一、肾母细胞瘤影象学检查与手术及病理对照（论文文献综述）
胡传兵,韩暖,于宝华,田俊严,孙劲松[1]（2021）在《CXCR4、RGS4及RAGE在小儿肾母细胞瘤中的表达及临床意义》文中认为目的分析选择趋化因子受体（CXCR4）、蛋白信号调节因子4（RGS4）、晚期糖基化终末产物受体（RAGE）在小儿肾母细胞瘤中的表达及临床意义。方法选取2015年6月至2020年6月本院收治的98例小儿肾母细胞瘤患者,手术留取肾母细胞瘤组织纳入研究组,并选取距离肿瘤边缘>5 cm的正常肾组织纳入对照组（经病理筛查无癌细胞后最终纳入73例）。比较两组CXCR4、RGS4及RAGE表达水平,分析影响肾母细胞瘤患者预后死亡的独立危险因素。结果对照组CXCR4、RAGE高表达率低于研究组,RGS4高表达率高于研究组,差异均有统计学意义（P<0.05）。临床分期Ⅲ～Ⅳ期、预后不良组织结构（UH）、有淋巴结转移者CXCR4、RAGE高表达率高于临床分期Ⅰ～Ⅱ期、预后良好组织结构（FH）及无淋巴结转移者,差异均有统计学意义（P<0.05）。FH者RGS4高表达率高于UH者,差异有统计学意义（P<0.05）。临床分期Ⅲ～Ⅳ期、预后不良组织结构、有淋巴结转移、CXCR4、RAGE高表达及RGS4低表达是影响肾母细胞瘤患者预后死亡的危险因素（P<0.05）。结论 CXCR4、RGS4及RAGE在小儿肾母细胞瘤组织中表达异常,并与肾母细胞瘤发生、发展有关,临床上可通过检测三者表达情况对患者病情进展及预后进行评估。
徐红[2]（2021）在《超声造影在儿童腹膜后常见恶性肿瘤中应用研究初探》文中进行了进一步梳理目的:探讨超声造影（CEUS）及超声造影定量参数在儿童腹膜后肿瘤中的应用价值,为儿童腹膜后肿瘤的临床早期诊断及鉴别诊断提供更精准的影像学方法。方法:收集2019年8月至2021年4月重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科、肿瘤科住院治疗的腹膜后肿瘤患儿共39例,均经过病理学证实,包括神经母细胞瘤（Neuroblastoma,NB）24例,肾母细胞瘤（Wilms’tumor,WT）10例,节细胞神经母细胞瘤（Ganglion Cell Neuroblastoma,GNB）5例。分析所有病例的常规超声及超声造影声像图特征,并使用Sono Liver软件的动态血管模型（Dynamic vascular pattern,DVP）技术及输出时间-强度曲线处理技术,脱机分析得到DVP曲线以及时间强度数据。结果:1.神经母细胞瘤、肾母细胞瘤、节细胞神经母细胞瘤三组病例实验室指标神经烯醇化酶及尿中香草扁桃酸分布具有差异,且差异有显着统计学意义（P<0.05）。2.常规超声显示,神经母细胞瘤大部分表现为中等偏低回声,明显钙化,而肾母细胞瘤表现以中等回声为主,少量钙化,节细胞神经母细胞瘤主要为低回声,明显钙化。三种瘤体内部回声及钙化分布差异具有统计学意义（P<0.05）。3.超声造影结果显示肾母细胞瘤肿瘤内造影剂显影时间较神经母细胞瘤早,差异有统计学意义（P<0.05）,而神经母细胞瘤和节细胞神经母细胞瘤造影剂显影时间差异无统计学意义。在造影模式上,神经母细胞瘤、肾母细胞瘤大多表现为高增强、不均匀、快进,节细胞神经母细胞瘤大多表现为低增强、不均匀、快进,三组病例肿瘤内造影剂显影时间、造影增强水平以及造影模式方面的差异具有显着统计学意义（P<0.05）。4.以正常肝实质或肾皮质作为参考区,三组病例造影定量参数结果显示神经母细胞瘤、肾母细胞瘤的上升时间（Rising Time,RT）早于参考区（P<0.05）,而节细胞神经母细胞瘤稍晚于与参考区。5.本组超声造影过程中不良反应发生率为3.05%。结论:1.神经烯醇化酶及尿液中香草扁桃酸是鉴别神经母细胞瘤与肾母细胞瘤主要肿瘤标志物。2.常规超声中神经源性肿瘤内钙化灶明显,是与肾母细胞瘤声像图重要鉴别点之一。3.神经母细胞瘤、肾母细胞瘤及节细胞神经母细胞瘤超声造影肿瘤内造影剂显影时间、超声造影的增强水平以及造影模式的差异可为三者鉴别诊断提供更多的影像学信息,为上述三种肿瘤临床诊断及鉴别诊断提供新的影像学方法。4.超声造影时间强度数据中上升时间量化分析了造影结果,有望成为三组病例鉴别诊断的有效参数。5.超声造影在儿童腹膜后肿瘤中的应用具有一定安全效能。
王颖芳,杨小红,赵胜,刘思,杨帆,张晓燕,兰为顺[3]（2021）在《胎儿期中胚层肾瘤超声特征及病理对照分析》文中提出目的总结胎儿期中胚层肾瘤的超声表现并与病理组织学类型对照分析。方法对2003年1月至2018年12月湖北省妇幼保健院产前超声发现肾区肿块并经病理证实的4例中胚层肾瘤胎儿的超声图像、磁共振影像特征、病理组织学类型及随访结果进行综合分析。结果 4例中胚层肾瘤超声特征:4例胎儿中胚层肾瘤均于晚孕期被检出,发现肿块时径线均较大（直径均> 6 cm）,均为单侧肾区单发肿块,实性或囊实性;肿块与周围组织分界清,其中3例可于肿块一极见少许残肾回声,彩色多普勒超声显示肿块内部均可见较丰富的"树枝状"血流信号,均合并羊水多。产前胎儿磁共振影像均显示肿块内部有不同程度坏死灶,肿块边界清楚,周边可见受压的残肾组织。随访结果:3例孕妇选择终止妊娠,1例出生后行患侧肾切除手术,预后良好。超声与病理类型对照:1例超声显示为完全实性肿块,病理组织学类型为经典型;而囊实性肿块及实性为主肿块3例,病理组织学类型为细胞型或混合型。结论中胚层肾瘤是胎儿期常见的肾肿瘤,有特征性的超声表现,影像学特征与病理组织学类型有一定相关性,超声与磁共振联合诊断有助于正确诊断而减少误诊。
马伟[4]（2021）在《淋巴结受累与取样数目对肾母细胞瘤患儿预后的影响》文中进行了进一步梳理目的:探究淋巴结取样数目与结果对肾母细胞瘤患儿预后的影响。方法:采用回顾性队列研究,收集2010年1月至2019年12月在重庆医科大学附属儿童医院规范化治疗的肾母细胞瘤患儿的临床资料。采用Kaplan-Meier生存函数描述生存结局,根据淋巴结受累情况及取样数目分组,Log-rank检验比较组间患儿的5年无事件生存率（Event-Free Survival,EFS）的差异。Pearson卡方检验用于分类变量的比较。结果:共173名患儿纳入研究,男性81例、女性92例,发病中位年龄2（0.13-13）岁,中位随访53（3～108）个月。淋巴结受累与未受累患儿分别为23例（13.3%）和150例（86.7%）,5年EFS分别为6.19%与81.27%（P<0.0001）。u FH型患儿中,淋巴结受累与未受累患儿的5年EFS分别为25.00%与71.13%（P<0.0001）;FH型患儿中年EFS分别为73.33%与84.16%（P=0.0918）。淋巴结取样数量为1～3个、4～6个、7～9个、超过10个的患儿中淋巴结阳性的概率分别为4.23%、.32%、38.46%,43.75%（P<0.0001）。在Ⅰ期和Ⅱ期患者中,淋巴结取样数量与患者预后无显着相关性（P=0.4811）。结论:淋巴结受累是肾母细胞瘤患儿预后不良的重要因素,特别表现在肿瘤组织学为uFH的患儿中;淋巴结取样数量超过7个时,发现阳性淋巴结的概率更大;但在Ⅰ期和Ⅱ期患儿中,预后不受淋巴结取样数量影响。
田凯旋[5]（2020）在《靶向纳米复合物AS1S17499-USPIO-CD163调控肿瘤相关巨噬细胞对肾母细胞瘤的影响研究》文中指出背景肾母细胞瘤（Wilms’ Tumor,WT）是儿童中常见的泌尿系统恶性肿瘤,发病率约为1/10000。肾母细胞瘤的恶性度高、生长较快,部分患者可合并有尿道下裂、隐睾、散发性无虹膜等畸形。目前治疗方案主要采用美国肾母细胞瘤研究组（National Wilms’ Tumor Study Group,NWTS）和国际小儿肿瘤协会（International Society of Pediatric Oncology,SIOP）制定的治疗标准,根据分期、年龄、瘤重和组织病理分型,可给予个体化治疗。肾母细胞瘤患儿可通过手术扩大切除肿瘤,并且结合放化疗等综合治疗方法,可显着提高总生存率,有文献报道称在发展中国家的5年总存活率可达到80%以上。但手术扩大切除以及术后大剂量化疗的副作用逐渐被重视,可严重影响存活患儿的生活质量。因此前瞻性识别低复发率、低风险的患儿,寻找靶向分子治疗,降低患儿的治疗后的毒副作用,提高生存率,是儿外科医生面临的诸多问题。肿瘤相关巨噬细胞（Tumor associated macrophages,TAMs）是肿瘤间质细胞的重要组成部分,是由骨髓抑制细胞、单核细胞在肿瘤部位募集、分化和增殖而形成。近年来的研究表明,TAMs在肿瘤中有着重要的作用,主要表现在促进其增殖、侵袭,促进免疫逃避、血管生成等方面。根据肿瘤微环境中不同细胞、趋化因子的影响,TAMs可分化为具有不同作用的亚型,可受LPS、IFN-γ等刺激后极化为具有抗肿瘤作用的M1型巨噬细胞,属于TAMs的经典活化途径;也可在IL-4、IL-10、IL-13等因子作用下极化为具有促肿瘤作用的M2型巨噬细胞,属于TAMs的替代活化途径。近年来大量的研究证实TAMs在肿瘤中的高表达与患者的不良预后有相关性,例如,在上皮性卵巢癌、胰腺癌、髓母细胞瘤、乳腺癌中TAMs的增多预示着不良的预后,但TAMs在肾母细胞瘤中的表达及作用尚未有明确研究,需进一步探讨。由于肿瘤微环境对TAMs的影响,可使其极化为有不同作用的亚型,对肿瘤的作用有着两面性。在肿瘤发生初期肿瘤间质中TAMs主要向M1型巨噬细胞极化,随着肿瘤的不断进展,TAMs的极化方向调整为促肿瘤作用的M2型巨噬细胞,从而增强肿瘤的侵袭、转移能力。TAMs主要分布于肿瘤间质中,与肿瘤细胞相辅相成,TAMs表面高表达CSF-1受体,而肿瘤细胞可产生大量CSF-1,使TAMs向促肿瘤的亚型极化,而极化后的TAMs可分泌CCL2、EGF因子促进肿瘤细胞的增殖,可分泌PDGF、VEGF等因子促进肿瘤周围血管生成,分泌MMPs水解破坏基质膜促进肿瘤的迁移。近年来研究发现,虽然靶向抑制肿瘤细胞是肿瘤治疗的主要途径,但抗TAMs的治疗也成为了肿瘤治疗中重要的辅助手段。抗TAMs的治疗常规有两大途径,一是抑制单核细胞/TAMs在肿瘤部位的聚集;二是调控TAMs向具有抗肿瘤作用的类M1型巨噬细胞的亚型极化。依据TAMs表面抗原、激酶受体表达分布情况,特异性选择靶点,抑制TAMs的聚集、极化过程,达到调节肿瘤微环境、促进T细胞免疫的作用,为肿瘤的治疗提供新的切入点。肾母细胞瘤中TAMs的分布、不同亚型的表达情况,尚无明确研究。因此,探讨TAMs在肾母细胞瘤表达情况及相关调控机制,有助于了解TAMs在肾母细胞瘤中的作用机制,并针对性的提出靶向TAMs的治疗方案,为研究肾母细胞瘤的发生发展机制、分子靶向治疗提供了新的思路。目的探讨肾母细胞瘤中不同亚型的TAMs表达情况,与临床患者随访信息进行相关性分析;通过细胞实验研究TAMs促进肾母细胞瘤的相关分子机制,并对TAMs的极化过程进行初步的调控;应用超小型超顺磁氧化铁颗粒（Ultrasmall Superparamagntic 1ron Oxide,USPIO）作为药物载体,制作靶向纳米复合物精准调控TAMs的极化过程,抑制肾母细胞瘤的增殖、侵袭。方法收集2006.04到2014.03在山东省立医院进行手术治疗的肾母细胞瘤患者信息,术前未行放化疗治疗,符合入组标准的共61人,其中男性44人,女性17人,中位年龄是19个月（2-106月）。根据NWTS-5分期标准,I期27人,II期18人,III期16人。进行Western Blot、免疫组化、免疫荧光分别检测肿瘤与瘤旁组织中M1、M2型巨噬细胞表达情况,根据患者随访信息,制作Kaplan-Meier生存曲线,分析M1、M2型巨噬细胞表达与患者预后的相关性。诱导THP-1分别极化为M1、M2型巨噬细胞,并应用PCR、Western Blot、免疫荧光等方法验证诱导结果。将M1、M2型巨噬细胞分别与肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1共培养,通过CCK8、Transwell方法测定SK-NEP-1细胞活力、侵袭能力的改变,研究不同极化类型的TAMs对肾母细胞瘤的作用。应用PCR、Western Blot、ELISA从基因、蛋白角度研究M1、M2型巨噬细胞的差异表达MMP9蛋白,在肾母细胞瘤组织中应用Western Blot、免疫组化进一步分析MMP9的表达情况。对TAMs促肿瘤机制的相关信号通路,进行研究。研究M2型巨噬细胞极化过程中的重要信号通路STAT6作用机制,通过阻断该信号通路对肾母细胞瘤产生的影响。应用碳二亚胺法将PEG修饰后的磁性纳米氧化铁颗粒USPIO分别与STAT6信号通路抑制剂AS1517499、CD163单克隆抗体耦联制作靶向纳米复合物AS1517499-USPIO-CD163（AUC）,测定靶向纳米复合物AUC的稳定性、水合粒径、铁浓度、AS1517499包封率载药率、CD163的抗体含量,透射电子显微镜观察靶向纳米复合物AUC的颗粒特点。应用Western Blot、免疫荧光法检测靶向纳米复合物AUC中AS1517499、CD163抗体的活性。通过AO/EB、流式细胞术测定AUC对M2型巨噬细胞凋靶向高选择性,并在TAMs与肾母细胞瘤共培养体系检测AUC的药物效果。结果肿瘤相关巨噬细胞在肾母细胞瘤组织中高表达,表达量明显高于瘤旁正常组织,主要分布在肿瘤间质中。随临床分期增加,M2型巨噬细胞的数量逐渐增加,而M1型巨噬细胞数量逐渐降低,组间差异明显。通过Kaplan-Meier生存曲线分析,M1型巨噬细胞表达阳性的患者与表达阴性的患者的总生存率未见明显差异（p=0.074）,M2型巨噬细胞表达阳性的患者的总生存率明显低于表达为阴性的患者（p=0.011）。THP-1细胞诱导为M1、M2型巨噬细胞成功,细胞表型鉴定可见M1型巨噬细胞中特异性蛋白CD80,iNos呈高表达,而M2型巨噬细胞中Arg-1,CD163,CD206表达较M1型巨噬细胞增多。将M1,M2型巨噬细胞分别与肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞共培养之后,通过CCK8,Transwell实验测定细胞的活力、侵袭能力变化,可以发现M2型巨噬细胞可提高肾母细胞瘤细胞的活力、侵袭能力。应用PCR、Western Blot、ELISA方法在基因、蛋白、细胞上清液角度测定两种亚型巨噬细胞中表达差异发现,MMP9在两者之间差异明显,且肾母细胞瘤组织中的MMP9也呈高表达。MMP9通过激活AKT/PI3K信号通路,降低E-Cadherin蛋白、增加N-Cadherin蛋白表达,启动上皮间充质转化（EMT）过程,明显增强SK-NEP-1细胞侵袭迁移能力。STAT6信号通路可以调控M2型巨噬细胞极化,应用抑制剂AS1517499后发现磷酸化的STAT6降低,M2型巨噬细胞特异性蛋白CD206,CD163的表达降低,在共培养体系中阻断STAT6信号通路可以明显减少M2型巨噬细胞极化,抑制肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞的增殖、侵袭。通过碳二亚胺法将纳米级的PEG修饰USPIO先后与AS1517499、CD163单克隆抗体耦联成功,靶向纳米复合物AS1517499-USPIO-CD163具有AS1517499、USPIO、CD163抗体的三重活性,其水合粒径小于10Onm,稳定性良好,每1mgFe中有AS1517499约145.9±36.9μg,CD163抗体34±8.9μg,透射电镜观察其形态呈圆形或椭圆形颗粒,形态规则,大小均一,呈聚团分布,铁核直径在5nm左右。在细胞实验中,靶向纳米复合物AUC可靶向抑制M2型巨噬细胞极化过程,降低M2型巨噬细胞的特异性蛋白表达;靶向纳米复合物可增加M2型巨噬细胞的吞噬作用、导致细胞大量死亡;在TAMs与肾母细胞瘤共培养体系中靶向纳米复合物可明显抑制肾母细胞瘤的活性、侵袭能力。结论在肾母细胞瘤中TAMs集聚、表达量增加,M1型巨噬细胞随着临床分期进展逐渐减少,而M2型巨噬细胞与临床分期呈正相关。M2型巨噬细胞的数量增加预示着患者不良的预后。M2型巨噬细胞可促进肾母细胞瘤的增殖、侵袭迁移,其主要作用机制可能为,通过分泌MMP9蛋白激活AKT/PI3K信号通路启动上皮间充质转化（EMT）过程。STAT6信号通路在M2型巨噬细胞极化过程有重要作用,其信号通路抑制剂AS1517499可明显减少M2型巨噬细胞的生成,对肾母细胞瘤起到抑制作用,可作为肾母细胞瘤治疗的新靶点进行深入研究。靶向纳米复合物AS1517499-USPIO-CD163可通过碳二亚胺法合成,水合粒径小,稳定性良好,其中包含的STAT6信号通路抑制剂AS1517499及CD163抗体活性良好,可用于分子靶向治疗。靶向纳米复合物AUC的核心为磁性纳米级氧化铁颗粒,可主动被巨噬细胞吞噬导致凋亡,对M2型巨噬细胞有靶向高选择性,可作为靶向抗TAMs的治疗药物,对肾母细胞瘤的增殖、侵袭有明显的抑制作用。
蒋鸿飞[6]（2020）在《保留肾上腺在治疗儿童肾母细胞瘤中的初步探索》文中指出目的:肾母细胞瘤（Nephroblastoma）是常见的儿童腹膜后肿瘤,发病率约0.8/100 000,绝大多数在1-3岁发病。30多年来,随着多学科综合治疗得不断深入,患儿的5年整体存活率由25%提高到接近90%。随着总体生存率的提升,现代医学开始聚焦于精准化切除及患儿治疗后的生存状况。本文章通过分析本中心所收治的肾母细胞瘤患儿的临床资料,总结出在一期行患肾根治性切除时,保留与切除肾上腺所带来的病情转归是否存在差异;从而得出在行肿瘤根治术时,是否有必要同时切除同侧肾上腺。方法:统计并分析本中心2003年-2018年所收治的肾母细胞瘤。统计数据包括患儿基本情况、肿瘤特征（形态、位置）、术中情况、组织病理分型、临床分期及患儿随访结果（术后发育情况、肾功能、五年总体生存率、盐皮质激素水平及糖皮质激素水平,个别患儿完善放射性肾图检查）。结果:共收集147名肾母细胞瘤患儿,男性患儿75名,女性患儿72名;平均确诊月龄为42±27月;平均随访时间63±8.6月。共89名患儿在一期手术时同时切除同侧肾上腺,其中临床III期患儿有35名（III期患儿47名,占74.47%）,临床IV期患儿17名（IV期患儿24人,占70.83%）。术后病检结果示2名患儿肾上腺被肿瘤浸润（1.36%）,病检阳性患儿均为临床III期。共有33名患儿在随访过程中死亡,临床I期2名,II期8名,III期14名,IV期9名。一期手术时切除肾上腺与保留肾上腺未发现统计学意义的关联（p=0.997）。结论:在各临床分期中,保留肾上腺对患儿总体生存率无影响。故肿瘤与同侧肾上腺分界清晰时,应予以保留肾上腺。若肿瘤与同侧肾上腺关系密切,或术中破溃时,可予以一并切除。
朱雷[7]（2020）在《Apelin蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达及与临床指标相关性研究》文中指出目的分析Apelin蛋白在肾母细胞瘤（Wilms’Tumor）组织与瘤旁肾组织中的表达差异,并与相关各临床指标进行相关性研究,评判Apelin蛋白作为肾母细胞瘤侵袭性及恶性程度的新指标。方法收集2018年01月至2019年12月在我院泌尿外科就诊,经手术后病理结果确诊的43例肾母细胞瘤患儿的基本信息包括:性别、年龄、肿瘤位置,肿瘤直径、组织结构分型、病理类型、临床分期、PET-CT SUVmax值、Ki-67值的结果。实验标本为肾母细胞瘤患儿的肿瘤组织与瘤旁3cm肾脏组织,瘤旁组织要求无肿瘤侵润。肿瘤标本43例,瘤旁标本43例,一一对应。对组织标本进行HE染色和免疫组织化学法染色,在免疫组化染色中,Apelin蛋白定位于胞浆,阳性标记为棕黄色,根据每种切片中阳性细胞占所有细胞的百分比进行评分:无阳性细胞评为0分,阳性细胞占所有细胞1%-10%评为1分,11%-50%为2分,>50%为3分;按照阳性强度评分:微弱阳性为1分,中等强度为2分,强阳性为3分,总评分=阳性百分比得分×阳性强度评分。0-3分判定为阴性组,4-9分属于阳性组。结果HE染色:肾母细胞瘤组织镜下可见到原始肾胚芽、间叶和上皮三种成分,瘤旁肾脏组织镜下可见正常的肾小管、肾小球、肾小囊结构。免疫组化:肾母细胞瘤肿瘤组织及瘤旁组织均有Apelin蛋白表达,表达定位于细胞的胞浆,阳性表达的上皮细胞可见胞浆内黄棕色颗粒。肿瘤组织中,Apelin蛋白主要在肿瘤的上皮成分表达,胚芽成分未见表达,间叶成分少量表达（主要以血管上皮表达为主）,瘤旁组织可见Apelin蛋白表达于肾小管、肾小囊上皮细胞。肾母细胞瘤组织Apelin蛋白的总阳性表达率为51.2%（22/43）,瘤旁组织Apelin蛋白的总阳性表达率为27.9%（12/43）（P<0.05）。Ⅰ期+Ⅱ期肾母细胞瘤Apelin蛋白表达率为37.5%（9/24）,Ⅲ期+Ⅳ期表达率为68.4%（13/19）（P<0.05）。FH型肾母细胞瘤Apelin蛋白阳性表达率为45.9%（17/37）,UFH型表达率为100%（6/6）（P<0.05）。PET-CT:SUVmax值≥2.5 Apelin蛋白的阳性表达率为56.4%（22/39）,SUVmax值<2.5无阳性表达（0/4）（P<0.05）。Ki-67值>30%肾母细胞瘤Apelin蛋白阳性表达率为61.8%（21/34）,Ki-67≤30%Apelin的表达率为11.1%（1/9）（P<0.05）。结论Apelin蛋白在肾母细胞瘤瘤组织、瘤旁组织中均有表达,但肿瘤细胞中的表达高于瘤旁组织;Apelin蛋白的表达与肾母细胞瘤的临床分期,病理分型具有相关性;临床分期越高,病理分型预后不良,Apelin蛋白表达越高;Apelin蛋白或可作为儿童肾母细胞瘤恶性程度的标志物。
卢娜娜[8]（2020）在《儿童肾母细胞瘤临床资料及预后的影响因素的研究》文中指出目的:通过对肾母细胞瘤（Wilms瘤）患儿临床指标、生物标志物、治疗及预后的分析,评估不同影响因素对患者生存率的影响,为肾母细胞瘤患儿的诊治和随访提供依据。方法:回顾性分析2013/12/12019/1/1新疆医科大学第一附属医院收治的病理明确诊断为肾母细胞瘤的63例患儿的临床资料,探究不同年龄、性别、部位、肿瘤直径、临床分期、有无转移、外周血中Fra-1mRNA值等相关因素对肾母细胞瘤患儿5年生存率的影响,采用χ2检验分析影响肾母细胞瘤远期生存率的危险因素,并采用Cox风险模型对肾母细胞瘤患儿预后进行分析。结果:I-Ⅱ、Ⅲ-Ⅳ期肾母细胞瘤患儿的5年EFS分别为93.8%、67%。患儿的临床分期、有无远处转移、外周血中Fra-1mRNA水平是影响患儿预后的独立危险因素,临床分期越高、远处转移、Fra-1mRNA值越高,生存预后越差。而年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤直径对肾母细胞瘤患儿的生存率无明显影响。结论:临床分期、远处转移、外周血中Fra-1mRNA水平影响肾母细胞瘤患儿无病生存率,早期诊断及治疗能够有效改善预后,提高肾母细胞瘤患者的生存率。
李超群[9]（2019）在《拉曼光谱结合统计学分析神经母细胞瘤及相关肿瘤成分的差异表达》文中研究表明目的:每种生物皆由脂质、氨基酸、核酸、碳水化合物等物质组成,当生物组织细胞发生增值、衰减、变异、病变时,生物分子的成分、构型、构象都会发生改变,这些变化可以被拉曼散射检测到,并形成特有的拉曼散射光谱,通过研究光谱可以获得生物分子的信息。目前诊断肿瘤的金标准仍为有创的病理诊断,临床尚未发现有效的快速无创的诊断方法。为了解神经母细胞瘤、节细胞神经瘤及节细胞神经母细胞瘤中不同类型分子上的细微差异,我们对经母细胞瘤、节细胞神经瘤及节细胞神经母细胞瘤的拉曼光谱进行了研究。证明神经母细胞瘤、节细胞神经母细胞瘤及节细胞神经瘤,以及其相关分类均具有各自不同的拉曼指纹普,这将可能成为区别该类肿瘤病理分型及相关分类之间的基础。同时寻找不同分类的拉曼指纹普中具有特征性差异的分子,这将有可能成为开启该类肿瘤发生发展中相关分子的作用机制研究中的关键。方法:采用华中科技大学同济医学院附属同济医院病理科近十年来石蜡包埋冰冻保存的已经确诊为神经母细胞瘤29例、节细胞神经母细胞瘤13例及节细胞神经瘤1例的手术或活检标本及相关标本的所有疾病信息以作为患儿肿瘤诊断及分类的金标准。将每个标本解冻后切片成10μm固定于镀金玻片后脱腊处理。根据已有的患儿资料,将对应的标本分为神经母细胞瘤（29例）、节细胞神经母细胞瘤及节细胞神经瘤（14例）;根据病理组织预后分类分为确诊神经母细胞瘤中预后良好型（19例）、预后不良型（19例）;根据临床肿瘤INSS分期分为1期（20例）、2期（7例）、3及4期（15例）;根据治疗后实际生存情况,选取其中获得预后结果的样本分为1年内死亡及复发（12例）、1年生存（20例）、3年生存（5例）;根据危险程度分为低危（22例）、中高危（19例）;神经母细胞瘤根据组织分化程度分为未分化（6例）、分化（19例）。使用Renishaw拉曼显微镜,从每个样本的不同区域收集至少24个光谱,选择光谱区域为400-2000 cm-1,该区域被称为生物指纹区。对采集的信息使用MATLAB软件进行主成分分析及线性判别分析（PCA-LDA）,再对获得的图谱信息进行统计学分析。结果:PCA-LDA一维及二维图显示上述分组各组间区分度和组间差异明显（P<0.05）,上述各分组组间协方差矩阵分析显示在生物指纹区的交叉峰亦存在明显的差异。矢量聚类分析显示各分组组间皆存在具有统计学差异的特征性的分子吸光度显着升高或降低处,如在神经母细胞瘤、节细胞神经瘤及节细胞神经母细胞瘤中分组中,相较于节细胞神经瘤及节细胞神经母细胞瘤组,神经母细胞瘤组在Tyrosine(1169cm-1)、DNA/RNA bases(1373cm-1),C-H bending band of lipids(1439cm-1)分子吸光度显着升高（P<0.001）,在carbohydrates(905 cm-1)、amide III(1325cm-1)分子吸光度明显降低（P<0.001）。结论:神经母细胞瘤、节细胞神经母细胞瘤及节细胞神经瘤的生物信息可从拉曼光谱中得到体现。拉曼光谱可以提供不同肿瘤之间、同种肿瘤不同分类之间的具有特征性差异的分子光谱信息。结果表明神经母细胞瘤与研究中的非神经母细胞瘤之间的生物分子组成及结构有明显的不同,拥有各自不同的分子指纹;该类肿瘤不同临床分期之间,不同预后分类之间、不同危险程度之间、肿瘤组织不同的分化程度之间,以及不同的实际预后方面均具有各自的拉曼指纹普。这些指纹普将可能成为区别该类肿瘤病理类型及相关各个分类的依据,具有诊断和分类该类肿瘤的潜在可能性。拉曼指纹普中具有明显差异的分子如酪氨酸、碳水化合物、类胡萝卜素等将可能成为开启该类肿瘤发生发展中相关分子作用机制研究的关键。
赵伟[10]（2016）在《血清蛋白质标记物M/Z 6455.5Da的筛选及对肾母细胞瘤生物学行为影响的研究》文中提出1研究背景与研究目的肾母细胞瘤,这种儿童肾脏疾病,属于腹部恶性实体肿瘤之一,一般在婴幼儿体内发生,治疗后生存率的提高依赖于早期诊断以及合适的综合治疗。当前,这种儿科疾病诊断检查方法以彩色多普勒超声、静脉尿路造影、CT和MRI为主,预后监测的方法以彩色多普勒超声和CT为主,以上检查方法的结果敏感性不高,能够早期诊断肾母细胞瘤的措施不够完善。以根治性手术切除为主的综合治疗是此儿科疾病的主流治疗措施,当然,合理的放化疗是其必要组成部分。早期的肾母细胞瘤疾病的治愈效果基本令人满意,但进入中晚期之后,肾母细胞瘤的治疗效果亟待提高。鉴于肾母细胞瘤的早期诊断、临床病理分期和预后监测对于肾母细胞瘤的治疗至关重要,要求一种更敏感的、更准确的诊断和监测的方法。长期以来对于肾母细胞瘤的治疗主要依靠根治性肾切除术,现在以手术为主,辅助化疗或放疗,I、II期的长期生存率达到90%,III、IV期的长期生存率达到70-80%。尽管肾母细胞瘤患儿经过手术、化疗、放疗等临床治疗后,可以得到一个较高程度的长期生存率,但这些治疗措施后会出现心力衰竭、生殖功能异常、肾功能异常等各种不同程度的临床并发症,甚至在儿童成年后亦会出现严重的并发症。因此,需要研发一种以减少治疗负担和改善治疗结果为主要目标的新颖的治疗肾母细胞瘤方式。本课题包含两部分内容。第一部分,依赖蛋白质组学的技术与方法,寻找出肾母细胞瘤特异性蛋白质标记物M/Z 6455.5Da蛋白质多肽,进一步拓展建立以此为基础的分期诊断模型和预后监测模型;第二部分,人工合成M/Z 6455.5Da蛋白质多肽,通过体内、体外实验,研究其对肾母细胞瘤的生物学行为的影响,在基因水平上,探索M/Z 6455.5Da蛋白质多肽对肾母细胞瘤的作用机制。2材料与方法2.1实验材料2.1.1临床病例资料肾母细胞瘤m/z 6455.5Da蛋白质多肽的筛选。选取肾母细胞瘤患儿48例,入院检查时抽取血清作为肿瘤组;选取年龄、性别与之相当的正常健康儿童54例,常规体检时抽取血清作为正常组肾母细胞瘤m/z 6455.5Da蛋白质多肽分期诊断模型的构建。选取肾母细胞瘤患儿94例,入院检查时抽取血清作为肿瘤组;选取年龄、性别与之相当的正常健康儿童41例,常规体检时抽取血清作为正常组。依据NWTS-5分期,肿瘤组中包含I期23例,II期30例,III期26例和IV期15例,进一步将肿瘤组分为WT-I组,WT-II组,WT-III组和WT-IV组。肾母细胞瘤血清标记物预后监测模型的构建。正常健康儿童血清30例作为正常组,血清样本为体检检查时抽取。肾母细胞瘤患儿40名,此40名肾母细胞瘤患儿中:根治切除瘤体,完全治愈者27名;另外13名肾母细胞瘤患儿,手术治疗和（或）术后治疗效果差。分四次抽取肾母细胞瘤患儿160例血清样本,抽取时间为术前、术后2周、术后2月和术后6月。根据治愈情况,将肾母细胞瘤患儿血清标本进一步分为:术前组40例,治愈组（术后2周）27例,治愈组（术后2月）27例,治愈组（术后6月）27例,未治愈组（术后2周）13例,未治愈组（术后2月）13例,未治愈组（术后6月）13例。所有血清样本均来自河南省郑州大学第一附属医院小儿外科,采集时间2007年1月至2013年12月。以上肾母细胞瘤病例中所有患儿均未行术前化疗,其病理诊断结果均为良好组织学类型,病理样本的诊断均由两位以上的病理学专家检测病理切片后论证。经郑州大学伦理委员会、郑州大学第一附属医院伦理委员会认证批准,所有受试者法定监护人签署有知情同意书。2.1.2人工合成m/z 6455.5Da蛋白质多肽在Life Tein’s Peptide SynTM technology平台,通过FOMC-保护氨基酸固相合成法合成m/z 6455.5Da蛋白质多肽,具体工业生产过程交由Life Tein LLC完成。合成后的m/z 6455.5Da蛋白质多肽的形式为包含55个氨基酸的单链化合物,样品纯度为96.57%。常温下,将m/z 6455.5Da蛋白质多肽溶解在生理盐水中,配制成1μmol/ml药物原液,在-20℃环境下避光保存。2.1.3建立SK-NEP-1细胞系并成瘤裸鼠选择肾母细胞瘤细胞株SK-NEP-1作为研究对象,购自ATCC。建立好的SK-NEP-1细胞系为悬浮半贴壁型,换液间隔时间为3天,传代间隔时间为9天。选择4周龄雌性BALB/c Nude近交系无胸腺小鼠作为研究对象,在标准化SPF级动物实验室内饲养,建立稳定的12小时黑12小时白昼夜更替环境。所有操作均在无菌环境下进行。培养SK-NEP-1细胞,在指数生长期内提取该细胞,重悬浮于血清培养基和BD Matrigel基质胶中,两者比例为1:1,调整SK-NEP-1细胞浓度为1×107个/0.2ml。消毒裸鼠皮肤后,向左侧前肢腋窝皮下接种0.2ml细胞混合液,每3天观测一次,持续2周,建立肾母细胞瘤荷瘤小鼠模型。肾母细胞瘤荷瘤小鼠模型建立完成后,将其划分为实验组与对照组:实验组每天08:00AM时,经由腹腔向荷瘤小鼠注射m/z 6455.5Da蛋白质多肽稀释液,注射剂量为4mg/kg;对照组每天08:00AM时,向荷瘤小鼠模型腹腔注射相应体积的生理盐水。本部分的研究,经郑州大学伦理委员会、郑州大学第一附属医院伦理委员会认证批准。2.1.4主要仪器与试剂Profiling Kit 100 MB-WCX和MALDI-TOF-MS购自于德国Bruker公司;Protein Chip、PBS II+SELDI-TOF-MS、Bio-processor、WCX2 Protein Chip购自于美国Ciphergen Biosystems公司;SPD Speed Vac、2D-LC-LTQ-MS、Thermo酶标仪购自于美国Thermo公司;HPLC购自于日本岛津公司;Applied Biosystems7500 Fast Real-Time PCR System购自于美国ABI公司;BD Influx流式细胞仪购自于美国BD公司。乙腈、尿素等主要蛋白质组学实验试剂购自于美国Sigma公司;细胞培养相关试剂购自于美国Gibco公司;MB-WCX试剂盒购自于德国Bruker公司;PCR和Western blot相关实验试购自于美国Thermo公司。2.2实验方法2.2.1蛋白质组学筛选血清差异性蛋白质血清样解冻完毕后离心取上清液备用。使用弱阳离子试剂盒,按照说明与要求预处理血清样本,处理完毕后,静置供质谱分析。对WCX2 Protein Chip进行预处理,将预处理好的血清样本和U9稀释液充分混匀后,加入WCX2 Protein Chip的孔中。震荡WCX2 Protein Chip,使待测样本与WCX2 Protein Chip充分作用,弃除液体,使用超纯水、SPA溶液清洗结合有待测样本的芯片。干燥后,将其插入工作支架Bio-processor中,记录芯片坐标,准备上机使用。设置好PBS II+SELDI-TOF-MS的参数,将工作支架Bio-processor,装入SELDI-TOF-MS中进行检测,对血清差异性蛋白质进行筛选。采用Ciphergen Biosystems软件3.1版本原始数据进行校正,得到样本中各个m/z及其对应的蛋白质峰值数据,采用ZUCIPDAS网络服务软件分析蛋白质芯片数据。对SELDI-TOF-MS数据进行Wilcoxon秩和检验,P值小于0.01;对各组的SELDI-TOF-MS数据进行t检验,α值等于0.01。分析不同组别之间的数值,从中得到m/z相同、m/z对应的峰值不同的差异性蛋白质,再经过SVM筛选出youden指数最高的组合模型。根据SELDI-TOF-MS筛选结果,选取目标蛋白质表达量较高的血清样本作为分离纯化对象。预处理血清样本后,采用C18反相高压液相色谱柱对其进行分离。分别收集各峰组分,并转入SPD Speed Vac,真空浓缩体积,保存备用。提取纯化后的各组分样本和WCX2 Protein Chip进行预处理,预处理后置入MALDI-TOF-MS进行蛋白质质荷比的检测,找出与前期SELDI-TOF-MS技术筛选的目标蛋白质所在的样本。取纯化后的目标蛋白质进行酶解反应,酶解完成后真空浓缩体积,加入到C18蛋白质样品检测的梯度洗脱柱与2D-LC-LTQ-MS系统的喷雾系统串联,进行肽质荷比图谱的检测得到目标蛋白质的PMFs。最后,将目标蛋白质的肽质量指纹图（PMFs）数据导入SEQUEST程序中,调整系数,搜索Bioworks数据库,经数据库软件计算得到目标蛋白质的氨基酸序列。2.2.3体外细胞学实验选择处于对数生长期的SK-NEP-1细胞接种到24孔培养板,接种1天后,进行细胞计数,作为初始细胞数量。将m/z 6455.5Da蛋白质多肽药物原液加入到24孔培养板中,使每孔终浓度分别为0、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3、1×10-2μmol/ml。以24h为时间间隔,取各组3个复孔的SK-NEP-1细胞进行计数,持续一周,绘制出细胞生长曲线,并计算得到SK-NEP-1细胞的倍增时间。处于对数生长期的SK-NEP-1细胞接种到96孔培养板,接种1天后,将m/z 6455.5Da蛋白质多肽药物原液加入到96孔培养板中,使每孔终浓度分别为0、5、10、15、20、25、30×10-3μmol/m L。24h、48h和72h后,使用酶标仪检测吸光度OD值,计算细胞活性,绘制出细胞毒性作用的校正曲线,并计算m/z 6455.5Da蛋白质多肽在SK-NEP-1细胞系中的24h、48h和72h半数抑制浓度（IC50）和80%抑制浓度（IC80）。选择处于对数生长期的SK-NEP-1细胞,接种到6孔培养板,接种密度为1×106个/孔。接种1天后,将m/z 6455.5Da蛋白质多肽药物原液,加入到6孔培养板内,使每孔终浓度分别为0、IC50（48h半数抑制浓度）和IC80（48h 80%抑制浓度）。2天后,收集空白组、IC50组和IC80组的细胞,使用流式细胞仪,分析凋亡的SK-NEP-1细胞百分比和SK-NEP-1细胞的生长周期选择处于对数生长期的SK-NEP-1细胞,按细胞浓度1×106个/m L接种到2个25cm2培养瓶中。接种1天后,将m/z 6455.5Da蛋白质多肽加入一个培养瓶,使终浓度为IC50,作为实验组;另一瓶作为空白组。48h后,收集空白组与实验组中的细胞提取总RNA后,应用试剂盒逆转录c DNA。然后在Real-time PCR过程中检测空白组和实验组中的待测基因的扩增情况,并使用软件分析PCR数据。选择处于对数生长期的SK-NEP-1细胞,按细胞浓度为1×106个/m L接种到2个75cm2培养瓶中。接种1天后,将m/z 6455.5Da蛋白质多肽加入一个培养瓶,使终浓度为IC50,作为实验组;另一瓶作为空白组。48h后,收集各组瓶内细胞,提取总蛋白,测定蛋白质浓度。制备蛋白质电泳SDS-PAGE胶,将待测蛋白质样品上样进行电泳分离,然后蛋白质印迹转膜。在PVDF膜上孵育抗体,检测PVDF膜,照相分析结果。2.2.5裸鼠模型体内实验选择处于对数生长期的SK-NEP-1细胞,调整细胞浓度为1×107个/0.2m L,接种到裸鼠体内,建立肾母细胞瘤荷瘤小鼠模型。实验组每天经腹腔向裸鼠体内注射m/z 6455.5Da蛋白质多肽,注射剂量为4mg/kg,每日一次,持续6周。对照组注射相应体积的生理盐水。记录荷瘤小鼠体表肿瘤的生长情况,每隔3天,测量体表肿瘤的直径和体积。6周后,颈椎脱臼法处死,解剖瘤体,测量、拍照、记录。解剖对照组与实验组的裸鼠后,石蜡包埋肿瘤组织,切成4um的切片。做免疫组化分析和TUNEL凋亡检测3结果3.1蛋白质组学实验结果儿童肾母细胞瘤患儿血清中,高表达的蛋白质峰值有3个,相反,低表达的9个,经过支持向量机技术（SVM）筛选出约登指数最高的模型,得到m/z6455.5Da的蛋白标记物。该标记物在肿瘤组中低表达,表达强度为881.68±484.86;在正常组高表达,表达强度为3503.27±780.49,差异有统计学意义。在肾母细胞瘤分期诊断模型实验中,分析正常组、肿瘤组、WT-I组、WT-II组、WT-III组和WT-IV组m/z 6455.5Da蛋白标记物的表达量,分别为3305.50±821.90、1279.50±919.17、2579.95±644.57、1116.63±504.98、911.70±294.15、248.76±228.21。对正常组、WT-I组、WT-II组、WT-III组和WT-IV组进行统计学对比,任意两组数据之间差异有统计学意义。确定了M/Z 6455.5Da蛋白质多肽可以作为肾母细胞瘤分期模型的标准。在肾母细胞瘤预后监测模型实验中,分析m/z 6455.5Da蛋白标记物的表达量。正常组表达强度为3619.27±760.79,术前组表达强度为881.36±355.29,差异有统计学意义。术后治愈组为2198.35±741.09（术后2周）、2604.43±886.20（术后2月）、3246.36±859.22（术后6月）;术后未治愈组为863.05±250.79（术后2周）、743.47±375.99（术后2月）、480.72±250.04（术后6月）。m/z6455.5Da蛋白标记物的表达在手术治愈后检测时升高,其中各时期的数据与术前组均有统计学差异,与正常组相比无差异;m/z 6455.5Da蛋白标记物的表达在治疗（包括手术、术后放化疗）失败后检测时降低,其中各时期的数据与与正常组均有统计学差异,与术前组无差异。肾母细胞瘤患儿经过完整手术切除瘤体以及相应的术后化疗完全治愈后,该蛋白质标记物的表达再次升高,并随着术后的恢复逐渐上升到与正常健康儿童的水平相当;姑息性切除肾母细胞瘤患儿的瘤体或者完整切除但术后复发转移的情况中,该蛋白质标记物持续低表达。分离纯化m/z 6455.5Da蛋白质多肽,MALDI-TOF-MS验证其准确无误后,通过2D-LC-LTQ-MS系统检测目标蛋白质,分析获得各种蛋白质片段的氨基酸序列,将这些蛋白质片段的氨基酸序列导入SEQUEST程序并在Bioworks数据库检索,进行匹配重组,获得完整的氨基酸序列。收集正常健康儿童、肾母细胞瘤患儿、其他腹部实体肿瘤患儿的血清样本、影像学检查和预后生存资料,分析m/z 6455.5Da蛋白质多肽的敏感性与特异性。m/z 6455.5Da蛋白质多肽在分期诊断的敏感性上较其它诊断方法具有明显的优势,m/z 6455.5Da蛋白质多肽在预后监测的敏感性与特异性上较其它诊断方法均具有明显的优势。3.2体外细胞实验结果观察组中m/z 6455.5Da蛋白质多肽干预的SK-NEP-1细胞生长趋势,较未受药物干预的对照组的正常的SK-NEP-1细胞差,并呈剂量依赖性特点。根据所绘制的细胞生长曲线,通过帕特森公式,计算得到SK-NEP-1细胞的细胞倍增时间。对照组中SK-NEP-1细胞在进入对数生长期24h后数量达到7.551×105个,细胞倍增时间为21.88小时;浓度为1×10-2μmol/ml的m/z 6455.5Da蛋白质多肽干预的SK-NEP-1细胞,在进入对数生长期24h后数量仅达到1.434×105个,倍增时间延长至67.40小时。根据观察组和对照组吸光度OD值,绘制出细胞毒性抑制率曲线,得到m/z 6455.5Da蛋白质多肽对SK-NEP-1细胞的毒性作用,数据表明m/z 6455.5Da蛋白质多肽阻滞了SK-NEP-1细胞的生长,并呈剂量依赖性和时间依赖性特点。通过流式细胞仪分析细胞凋亡比例,结果显示,m/z 6455.5Da蛋白质多肽干预SK-NEP-1细胞48小时后,空白组、IC50组和IC80组的细胞早期凋亡率分别为8.4%、22.3%和69.6%。在本研究中,我们发现m/z 6455.5Da蛋白质多肽能够有效的抑制SK-NEP-1细胞的增殖。通过流式细胞仪检测分析细胞生长周期,结果显示,m/z 6455.5Da蛋白质多肽干预了SK-NEP-1细胞,生长周期中G2/M期比空白组的SK-NEP-1细胞延长,m/z 6455.5Da蛋白质多肽诱导了SK-NEP-1细胞G2/M期的阻滞。在Real-time PCR过程中检测PCNA、Bcl-2和Bax的扩增表达情况,结果表明:m/z 6455.5Da蛋白质多肽干预了SK-NEP-1细胞后,下调了PCNA、Bcl-2的表达,同时上调了Bax的表达,验证了m/z 6455.5Da蛋白质多肽抑制SK-NEP-1细胞增殖的作用。同时对Wnt Pathway,Hedgehog Pathway,TGF-βPathway和Growth factor recepator Pathway这四条信号通路的关键蛋白进行检测,结果表明:m/z 6455.5Da蛋白质多肽干预了SK-NEP-1细胞后,下调了β-catenin的表达。m/z 6455.5Da蛋白质多肽抑制SK-NEP-1细胞增殖的过程中,β-catenin/Wnt Pathway发挥了重要的作用。Western blotting试验验证了PCNA、Bcl-2、Bax和β-catenin蛋白的蛋白质的表达情况,与PCR结果一致。3.3裸鼠模型体内实验结果m/z 6455.5Da蛋白质多肽干预的肿瘤组的肿瘤体积和直径,相比对照组缩小,m/z 6455.5Da蛋白质多肽在裸鼠体内具有明显的抗肾母细胞瘤作用。HE染色切片显示,对照组中肿瘤组织生长良好,观察组中肿瘤组织出现大片坏死,肿瘤组织结构受到破坏;TUNEL染色后,分别在荧光显微镜下观察,治疗组肿瘤细胞出现大片凋亡。免疫组化检测果显示,经过m/z 6455.5Da蛋白质多肽治疗后,肿瘤组织中PCNA低表达、β-catenin低表达、Bcl-2低表达,Bax高表达4结论m/z 6455.5Da蛋白质多肽是从人血清中分离出来的肾母细胞瘤特异性标记物,是由55个氨基酸组成的长肽,可以作为肾母细胞瘤分期诊断模型和预后监测模型的生物学标记物。同时,m/z 6455.5Da蛋白质多肽在分期诊断的敏感性上较其它诊断方法具有明显的优势,在预后监测的敏感性与特异性上较其它诊断方法均具有明显的优势。m/z 6455.5Da蛋白质多肽可以为肾母细胞瘤疾病的分期诊断与预后监测提供一种新的实验诊断方法。m/z 6455.5Da蛋白质多肽是一种能够有效诱导肾母细胞瘤细胞凋亡、抑制肾母细胞瘤组织生长的肿瘤抑制肽。初步探索m/z 6455.5Da蛋白质多肽抗肾母细胞瘤的作用机制,可能是m/z 6455.5Da蛋白质多肽调控了肾母细胞瘤细胞Wnt信号通路,导致其中关键蛋白β-catenin的表达下调,从而导致一些列复杂的细胞生物学变化。这种新的发现在研究肾母细胞瘤的治疗新方法、新手段方面潜在着重大意义,可能催生一种新型的抗肾母细胞瘤的蛋白质多肽药物的问世。
二、肾母细胞瘤影象学检查与手术及病理对照（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肾母细胞瘤影象学检查与手术及病理对照（论文提纲范文）
（1）CXCR4、RGS4及RAGE在小儿肾母细胞瘤中的表达及临床意义（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 两组CXCR4、RGS4及RAGE表达情况比较 |
| 2.2 CXCR4、RGS4及RAGE表达与肾母细胞瘤临床病理特征的关系 |
| 2.3 影响肾母细胞瘤患者预后死亡的单因素分析 |
| 2.4 影响肾母细胞瘤患者预后死亡的多因素分析 |
| 3 讨论 |
（2）超声造影在儿童腹膜后常见恶性肿瘤中应用研究初探（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 仪器与方法 |
| 1.3 图像分析 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 神经母细胞瘤、肾母细胞瘤、节细胞神经母细胞瘤三组病例一般资料 |
| 2.2 常规超声表现比较 |
| 2.3 超声造影结果比较 |
| 2.4 超声造影时间强度曲线定量参数结果 |
| 2.5 超声造影图像示例 |
| 2.6 超声造影剂不良反应发生率 |
| 3 讨论 |
| 3.1 常规超声特点探讨 |
| 3.2 超声造影特点分析 |
| 3.3 超声造影定量参数分析 |
| 3.4 不良反应发生率及处理 |
| 3.5 本研究的局限性 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 超声造影在儿童腹膜后常见恶性肿瘤中的应用进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表论文 |
（3）胎儿期中胚层肾瘤超声特征及病理对照分析（论文提纲范文）
| 资料与方法 |
| 一、对象 |
| 二、仪器与方法 |
| 结果 |
| 一、产前超声图像特征 |
| 二、产前MRI特征 |
| 三、临床结局、病理诊断、随访及预后 |
| 讨论 |
| 一、胎儿期中胚层肾瘤临床与超声影像特征 |
| （一）二维超声特征 |
| （二）彩色多普勒超声特征 |
| （三）伴发异常 |
| 1. 羊水多： |
| 2. 胎儿水肿： |
| 二、鉴别诊断 |
| 1.肾母细胞瘤： |
| 2.肾区肿块： |
| 3. 神经母细胞瘤： |
| 三、产前超声影像表现与病理组织学类型相关性 |
| 四、产科处理、治疗及预后 |
（4）淋巴结受累与取样数目对肾母细胞瘤患儿预后的影响（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究设计与对象 |
| 1.2 诊断标准及治疗方案 |
| 1.3 纳入排除标准 |
| 1.4 随访 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般特征 |
| 2.2 淋巴结受累对WT患儿预后的影响 |
| 2.3 淋巴结取样数量与淋巴结阳性率的关系 |
| 2.4 淋巴结取样数量对WT患儿预后的影响 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 淋巴结活检在儿童Wilms瘤分期及预后判断中的价值 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间已发表的文章 |
（5）靶向纳米复合物AS1S17499-USPIO-CD163调控肿瘤相关巨噬细胞对肾母细胞瘤的影响研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 第一部分：肿瘤相关巨噬细胞在肾母细胞瘤中的作用及机制研究 |
| 前言 |
| 材料及方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分：靶向纳米复合物AS1517499-USPI0-GD163的制备及调控肿痛相关巨噬细胞极化的作用研究 |
| 前言 |
| 材料及方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附表 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述：肿瘤相关巨噬细胞作为抗肿癯的靶点的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表学术论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况 |
| 外文论文1 |
| 外文论文2 |
（6）保留肾上腺在治疗儿童肾母细胞瘤中的初步探索（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 手术方式 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述:肾母细胞瘤综合治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表文章 |
（7）Apelin蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达及与临床指标相关性研究（论文提纲范文）
| 主要英文缩略词索引 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 样本采集与保存 |
| 2.3 主要试剂与仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.5 结果判定 |
| 2.6 统计学方法 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 基本临床资料 |
| 3.2 Apelin在肿瘤组织、瘤旁组织的表达情况 |
| 3.3 肾母细胞瘤中 Apelin 蛋白在各临床指标的表达情况 |
| 3.4 肾母细胞瘤中 Apelin 蛋白表达与临床分期的相关性分析 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间科研成果 |
| 致谢 |
（8）儿童肾母细胞瘤临床资料及预后的影响因素的研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 研究内容 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 筛选标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 诊断 |
| 2.2 分期 |
| 2.3 危险度分组 |
| 2.4 治疗方案 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.6 疗效评价 |
| 2.7 实验室检测 |
| 2.8 检查报告及影响学资料 |
| 2.9 临床资料收集 |
| 3 质量控制 |
| 3.1 资料来源控制 |
| 3.2 随访安排 |
| 4 统计学方法 |
| 5 技术路线图 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（9）拉曼光谱结合统计学分析神经母细胞瘤及相关肿瘤成分的差异表达（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 标本的采集 |
| 1.2 拉曼光谱的测量 |
| 1.3 数据的处理及分析 |
| 2 结果 |
| 3 结果分析与讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）血清蛋白质标记物M/Z 6455.5Da的筛选及对肾母细胞瘤生物学行为影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 引言 |
| 第一部分：血清标记物M/Z 6455.5DA蛋白质多肽的筛选与诊断模型的构建 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 6 参考文献 |
| 第二部分：M/Z 6455.5DA蛋白质多肽对肾母细胞瘤生物学行为影响的研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 6 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 肿瘤治疗肽的研究进展 |
| 1 摘要 |
| 2 前言 |
| 3 肿瘤治疗肽的现状 |
| 4 大分子药物传递策略 |
| 5 肿瘤靶向和传感膜 |
| 6 研究前景展望 |
| 7 参考文献 |
| 个人简历及在读期间研究成果 |
| 致谢 |
四、肾母细胞瘤影象学检查与手术及病理对照（论文参考文献）
- [1]CXCR4、RGS4及RAGE在小儿肾母细胞瘤中的表达及临床意义[J]. 胡传兵,韩暖,于宝华,田俊严,孙劲松. 分子诊断与治疗杂志, 2021(09)
- [2]超声造影在儿童腹膜后常见恶性肿瘤中应用研究初探[D]. 徐红. 重庆医科大学, 2021(01)
- [3]胎儿期中胚层肾瘤超声特征及病理对照分析[J]. 王颖芳,杨小红,赵胜,刘思,杨帆,张晓燕,兰为顺. 中华医学超声杂志(电子版), 2021(05)
- [4]淋巴结受累与取样数目对肾母细胞瘤患儿预后的影响[D]. 马伟. 重庆医科大学, 2021(01)
- [5]靶向纳米复合物AS1S17499-USPIO-CD163调控肿瘤相关巨噬细胞对肾母细胞瘤的影响研究[D]. 田凯旋. 山东大学, 2020(10)
- [6]保留肾上腺在治疗儿童肾母细胞瘤中的初步探索[D]. 蒋鸿飞. 重庆医科大学, 2020(12)
- [7]Apelin蛋白在儿童肾母细胞瘤中的表达及与临床指标相关性研究[D]. 朱雷. 南华大学, 2020(01)
- [8]儿童肾母细胞瘤临床资料及预后的影响因素的研究[D]. 卢娜娜. 新疆医科大学, 2020(07)
- [9]拉曼光谱结合统计学分析神经母细胞瘤及相关肿瘤成分的差异表达[D]. 李超群. 华中科技大学, 2019(03)
- [10]血清蛋白质标记物M/Z 6455.5Da的筛选及对肾母细胞瘤生物学行为影响的研究[D]. 赵伟. 郑州大学, 2016(01)