导读:本文包含了亲和介质论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:聚乙二醇,修饰,固定化金属亲和介质
亲和介质论文文献综述
谭斌,周利琴,廖丹葵,刘彭如,孙丽霞[1]（2018）在《聚乙二醇修饰固定化金属亲和介质的制备》一文中研究指出针对固定化金属离子亲和层析技术(IMAC)存在对低浓度活性小分子肽的分离特异性差、选择性低等问题,通过在固定化金属离子亲和介质表面接枝修饰聚乙二醇单甲醚(mPEG)制备磁性限进性亲和介质,并优化了接枝工艺;采用红外光谱(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)、热重分析(TGA)等对修饰后的介质进行了表征;以牛血清蛋白(BSA)为大分子蛋白模型,研究了不同接枝率的介质对BSA阻拒效果的影响。结果表明,当使用叁氟化硼为催化剂,其用量与mPEG摩尔比为1∶0.08、反应时间为6 h、反应温度为50℃时,接枝率最大可以达到26.46%;固定化金属离子亲和介质经接枝聚乙二醇修饰后可有效减少大分子蛋白的吸附,对BSA的阻拒率最大可达到50.68%。(本文来源于《广西大学学报(自然科学版)》期刊2018年03期）
高华峰[2]（2016）在《Fe_3O_4磁性亚微球金属螯合亲和介质的制备及应用研究》一文中研究指出本文采用溶剂热法合成了具有超顺磁性的Fe3O4亚微球(MSF),经环氧化、修饰亚氨基二乙酸(IDA),获得IDA修饰的Fe3O4亚微球(MSF-IDA),然后螯合系列过渡金属离子(Me),制备成超顺磁性Fe3O4亚微球金属螯合亲和介质(MSF-IDA-Me),用于带有六聚组氨酸标签(6×His-Tag)的枯草芽孢杆菌1-382氨基酸基因工程重组蛋白(His-1-382APR,kD值约为42)的吸附及分离能力的研究。对溶剂热法合成了具有超顺磁性的MSF进行直接环氧氯丙烷修饰,无复杂的聚合反应过程,然后连接IDA、螯合Me,经傅立叶红外吸收光谱(FT-IR)对MSF、MSF-IDA、MSF-IDA-Me进行表征分析,证明IDA成功修饰到环氧化MSF表面,FT-IR及电感耦合等离子体发光光谱分析(ICP)金属元素分析都证明Me成功地螯合到MSF-IDA上。滞磁回归曲线(VFM)表明MSF经IDA修饰及Me螯合对饱和磁化强度影响不大,仍保持有良好的磁响应性能。通过 MSF、MSF-IDA、MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+、MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对无 6×His-Tag 蛋白——牛血清蛋白(BSA)和His-1-382APR的吸附实验,对实验结果进行SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,表明MSF、MSF-IDA、MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+、MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对BSA无特异吸附作用;未螯合Me的MSF、MSF-IDA对His-1-382A PR也无特异吸附作用。对His-1-382A PR特异性吸附效果良好的是MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+、MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+四种磁性亚微球金属螯合亲介质。对MSF-IDA-Me制备条件及His-1-382APR分离条件的优化研究表明,IDA修饰环氧化MSF最佳浓度为5%,NaHC03缓冲溶液最佳pH为9.5;螯合Me溶液浓度为0.1 mol/L即可达到饱和。实验表明,螯合不同Me对His-1-382APR的吸附能力不同,其负载 His-1-382A PR 的强弱能力顺序为:MSF-IDA-Cu2+>MSF-IDA-Ni2+>MSF-IDA-Co2+>MSF-IDA-Zn2+,其中 MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+吸附的 His-1-382A PR 难以洗脱,而 MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对His-1-382APR可以实现吸附-分离。对 MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+两种介质对 His-1-382A PR 纯化反复使用性进行研究,目前商品化的His-1-382A PR纯化介质的载量一般在40mg/g左右,而且在使用6至7次对His-1-382APR的载量就降至30%以下,需要重新负载Me。MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对His-1-382APR的初次负载量超过100 mg/g,在使用6至7次后,对His-1-382A PR的载量依然为初次载量的80%以上,长时间储存后,经过重新负载Co2+或Zn2+,对His-1-382APR的载量也没有明显降低。MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对 His-1-382A PR的纯化效果远高于目前商品化的6×His-Tag蛋白纯化介质。(本文来源于《北京化工大学》期刊2016-12-06）
朱凯,张静飞,赵岚,黄永东,李强[3]（2016）在《葡聚糖接枝过程对亲和介质性能提升影响》一文中研究指出以琼脂糖微球为基质的层析介质在制备过程中接枝葡聚糖被发现可以很好的提升介质载量和稳定性[1]。向金属螯合介质内部引入葡聚糖线性分子,并对其进入程度进行调控[2]。研究表明,介质对His-tagged标签蛋白的吸附载量比市售进口介质提高2.5倍(图1)。与此同时,介质的稳定性能和流通性能也大大改善,流速较市售进口介质增加约30%,耐压性显着提升。琼脂糖微球与葡聚糖溶液进行接枝反应,再经环氧活化和偶联Protein A配基,得到(本文来源于《2016年全国高分子材料科学与工程研讨会论文摘要集》期刊2016-11-01）
谭斌[4]（2016）在《聚乙二醇限进亲和介质的制备及应用研究》一文中研究指出近年来,固定化金属离子亲和层析(IMAC)技术因其分离快速、分离条件温和,成本低等优势而得到广泛应用。但是在一些复杂的混合体系中,由于蛋白质大分子会与目标小分子竞争亲和位点,降低了亲和介质对活性小分子的分离纯化效果而使其应用范围受到了限制。为了减弱实际体系中大分子蛋白质的干扰,近年来发展起来的限进性介质具有一定的优势,其主要的特点是在吸附介质表面修饰一层半渗透屏障形成体积排阻效应,并结合IMAC的亲和力选择性富集目标活性分子。因此,根据上述思路,研究制备了一种具有高载量、高选择性限进性亲和吸附介质。详细的实验结果如下：(1)采用乳化交联法制备磁性壳聚糖微球(M-CS)作为亲和介质的载体,微球平均粒径为25μm。使用环氧氯丙烷对载体进行活化,当溶胀时间为4h、活化温度为50℃、活化时间为6h、环氧氯丙烷体积分数50%、NaOH浓度为0.4M时,环氧基密度为260μmol·g-1。通过亚氨基乙二酸(IDA)作为间隔臂螯合亲和铜离子(Cu2+),制备M-CS@Cu2+。选择牛血清蛋白(BSA)为大分子蛋白模型,考察了离子强度、pH值、吸附时间、配基密度(Cu2+)对吸附效果的影响,当缓冲液离子浓度为0.02M、pH=7、吸附时间为60min,配基密度为140μmol·g-1时,对BSA (1mg·mL-1)的吸附量达到117.6mg·g-1。(2)用聚乙二醇mPEG1900对亲和介质进行表面修饰,当以叁氟化硼为催化剂,催化剂用量(摩尔比)1：0.08、反应时间6h,反应温度50℃时,mPEG1900接枝率达26.46%,并通过红外光谱(FT-IR)、扫描电子显微镜(SEM)、差式量热分析仪(DSC)及热失重(TG)对其进行了表征。研究了接枝率对阻挡BSA吸附效果的影响,限进亲和介质对BSA的吸附量随着mPEG1900的接枝率升高而降低。当介质配基密度为140μmol·g-1,表面mPEG1900接枝率为26.46%时,介质对BSA的阻拒率达到50.68%。(3)为了进一步探索限进亲和介质的应用效果,以Val-Ser-Leu-Pr o-Glu-Try (VW-6)为小分子肽模型,BSA为大分子蛋白模型分子,建立了模拟混合体系以及酪蛋白酶解体系,比较了mPEG1900修饰前后亲和介质在混合体系以及酪蛋白酶解体系中对小分子的吸附选择性以及对大分子的阻拒效果。结果表明限进亲和介质对VW-6的吸附效果有提高,对大分子BSA的吸附具有一定的阻挡效果。说明限进性金属离子亲和介质能够有效的富集小分子多肽,减少大分子蛋白的非特异性吸附,为提高活性小分子的分离效率提供了一种可行的方法。(本文来源于《广西大学》期刊2016-05-01）
谭斌,廖丹葵,刘彭如,周利琴,孙丽霞[5]（2015）在《聚乙二醇修饰磁性限进性亲和介质的制备及应用研究》一文中研究指出金属离子亲和介质在生物分离中有着广泛的应用,但在一些复杂的混合体系中,由于蛋白质大分子会与目标小分子争抢亲和位点,降低了介质对活性小分子的分离纯化效果,为提高分离活性小分子的特异性吸附效果,本文以Fe3O4纳米粒子为磁核,采用乳化交联法制备磁性壳聚糖微球,经过环氧氯丙烷活化,并通过IDA螯合铜离子(Cu2+),同时在微球表面接枝聚乙二醇(mpeg1900)制备磁性限进性亲和介质。通过红外光谱(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)、差式量热分析(DSC)对其进行了表征。以牛血清蛋白(BSA)为大分子蛋白为模型,研究了不同配基密度(Cu2+)和接枝率限进微球对吸附BSA的阻据效果。SEM表征显示,该亲和介质球形良好,圆整度高;修饰mpeg1900与铜离子配基后的磁性亲和介质表面变粗糙,对粒径以及外观基本无影响。在该介质吸附BSA过程中发现,亲和介质对BSA的吸附量随配基密度Cu2+的增大而提高,经mpeg1900修饰之后的限进性亲和介质对BSA的吸附量随着mpeg1900的接枝率升高而降低,当磁性亲和介质粒径为20-25um,配基密度为114.62umol/g,微球表面mpeg接枝率为28.46%时,在p H=7.0,离子浓度为0.002M的PBS溶液中进行BSA吸附实验介质对BSA的阻据率达到60.68%。可明显提高磁性限进性亲和介质对分离小分子的选择性,减少大分子蛋白的非特异性吸附,为提高活性小分子的分离效率提供了一种可行的方法。(本文来源于《2015年中国化工学会年会论文集》期刊2015-10-17）
梁振东[6]（2015）在《重组蛋白A亲和介质的制备及性能和应用研究》一文中研究指出金黄色葡萄球菌蛋白A具有独特的免疫学特性,在医学、生物学等领域都发挥了重要作用,在抗体纯化中也占据了不可替代的位置,具有巨大的研究价值。本文以实现重组蛋白A亲和层析的实际应用为目的,以两种不同重组蛋白A的表达为出发点,重点研究了重组蛋白A亲和层析介质的吸附性能和在分离纯化中的应用。主要从以下几个方面展开工作:(1)重组菌的构建。成功构建两株重组蛋白A工程菌,一株带有天然蛋白A的基因spa,另一株带有改造蛋白A的基因z5,构建设计时,将组氨酸亲和性标签引入蛋白N端,为重组蛋白A的分离纯化奠定了基础。(2)重组蛋白A的表达和纯化。通过优化发酵条件,确定了菌株最优的发酵条件,提高了蛋白的表达水平;运用金属离子Ni螯合亲和纯化重组蛋白A,选择400 mmol/L咪唑进行洗脱,纯化效果最好,结果满意。(3)自制亲和层析介质性能研究。重点考察了两种亲和介质在吸附Ig G过程中的静态吸附和吸附动力学。比较发现,z5配基亲和介质具有更优良的性能,一方面其洗脱条件更加温和,可以在p H 4的条件下进行洗脱,另一方面耐碱性强,经Na OH浸泡后,吸附性能基本没变。(4)在分离纯化中的应用。以猪血为分离体系,z5配基的亲和层析介质为研究对象,重点考察了上样量和流速对纯化结果的影响及评价了介质的稳定性。当上样量为3 m L,流速为1.0 m L/min时,能更好地维持纯化周期和工作效率的平衡,回收率和纯度分别为92.8%和65.6%,纯化倍数为2.3;自制重组蛋白A亲和层析介质稳定性良好,具有实现商品化的巨大潜力。(本文来源于《江南大学》期刊2015-06-01）
于广金,张博,杨姗,张元,任天瑞[7]（2014）在《氟虫腈为配基的亲和介质制备及鱼类GABA受体纯化》一文中研究指出以琼脂糖凝胶(Sepharose)CL-6B为载体,衍生化的氟虫腈为亲和配基,制备亲和层析介质,对其进行FT-IR和XPS表征。用制备的亲和层析介质分离鱼类脑组织中的GABA(γ-氨基丁酸)受体,研究分离蛋白质的效率。结果表明,成功将氟虫腈作为配体偶联到亲和介质上,偶联量为36.68μmol/g胶;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示两条蛋白质条带,其相对分子质量约为44 kD和55 kD。(本文来源于《上海化工》期刊2014年05期）
陈扬扬,马贵军,李荣秀[8]（2014）在《新型仿生亲和介质纯化工艺生产效率分析》一文中研究指出抗体的捕获层析的成本在整个抗体纯化工艺中占有相当的比例.分析比较了新型小分子仿生亲和介质和常规蛋白A的动态载量、循环使用次数和线性流速等参数,并计算了相应的生产效率,发现新型小分子仿生亲和介质最高生产效率能达到蛋白A亲和层析介质最高生产效率的3~6.9倍.(本文来源于《信阳师范学院学报(自然科学版)》期刊2014年01期）
吕燕妮,翟科峰,寇俊萍,余伯阳[9]（2013）在《正交试验法优化生脉散中有效成分组方亲和介质的制备工艺》一文中研究指出目的:制备以生脉散中有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、麦冬皂苷DT-13及五味子醇甲为配基的亲和介质。方法:采用4个有效成分与环氧活化琼脂糖凝胶6B(EAS 6B)偶联,制备亲和介质。建立HPLC-DAD对4个有效成分同时在线分离与检测,以偶联率为指标,通过L9(34)正交试验考察反应温度,反应时间和投料比对偶联反应的影响,优化制备工艺条件。结果:4个成分均可与EAS 6B发生偶联,最佳制备工艺为反应温度25℃,反应时间24 h,添加10倍量生脉散有效成分组方。人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、麦冬皂苷DT-13及五味子醇甲亲和介质的偶联率分别为27.4%,22.3%,50.0%,24.5%。结论:成功制备了以生脉有效成分组为配基的亲和介质,为进一步识别该方的作用靶点提供技术手段,同时也为制备类似结构中药复方的亲和介质提供实验依据。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2013年14期）
金卫华,张叁燕[10]（2012）在《SPA的高效表达及其亲和介质制备条件的优化》一文中研究指出使用M9培养基,以大肠杆菌BL21为宿主菌、pET32a(+)为载体,在15℃、IPTG浓度为0.8 mmol.L-1、150 r.min-1、诱导时间为4 d的条件下,SPA能够得到高效表达;在SPA∶Sepharose 4B=1∶1(质量体积比)、偶联时间为14 h时,SPA偶联率为89.67%,对IgG的纯化效果最好。(本文来源于《化学与生物工程》期刊2012年02期）
亲和介质论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文采用溶剂热法合成了具有超顺磁性的Fe3O4亚微球(MSF),经环氧化、修饰亚氨基二乙酸(IDA),获得IDA修饰的Fe3O4亚微球(MSF-IDA),然后螯合系列过渡金属离子(Me),制备成超顺磁性Fe3O4亚微球金属螯合亲和介质(MSF-IDA-Me),用于带有六聚组氨酸标签(6×His-Tag)的枯草芽孢杆菌1-382氨基酸基因工程重组蛋白(His-1-382APR,kD值约为42)的吸附及分离能力的研究。对溶剂热法合成了具有超顺磁性的MSF进行直接环氧氯丙烷修饰,无复杂的聚合反应过程,然后连接IDA、螯合Me,经傅立叶红外吸收光谱(FT-IR)对MSF、MSF-IDA、MSF-IDA-Me进行表征分析,证明IDA成功修饰到环氧化MSF表面,FT-IR及电感耦合等离子体发光光谱分析(ICP)金属元素分析都证明Me成功地螯合到MSF-IDA上。滞磁回归曲线(VFM)表明MSF经IDA修饰及Me螯合对饱和磁化强度影响不大,仍保持有良好的磁响应性能。通过 MSF、MSF-IDA、MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+、MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对无 6×His-Tag 蛋白——牛血清蛋白(BSA)和His-1-382APR的吸附实验,对实验结果进行SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,表明MSF、MSF-IDA、MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+、MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对BSA无特异吸附作用;未螯合Me的MSF、MSF-IDA对His-1-382A PR也无特异吸附作用。对His-1-382A PR特异性吸附效果良好的是MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+、MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+四种磁性亚微球金属螯合亲介质。对MSF-IDA-Me制备条件及His-1-382APR分离条件的优化研究表明,IDA修饰环氧化MSF最佳浓度为5%,NaHC03缓冲溶液最佳pH为9.5;螯合Me溶液浓度为0.1 mol/L即可达到饱和。实验表明,螯合不同Me对His-1-382APR的吸附能力不同,其负载 His-1-382A PR 的强弱能力顺序为:MSF-IDA-Cu2+>MSF-IDA-Ni2+>MSF-IDA-Co2+>MSF-IDA-Zn2+,其中 MSF-IDA-Cu2+、MSF-IDA-Ni2+吸附的 His-1-382A PR 难以洗脱,而 MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对His-1-382APR可以实现吸附-分离。对 MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+两种介质对 His-1-382A PR 纯化反复使用性进行研究,目前商品化的His-1-382A PR纯化介质的载量一般在40mg/g左右,而且在使用6至7次对His-1-382APR的载量就降至30%以下,需要重新负载Me。MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对His-1-382APR的初次负载量超过100 mg/g,在使用6至7次后,对His-1-382A PR的载量依然为初次载量的80%以上,长时间储存后,经过重新负载Co2+或Zn2+,对His-1-382APR的载量也没有明显降低。MSF-IDA-Co2+、MSF-IDA-Zn2+对 His-1-382A PR的纯化效果远高于目前商品化的6×His-Tag蛋白纯化介质。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
亲和介质论文参考文献
[1].谭斌,周利琴,廖丹葵,刘彭如,孙丽霞.聚乙二醇修饰固定化金属亲和介质的制备[J].广西大学学报(自然科学版).2018
[2].高华峰.Fe_3O_4磁性亚微球金属螯合亲和介质的制备及应用研究[D].北京化工大学.2016
[3].朱凯,张静飞,赵岚,黄永东,李强.葡聚糖接枝过程对亲和介质性能提升影响[C].2016年全国高分子材料科学与工程研讨会论文摘要集.2016
[4].谭斌.聚乙二醇限进亲和介质的制备及应用研究[D].广西大学.2016
[5].谭斌,廖丹葵,刘彭如,周利琴,孙丽霞.聚乙二醇修饰磁性限进性亲和介质的制备及应用研究[C].2015年中国化工学会年会论文集.2015
[6].梁振东.重组蛋白A亲和介质的制备及性能和应用研究[D].江南大学.2015
[7].于广金,张博,杨姗,张元,任天瑞.氟虫腈为配基的亲和介质制备及鱼类GABA受体纯化[J].上海化工.2014
[8].陈扬扬,马贵军,李荣秀.新型仿生亲和介质纯化工艺生产效率分析[J].信阳师范学院学报(自然科学版).2014
[9].吕燕妮,翟科峰,寇俊萍,余伯阳.正交试验法优化生脉散中有效成分组方亲和介质的制备工艺[J].中国实验方剂学杂志.2013
[10].金卫华,张叁燕.SPA的高效表达及其亲和介质制备条件的优化[J].化学与生物工程.2012