欧浩:MEK抑制剂PD0325901显著提高猪胎儿成纤维细胞ssODN介导的HDR效率论文

欧浩:MEK抑制剂PD0325901显著提高猪胎儿成纤维细胞ssODN介导的HDR效率论文

本文主要研究内容

作者欧浩,李国玲,王豪强,黄广燕,蔡更元,李紫聪,吴珍芳,张献伟(2019)在《MEK抑制剂PD0325901显著提高猪胎儿成纤维细胞ssODN介导的HDR效率》一文中研究指出:基因组DNA发生双链断裂(double strand break, DSB)后主要通过同源定向修复(homologous-directed repair, HDR)和非同源末端连接(nonhomologous end joining, NHEJ)两种途径进行修复,其中单链寡聚核苷酸(single-stranded oligodeoxyribonucleotide, ssODN)介导的同源定向修复是动物基因组常用的基因组定点修饰技术,具有较大的科研和应用价值。为提高猪基因组ssODN介导HDR效率,本研究以猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts, PFFs)为研究对象,利用丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase, MEK)抑制剂PD0325901培养细胞,研究其对HDR效率的影响及作用分子机理。结果显示,PD0325901能显著提高PFFs的G2期和S期细胞群百分比,减少G1期细胞群比率,促进HDR修复因子的表达。在最适浓度250 nmol/L时,PD0325901使ssODN介导的GFP报告载体的修复效率提高了58.8%;同时使PFFs基因组位点DMD和ROSA26定点修饰效率分别提高了48.16%和17.64%。本研究表明,MEK抑制剂PD0325901能显著提高猪基因组ssODN介导的同源定向修复效率,为高效制备定点基因修饰动物模型提供了新思路。

Abstract

ji yin zu DNAfa sheng shuang lian duan lie (double strand break, DSB)hou zhu yao tong guo tong yuan ding xiang xiu fu (homologous-directed repair, HDR)he fei tong yuan mo duan lian jie (nonhomologous end joining, NHEJ)liang chong tu jing jin hang xiu fu ,ji zhong chan lian gua ju he gan suan (single-stranded oligodeoxyribonucleotide, ssODN)jie dao de tong yuan ding xiang xiu fu shi dong wu ji yin zu chang yong de ji yin zu ding dian xiu shi ji shu ,ju you jiao da de ke yan he ying yong jia zhi 。wei di gao zhu ji yin zu ssODNjie dao HDRxiao lv ,ben yan jiu yi zhu tai er cheng qian wei xi bao (porcine fetal fibroblasts, PFFs)wei yan jiu dui xiang ,li yong si lie yuan huo hua de xi bao wai xin hao diao jie ji mei (mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase, MEK)yi zhi ji PD0325901pei yang xi bao ,yan jiu ji dui HDRxiao lv de ying xiang ji zuo yong fen zi ji li 。jie guo xian shi ,PD0325901neng xian zhe di gao PFFsde G2ji he Sji xi bao qun bai fen bi ,jian shao G1ji xi bao qun bi lv ,cu jin HDRxiu fu yin zi de biao da 。zai zui kuo nong du 250 nmol/Lshi ,PD0325901shi ssODNjie dao de GFPbao gao zai ti de xiu fu xiao lv di gao le 58.8%;tong shi shi PFFsji yin zu wei dian DMDhe ROSA26ding dian xiu shi xiao lv fen bie di gao le 48.16%he 17.64%。ben yan jiu biao ming ,MEKyi zhi ji PD0325901neng xian zhe di gao zhu ji yin zu ssODNjie dao de tong yuan ding xiang xiu fu xiao lv ,wei gao xiao zhi bei ding dian ji yin xiu shi dong wu mo xing di gong le xin sai lu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自遗传的欧浩,李国玲,王豪强,黄广燕,蔡更元,李紫聪,吴珍芳,张献伟,发表于刊物遗传2019年04期论文,是一篇关于抑制剂论文,同源定向修复论文,基因编辑论文,遗传2019年04期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自遗传2019年04期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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