导读:本文包含了终板软骨细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:鹿茸多肽,软骨终板,椎间盘退变,基质金属蛋白酶
终板软骨细胞论文文献综述
李文超,林一峰,沈国喜,原超,朱辉[1]（2019）在《鹿茸多肽对IL-1β诱导退变的椎间盘终板软骨细胞保护作用》一文中研究指出目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘终板软骨细胞的影响,分析其对终板软骨细胞保护的作用机制。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,并对其椎间盘终板软骨细胞进行分离与培养,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分3组,分别在培养基中加入10μg/L的IL-1β和10、30、50μg/mL的鹿茸多肽,MTT比色法检测3个时间节点(24、48、72 h)各组椎间盘终板软骨细胞的增殖情况;流式细胞仪检测大鼠椎间盘终板软骨细胞的凋亡;qPCR法检测Collagen Ⅱ、Collagen X、caspase-3、MMP-13、Bax、Bcl-2基因的表达水平。结果:在24、48、72 h时间点,MTT法检测10μg/mL鹿茸多肽组在各时间点终板软骨细胞增殖情况与IL-1β诱导组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05);而30μg/mL组和50μg/mL组均能拮抗IL-1β对软骨终板细胞増殖的抑制作用,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);流式分析结果表明,不同浓度的鹿茸多肽均能够降低IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例(P<0.05,P<0.01);qPCR检测结果表明,IL-1β诱导组的Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达减弱,Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达增强,与空白对照组对比差异具有统计学意义(P<0.05);各浓度鹿茸多肽组均能够上调Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达(P<0.05,P<0.01),下调Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达(P<0.05,P<0.01),以50μg/mL组效果最为显着(P<0.01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽通过抑制软骨终板细胞的凋亡,促进其増殖,调控其相关基质蛋白及基质降解酶、凋亡因子等基因的表达,起到了对退变的椎间盘终板软骨细胞的保护作用。(本文来源于《辽宁中医药大学学报》期刊2019年09期）
张芝良[2]（2019）在《PTHrP旁分泌调节HDAC4细胞核内外穿梭调控生长板软骨细胞增殖的实验研究》一文中研究指出目的:本研究旨在通过利用外源性PTHrP作用于C57 BL/6小鼠生长板或生长板软骨细胞,验证PTHrP可通过旁分泌途径调节生长板软骨细胞中HDAC4的核内外穿梭进而调控软骨细胞增殖。方法:1.C57BL/6小鼠胫骨生长板软骨细胞的培养与鉴定。显微镜下对出生3-5天C57小鼠胫骨生长板进行观察并定位,通过HE染色、番红O染色观察生长板组织中软骨细胞的大致形态与分布特点;超净工作台分离生长板组织,采用胰酶、Ⅱ型胶原酶序贯消化法对小鼠生长板组织进行消化,提取生长板软骨细胞;通过HE染色与番红O染色对细胞大致形态观察,免疫组化实验对所培养软骨细胞Col-Ⅱ进行检测。2.PTHrP对生长板软骨细胞增殖影响的实验研究。将生长板软骨细胞体外培养至第二代后随机分为3个组别:高表达组,培养液中添加外源性PTHrP、Lipo2000;抑制表达组,使用Lipo2000运载PTHLH-homo-617质粒转染软骨细胞;空白对照组,培养液中添加Lipo2000。通过Rt-PCR实验检测软骨细胞增殖相关指标如Sox-9、Col-Ⅱ、Agg、Ihh、Col-Ⅹ、Runx-2及MMP-13的基因表达水平变化;EdU标记实验、CCK-8实验检测软骨细胞增殖情况。3.PTHrP促进生长板软骨细胞增殖相关机制的实验研究。将生长板软骨细胞体外培养至第二代后随机分为2个组别:实验组给予添加外源性PTHrP的培养液,对照组仅给予培养液。通过免疫荧光实验及Western blot实验观察并比较实验组与对照组生长板软骨细胞中HDAC4在胞浆和胞核中的含量及分布;使用PTHrP孵育小鼠生长板组织与细胞,通过免疫组化实验观察并对比两组Runx-2表达水平的差异。结果:1.镜下成功观察到呈半透明状的C57BL/6小鼠胫骨生长板,HE染色与番红O染色可见呈柱状排列的生长板增殖区软骨细胞;成功分离小鼠胫骨生长板并进行细胞培养。2.Rt-PCR结果显示:PTHrP高表达组小鼠生长板软骨细胞中Col-Ⅱ的表达量相较于空白对照组更高,Sox9、Ihh、MMP-13和Runx-2的表达则相对降低(P<0.05);抑制表达组生长板软骨细胞中Ihh的表达量相较于空白对照组增多(P>0.05),Sox-9、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ、Agg、Runx-2及MMP-13的表达水平与空白对照组相比无明显变化(P>0.05)。EdU标记实验结果显示:PTHrP高表达组生长板软骨细胞阳性率高于空白对照组(P<0.05),抑制表达组细胞阳性率与空白组无明显差异(P>0.05);CCK-8实验结果与EdU标记实验结果一致。3.Western blot实验结果显示:空白对照组软骨细胞HDCA4在胞浆与胞核中的表达量相差不大,PTHrP高表达组小鼠生长板软骨细胞胞核内HDAC4的蛋白水平明显高于胞浆(P<0.05);细胞免疫荧光实验结果显示:空白对照组生长板软骨细胞HDCA4荧光围绕胞核分布,且胞浆和胞核中有,而PTHrP高表达组HDCA4荧光主要位于软骨细胞核内,胞浆中几乎没有荧光分布;免疫组化实验结果显示:PTHrP高表达组的小鼠生长板及生长板软骨细胞中Runx-2的蛋白表达水平均低于空白对照组。结论:1.PTHrP可促进小鼠生长板软骨细胞的增殖,且主要通过旁分泌途径发挥作用。2.PTHrP可促进HDAC4由胞浆穿梭入胞核,进而抑制Runx-2的表达发挥其促进软骨细胞增殖的作用。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-04-19）
李晓娟,李浩,马永壮,闫吉元,张俊[3]（2019）在《缺氧环境通过HIF-1α/YAP信号促进大鼠生长板软骨细胞表型维持》一文中研究指出目的研究缺氧条件下缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)蛋白在软骨细胞表型维持中的作用。方法生长板软骨细胞取自7日龄的SD大鼠,并通过氯化钴干预以模拟体外缺氧微环境。通过检测细胞外基质水平和Ⅱ型胶原(Collagen 2,Col2)蛋白水平表达变化来确定软骨细胞在氯化钴刺激下软骨表型变化。通过Western blotting方法检测HIF-1α、YAP蛋白水平在氯化钴刺激后的表达变化。结果氯化钴于体外实验中模拟的缺氧环境能够促进软骨细胞细胞外基质的表达水平,并且能够上调Col2蛋白表达,同时上调HIF-1α和YAP蛋白水平的表达。抑制HIF-1α的表达可以下调缺氧环境所致的YAP蛋白表达水平的上调,而抑制YAP的表达并不能影响HIF-1α蛋白表达水平。结论氯化钴于体外实验中模拟的缺氧环境可能通过HIF-1α/YAP信号促进大鼠生长板软骨细胞软骨表型的维持。(本文来源于《骨科》期刊2019年02期）
徐永明[4]（2018）在《力学敏感MicroRNA-199a-5p在终板软骨细胞退变中的作用》一文中研究指出目的:通过体外构建终板软骨细胞牵张力诱导退变模型,探讨力学敏感MicroRNA-199a-5p在牵张力条件下诱导终板软骨细胞退变中的调控机制。方法:收集因年轻颈椎骨折患者在我科接受颈椎手术的终板软骨组织,通过FX-5000细胞应变加载系统应用在体外构建体终板软骨细胞牵张力模型(10%伸长率、0.5Hz、12h/d);采用MicroRNA芯片检测技术检测牵张力作用后差异MicroRNAs表达情况,并通过Realtime RT-PCR验证芯片结果;采用Targetscan、Miranda、miRbase、mirdb四种生物学软件分别预测差异表达MicroRNAs靶基因;选取目标MicroRNA-199a-5p进行动物体外实验,细胞染色观察牵张力刺激前后软骨细胞的表型;鬼笔环肽染色用于检测牵张力刺激后细胞骨架的改变情况,细胞增殖和凋亡情况分别采用AlamarBlue法、流式细胞术方式检测;双荧光素酶报告基因方法验证MicroRNA-199a-5p对IKBKB靶基因的直接作用;分别通过采用Realtime RT-PCR和western blot方法检测过表达(mimic)和抑制(inhibitor)MicroRNA-199a-5p后靶基因IKBKB及软骨细胞相关基因二型胶原(COL2A1)、蛋白多糖(ACAN)及SOX9等基因和蛋白水平变化;并通过合成小分子RNA(siRNA)干扰靶基因IKBKB后进一步检测软骨相关基因及蛋白水平变化。结果:牵张力加载作用后终板软骨细胞中COL2A1和SOX9以及ACAN这些与软骨相关标志基因的表达水平随着牵张力时间的延长呈现逐渐下调改变,在对终板软骨细胞外基质的合成中起到明显抑制效果。在对终板软骨细胞的增殖方面具有促进作用,软骨细胞细胞骨架形态在受到牵张力加载后出现变化,由多角形被拉伸为长条梭形状,但是在细胞的凋亡水平上出现明显变化。终板软骨细胞在牵张力加载作用后进行MicroRNA芯片筛选发现共有9个MicroRNAs表达水平上调、16个MicroRNAs表达水平下调;生物信息学软件分析MicroRNA-199a-5p对IKBKB靶基因具有直接调控作用;过表达MicroRNA-199a-5p后IKBKB靶基因表达水平明显抑制,相反通过抑制MicroRNA-199a-5p后IKBKB水平表达明显增高,分别通过过表达MicroRNA-199a-5p及siRNA干扰IKBKB后均能够使终板软骨细胞相关基因COL2A1、ACAN及SOX9的水平表达增高;终板软骨细胞退变的程度有所缓解。结论:一定条件下牵张力刺激能够使终板软骨细胞发生退变改变;通过对MicroRNA-199a-5p过表达以及靶基因IKBKB的抑制均能够缓解终板软骨细胞退变程度。(本文来源于《皖南医学院》期刊2018-05-01）
许珂[5]（2018）在《生长板软骨细胞SHOX基因过/低表达的差异miRNA筛选及靶基因验证》一文中研究指出目的:建立软骨细胞(HC-α)SHOX基因过/低表达模型,筛选与未处理组差异表达miRNA并予以验证,同时寻找差异miRNA可能调控的靶基因,为SHOX异常乃至生长板异常疾病探寻新的治疗靶点并提供新的理论依据。方法:(1)用SHOX过表达慢病毒、含有shRNA序列的SHOX干扰慢病毒、过表达空载慢病毒和干扰空载慢病毒分别感染HC-a细胞,并经过嘌呤霉素筛选阳性感染成功HC-a细胞。(2)Real-time PCR检测SHOX mRNA在各组的相对表达量。(3)用miRNA芯片分析SHOX过表达组、SHOX低表达与未处理组的差异表达miRNA。(4)选取处理组中表达趋势相反的差异miRNA作为研究对象,用Real-time PCR验证差异表达mi RNA与芯片结果的一致性。(5)通过Target Scan预测具有显着差异的miRNA的靶基因,并在HC-a细胞中转染差异miRNA的类似物(mimic),检测靶基因表达量的变化。结果:(1)成功筛选出各组已感染慢病毒的阳性HC-a细胞。(2)Real-time PCR测定SHOX mRNA表达情况与未处理组相比,过表达组SHOX mRNA表达上调,差异具有统计学意义(P<0.001),干扰组SHOX mRNA表达下调,差异具有统计学意义(P<0.001)。空载对照组分别与未处理组相比,SHOX mRNA表达差异都无统计学意义(P>0.05)。(3)与未处理组相比,SHOX基因过表达组有425条mi RNA在两组间差异表达;与未处理组相比,SHOX基因低表达组有379条mi RNA在两组间差异表达。(4)按照表达水平差异相反的标准筛选差异miRNA,其中6条miRNA在处理组中表达水平差异相反:miR-126-3p、miR-192-5p、miR-370-3p、miR-432-5p、miR-3162-5p、mi R-4745-5p。Real-time PCR验证结果显示miR-126-3p、miR-192-5p、miR-3162-5p、miR-4745-5p的表达均具有显着性。(5)选取差异显着的miR-3162-5p进一步研究,TargetScan在线预测STAT5b可能为其靶基因。HC-a细胞中转染mi R-3162-5p mimic后,STAT5b的蛋白表达量显着降低。结论:综上所述,本研究表明miR-3162-5p在SHOX基因过/低表达软骨细胞表达具有显着差异。进一步机制分析表明,miR-3162-5p可能靶向STAT5b,降低其表达,该机制发挥的生物学功能还需进一步研究。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2018-05-01）
柳根哲,孙旗,陈江,赵丁岩,祝永刚[6]（2018）在《高静水压下益气活血汤通过p38MAPK信号通路对兔椎体终板软骨细胞的调控作用》一文中研究指出目的观察益气活血汤含药血清在高静水压下对兔终板软骨细胞p38MAPK信号通路的调控作用,探讨益气活血汤治疗椎间盘退行性病变的可能作用机制。方法选用3月龄新西兰白兔制备益气活血汤含药血清,体外分离培养第3代兔椎体终板软骨细胞,建立体外高静水压加载干预模型,确定益气活血汤含药血清最佳干预条件。将体外培养的第3代终板软骨细胞随机分为空白组、模型组及含药血清组,空白组无任何干预,其余2组分别施加1 MPa静水压干预24 h后收集终板软骨细胞,运用Western Blot法检测各组终板软骨细胞p38、磷酸化p38蛋白表达情况。结果持续高静水压干预下,1μg/μL含药血清促终板软骨细胞增殖作用最明显。各组终板软骨细胞p38蛋白表达量比较差异无统计学意义;模型组磷酸化p38蛋白表达量显着高于空白组,而含药血清组磷酸化p38蛋白表达量显着低于模型组(P<0.05)。结论益气活血汤可以提高持续高静水压下终板软骨细胞增殖率,抑制软骨细胞凋亡,可能与其降低磷酸化p38蛋白表达水平,抑制p38MAPK信号通路的激活有关,推测益气活血汤可能通过调控p38MAPK信号通路发挥延缓椎间盘退行性病变的作用。(本文来源于《现代中西医结合杂志》期刊2018年10期）
刘志祥[7]（2018）在《硫酸氨基葡萄糖对颈椎软骨终板软骨细胞退变影响的研究》一文中研究指出目的硫酸氨基葡萄糖对颈椎软骨终板软骨细胞退变影响的研究方法1.取材根据pfirrmann椎间盘退变评级准(Ⅰ-Ⅴ)共5型的人颈椎间盘软骨终板,使用酶解消化的方法获取颈椎间盘软骨终板当中的软骨细胞,并用甲苯胺蓝染色液对细胞进行检测鉴定软骨细胞,使用相差显微镜来观察软骨细胞的生长情况并用比色法绘制生长曲线。2.从软骨终板中成功分离出软骨细胞在体外培养至3代,每一型中取一组典型细胞分别标记为A、B、C、D、E五组,每组实验设为对照组和实验组(实验组为10μM、100μM、1000μM浓度硫酸氨基葡萄糖)分别干预72小时,通过q-PCR检测Ⅱ型胶原、多聚蛋白聚糖(Aggrecan)、MMP-3和MMP-13基因的表达。结果一、利用酶消化法获得了形态正常,获取大量纯净的软骨细胞,并能在体外稳定增殖。二、1、GS对多聚蛋白聚糖(Aggrecan)基因表达(1)A组:GS浓度为10μΜ下调Aggrecan基因的表达,GS浓度为100μΜ、1000μΜ时上调Aggrecan基因的表达;B、C组:GS浓度为10μΜ上调Aggrecan基因的表达,GS浓度为100μΜ、1000μΜ时下调Aggrecan基因的表达;D组:GS浓度为10μΜ、100μΜ时上调Aggrecan基因的表达,GS浓度为10μΜ上调Aggrecan基因的表达;E组:GS浓度为10μΜ上调Aggrecan基因的表达,GS浓度为10μΜ、100μΜ时下调Aggrecan基因的表达。(2)GS为0、10μΜ时,B、C、D、E与A相比上调Aggrecan基因的表达;GS为100μΜ时,B、C、D、E与A相比都下调Aggrecan基因的表达;GS为1000μΜ时,B、D、E与A相比都上调Aggrecan基因的表达,C与A相比下调Aggrecan基因的表达。2、GS对Ⅱ型胶原的基因表达(1)A、B组:GS浓度为10μΜ、100μΜ时,上调Ⅱ型胶原的基因表达,GS浓度为1000μΜ时,上调Ⅱ型胶原的基因表达;C、D、E组:GS浓度为100μΜ、100μΜ、1000μΜ时,下调Ⅱ型胶原的基因表达;(2)GS在0、10μΜ时,B、C、D与A相比都上调Ⅱ型胶原的基因的表达,E与相比下调Ⅱ型胶原基因的表达;GS为100μΜ时,B、C、D、E与A相比都下调Ⅱ型胶原基因的表达;GS为1000μΜ,B、D、E与A相比都上调Ⅱ型胶原基因的表达,C与A相比下调Ⅱ型胶原基因的表达。3、GS对MMP-3基因表达(1)A、D组:GS浓度为10μΜ、100μΜ、1000μΜ时上调MMP-3基因表达;B组:GS浓度为10μΜ、100μΜ时下调MMP-3基因表达,GS浓度为1000μΜ时上调MMP-3基因表达;C组:GS浓度为10μΜ、100μΜ时上调MMP-3基因表达,GS浓度为1000μΜ时下调MMP-3基因表达;E组:GS浓度为10μΜ、1000μΜ时上调MMP-3基因表达,GS浓度为100μΜ下调MMP-3基因表达;(2)GS的浓度10μΜ:B、C、D、E与A相比上调MMP-13基因的表达;GS的浓度为100μΜ:B、E与A相比是上调MMP-13基因的表达,C、D与A相比都是下调MMP-13基因的表达;GS的浓度为1000μΜ:B、D与A相比上调MMP-13基因的表达,C、E与A相比下调MMP-13基因的表达。4、GS对MMP-13基因表达(1)A、B、C组:GS浓度为10μΜ、100μΜ、1000μΜ时上调MMP-13基因表达;D组:GS浓度为10μΜ、100μΜ时下调MMP-13基因表达,GS浓度为1000μΜ时上调MMP-13基因表达;D组:GS浓度为10μΜ、1000μΜ时下调MMP-13基因表达,GS浓度为100μΜ时上调MMP-13基因表达;(2)GS在0、10μΜ时B、C、D、E与A相比下调MMP-13基因的表达;GS为100μΜ时,B、C、D、与A相比下调MMP-3基因的表达,E与A相比下调MMP-3基因的表达;GS为1000μΜ时,C、D、E与A相比下调MMP-3基因的表达,B与A相比下调MMP-3基因的表达。结论:1、GS对聚集蛋白聚糖(Aggrecan)基因表达:10μΜ浓度GS上调Ⅰ-Ⅴ型退变颈椎软骨软骨终板软骨细胞中的聚集蛋白聚糖(Aggrecan)基因表达;100、1000μΜ的GS下调Ⅰ-Ⅴ型退变颈椎软骨软骨终板细胞中聚集蛋白聚糖(Aggrecan)基因表达。2、GS对Ⅱ型胶原蛋白基因表达:10μΜ、100μΜ浓度GS上调Ⅰ、Ⅱ型退变颈椎软骨终板软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白基因表达,下调Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白基因表达;1000μΜ浓度GS下调Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白基因表达。3、GS对MMP-3基因表达:10μΜ浓度GS上调Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-3基因表达,下调Ⅱ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-3基因表达;100μΜ浓度GS上调Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型退变颈椎软骨终板软骨MMP-3细胞基因表达,下调Ⅱ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-3基因表达;1000μΜ浓度GS上调Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨MMP-3细胞基因表达,下调Ⅲ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-3基因表达。4、GS对MMP-13基因表达:10μΜ浓度GS上调Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-13基因表达,下调Ⅳ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-13基因表达;100μΜ浓度GS上调Ⅰ、Ⅱ型退变颈椎软骨终板软骨MMP-13细胞基因表达,下调Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-13基因表达;1000μΜ浓度GS上调Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、型退变颈椎软骨终板软骨MMP-13细胞基因表达,下调Ⅲ、Ⅴ型退变颈椎软骨终板软骨细胞MMP-13基因表达。说明不同浓度的GS对某些退变类型的颈椎软骨终板有一定的保护作用,但其作用机制比较复杂。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2018-03-01）
梁小微[8]（2018）在《IL-1β对大鼠终板软骨细胞增殖的影响及机制研究》一文中研究指出目的:相间盘退变为多种因素综合影响所致,有报道表明,软骨终板发生钙化所引发椎间盘营养物质供应下降为椎间盘启动的关键性因素。本实验通过培养大鼠椎体终板软骨细胞,检测ADAMTS-5蛋白的表达水平与IL-1β是否具有相关性,在IL-1β炎性因子的干预下,通过检测磷酸化p65蛋白,p65蛋白含量的变化,来探究IL-1β是否促进ADAMTS-5的表达通过NF-κB信号通路,从而促进终板软骨细胞退变,为预防和治疗椎间盘退变提供新的方法。方法:取4-6周龄大鼠椎体的终板软骨细胞进行纯化,通过原代及传代培养。选择生长较好的3代细胞进行实验,通过观察细胞的形态,来描绘细胞的生长曲线。1.采用MTT法研究不同浓度的IL-1β对大鼠终板软骨细胞增殖的影响。通过在紫外分光光度计上测定各孔光吸收值,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标,观察细胞增殖变化。2.研究不同浓度的IL-1β(5 ng/ml,10 ng/ml、20 ng/ml、40 ng/ml)对大鼠终板软骨细胞ADAMTS-5蛋白表达的影响。3.培养皿中加入10 ng/mL的IL-1β,观察24、48、96小时,大鼠椎板软骨细胞中ADAMTS-5蛋白表达量的变化。4.培养皿中加入10 ng/mL的IL-1β,设立空白对照,通过检测磷酸化p65蛋白含量,p65蛋白含量的变化,来探究IL-1β是否通过激活NF-κB信号通路促进ADAMTS-5的表达。5.将大鼠椎体终板软骨细胞分为4组,第一组为空白对照组,第二组加入10 ng/mL的IL-1β,第叁组加入50 ug/ml NF-κB信号通路的阻断剂SN50,第四组加入10 ng/mL的IL-1β及50 ug/ml SN50,观察ADAMTS-5蛋白表达量的变化,从而验证IL-1β是否通过激活NF-κB信号通路促进ADAMTS-5的表达。结果:1.随IL-1β浓度增高,大鼠终板软骨细胞数目逐渐减少,且各组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。2.不同浓度的IL-1β对大鼠终板软骨细胞ADAMTS-5蛋白表达与空白对照组相比都有增强,且各组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。10 ng/ml的IL-1β作用最强。3.不同时间点,10 ng/ml的IL-1β对大鼠终板软骨细胞ADAMTS-5蛋白表达与空白对照组相比都有增强,且各组之间差异具有统计学意义(P<0.05),48小时达到高峰。4.与空白对比,10 ng/ml IL-1β作用大鼠终板软骨细胞48小时后,p-p65蛋白浓度明显升高,而p65蛋白浓度基本保持不变。两组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。5.四组不同干预蛋白分别作用于大鼠终板软骨细胞,其ADAMTS-5蛋白表达量从高到低分别为IL-1β组,IL-1β+SN50组,空白对照组,SN50组。且各组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.IL-1β能够抑制大鼠终板软骨细胞的增殖。2.IL-1β对大鼠终板软骨细胞增殖的抑制可能是部分通过影响NF-κB信号通路实现的。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-03-01）
于波,王俊祺,王伟,孙曼青,肖园[9]（2017）在《雌二醇对大鼠生长板软骨细胞C型利钠肽及胰岛素样生长因子1表达的影响》一文中研究指出目的·探讨不同浓度的17β雌二醇(17βE2)对大鼠生长板软骨细胞C型利钠肽(CNP)、利钠肽受体B(NPR-B)及胰岛素样生长因子1(IGF1)的调控作用,及其对软骨细胞增殖的影响。方法·Wistar大鼠8只,于出生后14 d处死,分离胫骨上段骺软骨板,取得软骨细胞并培养48 h后,于培养液中加入17βE2,并使其终浓度分别为10~(-4)、10~(-6)、10~(-8)、10~(-10)和10~(-12) mol/L,同时设空白对照组。继续培养48 h。之后利用CCK8法测定软骨细胞增殖能力,应用ELISA法测定培养液中CNP和IGF1的浓度,并利用实时定量PCR检测软骨细胞CNP、NPR-B及IGF1 mRNA的相对水平。结果·不同浓度的17βE2对生长板软骨细胞增殖有显着影响。当17βE2的浓度为10~(-8) mol/L时,其对软骨细胞的促增殖效应最强;当浓度进一步增至10~(-4) mol/L时,则抑制其增殖。随着17βE2浓度的增加,细胞培养液中CNP的浓度以及软骨细胞中CNP mRNA相对水平均出现明显差异,以10~(-8) mol/L组CNP的浓度和mRNA水平最高,10~(-4) mol/L组为最低。IGF1同样在10~(-8) mol/L组的浓度和mRNA表达水平达到最高,但最低值分别出现在10~(-10) mol/L组和10~(-12) mol/L组。软骨细胞增殖水平与CNP的mRNA及蛋白浓度均呈正相关(均P=0.000),但与IGF1的mRNA及蛋白浓度水平无明显相关性(均P>0.05)。结论·17βE2对大鼠生长板软骨细胞增殖调控具有剂量-效应关系,呈现出高浓度抑制、一定浓度范围内(10~(-10)~10~(-8) mol/L)促进的作用;该作用与其调节生长板软骨细胞表达CNP水平呈正相关。(本文来源于《上海交通大学学报(医学版)》期刊2017年08期）
任东成,丁金勇[10]（2017）在《终板软骨细胞退变相关信号通路的研究进展》一文中研究指出椎间盘退变性疾病是临床常见病和多发病,目前研究认为,影响椎间盘退变的主要因素有炎症反应、氧化应激和机械应力等~[1~3]。在这些因素的作用下,椎间盘软骨终板发生病理性改变,出现终板钙化,导致营养物质弥散障碍,是椎间盘退变的始动因素~[4],而终板软骨细胞肥大、凋亡在终板钙化中起主要作用~[5]。但目前对软骨细胞退变的(本文来源于《中国脊柱脊髓杂志》期刊2017年07期）
终板软骨细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:本研究旨在通过利用外源性PTHrP作用于C57 BL/6小鼠生长板或生长板软骨细胞,验证PTHrP可通过旁分泌途径调节生长板软骨细胞中HDAC4的核内外穿梭进而调控软骨细胞增殖。方法:1.C57BL/6小鼠胫骨生长板软骨细胞的培养与鉴定。显微镜下对出生3-5天C57小鼠胫骨生长板进行观察并定位,通过HE染色、番红O染色观察生长板组织中软骨细胞的大致形态与分布特点;超净工作台分离生长板组织,采用胰酶、Ⅱ型胶原酶序贯消化法对小鼠生长板组织进行消化,提取生长板软骨细胞;通过HE染色与番红O染色对细胞大致形态观察,免疫组化实验对所培养软骨细胞Col-Ⅱ进行检测。2.PTHrP对生长板软骨细胞增殖影响的实验研究。将生长板软骨细胞体外培养至第二代后随机分为3个组别:高表达组,培养液中添加外源性PTHrP、Lipo2000;抑制表达组,使用Lipo2000运载PTHLH-homo-617质粒转染软骨细胞;空白对照组,培养液中添加Lipo2000。通过Rt-PCR实验检测软骨细胞增殖相关指标如Sox-9、Col-Ⅱ、Agg、Ihh、Col-Ⅹ、Runx-2及MMP-13的基因表达水平变化;EdU标记实验、CCK-8实验检测软骨细胞增殖情况。3.PTHrP促进生长板软骨细胞增殖相关机制的实验研究。将生长板软骨细胞体外培养至第二代后随机分为2个组别:实验组给予添加外源性PTHrP的培养液,对照组仅给予培养液。通过免疫荧光实验及Western blot实验观察并比较实验组与对照组生长板软骨细胞中HDAC4在胞浆和胞核中的含量及分布;使用PTHrP孵育小鼠生长板组织与细胞,通过免疫组化实验观察并对比两组Runx-2表达水平的差异。结果:1.镜下成功观察到呈半透明状的C57BL/6小鼠胫骨生长板,HE染色与番红O染色可见呈柱状排列的生长板增殖区软骨细胞;成功分离小鼠胫骨生长板并进行细胞培养。2.Rt-PCR结果显示:PTHrP高表达组小鼠生长板软骨细胞中Col-Ⅱ的表达量相较于空白对照组更高,Sox9、Ihh、MMP-13和Runx-2的表达则相对降低(P<0.05);抑制表达组生长板软骨细胞中Ihh的表达量相较于空白对照组增多(P>0.05),Sox-9、Col-Ⅱ、Col-Ⅹ、Agg、Runx-2及MMP-13的表达水平与空白对照组相比无明显变化(P>0.05)。EdU标记实验结果显示:PTHrP高表达组生长板软骨细胞阳性率高于空白对照组(P<0.05),抑制表达组细胞阳性率与空白组无明显差异(P>0.05);CCK-8实验结果与EdU标记实验结果一致。3.Western blot实验结果显示:空白对照组软骨细胞HDCA4在胞浆与胞核中的表达量相差不大,PTHrP高表达组小鼠生长板软骨细胞胞核内HDAC4的蛋白水平明显高于胞浆(P<0.05);细胞免疫荧光实验结果显示:空白对照组生长板软骨细胞HDCA4荧光围绕胞核分布,且胞浆和胞核中有,而PTHrP高表达组HDCA4荧光主要位于软骨细胞核内,胞浆中几乎没有荧光分布;免疫组化实验结果显示:PTHrP高表达组的小鼠生长板及生长板软骨细胞中Runx-2的蛋白表达水平均低于空白对照组。结论:1.PTHrP可促进小鼠生长板软骨细胞的增殖,且主要通过旁分泌途径发挥作用。2.PTHrP可促进HDAC4由胞浆穿梭入胞核,进而抑制Runx-2的表达发挥其促进软骨细胞增殖的作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
终板软骨细胞论文参考文献
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