人胸苷激酶论文-陈媛

人胸苷激酶论文-陈媛

导读:本文包含了人胸苷激酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:人胸苷激酶Ⅰ,免疫分析,磁性纳米颗粒,纳米金

人胸苷激酶论文文献综述

陈媛[1](2008)在《人胸苷激酶Ⅰ免疫分析方法研究》一文中研究指出利用生物传感器技术检测疾病标志物,进行临床疾病的快速诊断以及流行性疾病的现场筛选与群体监控,是当前医学上既新颖又极具吸引力的热门研究课题之一。人胸苷激酶Ⅰ( hTK1 )是一种新的肿瘤标志物,我们就hTK1开展了新型免疫分析方法的研究。这些方法具有快速、准确、方便等优点,而且还避免了放射性免疫方法中经常遇见的问题,有一定的实用价值,有望用于hTK1的临床免疫检测。(1)研制了一种用于hTK1检测的荧光增强型免疫分析方法。采用磁纳米颗粒作为生物分子固定化载体,将辣根过氧化物酶标记的抗体(HRP-Ab)和游离的待测hTK1同时与磁性纳米颗粒表面的固定化hTK1竞争反应。当与磁场分离后,结合在磁性纳米颗粒的酶标记抗体催化3-(间-羟苯基)-丙酸形成荧光产物,在470 nm处产生荧光增强,且荧光增强反比于待测hTK1的浓度。hTK1的线性检测范围为0.01-1 ng/mL,检测下限达到0.008 ng/mL。该荧光免疫方法能很好地检测癌症血清和正常血清中的hTK1,且简单、快速、灵敏,该方法尚可用于其它生物分子的临床检测。(2)研究了一种新型hTK1电流型免疫分析方法。制备了纳米金-壳聚糖复合材料(Nano Au-Chit),壳聚糖膜表面丰富的-NH2与纳米金强静电结合,在玻碳电极表面获得稳定的纳米金-壳聚糖复合物修饰层,再共价固定hTK1。负电性的纳米金可以有效地保持酶的活性,从而制备了性能良好的电流型hTK1免疫传感器,hTK1检测的线性范围是0.5-10 ng/mL,检测限为0.22 ng/mL,显示了良好的检测灵敏度。(3)建立了一种hTK1显微检测新方法。通过扫描电化学显微镜(SECM)的收集模式,检测辣根过氧化物酶(HRP)催化对苯二酚( H2Q )氧化产生的1,4一苯醌(BQ)来间接检测样品中的hTK1。实验中,我们确定了检测hTK1的实验条件,缓冲液为0.1m ol/L磷酸缓冲溶液( pH7 .0 ),底物H2Q和H2O2的浓度均为1.0 x 10-3 mol/L,探头电位为- 0.3 V。在这些实验条件下,对固定在金基底上的hTK1点进行了扫描,得到了它的SECM图像。(本文来源于《湖南大学》期刊2008-05-01)

张万强,吴朝阳,丁克祥,郑永晨,王攀[2](2006)在《压电免疫传感器用于人胸苷激酶及其与单克隆抗体反应亲和常数的测定》一文中研究指出目的用自制单克隆抗体构建人胸苷激酶(hTK)压电免疫传感器,测定免疫反应亲和常数,评价抗体的活性。方法在压电石英晶体的金电极上自组装一层蛋白A,定向固定hTK单克隆抗体,测定不同浓度hTK引起的频移值。结果根据Scatchard绘图法,对免疫反应亲和常数进行了估算,为1.85×106mol/L。结论该压电免疫传感器可直接测定溶液中的hTK,得到免疫反应的亲和常数,并证实实验室制备的单克隆抗体具有较高活性。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2006年02期)

丁克祥,郑永晨,吴朝阳,王攀,张杰[3](2005)在《人胸苷激酶单克隆抗体的制备》一文中研究指出目的制备人胸苷激酶单克隆抗体。方法用大肠杆菌表达和纯化的人胸苷激酶免疫Balb/C小鼠,免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,HAT选择培养和ELISA筛选阳性克隆,阳性克隆杂交瘤注入小鼠腹腔制备腹水,用ELISA和免疫组化鉴定胸苷激酶单克隆抗体。结果经细胞融合和筛选得到37个阳性单克隆杂交瘤,其中有二株杂交瘤可以稳定地产生人胸苷激酶的特异性抗体,制备的腹水中有高效价的抗体活性。结论用原核表达的人胸苷激酶免疫小鼠可以制备出人胸苷激酶特异性单克隆抗体。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2005年01期)

丁克祥,郑永晨,吴朝阳,王攀,张杰[4](2004)在《人胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的 在大肠杆菌中表达人胸苷激酶 (hTK)。方法 用内切酶将hTKTA克隆中的hTK基因切下 ,并与同样内切酶切的载体PET2 8a+连接 ,转化大肠杆菌 ,筛选阳性克隆 ,酶切和DNA序列分析鉴定 ,用IPTG诱导培养阳性克隆 ;SDS -PAGE鉴定hTK在大肠杆菌中的表达。结论 hTK基因重组入PET2 8a +的EcoRI和XhoI位点 ,IPTG可以明显诱导hTK在大肠杆菌中表达。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2004年11期)

丁克祥,郑永晨,吴朝阳,王攀,张杰[5](2004)在《人胸苷激酶基因cDNA克隆》一文中研究指出目的 克隆人胸苷激酶基因cDNA。方法采用逆转录PCR方法扩增胸苷激酶cDNA ,用十二烷基氟波酯 (TPA)刺激人外周血细胞的mRNA为模板 ;扩增的PCR产物经TA克隆重组和内切酶鉴定 ,以及DNA序列分析确定克隆基因的序列。结果经逆转录PCR扩增出一个 70 0bp左右的DNA片段 ,TA克隆出现 1 6个阳性克隆 ,选择其中的一个克隆 (TKTA8)进行DNA序列分析 ,序列分析结果表明TKTA8克隆重组的序列是人胸苷激酶的cDNA序列。结论从外周血细胞中得到了hTK完整的开放读码框架。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2004年10期)

人胸苷激酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的用自制单克隆抗体构建人胸苷激酶(hTK)压电免疫传感器,测定免疫反应亲和常数,评价抗体的活性。方法在压电石英晶体的金电极上自组装一层蛋白A,定向固定hTK单克隆抗体,测定不同浓度hTK引起的频移值。结果根据Scatchard绘图法,对免疫反应亲和常数进行了估算,为1.85×106mol/L。结论该压电免疫传感器可直接测定溶液中的hTK,得到免疫反应的亲和常数,并证实实验室制备的单克隆抗体具有较高活性。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

人胸苷激酶论文参考文献

[1].陈媛.人胸苷激酶Ⅰ免疫分析方法研究[D].湖南大学.2008

[2].张万强,吴朝阳,丁克祥,郑永晨,王攀.压电免疫传感器用于人胸苷激酶及其与单克隆抗体反应亲和常数的测定[J].中国老年学杂志.2006

[3].丁克祥,郑永晨,吴朝阳,王攀,张杰.人胸苷激酶单克隆抗体的制备[J].中国老年学杂志.2005

[4].丁克祥,郑永晨,吴朝阳,王攀,张杰.人胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达[J].中国老年学杂志.2004

[5].丁克祥,郑永晨,吴朝阳,王攀,张杰.人胸苷激酶基因cDNA克隆[J].中国老年学杂志.2004

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