人木糖基转移酶论文-周佩娜,李阳,蒲天珍,余坤,张秀桥

人木糖基转移酶论文-周佩娜,李阳,蒲天珍,余坤,张秀桥

导读:本文包含了人木糖基转移酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:霍山石斛,β-1,4-木糖基转移酶,基因克隆,生物信息学分析

人木糖基转移酶论文文献综述

周佩娜,李阳,蒲天珍,余坤,张秀桥[1](2019)在《霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因克隆及生物信息学分析》一文中研究指出目的克隆霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因,并进行生物信息学、密码子偏性分析。方法根据霍山石斛转录组数据获得的IRX9基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR技术得到IRX9基因cDNA的全长序列,并进行生物信息学分析。结果霍山石斛IRX9基因全长1 553 bp,包含一个长度为1 047 bp的开放阅读框,编码348个氨基酸,理论相对分子质量为39 350,等电点为7.26,为不含信号肽的亲水性稳定蛋白,定位于质膜,具有多个磷酸化位点和糖基化位点。系统进化树表明,该序列与同科植物铁皮石斛的同源性最高,且具有GT-A超家族的保守区域"DXD"。密码子偏性分析表明,该基因偏好使用以A/T结尾的密码子,具有27个偏性密码子,烟草为该基因最适合的外源表达宿主。结论成功克隆IRX9基因,为从分子水平调控霍山石斛的生长发育和改善药材产量和品质提供理论基础。(本文来源于《中草药》期刊2019年05期)

高世超,钟凤林,林义章,赵瑞丽,林俊芳[2](2014)在《青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的克隆及在模拟酸雨胁迫下的表达分析》一文中研究指出由糖基转移酶催化产生的次生代谢物质对植物抵御和适应环境的变化起着重要作用。为探讨青花菜在酸雨胁迫下糖基转移酶的表达变化,对青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA序列全长进行克隆,并对其进行生物信息学和表达分析。结果表明:青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA全长为1 550 bp,开放阅读框为1 155 bp,编码384个氨基酸,推测分子式为C1964H3044N558O567S11,分子量为43 897.8,没有信号肽。系统进化树分析结果表明,该青花菜基因与拟南芥聚类关系最近。利用实时荧光定量PCR研究模拟酸雨胁迫下β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的表达量,结果显示该基因的表达量在模拟酸雨胁迫初期显着增大,随着时间的延长,又开始下降,这表明其在青花菜抗酸雨胁迫中发挥了作用。(本文来源于《热带作物学报》期刊2014年04期)

赵婷婷,李平[3](2011)在《链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病大鼠肾组织木糖基转移酶和N-乙酰基转移酶基因的表达》一文中研究指出目的:糖尿病肾病是糖尿病常见的微血管并发症,其发病机制非常复杂,目前尚未完全阐明,大量研究表明糖尿病肾病蛋白尿产生机理主要与肾小球电荷屏障被破坏,即肾小球基底膜阴离子位点减少有关。硫酸乙酰肝素(HS)是硫酸乙酰肝素蛋白多糖带多阴离子的侧链,是构成基底膜电荷屏障的主要成分,在蛋白尿产生的过程中具有重要作用。木糖基转移酶(xylosyltransferase,XT)是合成HS的起始酶,在组织细胞中表达,在它的催化下,将一分子木糖基从尿苷二磷酸-木糖转移连接到核心蛋白的丝氨酸-甘氨酸序列的丝氨酸残基的羟基上,形成O-糖苷键。然后在N-乙酰基转移酶(N-acetyl-galactosaminyltransferase,GNT)等酶的作用下形成HS。本文通过单侧肾切除与链脲佐菌素联合诱导制备糖尿病肾病大鼠模型,观察肾组织病理改变,及肾组织XT1、XT2和GNT基因表达水平,为深入探讨DN发病机制提供线索。方法:健康雄性wistar大鼠顺应性喂养3天,随机分为2组:假手术对照组、单侧肾切除+STZ腹腔注射造模模型组。动物每4周检测体重、血糖、连续给药20周处死大鼠,测定血脂、血清总蛋白、白蛋白及肾功的变化;观察肾组织肾小球及肾小管间质病理变化并进行半定量分析;RT-PCR方法检测肾皮质XT1、XT2和GNT基因表达水平并进行半定量分析。结果:模型组大鼠系膜基质中度至重度增生,基底膜增厚,部分区域出现局灶性肾小球硬化,部分肾小管扩张,部分管腔内可见蛋白样物质或蛋白管型,部分区域出现肾小管萎缩。间质可见散在或成片淋巴细胞和单核细胞浸润及纤维化。模型组大鼠肾小球硬化指数及肾小管纤维化指数与空白组相比显着升高,均为P<0.01。与假手术组比较,模型组大鼠肾皮质XT1、XT2和GNT基因表达量均增加(p<0.05)。结论:单侧肾切除联合STZ诱导的大鼠模型符合糖尿病肾脏病变特点,肾皮质XT1、XT2和GNT显着增加,这可能是导致硫酸乙酰肝素合成增加的重要原因。(本文来源于《中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2011年学术年会暨2011年国际中西医结合肾脏病学术会议论文汇编》期刊2011-11-22)

石宏,王洁,王旭,顾洪涛,侯亚丽[4](2008)在《靶向抑制人木糖基转移酶-I基因的shRNA真核表达载体的构建》一文中研究指出目的构建靶向抑制人木糖基转移酶-Ⅰ(XT-Ⅰ)基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,为探讨唾液腺肿瘤性肌上皮细胞合成及分泌蛋白多糖(PG)的研究奠定基础。方法根据GenBank提供的XT-Ⅰ基因序列,设计短链寡核苷酸,化学合成后经退火形成双链DNA片段,克隆到Pgenesil-1载体中,构建shRNA真核表达载体WJ1-WJ6,行酶切及核酸测序鉴定;将构建的XT-Ⅰ特异性shRNA表达载体转染体外培养的人唾液腺腺样囊性癌细胞株ACC-M,在荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术检测转染效率,并采用半定量RT-PCR和Western blot分别检测转染后细胞XT-Ⅰ基因mRNA和蛋白表达水平的变化。结果经酶切、连接后构建的6个质粒命名为WJ1、WJ2、WJ3、WJ4、WJ5、WJ6。酶切及核酸测序鉴定证实,构建的shRNA表达载体WJ1-WJ6序列正确;转染WJ1-WJ6后ACC-M细胞均可表达绿色荧光;流式细胞术测定转染效率平均为50.26%;RT-PCR结果显示,WJ3显着抑制XT-Ⅰ mRNA的表达,抑制率为72.39%;Western blot结果显示,WJ3有效抑制XT-Ⅰ的蛋白表达,抑制率为70.18%。结论成功构建靶向抑制XT-Ⅰ的shRNA真核表达载体WJ1-WJ6,其中WJ3可高效抑制XT-Ⅰ基因mRNA及蛋白水平的表达,为唾液腺肿瘤中PG的RNAi研究奠定了基础。(本文来源于《华西口腔医学杂志》期刊2008年02期)

石宏,王洁,董福生,于利洁,王旭[5](2007)在《抗人木糖基转移酶蛋白多克隆抗体的制备及鉴定》一文中研究指出目的:制备兔抗人木糖基转移酶(XT-I)蛋白的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:应用DNAssist软件分析XT-I蛋白的抗原表位,从中选择优势抗原表位,通过引物优化设计,PCR拼接并扩增相应区域DNA片段,将其插入原核表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌ER2566,获得融合表达产物。将纯化的可溶性蛋白GST-XT作为抗原,免疫新西兰大白兔,制备抗XT-I蛋白的多克隆抗体,ELISA间接法测定效价。GST柱亲和层析法纯化抗体,采用Westernblot法鉴定该抗体的特异性和生物学活性。结果:确定XT-I的N端氨基酸序列QKHQPELAKKPPSRQKELLKRKLEQQEKGKG(175-205)为抗原表位,成功构建了重组表达载体,表达融合蛋白GST-XT,并以其为抗原,免疫新西兰大白兔,制备了抗XT-I蛋白的多克隆抗体。ELISA证实其效价高达1:640000;Westernblot结果显示:该抗体可与人涎腺腺样囊性癌肺转移细胞株ACC-M中表达的XT-I蛋白特异性结合。结论:获得具有高特异性的兔抗人XT-I蛋白多克隆抗体,为涎腺肿瘤性肌上皮细胞蛋白多糖生物合成的研究提供了特异性抗体。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2007年11期)

罗苇,王峥[6](2007)在《阿霉素肾病模型鼠肾组织木糖基转移酶和乙酰肝素酶基因的表达》一文中研究指出目的研究肾病模型鼠肾组织木糖基转移酶(xylosyltransferase,XT-Ⅰ)和乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达水平并观察其与尿蛋白量的关系。方法将大鼠随机分为正常对照组、肾病模型7d组、14d组、21d组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对4组大鼠肾组织中XT-Ⅰ、Hpa基因表达进行半定量研究,并观察其与尿蛋白量的关系。结果肾病模型7d组、14d组、21d组与正常对照组之间比较,XT-Ⅰ表达量增加(P<0.05),肾组织XT-Ⅰ表达水平增高与尿蛋白的增加呈正相关关系(r=0.760,P<0.05);肾病模型7d组、14d组、21d组与正常对照组之间比较,HPa表达量增加(P<0.05),各组肾组织HPa表达水平增高与尿蛋白的增加呈正相关关系(r=0.757,P<0.05)。结论Hpa在大鼠肾病模型蛋白尿的产生中起重要作用,同时,XT-Ⅰ的增加可能导致硫酸乙酰肝素(HS)的合成增加。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2007年06期)

人木糖基转移酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

由糖基转移酶催化产生的次生代谢物质对植物抵御和适应环境的变化起着重要作用。为探讨青花菜在酸雨胁迫下糖基转移酶的表达变化,对青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA序列全长进行克隆,并对其进行生物信息学和表达分析。结果表明:青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA全长为1 550 bp,开放阅读框为1 155 bp,编码384个氨基酸,推测分子式为C1964H3044N558O567S11,分子量为43 897.8,没有信号肽。系统进化树分析结果表明,该青花菜基因与拟南芥聚类关系最近。利用实时荧光定量PCR研究模拟酸雨胁迫下β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的表达量,结果显示该基因的表达量在模拟酸雨胁迫初期显着增大,随着时间的延长,又开始下降,这表明其在青花菜抗酸雨胁迫中发挥了作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

人木糖基转移酶论文参考文献

[1].周佩娜,李阳,蒲天珍,余坤,张秀桥.霍山石斛β-1,4-木糖基转移酶(IRX9)基因克隆及生物信息学分析[J].中草药.2019

[2].高世超,钟凤林,林义章,赵瑞丽,林俊芳.青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的克隆及在模拟酸雨胁迫下的表达分析[J].热带作物学报.2014

[3].赵婷婷,李平.链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病大鼠肾组织木糖基转移酶和N-乙酰基转移酶基因的表达[C].中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2011年学术年会暨2011年国际中西医结合肾脏病学术会议论文汇编.2011

[4].石宏,王洁,王旭,顾洪涛,侯亚丽.靶向抑制人木糖基转移酶-I基因的shRNA真核表达载体的构建[J].华西口腔医学杂志.2008

[5].石宏,王洁,董福生,于利洁,王旭.抗人木糖基转移酶蛋白多克隆抗体的制备及鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志.2007

[6].罗苇,王峥.阿霉素肾病模型鼠肾组织木糖基转移酶和乙酰肝素酶基因的表达[J].四川大学学报(医学版).2007

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