类似,且均发出长长的顶树突指向皮质表层。而电转Brd2 sh RNA重组质粒时可见大量迂曲样短突起。这就提示,E15下调Brd2可影响皮质神经元突起的发育。但是,Brd2具体是通过什么机制来调控皮质神经元突起的发育还有待进一步实验探明。综上所述,本文获得了以下主要结论:1)Brd2基因在成年小鼠脑内广泛表达,在成年大脑皮质中Brd2主要表达于神经元中,可能对神经元的发育调控发挥作用。2)对于体外培养皮质神经元突起形态的研究来说,脂质体转染优于电穿孔转染。下调Brd2可以增加离体培养皮质神经元的突起总长度。3)在体胚胎电转Brd2 sh RNA重组质粒对皮质神经元的迁移可能影响不大,但可影响皮质神经元突起的发育。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

结构域包含蛋白论文参考文献

[1].李璐璐,孙勇虎,刘红.锌指蛋白结构域MIZ-1型包含蛋白基因研究进展[J].中国麻风皮肤病杂志.2018

[2].张学思.溴结构域包含蛋白2在小鼠脑内的表达及其对皮质神经元突起发育的影响[D].第叁军医大学.2015

[3].冉永红,黄婷,郝友进,陈斌,何正波.东亚飞蝗UBX结构域包含蛋白基因LmUBX2的克隆和表达分析(英文)[J].昆虫学报.2015

[4].龙璐,王堃,陈贞,朱乐攀,易斌.叁结构域包含蛋白29对鼻咽癌细胞生长和迁移的影响[J].中国现代医学杂志.2015

[5].徐晓杰,周鸣,李桂源.bromodomain结构域对溴区包含蛋白7亚细胞定位的影响[J].郑州大学学报(医学版).2011

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