羊膜匀浆论文-吕璐,杨文贤,童亚林,王磊,莫永亮

羊膜匀浆论文-吕璐,杨文贤,童亚林,王磊,莫永亮

导读:本文包含了羊膜匀浆论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:羊膜,角朊细胞,细胞培养,生长因子

羊膜匀浆论文文献综述

吕璐,杨文贤,童亚林,王磊,莫永亮[1](2016)在《人羊膜匀浆上清液对大鼠角朊细胞生长的影响》一文中研究指出目的观察不同浓度人羊膜匀浆上清液(h AHS)对体外培养的SD大鼠角朊细胞生长的影响。方法取SD大鼠背部皮肤,采用中性蛋白酶与胰蛋白酶复合消化的方法,分离第一代角朊细胞。将新鲜人羊膜制备成h AHS,采用考马斯亮蓝法、酶联免疫吸附试验分别测定h AHS中总蛋白含量和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(b FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的浓度。用不同浓度h AHS对第一代角朊细胞进行体外培养:将细胞以2.5×104个/m L密度接种于96孔板中(每孔100μL),随机数字表法将其分为体积分数0(对照组)及10%、15%、20%、25%h AHS组,用含10%胎牛血清低糖培养基培养24 h后,根据h AHS在低糖DMEM培养基中的不同体积分数进行换液,分别于培养即刻和培养24、48、96 h,用噻唑兰法检测各孔的吸光度值并绘制角朊细胞的生长曲线和计算各组细胞增殖率。采用SPSS13.0统计软件进行分析,各不同体积分数h AHS组的数据与对照组比较采用Dunnett-t检验。结果 h AHS中总蛋白含量为(675.435±9.215)×10-3g/L,EGF、b FGF和VEGF的浓度分别为(470.625±2.546)×10-6、(4.121±0.026)×10-6和(0.172±0.002)×10-6g/L。与对照组比较,10%h AHS组培养48、96 h角朊细胞增殖率明显高于对照组,差异均有显着性统计学意义(t=4.644、9.694,P值均小于0.01),15%h AHS组培养48、96 h角朊细胞增殖率均明显高于对照组,差异均有显着性统计学意义(t=4.766、6.648,P值均小于0.01);20%h AHS组培养24 h角朊细胞增殖率高于对照组,差异有统计学意义(t=2.272,P<0.05),培养48、96 h增殖率均明显高于对照组,差异有显着性统计学意义(t=5.027、8.861,P值均小于0.01);25%h AHS组培养48 h增殖率低于对照组,差异有统计学意义(t=2.188,P<0.05),培养96 h增殖率明显低于对照组,差异有显着性统计学意义(t=5.147,P<0.01)。结论体积分数10%、15%、20%h AHS对体外培养的角朊细胞增殖有明显促进作用,且促增殖的效果随h AHS体积分数的增加而增强,但h AHS的体积分数在25%时角朊细胞的增殖受到抑制,平稳期相对缩短。(本文来源于《中华损伤与修复杂志(电子版)》期刊2016年02期)

莫永亮,刘亮,童亚林,王磊,吕璐[2](2016)在《人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤条件下肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及炎症因子分泌的影响》一文中研究指出目的观察人羊膜匀浆上清液(human amniotic homogenate supernatant,hAHS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致伤条件下大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell,AT-Ⅱ)增殖及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin1 beta,IL-1β)分泌的影响。方法 1取健康胎盘来源的新鲜人羊膜制备hAHS,配制含hAHS体积分数不同的5组培养基(对照组、10%hAHS组、20%hAHS组、40%hAHS组、80%hAHS组)对大鼠AT-Ⅱ行分组培养,四甲基偶氮唑盐(microculture tetrazolium,MTT)法测不同时间点OD630值。2对对照组、LPS致伤组、40%hAHS干预组大鼠AT-Ⅱ行分组培养,MTT法和酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测不同时间点OD630值和培养液中大鼠TNF-α和IL-1β含量。结果 1对数期内前4组间各时间点比较,hAHS体积分数相对较高组别的OD630值也相对较高(即40%hAHS组>20%hAHS组>10%hAHS组>对照组),且第3~5天均有统计学差异(P<0.05),而hAHS含量更高的80%hAHS组,各时间点均低于40%hAHS组,且第3~5天有统计学差异(P<0.05)。2 hAHS干预组在24 h后各时间点的OD630值不仅均高于LPS致伤组,也均高于对照组,且均有统计学差异(P<0.05)。与此同时,hAHS干预组各时间点大鼠TNF-α和IL-1β含量均低于LPS致伤组,且二者均分别于前6 h各时间点组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 hAHS可显着促进体外正常培养条件下AT-Ⅱ的增殖,且对LPS致伤条件下AT-Ⅱ的增殖和TNF-α、IL-1β等促炎因子分泌具有保护和抑制作用。(本文来源于《华南国防医学杂志》期刊2016年02期)

陈云鹏,王磊,童亚林,刘亮,吕璐[3](2015)在《人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤的大鼠肺微血管内皮细胞增殖及分泌炎症因子的影响》一文中研究指出目的:探讨人羊膜匀浆上清液(hAHS)对脂多糖(LPS)致伤的大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)增殖及其分泌促炎因子的影响。方法:用新鲜人羊膜制备hAHS,用考马斯亮蓝法和ELISA法分别测定hAHS中总蛋白和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白介素-4(IL-4)、IL-10、血管生成素-1(Ang-1)、人β-防御素2(HBD2)的含量。MTT法检测不同体积分数hAHS(0、10%、15%、20%、25%)作用于RPMVECs后细胞增殖活性的变化,确定hAHS促进RPMVECs增殖的最佳浓度。根据共培养条件不同,将RPMVECs随机分为4组:N组(10%FBS+DMEM/F12),A组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS),B组(10%FBS+DMEM/F12+LPS)和C组(10%FBS+DMEM/F12+15%hAHS+LPS)。各组细胞在干预后0、12、24、48、72h用MTT法测定吸光度值(A值),并分别于培养6、8、10、12、24h时用ELISA法测定RPMVECs培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果:hAHS中总蛋白浓度为(725.125±12.625)mg/L,其中EGF、bFGF、VEGF、IL-4、IL-10、Ang-1、HBD2的浓度分别为(504.785±4.665)、(4.426±0.138)、(0.185±0.006)、(25.650±4.104)、(13.733±2.197)、(15.561±0.496)和(4.763±0.714)ng/L。hAHS的体积分数在10%~20%时均具有促进RPMVECs增殖的作用且以15%hAHS培养后第7、9天的增殖率最佳,而25%hAHS在第7、9、11天使RPMVECs增殖率小于0%hAHS组(P<0.05)。A组48和72h细胞增殖活性较N组显着增加,B组24、48和72h的增殖活性较N组显着降低;C组24、48和72h的增殖活性较B组显着升高(P<0.05)。ELISA结果显示,B组各时间点的IL-6和TNF-α的含量以及8、10、12和24h的IL-8含量均显着高于N组(P<0.05);C组10和12h的IL-6含量,8、10、12和24h的IL-8含量及各时间点的TNF-α含量均显著低于B组(P<0.05)。结论:hAHS含有促进组织修复、调节免疫反应、降低血管通透性及杀伤致病微生物的多种生长因子、细胞因子,对LPS致伤的RPMVECs增殖具有促进作用,并减少致伤后炎症因子分泌。(本文来源于《感染、炎症、修复》期刊2015年01期)

刘亮,王磊,童亚林,莫永亮,吕璐[4](2014)在《不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖》一文中研究指出背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代培养RSC96细胞株,传代至第2代用于实验研究。根据人羊膜匀浆上清液在培养基中的不同体积分数(0,10,15,20,25%)分组。结果与结论:人羊膜匀浆上清液的总蛋白浓度为675 mg/L,表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血管内皮生长因子浓度分别为(470.625±2.546),(4.121±0.026)和(0.172±0.002)ng/L。在培养第1-7天,10%和15%人羊膜匀浆上清液组的增殖率大于20%和25%人羊膜匀浆上清液组(P<0.05);10%、15%人羊膜匀浆上清液组显示出促进细胞增殖的作用,而20%、25%人羊膜匀浆上清液组显示出抑制细胞增殖的作用;各实验组的细胞活力与对照组接近(P>0.05)。提示人羊膜匀浆上清液低浓度时(10%和15%)具有促进RSC96增殖作用,高浓度时(20%和25%)抑制RSC96增殖。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2014年20期)

叶芬,夏元,施宇华,黄振平[5](2014)在《共聚焦显微镜观察人羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜超微结构的影响》一文中研究指出目的通过角膜共聚焦显微镜活体动态观察人羊膜匀浆提取液对大鼠角膜碱烧伤后角膜超微结构的影响,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤后的临床价值及作用机理。方法 SD大鼠40只(40只眼),通过1 mol/L的氢氧化钠(NaOH)溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。随机分为实验组和对照组,实验组行人羊膜匀浆提取液(AM)点眼,每日4次,对照组用PBS液点眼,每日4次。碱烧伤后行共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜各层细胞数量以及形态的变化。结果实验组角膜上皮层炎症细胞形成晚,数量较少;基质层纤维结构排列较为规则,肌成纤维细胞的增殖和激活较少、角膜新生血管数量少,管径细。结论新鲜人羊膜匀浆提取液可以有效促进大鼠碱烧伤后角膜上皮细胞的增殖,抑制炎症细胞浸润,减少角膜新生血管的形成,抑制成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成,有利于碱烧伤后大鼠角膜的透明愈合。(本文来源于《临床眼科杂志》期刊2014年02期)

刘亮[6](2014)在《人羊膜匀浆上清液对脂多糖诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤保护作用研究》一文中研究指出目的(1)观察不同浓度的人羊膜匀浆上清液(human Amniotic Homogenates Supernatant, hAHS)对体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar Type Ⅱ cell, AT-Ⅱ)增殖的影响。(2)探讨hAHS对脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)致大鼠AT-Ⅱ损伤后细胞增殖的保护作用及自身表达促炎细胞因子的影响。方法(1) hAHS的制备及其总蛋白与相关因子含量的测定:取健康剖宫产产妇胎膜,PBS冲洗,于无菌条件下剥离人羊膜,同时鉴定其活力。将活力大于95%的人羊膜剪碎后放入EP管,按体积比1:1加入专用培养基匀浆,转移匀浆液并按体积比1:5加入专用培养基后离心,离心后取上清液用细菌过滤器过滤,收集滤液,即得到用于细胞培养的hAHS,-80℃冻存备用。参照上述方法,将过程中的专用培养基用PBS替代,制得用于细胞因子检测的hAHS,并用考马斯亮蓝法检测其总蛋白含量,ELISA法检测细胞因子EGF、 bFGF、 HGF、 IL-4、 IL-10、 HBD2的含量。(2)观察不同浓度hAHS对体外培养的大鼠AT-Ⅱ增殖的影响:将第一代AT-Ⅱ培养至90%融合后消化并以2×104cell/mL密度接种于96孔板,每孔200μL,孵育24h,经饥饿处理后弃培养液,按分组更换培养基,并隔天换液。根据培养基配方不同而分为五组(各配方中FBS、hAHS、专用培养基的浓度均指其占培养基总体积的百分数):0%hAHS组为10%FBS+90%专用培养基,10%hAHS组为10%FBS+80%专用培养基+10%hAHS, 20%hAHS组为10%FBS+70%专用培养基+20%hAHS,40%hAHS组为10%FBS+50%专用培养基+40%hAHS,80%hAHS组为10%FBS+10%专用培养基+80%hAHS。分别于每组第一次更换培养基后的第0(当天)、1、3、5、7天用MTT法检测各孔的OD值、绘制生长曲线、计算各组细胞增殖率。(3) hAHS对LPS诱导AT-Ⅱ损伤的保护作用:培养第一代AT-Ⅱ至融合度为90%时消化,以1×105cell/mL密度接种于96孔板,每孔200μL。孵育24h,经饥饿处理后,按分组更换培养基。根据培养基、LPS及hAHS配比不同分为五组(各组培养基中FBS、 hAHS、专用培养基的浓度均指其占培养基总体积的百分数,LPS浓度均指培养基中LPS的终浓度):FBS组(对照组)10%FBS+90%专用培养基,hAHS组10%FBS+50%专用培养基+40%hAHS,LPS组10%FBS+90%专用培养基+40μg/mL LPS, LPS+hAHS组10%FBS+50%专用培养基+40%hAHS+40μg/mL LPS。按照实验分组更换培养基后的第0(当天)、24、48、72h用MTT法检测细胞OD值,第2、4、6、12、24h收集细胞培养上清液,采用ELISA法检测各组细胞培养上清液中鼠源性IL-1β、TNF-α的含量。结果(1) hAHS中总蛋白含量为(725.125±12.625)mg/L,其中部分细胞因子含量分别为:EGF(504.785±4.665)、bFGF(4.426±0.138)、HGF(20.763±3.396)ng/L,IL-4(25.650±4.104) ng/L、IL-10 (13.733±2.197) ng/L、Ang-1 (15.561±0.496) ng/L、HBD2 (4.763±0.714) ng/L。(2) hAHS促进AT-ⅡI增殖实验中,各组生长曲线趋势为——对照组第1天处于停滞期,第3、5、7天处于对数期;10%组只有短暂的停滞期,第1、3、5、7天处于对数期;20%和80%组相似,经过短暂的停滞期后,第1、3、5天处于对数期,第7天处于平稳期;40%组只有短暂的停滞期,第1、3、5、7天处于对数期。各组OD值相比——实验组各组的OD值在第1、3、5、7天都大于对照组(C组)且有统计学差异(P<0.05)。10%hAHS浓度组的OD值在第1、3、5、7天小于40%hAHS浓度组且有统计学差异(P<0.05),在第3、5、7天小于20%、80%hAHS浓度组且有统计学差异(P<0.05)。20%hAHS浓度组的OD值在第3、5天小于40%hAHS浓度组且有统计学差异(P<0.05),在第1、3、天小于80%hAHS浓度组,其中在第3天有统计学差异(P<0.05),在第5、7天大于80%hAHS浓度组,其中在第7天有统计学差异(P<0.05)。40%hAHS浓度组的OD值在第1、3、5天均大于其他实验各组,其中40%hAHS浓度组的OD值在第1、3、5天大于10%hAHS浓度组且有统计学差异(P<0.05),40%hAHS浓度组的OD值在第3、5天大于20%、80%hAHS浓度组且有统计学差异(P<0.05)。各组细胞增殖率相比——10%组的增值率在第1、3、5、7天小于40%组且有统计学差异(P<0.05)。20%组的增值率在第3、5天小于40%组且有统计学差异(P<0.05)。80%组的增值率在第3、5、7天小于40%组且有统计学差异(P<0.05)。(3) hAHS对LPS致伤的保护实验中:hAHS组在第24、48、72h的OD值高于FBS组,有统计学差异(P<0.05);IL-1β、TNF-α的含量在各时间点与FBS组相比无统计学差异(P>0.05)。LPS致伤组在第48、72h的OD值低于FBS组,具有统计学差异(P<0.05);IL-1p的含量在第2、4小时高于FBS组,且具有统计学差异(P<0.05),TNF-α的含量在第2、4、6、12小时均高于FBS组,且具有统计学差异(P<0.05)。LPS+hAHS组在第24、48、72h的OD值高于LPS组,具有统计学差异(P<0.05);IL-1β的含量在2、4小时低于LPS组(P<0.05),TNF-α的含量在第2、4、6、12小时低于LPS组,且具有统计学差异(P<0.05)。结论(1) hAHS检测到了EGF、 bFGF、 HGF、 IL-4、 IL-10、 HBD2。(2) hAHS对体外培养的大鼠AT-Ⅱ增殖有明显的促进作用,浓度为40%时有最佳的促进效果。(3) hAHS对LPS诱导大鼠AT-Ⅱ损伤后AT-Ⅱ的增殖具有保护作用,并可降低LPS诱导AT-Ⅱ损伤后自身产生的促炎因子IL-1β、TNF-α的表达。(本文来源于《广西师范大学》期刊2014-04-01)

王磊[7](2014)在《人羊膜匀浆上清液对脂多糖致肺微血管内皮细胞损伤的保护作用》一文中研究指出研究目的(1)观察不同浓度的人羊膜匀浆上清液(human Amniotic Homogenates Supernatant, hAHS)对体外培养的SD大鼠肺微血管内皮细胞(Pulmonary Microvascular Endothelial Cells, PMVEC)增殖的影响。(2)探讨hAHS对脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)致SD大鼠PMVEC损伤后细胞增殖及PMVEC促炎细胞因子表达的影响。研究方法(1) hAHS的制备及其总蛋白与相关因子含量的测定:取健康剖宫产产妇胎膜,PBS冲洗,于无菌条件下剥离人羊膜,同时鉴定其活力。将活力大于95%的人羊膜剪碎后放入EP管,按体积比1:1加入DMEM/F12匀浆,转移匀浆液并按体积比1:5加入DMEM/F12后离心,离心后取上清液用细菌过滤器过滤,收集滤液,即得到用于细胞培养的hAHS,-80℃冻存备用。参照上述方法,将过程中的DMEM/F12用PBS替代,制得用于细胞因子检测的hAHS,并用考马斯亮蓝法检测其总蛋白含量,ELISA法检测细胞因子EGF、bFGF、 VEGF、IL-4、IL-10、Ang-1、HBD2的含量。(2)观察不同浓度hAHS对体外培养的大鼠PMVEC增殖的影响:将第一代PMVEC培养至第6天后消化并以1×104cell/mL密度接种于96孔板,每孔200μL。孵育24h后弃培养液,按分组更换培养基,并隔天换液。根据培养基配方不同而分为五组(各配方中FBS、 hAHS、DMEM/F12的浓度均指其占培养基总体积的百分数):0%hAHS组为10%FBS+90% DMEM/F12,10%hAHS组为10%FBS+80%DMEM/F12+10%hAHS,15%hAHS组为10%FBS+75% DMEM/F12+15%hAHS,20%hAHS组为10%FBS+70% DMEM/F12 +20%hAHS,25%hAHS组为10%FBS+65%DMEM/F12+25%hAHS。分别于每组第一次更换培养基后的第0(当天)、1、3、5、7、9、11天用MTT法检测各孔的OD值、绘制生长曲线、计算各组细胞增殖率。(3) hAHS对LPS致PMVEC损伤的保护作用:培养第一代PMVEC至融合度为80%时消化,以4×104cell/mL密度接种于96孔板,每孔200μL。孵育24h后,用含10%FBS的DMEM/F12换液,培养至第2天后,按分组更换培养基。根据培养基中FBS、LPS及hAHS配比不同分为四组(各组培养基中FBS、hAHS、DMEM/F12的浓度均指其占培养基总体积的百分数,LPS浓度均指培养基中LPS的终浓度):N组10%FBS+90%DMEM/F12, A组10%FBS+75%DMEM/F12+15%hAHS,B组10%FBS+90%DMEM/F12+20μg/mL LPS,C组10%FBS+75%DMEM/F12+15%hAHS+20μg/mL LPS。按照实验分组更换培养基后的第0(当天)、12、24、48、72h用MTT法检测细胞OD值,第6、8、10、12、24h收集细胞培养上清液,采用ELISA法检测各组细胞培养上清液中鼠源性IL-6、IL-8、TNF-α含量。研究结果(1) hAHS中总蛋白含量为(725.125±12.625)mg/L,其中部分细胞因子含量分别为:EGF (504.785±4.665)ng/L、bFGF(4.426±0.138)ng/L、VEGF(0.185±0.006)ng/L,IL-4 (25.650±4.104)ng/L、IL-10(13.733±2.197)ng/L、Ang-1 (15.561±0.496)ng/L、HBD2 (4.763±0.714)ng/L。(2) hAHS促进PMVEC增殖实验中,各组生长曲线趋势为——0%hAHS组,细胞从第0至3天为停滞期,第3天开始缓慢增长,第4天开始进入对数生长期,第7天到达平台期并持续至第10天,继而进入衰亡期;10%hAHS组,前4天与0%hAHS组相似,第4至8天为对数生长期,第8至10天为平台期,继而进入衰亡期;15%hAHS组,前4天与0%hAHS组相似,第4至7天为对数生长期,第7至9天为平台期,继而进入衰亡期;20%hAHS组,与0%hAHS组类似;25%hAHS组,与15%hAHS组类似。各组OD值、增殖率相比——10%hAHS组OD值在第1、3、5天大于0%hAHS组但无统计学差异(P>0.05),在第7、9、11天大于0%hAHS组且有统计学差异(P<0.05);增殖率在第7天大于0%hAHS且有统计学差异(P<0.05),其他时间点无统计学差异(P>0.05)。15%hAHS组OD值在第1、3天大于0%hAHS组但无统计学差异(P>0.05),在第5、7、9、11天大于0%hAHS组且有统计学差异(P<0.05);增殖率在第5、7天大于0%hAHS且有统计学差异(P<0.05),其他时间点无统计学差异(P>0.05)。20%hAHS组OD值在各时间点与0%hAHS组相比均无统计学差异(P>0.05),增殖率在第9天小于0%hAHS且有统计学差异(P<0.05),其他时间点无统计学差异(P>0.05)。25%hAHS组OD值在第1、3、5与0%hAHS组相比无统计学差异(P>0.05),在第7、9、11天小于0%hAHS组且有统计学差异(P<0.05);增殖率在第7、9、11天小于0%hAHS且有统计学差异(P<0.05),其他时间点无统计学差异(P>0.05)。(3) hAHS对LPS致伤PMVEC的保护实验中:A组(hAHS组)在第48、72h的OD值高于对照N组,有统计学差异(P<0.05);IL-6、IL-8、TNF-α的含量在各时间点与N组(FBS组)相比无统计学差异(P>0.05)。B组(LPS致伤组)在第24、48、72h的OD值低于对照N组,具有统计学差异(P<0.05);IL-6、IL-8(6h除外)、TNF-a的含量在各时间点均高于对照N组,且具有统计学差异(P<0.05)。C组(LPS+hAHS保护组)在第24、48、72h的OD值高于实验B组,具有统计学差异(P<0.05);IL-6的含量在10、12h时低于实验B组,IL-8的含量在8、10、12、24h时低于实验B组,TNF-a的含量在各时间点低于实验B组,且具有统计学差异(P<0.05)。研究结论(1) hAHS含有丰富的细胞因子,如EGF、bFGF、VEGF、IL-4、IL-10、HBD2、Ang-1。(2) hAHS在10、15%浓度时对体外培养的SD大鼠PMVEC增殖有促进作用,尤其在15%浓度时促进作用最明显。但在25%时出现抑制PMVEC增殖的现象。(3) hAHS对LPS致SD大鼠PMVEC损伤后细胞增殖具有保护作用,并可降低LPS诱导PMVEC后细胞分泌促炎因子IL-6、IL-8、TNF-α的表达。(本文来源于《广西师范大学》期刊2014-04-01)

叶芬,吴艳,施宇华,黄振平[8](2014)在《羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜瘢痕形成的抑制作用》一文中研究指出目的观察大鼠角膜碱烧伤使用羊膜匀浆提取液(extraction of amniotic membrane,EAM)后角膜瘢痕的变化,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤的临床价值及作氉用机理。方法取SD大鼠40只随机分为EAM组(20只)和对照组(20只),所有大鼠通过1 mol·L-1的NaOH溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。EAM组行EAM滴眼,每天4次,对照组用PBS缓冲液滴眼。通过裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜透明性,角膜共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜超微结构的变化,计算肌成纤维细胞的数量。结果碱烧伤后28 d,EAM组的角膜透明度评分明显好于对照组,两组分别为2.36±0.81和3.36±1.12(P<0.01)。碱烧伤后第9天、第11天、第14天EAM组肌成纤维细胞密度均小于对照组,各时间点EAM组、对照组分别为(201±39)个·mm-2、(291±48)个·mm-2,(248±84)个·mm-2、(349±105)个·mm-2,(108±57)个·mm-2、(175±62)个·mm-2,两组之间差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论新鲜EAM可以有效抑制碱烧伤后肌成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成。(本文来源于《眼科新进展》期刊2014年03期)

唐敏,席兴华,唐罗生,岳丽菁[9](2013)在《人羊膜匀浆提取液对兔角膜成纤维细胞增殖和TGF-β1 mRNA表达的影响》一文中研究指出目的研究不同浓度的人羊膜匀浆提取液对兔角膜成纤维细胞增殖及转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA表达的影响,探讨人羊膜匀浆提取液抑制角膜瘢痕增生的机制。方法采用消化法获得原代兔角膜成纤维细胞并传代培养,应用波形蛋白和角蛋白抗体免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定。采用MTT比色法观察不同浓度人羊膜匀浆提取液(0 mg·L-1、40 mg·L-1、80 mg·L-1、160 mg·L-1,即对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组)对兔角膜成纤维细胞增殖的影响,同时利用RT-PCR检测不同浓度的人羊膜匀浆提取液对兔角膜成纤维细胞TGF-β1 mRNA表达的影响。结果体外培养细胞的免疫细胞化学染色显示:波形蛋白抗体染色呈阳性,角蛋白抗体染色呈阴性,证实所培养的细胞为角膜成纤维细胞。与对照组(OD值0.415±0.026)比较,不同浓度人羊膜匀浆提取液组兔角膜成纤维细胞增殖均显着受抑制(OD值分别为0.335±0.013、0.220±0.018、0.094±0.005),差异均有显着统计学意义(均为P<0.01)。与对照组(1.768±0.040)比较,不同浓度人羊膜匀浆提取液组兔角膜成纤维细胞TGF-β1 mRNA相对表达量(1.519±0.669、0.617±0.014、0.622±0.031)显着降低,差异均有显着统计学意义(均为P<0.01),但中、高浓度组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论人羊膜匀浆提取液具有抑制体外培养的兔角膜成纤维细胞增殖作用,并随着羊膜匀浆提取液浓度的增加,其抑制作用增强。(本文来源于《眼科新进展》期刊2013年11期)

蒋峰,丁莉莉,薛春燕,黄振平[10](2013)在《羊膜匀浆提取液与羊膜移植对大鼠碱烧伤后新生血管抑制作用的比较》一文中研究指出目的比较羊膜匀浆提取液和羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后新生血管的影响。方法 SD大鼠30只随机分为叁组,每组10只。使用3 mm直径圆形滤纸片浸入1 mol·L-1,NaOH溶液中60 s后放置于大鼠角膜中央建立右眼角膜碱烧伤模型。A组行PBS(磷酸缓冲盐溶液)液点眼,B组行羊膜移植术,C组行AM(羊膜匀浆提取液)点眼。通过裂隙灯显微镜观察叁组的角膜新生血管情况。结果碱烧伤后11 d,叁组的角膜新生血管面积分别为(49.12±2.05)、(35.17±1.95)、(34.04±1.37)mm2。B、C两组的新生血管面积比A组显着减少(q A、B=15.59,P A、B<0.001,q A、C=19.340 6,P A、C<0.001),而B、C组之间没有显着性差异(q=1.499 4,P>0.05)。结论新鲜人羊膜匀浆提取液与羊膜移植均能有效减少角膜新生血管形成。(本文来源于《安徽医药》期刊2013年09期)

羊膜匀浆论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的观察人羊膜匀浆上清液(human amniotic homogenate supernatant,hAHS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致伤条件下大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell,AT-Ⅱ)增殖及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin1 beta,IL-1β)分泌的影响。方法 1取健康胎盘来源的新鲜人羊膜制备hAHS,配制含hAHS体积分数不同的5组培养基(对照组、10%hAHS组、20%hAHS组、40%hAHS组、80%hAHS组)对大鼠AT-Ⅱ行分组培养,四甲基偶氮唑盐(microculture tetrazolium,MTT)法测不同时间点OD630值。2对对照组、LPS致伤组、40%hAHS干预组大鼠AT-Ⅱ行分组培养,MTT法和酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测不同时间点OD630值和培养液中大鼠TNF-α和IL-1β含量。结果 1对数期内前4组间各时间点比较,hAHS体积分数相对较高组别的OD630值也相对较高(即40%hAHS组>20%hAHS组>10%hAHS组>对照组),且第3~5天均有统计学差异(P<0.05),而hAHS含量更高的80%hAHS组,各时间点均低于40%hAHS组,且第3~5天有统计学差异(P<0.05)。2 hAHS干预组在24 h后各时间点的OD630值不仅均高于LPS致伤组,也均高于对照组,且均有统计学差异(P<0.05)。与此同时,hAHS干预组各时间点大鼠TNF-α和IL-1β含量均低于LPS致伤组,且二者均分别于前6 h各时间点组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 hAHS可显着促进体外正常培养条件下AT-Ⅱ的增殖,且对LPS致伤条件下AT-Ⅱ的增殖和TNF-α、IL-1β等促炎因子分泌具有保护和抑制作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

羊膜匀浆论文参考文献

[1].吕璐,杨文贤,童亚林,王磊,莫永亮.人羊膜匀浆上清液对大鼠角朊细胞生长的影响[J].中华损伤与修复杂志(电子版).2016

[2].莫永亮,刘亮,童亚林,王磊,吕璐.人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤条件下肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及炎症因子分泌的影响[J].华南国防医学杂志.2016

[3].陈云鹏,王磊,童亚林,刘亮,吕璐.人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤的大鼠肺微血管内皮细胞增殖及分泌炎症因子的影响[J].感染、炎症、修复.2015

[4].刘亮,王磊,童亚林,莫永亮,吕璐.不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖[J].中国组织工程研究.2014

[5].叶芬,夏元,施宇华,黄振平.共聚焦显微镜观察人羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜超微结构的影响[J].临床眼科杂志.2014

[6].刘亮.人羊膜匀浆上清液对脂多糖诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤保护作用研究[D].广西师范大学.2014

[7].王磊.人羊膜匀浆上清液对脂多糖致肺微血管内皮细胞损伤的保护作用[D].广西师范大学.2014

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