何亚鹏:传染性造血器官坏死病毒环介导等温扩增检测方法的建立和初步应用论文

何亚鹏:传染性造血器官坏死病毒环介导等温扩增检测方法的建立和初步应用论文

本文主要研究内容

作者何亚鹏,陈怡静,时晓,张宝莉,温战华,陈春山,李博,杜迎春(2019)在《传染性造血器官坏死病毒环介导等温扩增检测方法的建立和初步应用》一文中研究指出:实验建立了一套反转录环介导等温扩增方法(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),用于实验室及现场检测鲑鳟鱼传染性造血器官坏死病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)。针对IHNV的核蛋白基因设计特异性引物,以IHNV基因组RNA为模板,在反转录酶及Bst DNA聚合酶的作用下进行反转录LAMP,结果阳性样本表现为荧光绿色,阴性样本仍为红棕色。反应条件优化结果表明最适反应温度为64℃;特异性试验表明仅IHNV发生特异性扩增,而SVCV、HRV、VHSV和H2O均不发生反应;敏感性试验表明该LAMP方法可检出浓度为1.0×10-4μg/μL的IHNV核酸。本研究所建立的IHNV反转录LAMP检测法成本低、操作简单、反应迅速、不依赖专门的仪器,同时具有较高的灵敏度和特异性,适合IHNV的现场检测和大批量样品的检疫。

Abstract

shi yan jian li le yi tao fan zhuai lu huan jie dao deng wen kuo zeng fang fa (reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),yong yu shi yan shi ji xian chang jian ce gui zun yu chuan ran xing zao xie qi guan huai si bing du (infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)。zhen dui IHNVde he dan bai ji yin she ji te yi xing yin wu ,yi IHNVji yin zu RNAwei mo ban ,zai fan zhuai lu mei ji Bst DNAju ge mei de zuo yong xia jin hang fan zhuai lu LAMP,jie guo yang xing yang ben biao xian wei ying guang lu se ,yin xing yang ben reng wei gong zong se 。fan ying tiao jian you hua jie guo biao ming zui kuo fan ying wen du wei 64℃;te yi xing shi yan biao ming jin IHNVfa sheng te yi xing kuo zeng ,er SVCV、HRV、VHSVhe H2Ojun bu fa sheng fan ying ;min gan xing shi yan biao ming gai LAMPfang fa ke jian chu nong du wei 1.0×10-4μg/μLde IHNVhe suan 。ben yan jiu suo jian li de IHNVfan zhuai lu LAMPjian ce fa cheng ben di 、cao zuo jian chan 、fan ying xun su 、bu yi lai zhuan men de yi qi ,tong shi ju you jiao gao de ling min du he te yi xing ,kuo ge IHNVde xian chang jian ce he da pi liang yang pin de jian yi 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自淡水渔业的何亚鹏,陈怡静,时晓,张宝莉,温战华,陈春山,李博,杜迎春,发表于刊物淡水渔业2019年03期论文,是一篇关于传染性造血器官坏死病毒论文,鲑鳟论文,环介导等温扩增论文,核蛋白基因论文,淡水渔业2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自淡水渔业2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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