导读:本文包含了酶抑制蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:辣椒疫霉菌,葡聚糖酶抑制蛋白(GIP),原核表达,纯化
酶抑制蛋白论文文献综述
王会征,兰玉彬[1]（2019）在《辣椒疫霉菌葡聚糖酶抑制蛋白的原核表达、纯化及结晶》一文中研究指出葡聚糖酶抑制蛋白(GIP)是辣椒疫霉菌在病理环境下诱导产生的一类蛋白,是病原菌抗性蛋白的一种。本研究根据辣椒疫霉菌全基因组序列,通过生物信息学分析、序列比对获得葡聚糖酶抑制蛋白全长基因序列。以辣椒疫霉高致病菌株SD33全基因组为模板扩增GIP基因cDNA,并对其进行相关生物信息学分析。基因经测序验证后与载体pET28a(+)连接,构建好的重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli Rosetta),用IPTG诱导表达重组蛋白6×His-GIP。重组蛋白在5 mol/L尿素变性环境下进行亲和层析纯化,对纯蛋白进行透析、复性、浓缩后进行分子排阻层析纯化,并对获得的纯蛋白进行蛋白结晶试验,为进一步阐明GIP作用机理奠定基础。(本文来源于《山东农业科学》期刊2019年10期）
杜轲,周衍衡,陈国梁,贺晓龙,张向前[2]（2018）在《敲低丝酶抑制蛋白E2(serpin E2)抑制SW480结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移》一文中研究指出目的探讨丝酶抑制蛋白E2(serpin E2)对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法免疫组织化学染色对30名结肠癌患者癌组织和癌旁组织中serpin E2的表达量进行差异性检测,通过转染serpin小干扰RNA(si-serpin)至SW480细胞中,实时定量PCR检测SW480细胞中serpin E2 mRNA水平,Western blot法检测serpin E2蛋白水平,CCK-8法和平板克隆形成实验检测SW480细胞的增殖,TranswellTM实验分别检测SW480细胞的侵袭与迁移能力。结果结肠癌组织中serpin E2表达明显增加,敲低SW480细胞serpin E2水平后,SW480细胞的增殖、侵袭、迁移能力均显着降低。结论下调SW480细胞中serpin E2水平抑制SW480细胞的增殖、侵袭和迁移。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2018年11期）
李婷,吴成成,李保华,练森,梁文星[3]（2018）在《苹果木葡聚糖酶抑制蛋白基因的克隆与表达分析》一文中研究指出以‘富士’苹果(Malus pumila)树皮总RNA为模版,利用RT-PCR技术克隆木葡聚糖酶抑制蛋白基因,命名为Mp XEGIP1。通过生物信息学软件对基因c DNA序列、系统进化关系及理化性质进行分析,采用荧光定量PCR技术测定Mp XEGIP1的表达量。构建原核表达载体p ET-Mp XEGIP1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),利用SDSPAGE和western blot检测和验证融合蛋白的表达。结果表明,获得了Mp XEGIP1的全长c DNA序列(登录号MG515243),开放阅读框1 344 bp,编码447个氨基酸。Mp XEGIP1编码蛋白的理论分子量约48.77 k Da,为亲水的不稳定蛋白;57~419位氨基酸为木聚糖酶抑制蛋白保守域。序列多重比对及系统进化树分析表明,Mp XEGIP1编码氨基酸序列与‘金冠’苹果XEGIP完全一致,其次与梨XEGIP序列相似性81%,叁者亲缘关系较近。‘富士’枝条接种腐烂病菌后,Mp XEGIP1显着上调表达。原核表达和western blot分析表明,该蛋白以包涵体形式存在,能与HIS抗体特异性结合,证实Mp XEGIP1编码蛋白得到成功表达。(本文来源于《植物生理学报》期刊2018年07期）
关瑞攀,白智伟,王倩,唐笔锋,崔秀明[4]（2018）在《叁七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是植物抗病防御系统的重要组成部分。在前期研究中,从叁七中分离得到一个编码PGIP蛋白的基因PnPGIP,PnPGIP在转录水平响应叁七根腐病菌茄腐镰刀菌的侵染。为深入分析PnPGIP的功能,构建PnPGIP的原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行大量表达,纯化获得PnPGIP的重组蛋白,并进行体外平板抑菌试验;构建PnPGIP的植物超表达载体,通过根癌农杆菌介导产生了PnPGIP转基因烟草,分析T2转基因烟草离体叶片对茄腐镰刀菌的抗性。PnPGIP原核重组蛋白对茄腐镰刀菌、胶孢炭疽菌、核盘菌和轮枝状镰刀菌的菌丝生长具有很强的抑制作用,并且随着蛋白量的增加,抑制活性也逐渐增强。q RT-PCR分析结果显示,PnPGIP在T2转基因烟草中大量表达。此外,与野生型烟草相比,转基因烟草对茄腐镰刀菌的抗性显着增强。PnPGIP是叁七中参与茄腐镰刀菌防御反应的重要抗病基因。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年02期）
聂翠蓉[5]（2017）在《基因编辑系统有通用“刹车装置”》一文中研究指出科技日报北京8月29日电 （聂翠蓉）着名期刊《细胞》杂志近日刊登了CRISPR-Cas9基因编辑工具的共同发现者詹妮弗·唐德纳团队的最新成果：他们通过X衍射结晶法发现，两种抑制Cas9活性的蛋白质ACRⅡC1和ACRⅡC3具有完全不同的作用机理，且A(本文来源于《科技日报》期刊2017-08-30）
孙志伟,李佳欣,张茹琴,迟玉成,徐曼琳[6]（2016）在《花生多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因ApPGIP1的克隆》一文中研究指出以花育25(Arachishypogaea L.)植株总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,获得大约1 000 bp的条带。将该片段克隆到pMD19-T simple vector载体上,经测序表明,该序列全长967 bp,含一个开放阅读框(ORF),编码一个由318个氨基酸残基组成的蛋白质。在线软件预测该蛋白质的分子量为37.9kD,理论等电点为6.65,碱性氨基酸(Lys+Arg)占8.9%,酸性氨基酸(Asp+Glu)占9.3%,亮氨酸比例最高(12.8%);不稳定系数为39.10,说明该蛋白为稳定蛋白。将该cDNA及其推导的氨基酸序列在NCBl网站上进行Blast比对,表明该及其推导的氨基酸序列与已报道的PGIP基因及其推导的氨基酸的序列同源性最高。分析结果表明,所克隆片段为花生的PGIP基因,命名为ApPGIP1,并提交给GenBank。蛋白质疏水性分析表明,该蛋白N端有一明显的疏水区,采用神经网络方法预测蛋白质信号肽表明,ApPGIP1信号肽为N端的26个氨基酸残基,这与疏水性分析结果相一致。序列分析结果还表明,ApPGIP1成熟肽氨基酸序列中具有4个潜在的N-糖基化位点,N端和C端各有4个参与二硫键形成的半胱氨酸残基,亚细胞定位分析表明,该蛋白属于胞外蛋白。ApPGIP1叁级结构预测结果表明,由ApPGIP1肽链构建的叁维模型含9个α-螺旋和21个β-折迭,主体结构由9个串联的LRRs基序组成;ApPGIP1氨基酸序列从第74个氨基酸开始的LRRs基序均具有"LxxLxLxxNxLS/TGxIPxxLxxL"(x代表任意氨基酸残基)这样的共有序列,除个别替换、插入或缺失外,序列高度保守。(本文来源于《植保科技创新与农业精准扶贫——中国植物保护学会2016年学术年会论文集》期刊2016-11-10）
王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春[7]（2016）在《桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种特异性结合和抑制真菌内切多聚半乳糖醛酸酶(endo-PG)活性的细胞壁结合蛋白。采用RT-PCR从嘉陵40(Morus atropurpurea Roxb.)果实中扩增PGIP基因cDNA,利用生物信息学的方法分析其编码蛋白的结构和功能。结果表明,嘉陵40PGIP开放阅读框全长1017 bp,编码338个氨基酸残基,被命名为MaPGIP1。MaPGIP1蛋白分子量37.9 kD,等电点为为6.65,信号肽为N端26个氨基酸残基,具有4个潜在的N-糖基化位点。MaPGIP1蛋白的核心区域由9个串联的LRRs基序组成。原核表达产物经SDS-PAGE分析,MaPGIP1蛋白以包涵体形式出现,Western blot证实了重组蛋白的特异性,经过Ni-NTA柱纯化和分步透析复性后获得可溶性蛋白,该蛋白能部分抑制果桑肥大性菌核病菌(Ciboria shiraiana)PG(Cs PG)活性,其最适pH值为4.5~5.0,最适温度30℃。抑菌试验结果表明,MaPGIP1蛋白在果桑肥大性菌核病菌菌丝侵染油菜叶片过程中具有一定的抑制效果。(本文来源于《第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）》期刊2016-07-01）
王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春[8]（2015）在《桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种特异性结合和抑制真菌内切多聚半乳糖醛酸酶(endo-PG)活性的细胞壁结合蛋白。采用RT-PCR从嘉陵40(Morus atropurpurea Roxb.)果实中扩增PGIP基因c DNA,利用生物信息学的方法分析其编码蛋白的结构和功能。结果表明,嘉陵40PGIP开放阅读框全长1017 bp,编码338个氨基酸残基,被命名为MaPGIP1。MaPGIP1蛋白分子量37.9 k D,等电点为为6.65,信号肽为N端26个氨基酸残基,具有4个潜在的N-糖基化位点。MaPGIP1蛋白的核心区域由9个串联的LRRs基序组成。原核表达产物经SDS-PAGE分析,MaPGIP1蛋白以包涵体形式出现,Western blot证实了重组蛋白的特异性,经过Ni-NTA柱纯化和分步透析复性后获得可溶性蛋白,该蛋白能部分抑制果桑肥大性菌核病菌(Ciboria shiraiana)PG(Cs PG)活性,其最适pH值为4.5~5.0,最适温度30℃。抑菌试验结果表明,MaPGIP1蛋白在果桑肥大性菌核病菌菌丝侵染油菜叶片过程中具有一定的抑制效果。(本文来源于《作物学报》期刊2015年09期）
林世锋,安雪琴,杨承,王仁刚,任学良[9]（2015）在《两个烟草多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆和表达分析》一文中研究指出为了研究多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)在烟草中的生物学功能,运用生物信息学方法,结合RT-PCR和SMART RACE技术,从烟草中克隆到2个多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因c DNA和DNA全长序列,分别命名为Nt PGIP1(Gen Bank登录号:KF317203)和Nt PGIP2(Gen Bank登录号:KF317204)。Nt PGIP1基因全长为1 413 bp,编码338个氨基酸;Nt PGIP2基因全长为1 185 bp,编码329个氨基酸;两基因均没有内含子序列,核苷酸序列有50%的一致性,编码的氨基酸序列有54%的一致性。两基因编码蛋白均含有植物PGIP蛋白特有的重复保守序列LXXLXXLXXLXLXXNXLXGXIPXX。对PGIP基因在烟草不同组织表达量分析发现,两基因在根、茎、叶和芽中均有表达,其中均在茎中表达量最高,其次是根,叶中表达量很低。(本文来源于《华北农学报》期刊2015年01期）
李邦耀,姜晓幸[10]（2014）在《神经丝酶抑制蛋白对神经系统保护作用研究进展》一文中研究指出神经丝酶抑制蛋白(neuroserpin,NSP)是神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员,作为组织型纤溶酶原激活因子(tPA)抑制剂,对中枢神经系统蛋白酶活性起调控作用。在脑梗死及神经损伤等病理过程中,蛋白酶-抑制剂系统活性对脑梗死及神经损伤的预后有重要影响。NSP在脑梗死中能够起到抑制血脑屏障破坏、减少兴奋性毒性、抑制小胶质细胞活化等作用,在脑及脊髓损伤中很可能也起到类似的保护性作用。该文就NSP相关最新实验研究进展作一综述。(本文来源于《国际骨科学杂志》期刊2014年04期）
酶抑制蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨丝酶抑制蛋白E2(serpin E2)对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法免疫组织化学染色对30名结肠癌患者癌组织和癌旁组织中serpin E2的表达量进行差异性检测,通过转染serpin小干扰RNA(si-serpin)至SW480细胞中,实时定量PCR检测SW480细胞中serpin E2 mRNA水平,Western blot法检测serpin E2蛋白水平,CCK-8法和平板克隆形成实验检测SW480细胞的增殖,TranswellTM实验分别检测SW480细胞的侵袭与迁移能力。结果结肠癌组织中serpin E2表达明显增加,敲低SW480细胞serpin E2水平后,SW480细胞的增殖、侵袭、迁移能力均显着降低。结论下调SW480细胞中serpin E2水平抑制SW480细胞的增殖、侵袭和迁移。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶抑制蛋白论文参考文献
[1].王会征,兰玉彬.辣椒疫霉菌葡聚糖酶抑制蛋白的原核表达、纯化及结晶[J].山东农业科学.2019
[2].杜轲,周衍衡,陈国梁,贺晓龙,张向前.敲低丝酶抑制蛋白E2(serpinE2)抑制SW480结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移[J].细胞与分子免疫学杂志.2018
[3].李婷,吴成成,李保华,练森,梁文星.苹果木葡聚糖酶抑制蛋白基因的克隆与表达分析[J].植物生理学报.2018
[4].关瑞攀,白智伟,王倩,唐笔锋,崔秀明.叁七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析[J].华北农学报.2018
[5].聂翠蓉.基因编辑系统有通用“刹车装置”[N].科技日报.2017
[6].孙志伟,李佳欣,张茹琴,迟玉成,徐曼琳.花生多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因ApPGIP1的克隆[C].植保科技创新与农业精准扶贫——中国植物保护学会2016年学术年会论文集.2016
[7].王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春.桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析[C].第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）.2016
[8].王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春.桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析[J].作物学报.2015
[9].林世锋,安雪琴,杨承,王仁刚,任学良.两个烟草多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆和表达分析[J].华北农学报.2015
[10].李邦耀,姜晓幸.神经丝酶抑制蛋白对神经系统保护作用研究进展[J].国际骨科学杂志.2014
标签：辣椒疫霉菌; 葡聚糖酶抑制蛋白(GIP); 原核表达; 纯化;