导读:本文包含了属特异性外膜蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:外膜蛋白C,单链抗体可变区片段,核糖体展示,文库
属特异性外膜蛋白论文文献综述
王潇,王秀敏,管庆丰,滕达,姚军虎[1]（2015）在《特异性结合革兰氏阴性菌外膜蛋白C的单链抗体核糖体展示文库的构建》一文中研究指出以纯化的重组大肠杆菌外膜蛋白Omp C免疫BALB/c小鼠,提取骨髓浆细胞总RNA,逆转录获得c DNA,作为模板通过PCR扩增获得重链和轻链可变区序列。由(Gly4Ser)3 linker连接两片段,获得单链抗体可变区片段基因库。重迭延伸PCR添加T7启动子、核糖体结合位点、gⅢtether和两端茎环结构等元件,成功构建对外膜蛋白C具有特异性亲和力的单链抗体可变区的核糖体展示文库,为特异性强、亲和力高的单链抗体可变区筛选提供了技术和材料基础。构建能与革兰氏阴性菌外膜蛋白C特异性结合的鼠源单链抗体核糖体展示文库,是奠定构建饲料革兰氏阴性腐败菌分子预警和靶向抗菌剂的靶向定位区的高亲和力单链抗体可变区片段的重要基础,对建立有害革兰氏阴性菌分子检测方法和靶向抗革兰氏阴性菌菌剂设计方法具有借鉴作用。(本文来源于《中国饲料》期刊2015年09期）
孟艳芬,熊小路,齐永,段长松,龚文平[2]（2014）在《黑龙江立克次体重组外膜蛋白B激活树突状细胞诱导C3H/HeN小鼠特异性免疫应答》一文中研究指出专性胞内寄生的黑龙江立克次体是远东斑点热的病原体,外膜蛋白B(OmpB)是其最主要的表面蛋白抗原.本研究将黑龙江立克次体ompB基因分成4段插入原核表达载体,制备出4个重组OmpB抗原(OmpB-P1,OmpB-P2,OmpB-P3和OmpB-P4).将4个重组OmpB抗原分别刺激体外培养的C3H/HeN小鼠树突状细胞,再将这些抗原激活树突状细胞分别腹腔接种正常C3H/HeN小鼠.接种第14天用黑龙江立克次体攻击小鼠,7天后活杀小鼠并用实时定量PCR检测小鼠主要脏器的立克次体的载量.结果显示,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4激活树突状细胞受体小鼠的立克次体载量显着低于OmpB-P1激活树突状细胞受体小鼠.将不同抗原激活小鼠树突状细胞分别与同源抗原激活小鼠树突状细胞受体小鼠的CD4+和CD8+T细胞体外共培养.用流式细胞仪分析共培养后CD4+和CD8+T细胞的表面分子和细胞因子表达,结果显示,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4抗原激活树突状细胞共培养的CD4+或CD8+T细胞的CD69表达水平高于OmpB-P1激活树突状细胞共培养的T细胞.此外,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4激活树突状细胞共培养的CD4+或CD8+T细胞的TNF-?和IFN-?水平均显着高于OmpB-P1激活树突状细胞共培养的T细胞.本研究结果表明,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4为保护性抗原,其激活的树突状细胞可以有效地诱导T淋巴细胞活化,使CD4+T细胞和CD8+T细胞分别向Th1细胞和Tc1细胞分化,产生高水平TNF-?和IFN-?共同对抗立克次体感染.(本文来源于《中国科学:生命科学》期刊2014年09期）
姜久昆,林旭瑷,严杰,薛峰[3]（2008）在《问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定》一文中研究指出目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别。方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位。采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组P。分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组P免疫杂交反应性。结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位。经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段。各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体P蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其WesternBlot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定。结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位。共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位。差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象。(本文来源于《浙江大学学报(医学版)》期刊2008年06期）
姜久昆[4]（2008）在《问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及其有效表位噬菌体展示肽的筛选》一文中研究指出背景和目的钩端螺旋体(Leptospirosis)(简称钩体)病是由问号钩体(Leptospira interrogans)感染引起的自然疫源性人兽共患传染病,世界范围内广泛流行,尤其多见于水稻种植区,我国也是该病流行的主要疫区之一。问号钩体自然宿主众多,多可在其肾脏长期生存繁殖,并可随尿液排出,污染土壤和水源,人类常可通过接触疫土和疫水而感染,因而钩体病也是各国洪涝灾害时重点防疫和监控的传染病之一。接种疫苗是预防和控制钩体病的最有效措施,但钩体血清群、型众多,各血清群、型抗体之间交叉保护作用较弱或无。不同国家甚至同一国家不同地区主要流行的问号钩体血清群、型差异很大,常随当地自然宿主变更而改变,给钩体病预防带来很大困难。目前普遍使用的钩体疫苗是根据当地流行的数种优势钩体血清群、型制备的多价钩体全菌死疫苗,交叉保护作用弱且副作用较大。多价钩体外膜疫苗是由我国科学家首先研制成功的组分疫苗,虽显示免疫效果好和副作用小等优点,但交叉保护作用较差的缺陷仍未得到改变。位于钩体外膜上的外膜蛋白(Outer membrane proteins,OMPs)在决定抗原特异性方面有重要作用,其中一些蛋白为钩体属特异性抗原,例如LipL41,它们的编码基因几乎保守的存在于所有致病钩体中,在问号钩体基因工程疫苗的研制上有广泛的前景。外膜脂蛋白LipL41由355个氨基酸组成,在钩体的内外两层膜中都有分布,并暴露于外膜表面。Haake等(2000)克隆出lipL41全长基因序列,并发现它只存在于致病钩体中,而在非致病钩体中则测不到。我们以往的研究结果也证实我国15群15型问号钩体标准参考株均有lipL41基因,但存在两个不同的基因型lipL41/1和lipL41/2,其中lipL41/1基因型包含了我国人群中流行最广的问号钩体黄疸出血群、波摩那群、流感伤寒群、秋季群和赛罗群等,而lipL41/2基因型所包含的钩体血清群在国内的发病率都较低。此外研究还发现多数问号钩体临床分离株都含有ipL41基因,并且表达LipL41蛋白,在多数钩体病人的血清中也可测到相应保护性抗体的存在。含多个和多种抗原表位(epitope)的多抗原肽(multiple antigenicpeptide,MAP)是近年发展起来的一种研制新型基因工程疫苗的先进技术和研究策略,是解决普通钩体疫苗交叉保护作用弱的有效途径,而鉴定有效的抗原表位是研制MAP的第一步。研究抗原表位不仅可深层次的揭示蛋白抗原分子诱导免疫应答的分子机制及特点,而且在研制新型分子疫苗方面也有重要应用前景。通过噬菌体展示系统对LipL41/1和LipL41/2的T和B有效联合表位进行鉴定,可为进一步研制钩体MAP疫苗奠定基础;序列对比发现两个基因型存在少量氨基酸序列差异,且某些残基的差异使两个基因型的某些预测表位产生了较为显着的差异,对这些有差异的表位进行鉴定有利于深入了解其抗原性和免疫反应性特点及个别氨基酸序列突变对其表位抗原性的影响,同时也可为下一步评估MAP疫苗的保护范围提供参考。实验方法采用生物信息学技术对LipL41/1和LipL41/2的T细胞和B细胞表位进行预测和分析。选择主要T细胞和B细胞联合表位肽并融合表达于M13KE噬菌体PⅢ蛋白上,PEG/NaCl沉淀法提纯重组噬菌体,SDS-PAGE鉴定目的重组PⅢ蛋白(rPⅢ)。分别以自制备rLipL41/1、rLipL41/2、黄疸出血群赖型赖株血清和病人抗血清为一抗,采用Western blot对上述表位肽进行鉴定和筛选。结果通过抗原表位预测,选择了6个LipL41/1和2个LipL41/2联合表位。经扩增获得了预期的各抗原表位片段。各目的表位序列均准确插入噬菌体PⅢ蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述8个联合表位,但杂交信号强度存在差异,表现在两个方面:一是用同一抗血清为一抗时,不同表位的杂交信号强度不同,另一方面是同一表位对不同抗血清的相对信号强度也存在差异。表位中或附近的氨基酸序列突变可能会对表位的抗原性产生一定的影响,既可以使突变后表位与原抗体的亲和力升高也可表现为降低。综合8个表位对不同抗血清的Western Blot结果及实际意义,表位LipL41/1-30和LipL41/1-233的信号强度在兔抗全菌血清和多数病人血清中的杂交信号强度均较强,其余表位的信号强度较弱或变异较大。结论本研究成功构建了T细胞和B细胞联合表位肽段的噬菌体展示系统,所采用的生物信息学技术可有效的预测抗原表位。实验鉴定所构建的8个表位均为LipL41的有效抗原表位,其中表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可应用于钩体MAP疫苗研制。(本文来源于《浙江大学》期刊2008-05-01）
黄志坚,何建国[5]（2006）在《应用噬菌体随机肽库研究抗溶藻弧菌及其外膜蛋白单抗识别的特异性表位》一文中研究指出用噬菌体随机七肽库筛选制备的抗溶藻弧菌及其外膜蛋白的纯化单抗,经3轮淘洗,获得较高程度富集的噬菌体,效价较高,第3轮淘洗比第1轮淘洗的产量高出近百倍。同时获得的阳性噬菌体经ELISA检测能与Va抗原发生强的阳性反应,确证了淘洗筛选的结果。(本文来源于《中山大学学报(自然科学版)》期刊2006年05期）
李忠玉,吴移谋,余敏君,陈超群[6]（2005）在《沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答(英文)》一文中研究指出目的构建沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗,并观察其诱导小鼠产生的体液免疫和细胞免疫。方法将核酸疫苗(pcDNA3.1MOMP)或对照空质粒(pcDNA3.1)注射于4～6周龄小鼠后腿股四头肌,每次剂量为100mg。间隔2周加强免疫2次。末次免疫后,ELISA法测定脾淋巴细胞培养上清液中IFNγ及小鼠血清中抗MOMP水平;MTT法测定脾淋巴细胞特异性增殖反应。结果小鼠接种核酸疫苗后,能产生特异性抗体,第3次免疫后抗体最高滴度达1∶1024,培养上清液中IFNγ达(532.0±45.4)pg/mL;实验组小鼠脾淋巴细胞刺激指数为3.94±0.25,其抗原特异性反应明显高于对照组。结论沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗能刺激机体产生特异的细胞免疫和体液免疫。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2005年06期）
严杰,罗依惠,毛亚飞,李淑萍,李立伟[7]（2004）在《钩端螺旋体属特异性外膜蛋白抗原的分析》一文中研究指出致病性问号钩端螺旋体(简称钩体)血清群众多,各群间交叉保护作用较弱或无,目前国内外均采用当地流行的钩体血清群来制备多价钩体疫苗,但对疫苗中未包含钩体血清群感染的保护作用极其有限,易造成钩体病的暴发流行。已知80℃灭活、生理盐水回收的腐生性双曲钩体Pato(本文来源于《中华微生物学和免疫学杂志》期刊2004年07期）
罗依惠,严杰[8]（2004）在《不同毒力钩端螺旋体属特异性外膜蛋白抗原的分析》一文中研究指出目的 了解不同毒力钩端螺旋体株有无属特异性外膜蛋白抗原。方法 TR/ patocⅠ钩体属特异性抗原免疫家兔获得抗血清 ,以显微镜凝集试验检测TR/patocⅠ属特异性抗原抗血清对我国 15群 17型问号钩体和 2群 2型双曲钩体的凝集情况。采用Auran介绍的方法制备问号钩体黄疸出血群赖型 5 6 6 0 1株、波摩那群波摩那型 5 6 6 0 8株和双曲钩体叁宝垄群Patoc型patocⅠ株的外膜蛋白 ,用SDS -PAGE及Westernblot分析不同毒力钩体外膜蛋白的电泳特征及与TR/ patocⅠ属特异性抗血清的反应性。结果 钩体TR/ patocI属特异性抗血清能与上述各株钩体发生凝集反应 ,其效价为 1∶2 5 6～ 1∶5 12。叁种不同毒力钩体外膜蛋白有相似的SDS -PAGE图谱 ,其主要蛋白组分的分子量约为 6 0kDa ,Westernblot结果证实在约31kDa处有一共同的能与TR/patocI属特异性抗血清发生反应的阳性条带。结论 钩体细胞表面具有属特异性抗原 ,分子量31KDa外膜蛋白可能是属特异性抗原之一。(本文来源于《中国人兽共患病杂志》期刊2004年07期）
杜琳[9]（1999）在《外膜蛋白P6加霍乱毒素鼻腔免疫后的特异性粘膜免疫力及对未定型流感杆菌的鼻咽部清除作用》一文中研究指出急性中耳炎（AOM）是儿童最常见的感染性疾病之一,而未定型流感杆菌（NTHi）是引起中耳炎的最常见原因,可从60％的健康儿童鼻咽部分离到该菌。目前的流感杆菌菌苗仅对b型流感杆菌有效,故有必要开发抗NTHi的有效菌苗。外膜蛋白（OMP）P6在许多菌株中高度保守,并且具有抗原稳定性,而抗P6特异性slgA抗体水平的升高又与NTHi的定居率呈负相关,为此作者评估了鼻腔接种含霍乱毒素（CT）的P6后其预防NTHi鼻咽部定居的效力。(本文来源于《国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册》期刊1999年05期）
郑和义,Ｍｙｒｏｎ,Ｓ．Ｃｏｈｅｎ[10]（1996）在《淋病患者精液中抗淋球菌外膜蛋白抗体的特异性分析》一文中研究指出为了测定人体感染淋球菌后的局部体液免疫反应。我们从１５例无并发症的男性淋病患者的急性期和恢复期以及正常人对照中收集精液标本，经硫酸胺沉淀法纯化抗体后，用免疫印迹实验技术测定其对同一患者分离得到的淋球菌的外膜蛋白的抗原抗体反应。结果，精液中的抗体在急性期与淋球菌外膜蛋白抗原起反应的量多于恢复期，在同一标本ＩｇＡ型抗体量也多于ＩｇＧ型抗体。主要的反应抗原是ＰＩ、ＰＩ、４６０００～４８０００、１４０００～１６０００和８８０００～９００００。正常对照的１５份标本中仅２份对１４０００～１６０００抗原有反应。(本文来源于《中华皮肤科杂志》期刊1996年03期）
属特异性外膜蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
专性胞内寄生的黑龙江立克次体是远东斑点热的病原体,外膜蛋白B(OmpB)是其最主要的表面蛋白抗原.本研究将黑龙江立克次体ompB基因分成4段插入原核表达载体,制备出4个重组OmpB抗原(OmpB-P1,OmpB-P2,OmpB-P3和OmpB-P4).将4个重组OmpB抗原分别刺激体外培养的C3H/HeN小鼠树突状细胞,再将这些抗原激活树突状细胞分别腹腔接种正常C3H/HeN小鼠.接种第14天用黑龙江立克次体攻击小鼠,7天后活杀小鼠并用实时定量PCR检测小鼠主要脏器的立克次体的载量.结果显示,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4激活树突状细胞受体小鼠的立克次体载量显着低于OmpB-P1激活树突状细胞受体小鼠.将不同抗原激活小鼠树突状细胞分别与同源抗原激活小鼠树突状细胞受体小鼠的CD4+和CD8+T细胞体外共培养.用流式细胞仪分析共培养后CD4+和CD8+T细胞的表面分子和细胞因子表达,结果显示,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4抗原激活树突状细胞共培养的CD4+或CD8+T细胞的CD69表达水平高于OmpB-P1激活树突状细胞共培养的T细胞.此外,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4激活树突状细胞共培养的CD4+或CD8+T细胞的TNF-?和IFN-?水平均显着高于OmpB-P1激活树突状细胞共培养的T细胞.本研究结果表明,OmpB-P2,OmpB-P3或OmpB-P4为保护性抗原,其激活的树突状细胞可以有效地诱导T淋巴细胞活化,使CD4+T细胞和CD8+T细胞分别向Th1细胞和Tc1细胞分化,产生高水平TNF-?和IFN-?共同对抗立克次体感染.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
属特异性外膜蛋白论文参考文献
[1].王潇,王秀敏,管庆丰,滕达,姚军虎.特异性结合革兰氏阴性菌外膜蛋白C的单链抗体核糖体展示文库的构建[J].中国饲料.2015
[2].孟艳芬,熊小路,齐永,段长松,龚文平.黑龙江立克次体重组外膜蛋白B激活树突状细胞诱导C3H/HeN小鼠特异性免疫应答[J].中国科学:生命科学.2014
[3].姜久昆,林旭瑷,严杰,薛峰.问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定[J].浙江大学学报(医学版).2008
[4].姜久昆.问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及其有效表位噬菌体展示肽的筛选[D].浙江大学.2008
[5].黄志坚,何建国.应用噬菌体随机肽库研究抗溶藻弧菌及其外膜蛋白单抗识别的特异性表位[J].中山大学学报(自然科学版).2006
[6].李忠玉,吴移谋,余敏君,陈超群.沙眼衣原体主要外膜蛋白核酸疫苗诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答(英文)[J].免疫学杂志.2005
[7].严杰,罗依惠,毛亚飞,李淑萍,李立伟.钩端螺旋体属特异性外膜蛋白抗原的分析[J].中华微生物学和免疫学杂志.2004
[8].罗依惠,严杰.不同毒力钩端螺旋体属特异性外膜蛋白抗原的分析[J].中国人兽共患病杂志.2004
[9].杜琳.外膜蛋白P6加霍乱毒素鼻腔免疫后的特异性粘膜免疫力及对未定型流感杆菌的鼻咽部清除作用[J].国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册.1999
[10].郑和义,Ｍｙｒｏｎ,Ｓ．Ｃｏｈｅｎ.淋病患者精液中抗淋球菌外膜蛋白抗体的特异性分析[J].中华皮肤科杂志.1996