王辉:山黧豆抗氧化酶基因的克隆与表达分析论文

王辉:山黧豆抗氧化酶基因的克隆与表达分析论文

本文主要研究内容

作者王辉,刘晓宁,徐全乐(2019)在《山黧豆抗氧化酶基因的克隆与表达分析》一文中研究指出:【目的】克隆山黧豆抗氧化酶基因,并对其进行生物信息学及表达模式分析,为研究抗氧化酶基因在山黧豆中的抗旱机制奠定基础。【方法】以萌发7 d的山黧豆叶片为材料,通过RT-PCR克隆山黧豆抗氧化酶基因的编码序列(CDS);采用荧光定量PCR分析抗氧化酶基因的组织表达模式;利用在线软件ExPASy ProtParam、SignalP 4.1、TMHMM V. 2.0、TargetP 1.1分别分析抗氧化酶基因编码的蛋白质理化性质、信号肽、跨膜区域以及亚细胞定位;利用在线工具Conserved Domain、SOPMA预测蛋白质保守结构域和二级结构,利用MEGA 6.0软件构建蛋白系统进化树;并利用20%PEG 6000溶液模拟干旱处理山黧豆,采用荧光定量PCR分析干旱胁迫不同时间抗氧化酶基因在叶片中的相对表达量。【结果】RT-PCR克隆获得山黧豆抗氧化酶基因APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD的编码序列,其长度分别为864,1 485,723,1 005和942 bp。生物信息学分析表明,APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD抗氧化酶均为酸性不稳定蛋白质,且均由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲共4种二级结构组成;山黧豆抗氧化酶均包含高度保守的结构域。聚类分析结果表明,山黧豆的APX、CAT、MnSOD、FeSOD、Cu/ZnSOD依次与蒺藜苜蓿、蚕豆、豌豆、豌豆和锦鸡儿具有较高的相似性、较近的亲缘关系和遗传距离。表达分析结果表明,APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD基因在山黧豆根、茎、叶组织中均有表达。APX、CAT和MnSOD基因均响应了干旱胁迫,其中APX、CAT基因的表达量在干旱胁迫后迅速升高,3 h后达到最高,分别是0 h的5和4.3倍。【结论】成功克隆了山黧豆抗氧化酶基因APX、CAT、MnSOD、FeSOD和Cu/ZnSOD,推测其可协同清除干旱胁迫下产生的活性氧。

Abstract

【mu de 】ke long shan li dou kang yang hua mei ji yin ,bing dui ji jin hang sheng wu xin xi xue ji biao da mo shi fen xi ,wei yan jiu kang yang hua mei ji yin zai shan li dou zhong de kang han ji zhi dian ding ji chu 。【fang fa 】yi meng fa 7 dde shan li dou xie pian wei cai liao ,tong guo RT-PCRke long shan li dou kang yang hua mei ji yin de bian ma xu lie (CDS);cai yong ying guang ding liang PCRfen xi kang yang hua mei ji yin de zu zhi biao da mo shi ;li yong zai xian ruan jian ExPASy ProtParam、SignalP 4.1、TMHMM V. 2.0、TargetP 1.1fen bie fen xi kang yang hua mei ji yin bian ma de dan bai zhi li hua xing zhi 、xin hao tai 、kua mo ou yu yi ji ya xi bao ding wei ;li yong zai xian gong ju Conserved Domain、SOPMAyu ce dan bai zhi bao shou jie gou yu he er ji jie gou ,li yong MEGA 6.0ruan jian gou jian dan bai ji tong jin hua shu ;bing li yong 20%PEG 6000rong ye mo ni gan han chu li shan li dou ,cai yong ying guang ding liang PCRfen xi gan han xie pai bu tong shi jian kang yang hua mei ji yin zai xie pian zhong de xiang dui biao da liang 。【jie guo 】RT-PCRke long huo de shan li dou kang yang hua mei ji yin APX、CAT、MnSOD、FeSODhe Cu/ZnSODde bian ma xu lie ,ji chang du fen bie wei 864,1 485,723,1 005he 942 bp。sheng wu xin xi xue fen xi biao ming ,APX、CAT、MnSOD、FeSODhe Cu/ZnSODkang yang hua mei jun wei suan xing bu wen ding dan bai zhi ,ju jun you α-luo xuan 、yan shen lian 、β-zhuai jiao he mo gui ze juan qu gong 4chong er ji jie gou zu cheng ;shan li dou kang yang hua mei jun bao han gao du bao shou de jie gou yu 。ju lei fen xi jie guo biao ming ,shan li dou de APX、CAT、MnSOD、FeSOD、Cu/ZnSODyi ci yu ji li mu xu 、can dou 、wan dou 、wan dou he jin ji er ju you jiao gao de xiang shi xing 、jiao jin de qin yuan guan ji he wei chuan ju li 。biao da fen xi jie guo biao ming ,APX、CAT、MnSOD、FeSODhe Cu/ZnSODji yin zai shan li dou gen 、jing 、xie zu zhi zhong jun you biao da 。APX、CAThe MnSODji yin jun xiang ying le gan han xie pai ,ji zhong APX、CATji yin de biao da liang zai gan han xie pai hou xun su sheng gao ,3 hhou da dao zui gao ,fen bie shi 0 hde 5he 4.3bei 。【jie lun 】cheng gong ke long le shan li dou kang yang hua mei ji yin APX、CAT、MnSOD、FeSODhe Cu/ZnSOD,tui ce ji ke xie tong qing chu gan han xie pai xia chan sheng de huo xing yang 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自西北农林科技大学学报(自然科学版)的王辉,刘晓宁,徐全乐,发表于刊物西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年10期论文,是一篇关于山黧豆论文,抗氧化酶基因论文,基因克隆论文,生物信息学分析论文,西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年10期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年10期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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