导读:本文包含了葡萄糖剥夺论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:小鼠海马神经元,原代培养,茶多酚,细胞内钙离子浓度
葡萄糖剥夺论文文献综述
严飞平,陈晨,李志磊,霍国进,冯毅[1]（2019）在《茶多酚对氧葡萄糖剥夺/再恢复干预后原代培养的小鼠海马神经元内钙离子浓度的影响》一文中研究指出目的探讨茶多酚对氧葡萄糖剥夺/再恢复干预后原代培养的小鼠海马神经元内钙离子浓度的影响及机制。方法分离C57BL/6J雄性小鼠海马神经元并进行原代培养,然后分为对照组、氧葡萄糖剥夺/再恢复干预(模型)组和茶多酚组。对照组常规进行海马神经元原代培养,模型组利用氧葡萄糖剥夺/再恢复制作模型,茶多酚组在造模后应用4 mg/ml的茶多酚处理。利用Fluo-3AM钙离子特异性探针标记神经元内游离钙离子,利用流式细胞仪进行检测钙离子浓度;免疫印迹法检测神经元Cav1.2蛋白的表达水平;利用全细胞模式膜片钳技术检测神经元L-型电压依赖型钙离子通道(LTCC)的电流。结果与对照组相比,氧葡萄糖剥夺/再恢复干预后,神经元内钙离子浓度明显增高(P<0.05),神经元Cav1.2蛋白表达水平明显增高(P<0.05)、LTCC电流明显增大(P<0.05);茶多酚明显抑制上述作用(P<0.05),但未恢复到对照组水平(P<0.05)。结论茶多酚可减少氧葡萄糖剥夺/再恢复干预后原代培养小鼠海马神经元内钙离子,其作用机制可能与降低Cav1.2表达、减弱LTCC功能有关。(本文来源于《中国临床神经外科杂志》期刊2019年10期）
张鹏,张鹏飞,高琛,秦家振,戴宜武[2]（2018）在《条件培养基对氧-葡萄糖剥夺诱导皮层神经元死亡的保护作用》一文中研究指出目的研究脐带间充质干细胞源条件培养基(CM)对氧-葡萄糖剥夺(OGD)诱导皮层神经元死亡的保护作用。方法培养10 d的皮层神经元更换培养基为EBSS平衡盐溶液,后置于37℃低氧(N2∶CO2∶O2=94%∶5%∶1%)培养箱内孵育,4 h后恢复正常条件培养,同时更换为条件培养基作用20 h,用Hoechst33342/PI的染色方法检测其死亡情况。结果原代培养的UCMSCs传至第叁代时,细胞形态为长梭形的纤维状,折光性好;在培养的皮层神经元建立OGD模型,Control组细胞死亡率为(5.85%±0.41)%,OGD组细胞死亡率(35.6%±1.75)%,Control组与OGD组比较差异有统计学意义(P<0.01),OGD模型建立成功;复氧0 h时给予脐带间充质干细胞源条件培养基,作用24 h后,OGD+CM组细胞死亡率为(27.98±2.19)%,OGD+CM组与OGD组比较差异有统计学意义(P<0.05),CM可使皮层神经元的死亡率降低21.40%。结论脐带间充质干细胞源条件培养基对氧-葡萄糖剥夺诱导皮层神经元具有保护作用。(本文来源于《中国实用医药》期刊2018年12期）
王贝芬[3]（2018）在《抑制RAC1/NOX2通路保护葡萄糖剥夺损伤的视网膜感光细胞》一文中研究指出目的:研究RAC1/NOX2通路抑制剂NSC/APO保护葡萄糖剥夺损伤的视网膜感光细胞(661W)的分子机制。方法:通过对661W细胞进行葡萄糖剥夺,来模拟细胞急性能量衰竭,应用MTT及PI/Hoechest染色法检测细胞活性及细胞凋亡率,应用RAC1/NOX2通路抑制剂NSC/APO处理葡萄糖剥夺损伤的661W细胞,观察细胞活性及凋亡率的变化;应用DCFH-DA探针、Western Blot分别检测661W细胞内ROS变化及氧化应激标志物HO-1的表达情况;应用Western Blot从蛋白表达水平检测RAC1、NOX2、MAPK及NF-κB信号通路的活化。结果:葡萄糖剥夺导致661W细胞内ROS、氧化应激标志物HO-1水平升高,细胞活性降低、凋亡率增加,通过使用抑制剂NSC/APO阻断RAC1/NOX2通路可以保护损伤的661W细胞。葡萄糖剥夺导致NOX2核心亚基gp91、促凋亡蛋白Bax、细胞凋亡相关蛋白Caspase3表达水平增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平下降,线粒体膜电位异常,而阻断RAC1/NOX2通路,可减缓以上变化趋势,保护感光细胞。另外,葡萄糖剥夺导致MAPK信号通路叁条子通路ERK、P38、JNK均被激活,活化蛋白p-ERK、p-P38、p-JNK表达增加,使用MAPK子通路特异性抑制剂均可保护葡萄糖剥夺损伤的661W细胞。此外,葡萄糖剥夺导致NF-κB信号激活,抑制NF-κB信号通路可以显着保护葡萄糖剥夺损伤的661W细胞。结论:急性能量衰竭可以引起caspase依赖性细胞凋亡,RAC1/NOX2是细胞凋亡级联中的上游信号,阻断RAC1/NOX2通路可以保护损伤的感光细胞。NOX2信号激活后,引起MAPK/NF-κB信号的激活。抑制MAPK家族成员或NF-κB可以有效地保护葡萄糖剥夺损伤的感光细胞。本研究可能为寻求治疗缺血性视网膜疾病所致急性能量衰竭引起感光细胞损伤的神经保护新药提供新的思路和方法。(本文来源于《吉林大学》期刊2018-04-01）
王亮,马远征,徐小文,张妍,宋晓艳[4]（2017）在《慢性睡眠剥夺对大鼠葡萄糖稳态的影响》一文中研究指出目的评估慢性睡眠剥夺和大鼠血糖稳态之间的关系。方法将24只大鼠随机分为慢性睡眠剥夺(CSD)组和对照组,CSD组采用改良水平台法(MMPM)建立慢性睡眠障碍模型,干预3个月后接受糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT),并检测体重、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酐、血脂和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果干预后3个月,两组增重衰减,CSD组血糖水平显着高于对照组(P<0.01)。CSD组较对照组胰岛素抵抗指数和胰岛素耐受显着增加(P<0.01)。两组AST、ALT、肌酐和大部分血脂参数没有显着性差异(P>0.05)。结论慢性睡眠剥夺对大鼠葡萄糖稳态如葡萄糖耐受不良和胰岛素抵抗有显着影响。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2017年23期）
齐杰[5]（2017）在《舒巴坦通过激活星形胶质细胞p38 MAPK通路上调GLT-1的表达发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡的作用》一文中研究指出谷氨酸是中枢神经系统一种重要的兴奋性神经递质,对维持正常脑功能至关重要,但突触间隙过高浓度的谷氨酸同时具有很强的神经毒性。脑缺血和再灌注后,谷氨酸的过度释放或谷氨酸转运蛋白对谷氨酸清除不足可导致谷氨酸在突触间隙中堆积,突触间隙过量的谷氨酸作用于神经元突触后膜的离子型和代谢型谷氨酸受体,可引发兴奋性毒性,例如钙超载,钠超载,自由基产生和凋亡等。脑内细胞外没有代谢谷氨酸的酶,脑内细胞外谷氨酸的清除主要依靠高亲和力兴奋性氨基酸转运体系统(excitatory amino acid transporters,EAATs)来维持。胶质细胞谷氨酸转运体-1(glial glutamate transporter-1,GLT-1)在清除细胞外谷氨酸中的作用最为重要。多种证据表明,脑缺血预处理或药物可以通过上调GLT-1的表达及增强GLT-1对谷氨酸的摄取活性,对神经元的缺血损伤发挥保护作用。Rothstein等报道,在体实验中,β-内酰胺抗生素如头孢曲松可选择性地促进GLT-1在脑内的表达。体外实验中,头孢曲松可显着激活人胎儿星形胶质细胞或COS7细胞系中的GLT-1启动子,进而促进GLT-1的上调。但大量使用β-内酰胺抗生素,会带来例如菌群失调和细菌耐药性等多种副作用。舒巴坦是一种非典型的β-内酰胺抗生素,抗菌能力很弱,临床上常作为其它β-内酰胺类抗生素的增效剂。我室最近的研究表明,在大鼠全脑缺血模型中,舒巴坦预防性给药,可以通过上调海马CA1区GLT-1的表达减轻锥体神经元的缺血性损伤。这些发现为应用舒巴斯坦预防和治疗脑缺血损伤的临床研究提供了有益的基础和参考。然而,在体实验很难证明舒巴坦对星形胶质细胞GLT-1表达的直接作用,因此有必要利用星形胶质细胞培养技术,体外研究舒巴坦对星形胶质细胞GLT-1表达的直接作用。此外,进一步研究舒巴坦上调GLT-1的信号转导通路,可更好地理解舒巴坦在脑内的作用,促进舒巴坦作为抗脑缺血药物的临床开发和应用研究。p38丝裂原活化蛋白激酶(p 38 mitogen-activated protein kinases,p 38 mapk)是一种重要的细胞内信号转导系统,参与一系列生理和病理过程,包括细胞死亡和存活。p38mapk的激活如一把双刃剑,p38mapk的过度激活可促进脑缺血后的神经元死亡,但也有充分证据表明p38mapk的适度激活对缺血组织器官的保护作用。我室最新研究表明,全脑缺血预处理可诱导大鼠海马ca1区p38mapk适度激活,同时p38mapk的特异性抑制剂sb203580或反义寡核苷酸可抑制全脑缺血预处理诱导的大鼠脑缺血耐受和海马ca1区glt-1上调。这些研究结果表明,p38mapk的适度激活可能介导glt-1表达的上调,并诱导脑缺血耐受。因此,本实验旨在研究p38mapk信号通路在舒巴坦诱导的海马星形胶质细胞glt-1表达上调和抗氧葡萄糖剥夺(oxygenglucosedeprivation,ogd)模拟缺血损伤过程中的作用。第一部分舒巴坦发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡和上调海马星形胶质细胞glt-1表达的作用目的:应用神经元星形胶质细胞共培养技术,观察舒巴坦对ogd引起的海马神经元死亡的影响,探讨舒巴坦的抗ogd引起的神经元损伤作用。应用单纯星形胶质细胞培养技术,通过观察在ogd状态下,舒巴坦预孵育对星形胶质细胞glt-1表达的影响,证明星形胶质细胞glt-1表达上调在舒巴坦抗ogd中的作用。方法:为观察舒巴坦对ogd引起的海马神经元死亡的影响,取24h内新生鼠海马行神经元星型胶质共培养10天后,细胞随机分为4组;为观察舒巴坦预孵育对ogd后星形胶质细胞glt-1表达的影响,取1-2天新生鼠海马行单纯星形胶质细胞培养,并将细胞传至3-4代,最后一代细胞长满瓶底后,将细胞随机分为3组(4组中的前3组),4组如下:(1)对照组:正常培养基培养细胞48h+2h+24h,以上时间段分别对应下面实验分组中实验处理的时间段,48h对应舒巴坦孵育的时间段,2h对应ogd的时间段,24h对应ogd复氧后至收集细胞的时间段。(2)ogd组:首先细胞正常培养48h后(对应下一组舒巴坦孵育时间段),进行2h的ogd后,更换为正常培养基继续培养24h。(3)舒巴坦+ogd组:共培养细胞用加入舒巴坦培养液中孵育48h,之后行ogd,方法同ogd组。同时设溶剂对照组,用ns代替舒巴坦。根据舒巴坦的剂量,进一步分为5μm,25μm和125μm3个亚组,以观察其量效关系。(4)舒巴坦对照组:这一实验组只用于共培养中,观察细胞存活情况。培养基中加入舒巴坦生理盐溶液(100×),在舒巴坦终浓度为125μm下孵育48小时,换成正常培养基继续培养2h+24h。共培养的实验各组于ogd复氧后24h或相应时间点收集细胞,赫克斯特/碘化丙啶(hoechst/propidiumiodide,ho/pi)染色法观察计数神经元死亡百分率,mtt法观察细胞活力,分析舒巴坦对ogd所致的海马神经元死亡及损伤的影响。单纯星形胶质细胞培养的实验各组于ogd复氧后12h和24h两个时间点或相应时间点收集星形胶质细胞,应用免疫细胞化学和westernblot两种方法观察舒巴坦对ogd后星形胶质细胞glt-1表达的影响。结果:1ho/pi染色显示,对照组死亡细胞百分比是9.2±0.5%。2hogd可以使死亡细胞的百分比增加到71.6±2.4%,与对照组相比,死亡细胞的百分比明显提高;而且明场照片与ho/pi染色荧光图片合成后可以看出,死亡细胞主要为神经元,说明2h的ogd可以使神经元的死亡百分率明显提高。舒巴坦预孵育可以剂量依赖地降低海马神经元的死亡率,125μm的舒巴坦具有最好的药效,125μm的舒巴坦预孵育可以将死亡细胞的百分比降低至15.6±1.0%。ns溶剂对照组与ogd组相比,死亡细胞的百分比无明显差异,说明溶剂不能改变ogd引起的海马神经元死亡。以上结果共同说明,2h的ogd可以明显增加神经元的死亡,而舒巴坦有效的阻止了ogd引起的海马神经元死亡,此效应呈现良好的剂量依赖性。与对照组相比,舒坦坦对照组中,正常共培养中加入最大浓度125μm的舒巴坦并未引起死亡细胞的百分比的改变,说明最大浓度125μm的舒巴坦无明显损伤作用。2mtt检测结果显示:与正常对照组相比,2h的ogd可显着降低共培养的细胞活力;而48h的舒巴坦预孵育可以剂量依赖地增加共培养的细胞活力,并呈现明显的剂量依赖性。舒巴坦对照组的细胞活力与正常对照组相比无明显差异,说明最大浓度125μm的舒巴坦无明显损伤作用。以上结果表明,舒巴坦可剂量依赖的对抗氧葡萄糖剥夺引起海马神经元死亡和损伤。3免疫细胞化学结果显示:在对照组,glt-1广泛表达于星形胶质细胞。与对照组相比,ogd组的glt-1表达明显下调,约为正常组的1/2-2/3。与ogd组相比,舒巴坦预孵育可以显着上调ogd处理后的星形胶质细胞glt-1的表达,这种上调呈明显的剂量依赖性,最大剂量125μm舒巴坦可使其表达增加至对照组的1.5-2倍,ogd组的2-3倍,并且这种上调可持续到ogd后24h,这一时间覆盖了ogd后神经元死亡的时间,有利于其发挥神经元保护作用。与ogd组相比,舒巴坦的溶剂对照组glt-1的表达无明显变化。4westernblot结果显示:对照组glt-1有一定的基础表达。与对照组相比,ogd组的glt-1表达明显下调。与ogd组相比,舒巴坦+ogd组glt-1的表达明显上调,呈剂量依赖性,且表达上调时间可持续到到ogd复氧后24h。与ogd组相比,舒巴坦的溶剂对照组glt-1的表达无明显变化。小结:舒巴坦可剂量依赖的引起星形胶质细胞的glt-1表达的持续上调,这种上调可能是共培养中舒巴坦对抗ogd引起神经元死亡的机制之一。第二部分舒巴坦序列上调星形胶质细胞p-p38mapk和glt-1的表达目的:1观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1、p-p38mapk和总p38mapk表达的影响。2比较舒巴坦上调正常星形胶质细胞glt-1和p-p38mapk蛋白表达的时间进程。方法:行星形胶质细胞培养,纯化并传至3-4代,最后1代细胞布满瓶底时用于实验。1为观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的剂量依赖性,用终浓度为5μm,25μm和125μm的舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于孵育48h后收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察不同剂量的舒巴坦对星形胶质细胞glt-1表达的影响。同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。2为观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的时间进程,用终浓度为125μm舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于舒巴坦孵育1h,3h,6h,12h,24h,48h和72h时收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察舒巴坦的不同孵育时间对星形胶质细胞glt-1表达的影响。同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。3为观察舒巴坦对正常星形胶质细胞p-p38mapk表达的剂量依赖性,用终浓度为5μm,25μm和125μm的舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于孵育48h后收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察不同剂量的舒巴坦对星形胶质细胞p-p38mapk表达的影响;于孵育24h后收集细胞,观察不同剂量的舒巴坦对星形胶质细胞总p38mapk表达的影响。同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。4观察舒巴坦对正常星形胶质细胞p-p38mapk表达的时间进程,用终浓度为125μm舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于舒巴坦孵育1h,3h,6h,12h,24h,48h和72h时收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察舒巴坦的不同孵育时间对星形胶质细胞p-p38mapk和总p38mapk表达的影响。同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。结果:1在观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的剂量依赖性实验中,免疫细胞化学结果显示:在溶剂对照组,glt-1广泛表达于培养的星形胶质细胞。应用舒巴坦孵育星形胶质细胞48h,与对照组相比,5μm,25μm和125μm的舒巴坦显着增加glt-1的表达,这种上调呈剂量依赖性。westernblot分析显示与免疫细胞化学结果相同。2在观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的时间进程实验中,免疫细胞化学结果显示:在125μm的舒巴坦孵育后,与溶剂对照组相比,glt-1的表达从舒巴坦孵育12h开始增加,48h达到高峰,72h仍维持在与较高水平。westernblot分析显示与免疫细胞化学结果相同。3在观察舒巴坦对正常星形胶质细胞p-p38mapk表达的剂量依赖性实验中,免疫细胞化学结果显示,在溶剂对照组,p-p38mapk主要表达于培养的星形胶质细胞细胞核,细胞浆也有少量表达,主要存在于细胞核周围,且染色较浅,表达量较少;p38主要表达于星形胶质细胞的细胞浆,并有大量表达。免疫细胞化学和westernblot法检测均显示:应用舒巴坦孵育星形胶质细胞3h,与对照组相比,5μm,25μm和125μm的舒巴坦均显着增加p-p38mapk的表达,且这种上调呈剂量依赖性。在舒巴坦组,应用5μm,25μm和125μm舒巴坦孵育星形胶质细胞24h后,p38的表达与溶剂对照组相比无明显差异。westernblot分析显示与免疫细胞化学结果相同。4在观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的时间进程实验中,免疫细胞化学和westernblot法检测结果均显示,在溶剂对照组,p-p38mapk有少量的表达;在舒巴坦组,应用125μm的舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,与溶剂对照组相比,p-p38mapk的表达从舒巴坦孵育1h开始增加,3h达到高峰,24h恢复到对照基础水平。在舒巴坦组,应用125μm的舒巴坦孵育正常星形胶质细胞,总p38mapk的表达在任何时间点与溶剂对照组相比均无显着性差异。小结:1舒巴坦可上调正常星形胶质细胞的glt-1表达,这种上调具有剂量依赖性和时间依赖性,舒巴坦孵育12h开始增加,48h达到高峰,72h仍维持在与较高水平。2舒巴坦可上调正常星形胶质细胞的p-p38mapk表达,这种上调具有剂量依赖性和时间依赖性,且舒巴坦对总p38mapk的表达无影响,p-p38mapk的上调为p38mapk的磷酸化激活所致。p-p38mapk的上调从舒巴坦孵育1h开始增加,3h达到高峰,24h恢复到对照基础水平。第叁部分抑制p38mapk通路阻断舒巴坦引起的正常和ogd-处理的星形胶质细胞glt-1的表达目的:应用单纯星形胶质细胞培养技术,观察p-p38mapk抑制剂sb203580对正常和ogd-处理的星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1上调的影响,探讨p-p38mapk通路是否参与正常星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1的上调。方法:1行星形胶质细胞培养,纯化并传至3-4代,最后1代细胞布满瓶底时用于实验,将细胞随机分为以下4组:(1)对照组:正常的星形胶质细胞在正常的培养基中孵育1h+48h,相当于sb203580与舒巴坦的共同孵育时间。(2)舒巴坦组:在正常的培养基中孵育1h后,换成终浓度为125μm舒巴坦的培养液中孵育48h。(3)sb203580+舒巴坦组:首先正常星形胶质细胞的培养基中加入sb203580孵育1h,再加入终浓度为125μm的舒巴坦与sb203580共同孵育48h,根据sb203580的不同剂量分为2.5μm,5μm和10μm叁个亚组。同时设溶剂对照组,用dmso代替sb203580。(4)sb203580对照组:用终浓度为10μm的sb203580孵育正常星形胶质细胞1h+48h。收集以上各组的星形胶质细胞后,应用免疫细胞化学和westernblot两种方法观察各组glt-1的表达,分析抑制p-p38mapk通路对正常星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1上调的影响。2行星形胶质细胞培养,纯化并传至3-4代,最后1代细胞布满瓶底时用于实验,将细胞随机分为以下4组:(1)对照组:正常星形胶质细胞在正常的培养基中孵育1h+48h+2h,(相当于sb203580先单独孵育1h、舒巴坦和sb203580共同孵育时间48h和ogd的时间2h),换成正常培养基继续培养12h或24h收集细胞。(2)ogd组:首先星形胶质细胞正常培养1h+48h后,进行2h的ogd后,换成正常培养基继续培养12h或24h收集细胞。(3)舒巴坦+ogd组:星形胶质细胞在正常的培养基中培养1h,加入终浓度为125μm舒巴坦培养液中孵育48h,其余步骤同ogd组。(4)sb203580+舒巴坦+ogd组:正常星形胶质细胞首先在终浓度为2.5μm,5μm和10μm的sb203580的培养基中孵育1h,再加入舒巴坦使其终浓度为125μm,并与sb203580共同孵育48h,其余步骤同ogd组,同时设溶剂对照组,用dmso代替sb203580。实验各组于ogd复氧后12h或24h两个时间点及对照组相应时间点收集细胞,应用免疫细胞化学和westernblot法,观察各组glt-1的表达,分析抑制p-p38mapk通路对舒巴坦预孵育诱导ogd处理后的星形胶质细胞的glt-1上调的影响。结果:1免疫细胞化学结果显示,在对照组,glt-1广泛表达于培养的单纯星形胶质细胞。与对照组相比,舒巴坦组应用125μm舒巴坦孵育星形胶质细胞后,glt-1的表达显着上调。与舒巴坦组相比,sb203580+舒巴坦组中应用2.5μm,5μm,10μm的sb203580孵育,glt-1的表达明显下调,且这种下调呈显着的剂量依赖性。溶剂对照组,与舒巴坦组相比glt-1的表达无明显改变。与对照组相比,sb203580对照组中,用10μm的sb203580孵育正常星形胶质细胞,glt-1的基础表达无明显改变。2westernblot的结果与免疫细胞化学结果一致。与对照组相比,舒巴坦组的glt-1表达显着上调。与舒巴坦组相比,sb203580+舒巴坦组的glt-1表达剂量依赖性的显着下调。在sb203580的溶剂对照组,sb203580的溶剂对舒巴坦诱导的glt-1上调无影响。在sb203580对照组中,10μm的sb203580对基础表达的glt-1无明显影响。westernblot和免疫细胞化学的结果共同说明,sb203580剂量依赖的抑制舒巴坦诱导的正常星形胶质细胞的glt-1的上调。3免疫细胞化学结果显示:在对照组,glt-1广泛表达于培养的星形胶质细胞。与对照组相比,ogd组的glt-1表达明显下调,约为正常对照组的1/2-2/3。在舒巴坦+ogd组,与ogd组相比,125μm的舒巴坦预孵育48h后,可以显着上调星形胶质细胞的glt-1表达,其表达是正常水平的1.5-2倍。在sb203580+舒巴坦+ogd组,与舒巴坦+ogd组相比,2.5μm,5μm和10μm的sb203580可以显着抑制舒巴坦预孵育诱导的星形胶质细胞glt-1的上调,这种抑制作用呈剂量依赖性,10μm的sb203580表现出最好的抑制效果。单独加入sb203580的溶剂对舒巴坦预孵育诱导的星形胶质细胞glt-1的上调无影响。4westernblot法检测结果与免疫细胞化学结果相一致,结果显示:与对照组相比,ogd组的glt-1表达明显下调。在舒巴坦+ogd组,与ogd组相比,舒巴坦可以显着上调星形胶质细胞glt-1的表达;与舒巴坦+ogd组相比,sb203580+舒巴坦+ogd组的glt-1的表达上调被显着抑制,这种抑制呈剂量依赖性。sb203580的溶剂对舒巴坦预孵育诱导的glt-1上调无影响。westernblot和免疫细胞化学的结果共同说明,sb203580可剂量依赖的抑制舒巴坦预孵育诱导的星形胶质细胞glt-1的上调。小结:1抑制p38mapk通路阻断了舒巴坦诱导的正常星形胶质细胞的glt-1的上调,p38mapk通路参与了正常星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1的上调。2抑制p38mapk通路阻断舒巴坦引起的ogd处理后的星形胶质细胞glt-1的表达,p38mapk通路参与了舒巴坦预孵育诱导的ogd后星形胶质细胞glt-1的表达上调。第四部分抑制p38mapk通路阻断舒巴坦介导的海马神经元抗ogd作用目的:应用神经元星形胶质细胞共培养技术,观察p38mapk抑制剂sb203580对舒巴坦抗海马神经元ogd作用的影响,探讨p38mapk通路是否参与舒巴坦诱导的抗ogd损伤的神经元保护作用。方法:取24h内新生鼠进行海马神经元星形胶质细胞共培养10天后,将细胞随机分为以下6组:(1)对照组:正常培养基培养海马神经元星形胶质细胞1h+48h+2h+24h,以上时间段分别对应下面实验分组中实验处理的时间段,1h+48h对应sb203580孵育时间段,48h对应舒巴坦孵育的时间段,2h对应ogd的时间段,24h对应ogd复氧后至收集细胞的时间段。(2)ogd组:首先共培养细胞正常培养1+48h后(对应sb203580孵育时间段),进行2h氧葡萄糖剥夺后换成正常培养基继续培养24h。(3)舒巴坦+ogd组:共培养细胞先正常培养1h,加入舒巴坦培养液中孵育48h,之后行ogd,方法同ogd组。(4)sb203580+舒巴坦+ogd组:在含2%b27的nb培养基中,先加入sb203580孵育1h,培养液中加入终浓度为125μm的舒巴坦与sb203580继续共同孵育48h,之后行ogd,方法同ogd组。根据sb203580的剂量进一步分为2.5μm,5μm和10μm3个亚组,以观察其量效关系。(5)舒巴坦对照组:先正常培养1h,再加入终浓度为125μm的舒巴坦孵育48小时,换成正常培养基继续培养2h+24h。(6)sb203580对照组:在正常培养的海马神经元星形胶质细胞培养基中加入10μm的sb203580孵育1+48h,换成正常培养基继续培养2h+24h。实验各组于ogd复氧后24h或相应时间点收集细胞,ho/pi染色观察计数神经元死亡百分率;mtt法观察细胞活力,观察p38mapk抑制剂sb203580对舒巴坦抗ogd发挥神经元保护作用的影响。结果:1ho/pi双重染色显示,与对照组相比,125μm的舒巴坦单独处理正常的共培养细胞对细胞的死亡率无影响,2h的ogd可以显着增加细胞死亡率,而125μm的舒巴坦预孵育48h可以显着降低由ogd引起的海马神经元死亡。与舒巴坦+ogd组相比,sb203580+舒巴坦+ogd组应用2.5μm,5μm和10μm的sb203580后,细胞死亡率又明显升高,这种效应呈明显的剂量依赖性;在sb203580的溶剂对照组,共培养的细胞死亡率与舒巴坦+ogd组相比无明显差异,说明溶剂对舒巴坦预孵育对抗ogd而产生的神经元保护作用无影响。此外,在sb203580对照组,与对照组相比,细胞死亡率无明显改变,说明10μm的sb203580对正常的神经元无损伤致死作用。2mtt的结果显示,与对照组相比,2h的ogd可以显着降低共培养细胞的细胞活力,而舒巴坦可以显着增加由ogd引起的共培养细胞的细胞活力降低。与舒巴坦+ogd组相比,sb203580+舒巴坦+ogd组中sb203580明显降低共培养的细胞活力,且具有剂量依赖性。在sb203580的溶剂对照组,共培养的细胞活力与舒巴坦+ogd组相比无明显差异。在sb203580对照组,与对照组相比,细胞活力无明显改变。以上结果结合ho/pi结果,说明sb203580可以剂量依赖的抑制舒巴坦预孵育对抗ogd而产生的神经元保护作用,p-p38mapk通路参与了海马神经元胶质细胞共培养中舒巴坦对抗氧葡萄糖剥夺发挥的神经元保护作用。小结:在神经元-星形胶质细胞共培养体系中,抑制p38mapk通路阻断舒巴坦介导的海马神经元抗ogd作用。结论:1舒巴坦预孵育可剂量依赖性的对抗ogd引起的海马神经元死亡,并可上调ogd后星形胶质细胞glt-1表达,同时维持glt-1的高表达直至ogd复氧后24h,表明舒巴坦预孵育可能通过上调并维持星形胶质细胞的glt-1的表达对抗ogd引起的海马神经元死亡。2舒巴坦可剂量和时间依赖性的上调正常星形胶质细胞p-p38mapk和glt-1表达,且p38的磷酸化活化明显早于glt-1表达上调。3抑制p-p38 MAPK阻断舒巴坦诱导的正常和OGD后星形胶质细胞的GLT-1的上调,p38 MAPK通路参与了舒巴坦预孵育诱导的正常和OGD后星形胶质细胞GLT-1的表达上调。4抑制p-p38 MAPK阻断舒巴坦预孵育对抗OGD发挥的海马神经元保护作用。5以上表明,舒巴坦通过激活星形胶质细胞p38 MAPK通路上调GLT-1的表达发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡的作用。(本文来源于《河北医科大学》期刊2017-04-01）
孙延卿,陈雄生,周盛源,王智巍,赵寅[6]（2016）在《氧葡萄糖血清剥夺/再恢复诱导PC12细胞凋亡模型的建立》一文中研究指出目的明确氧葡萄糖血清剥夺/再恢复(oxygen-glucose-serum deprivation/restoration,OGSD/R)诱导PC12细胞凋亡的变化趋势,建立稳定的细胞凋亡模型,为体外模拟脊髓缺血再灌注损伤导致神经细胞凋亡的研究提供实验工具。方法常规培养高分化PC12细胞,取对数生长期的细胞进行实验。以低糖不含血清的DMEM培养基于叁气培养瓶(体积分数:95%N_2+5%CO_2,O_2<1%)培养12 h,然后换成高糖含血清DMEM培养基和普通培养箱继续培养,诱导PC12细胞凋亡。于复氧复糖复血清后0~6 h进行DAPI染色、CCK-8细胞活性检测及流式细胞术分析并检测相关凋亡蛋白caspase-3、caspase-12水平,比较不同时间点细胞凋亡的差异。结果 DAPI染色显示,OGSD 12 h/R 1 h细胞凋亡最重,凋亡细胞核固缩,形成较多颗粒光斑,凋亡严重的细胞破裂形成碎片,核解体。CCK-8活性检测表明在OGSD 12 h/R 1 h细胞活力最低。流式细胞术分析表明OGSD 12 h/R 1 h细胞凋亡率达到最大。凋亡蛋白检测结果提示在正常的PC12细胞中caspase-3、caspase-12含量极低,而在给予OGSD刺激后细胞内caspase-3、caspase-12的表达增强,复氧复糖复血清后2种凋亡蛋白表达进一步增强,caspase-12于OGSD 12 h/R 1 h时表达最强,caspase-3于OGSD 12 h/R 2 h表达最强。结论 OGSD可以诱导PC12细胞凋亡,且在复氧复糖复血清后细胞凋亡进一步加重;OGSD/R诱导PC12细胞凋亡具有时间依赖性,能有效模拟神经细胞缺血再灌注损伤病理生理过程,为脊髓缺血再灌注损伤的进一步研究提供实验模型。(本文来源于《脊柱外科杂志》期刊2016年03期）
胡亚玲[7]（2016）在《葡萄糖剥夺通过上调ATF4诱导结直肠癌耐药的实验研究》一文中研究指出目的:化疗耐药是肿瘤化疗失败的主要原因之一。最近研究表明肿瘤微环境在肿瘤发生发展与肿瘤耐药中起到重要的作用。肿瘤微环境发生改变,如缺氧、葡萄糖剥夺(glucose deprivation,GD),可以促进肿瘤的发生发展与耐药。然而,人们关于GD诱导结直肠癌(colorectal cancer,CRC)耐药的机制知之甚少。因此,我们探讨了GD在CRC细胞耐药中的作用和内在机制。方法:在GD的条件下检测CRC细胞的耐药与调亡。在GD处理CRC的细胞和转录激活因子4(activating transcription factor 4,ATF4)过表达的CRC细胞中,通过sh RNA敲降ATF4,探讨ATF4在GD诱导耐药中的作用。通过q RT-PCR和Western blotting检测MDR1 m RNA和蛋白水平的表达。结果:在本研究中,我们发现GD能够保护CRC细胞抵制抗肿瘤药奥沙利铂(oxaliplatin,LOHP)和5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)诱导的细胞凋亡,并且诱导未折迭蛋白反应中重要的基因ATF4表达。同时,我们发现在GD处理CRC细胞中敲降ATF4可以促进药敏、诱导凋亡。同样,在ATF4过表达的CRC细胞中敲降ATF4也可以促进药敏与诱导凋亡。除此之外,MDR1表达上调在GD处理CRC的细胞中。结论:GD通过上调ATF4促进CRC细胞耐药,ATF4可作为抵抗CRC细胞耐药的作用新靶点。(本文来源于《江南大学》期刊2016-06-01）
陈瑶[8]（2016）在《常氧葡萄糖剥夺以及肌酸补充对皮层神经元兴奋性的影响》一文中研究指出研究目的:运动性中枢疲劳发生时伴随脑内能量耗竭和运动皮层兴奋性下降。大电导钙激活钾通道(Large-conductance Ca~(2+)-and voltage-activated K~+,BK_(Ca))广泛分布于中枢神经系统(Central Nervous System,CNS),对神经元兴奋性以及动作电位发放频率具有重要的调控作用。因此,本实验拟观察BK_(Ca)通道在常氧葡萄糖剥夺时对皮层神经元兴奋性的调节,并探讨肌酸(Creatine,Cr)在葡萄糖耗竭过程中的神经保护作用。研究方法:(1)多通道神经信号采集系统在体记录成年大鼠一次性负重游泳至力竭时中枢皮层第一运动区(Primary motor cortex,M1)兴奋性的变化。(2)采用脑片膜片钳技术,观察常氧葡萄糖剥夺对成年大鼠皮层M1 Betz细胞兴奋性的影响。(3)采用原代培养的大鼠皮层神经元,全细胞膜片钳技术记录常氧葡萄糖剥夺不同时长后BK_(Ca)通道电流的变化;并应用激光共聚焦检测神经元胞内游离钙离子浓度的变化。(4)探究Cr补充对常氧葡萄糖剥引起的皮层神经元兴奋性、BK_(Ca)通道电流以及神经元胞内游离钙离子浓度变化的影响。研究结果:(1)大鼠一次性负重游泳至力竭时,M1场电位(local field potentials,LFPs)总能量显着下降(P<0.05),功率谱低频段(δ和θ)比例显著增加,高频段(β)显着减小(均P<0.01)。锥体神经元放电频率显着下降(P<0.01)(2)常氧糖剥夺0.5h-1h即使大鼠脑片M1Betz细胞动作电位发放频率显着下降(P<0.01),动作电位阈值(Spike Threshold)、引发第一个动作电位的最小电流强度(Rheobase)、快后超极化电位(fast After-Hyperpolarizing Potential,f AHP)的幅度均显着增加(均P<0.01)。(3)常氧糖剥夺1h-2h BK_(Ca)通道电流密度显着增加(P<0.01),4h-5h显着减小(P<0.01)。胞内游离Ca~(2+)荧光强度随常氧糖剥夺1h-5h逐渐增强(均P<0.01)。(5)Cr预先孵育30min显着增加糖剥夺中M1Betz细胞的兴奋性(P<0.01),而在撤去葡萄糖的同时添加Cr并无显着效果(P>0.05)。此外,Cr孵育24h显着减小原代培养神经元BK_(Ca)通道电流密度以及胞内游离Ca~(2+)荧光强度(均P<0.01)。研究结论:(1)大鼠一次性负重游泳至力竭时M1兴奋性显着降低。(2)常氧糖剥夺1h-2h使胞内游离Ca~(2+)浓度显着升高,激活BK_(Ca)通道大量开放,使神经元超极化,降低神经元兴奋性。(3)Cr补充可有效抑制常氧糖剥夺引起的锥体神经元兴奋性降低,BK_(Ca)通道电流增加以及胞内钙离子浓度升高。(本文来源于《北京体育大学》期刊2016-05-07）
彭晴霞,潘经锐,周颖,董朝飞,王艺东[9]（2015）在《氧葡萄糖剥夺再恢复后神经元pyroptosis对小胶质细胞存活的影响》一文中研究指出目的 Pyroptosis是依赖于caspase-1的新的细胞死亡形式,具有很强的促炎症效应,但脑缺血再灌注损伤中是否发生pyroptosis及其作用目前还不清楚。本研究拟在模拟脑缺血再灌注的体外环境中观察原代小鼠皮层神经元pyroptosis发生情况及其对小胶质细胞(BV-2细胞)存活的影响。方法对小鼠大脑皮层神经元进行氧葡萄糖剥夺再恢复(OGDR)处理,模拟脑缺血再灌注的体内过程。原代皮层神经元OGD处理4h后恢复正常培养0 h、12 h、(本文来源于《中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）》期刊2015-09-18）
李咏梅,袁勇,吴国瑞,赵宁辉,黄晓玮[10]（2015）在《梯度低氧及葡萄糖剥夺对脑胶质瘤细胞凋亡及增殖的影响》一文中研究指出探讨不同低氧浓度及葡萄糖剥夺对脑胶质瘤细胞(T98G)凋亡及增殖的影响.T98G细胞分别于常糖和无糖下培养,并分别在21%O2,3%O2,0.5 O2%,0.1 O2%下培养24 h,48 h,72 h,流式细胞仪及Hoechst染色检测细胞凋亡,MTT法检测存活及增殖.各常糖组均无明显细胞凋亡(P>0.05);而各无糖组均有明显细胞凋亡(P<0.01),常氧无糖组凋亡较3%、0.5%低氧无糖组显着,且随时间延长,细胞凋亡率递增(P<0.01).常氧无糖组48 h凋亡率比0.1%低氧无糖组高,至72 h时低于0.1%低氧无糖组.MTT示低氧可促进T98G细胞增殖,3%O2常糖组呈现明显增殖趋势,但0.5%及0.1%低氧增殖率减慢,各无糖组细胞增殖均显着受到抑制,但无糖低氧组细胞较无糖常氧组生长好.研究显示葡萄糖存在的条件下,适度低氧促进脑胶质瘤细胞存活及增殖,氧浓度低至0.1%,72 h以内仍无明显凋亡,但较常氧下增殖减慢,提示低氧不能作为独立因素诱导胶质瘤细胞发生凋亡,而葡萄糖剥夺可独立诱导脑胶质瘤细胞发生凋亡;0.5%及以上浓度的适度低氧对无糖逆境中及脑胶质瘤细胞有一定的抑制凋亡和促增殖作用.48 h内极度低氧浓度(0.1%)对无糖逆境中胶质瘤细胞仍具有抑制凋亡作用,但随着时间的延长,这种抗无糖逆境抑制凋亡的能力将消失.(本文来源于《昆明理工大学学报(自然科学版)》期刊2015年02期）
葡萄糖剥夺论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究脐带间充质干细胞源条件培养基(CM)对氧-葡萄糖剥夺(OGD)诱导皮层神经元死亡的保护作用。方法培养10 d的皮层神经元更换培养基为EBSS平衡盐溶液,后置于37℃低氧(N2∶CO2∶O2=94%∶5%∶1%)培养箱内孵育,4 h后恢复正常条件培养,同时更换为条件培养基作用20 h,用Hoechst33342/PI的染色方法检测其死亡情况。结果原代培养的UCMSCs传至第叁代时,细胞形态为长梭形的纤维状,折光性好;在培养的皮层神经元建立OGD模型,Control组细胞死亡率为(5.85%±0.41)%,OGD组细胞死亡率(35.6%±1.75)%,Control组与OGD组比较差异有统计学意义(P<0.01),OGD模型建立成功;复氧0 h时给予脐带间充质干细胞源条件培养基,作用24 h后,OGD+CM组细胞死亡率为(27.98±2.19)%,OGD+CM组与OGD组比较差异有统计学意义(P<0.05),CM可使皮层神经元的死亡率降低21.40%。结论脐带间充质干细胞源条件培养基对氧-葡萄糖剥夺诱导皮层神经元具有保护作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
葡萄糖剥夺论文参考文献
[1].严飞平,陈晨,李志磊,霍国进,冯毅.茶多酚对氧葡萄糖剥夺/再恢复干预后原代培养的小鼠海马神经元内钙离子浓度的影响[J].中国临床神经外科杂志.2019
[2].张鹏,张鹏飞,高琛,秦家振,戴宜武.条件培养基对氧-葡萄糖剥夺诱导皮层神经元死亡的保护作用[J].中国实用医药.2018
[3].王贝芬.抑制RAC1/NOX2通路保护葡萄糖剥夺损伤的视网膜感光细胞[D].吉林大学.2018
[4].王亮,马远征,徐小文,张妍,宋晓艳.慢性睡眠剥夺对大鼠葡萄糖稳态的影响[J].中国老年学杂志.2017
[5].齐杰.舒巴坦通过激活星形胶质细胞p38MAPK通路上调GLT-1的表达发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡的作用[D].河北医科大学.2017
[6].孙延卿,陈雄生,周盛源,王智巍,赵寅.氧葡萄糖血清剥夺/再恢复诱导PC12细胞凋亡模型的建立[J].脊柱外科杂志.2016
[7].胡亚玲.葡萄糖剥夺通过上调ATF4诱导结直肠癌耐药的实验研究[D].江南大学.2016
[8].陈瑶.常氧葡萄糖剥夺以及肌酸补充对皮层神经元兴奋性的影响[D].北京体育大学.2016
[9].彭晴霞,潘经锐,周颖,董朝飞,王艺东.氧葡萄糖剥夺再恢复后神经元pyroptosis对小胶质细胞存活的影响[C].中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）.2015
[10].李咏梅,袁勇,吴国瑞,赵宁辉,黄晓玮.梯度低氧及葡萄糖剥夺对脑胶质瘤细胞凋亡及增殖的影响[J].昆明理工大学学报(自然科学版).2015