导读:本文包含了琼脂糖微球论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:乳鼠,肺微血管内皮细胞,原代培养
琼脂糖微球论文文献综述
刘姗,刘艳霞,闫承慧,田孝祥,刘丹[1]（2018）在《应用琼脂糖微球抗体筛选原代乳鼠肺微血管内皮细胞新方法的建立》一文中研究指出目的建立一种简便、高效的原代乳鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)培养新方法。方法选取小于1周龄的C57BL/6乳鼠,采用琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养原代PMVECs。倒置显微镜观察细胞形态,采用CD31、血管性血友病因子(vWF)相关抗原免疫荧光染色以及基质胶体外成血管实验鉴定内皮细胞,采用CCK-8法绘制细胞生长曲线。结果倒置显微镜下观察培养的原代PMVECs呈短梭形、类圆形,单层融合呈铺路石样排列。CD31相关抗原、vWF免疫荧光染色阳性,阳性率分别为91.35%±3.06%、92.99%±2.67%,证实培养的细胞为PMVECs。PMVECs接种在基质胶上8h后,有血管腔结构形成。CCK-8法绘制的生长曲线显示,琼脂糖微球抗体筛选法提取PMVECs培养2~5d后细胞处于对数生长期。结论琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养乳鼠原代PMVECs简便、高效,是一种值得推广的分离培养乳鼠PMVECs的新方法。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2018年05期）
吴攀,龙霈华,陈宏,曹君铭,徐虹[2]（2017）在《膀胱输尿管反流注射治疗用琼脂糖微球/透明质酸凝胶填充剂的制备和表征》一文中研究指出膀胱输尿管反流(Vesicoureteral reflux,VUR)是由于膀胱输尿管连接部瓣膜作用不全而致尿液反流回输尿管及肾脏的一类疾病。VUR患儿具有泌尿系统感染的高风险,可引起肾盂肾炎和肾疤痕的形成。肾疤痕及其后的慢性肾损伤可导致成人期高血压、蛋白尿和进行性肾功能衰竭。因此,对儿童VUR早发现、正确诊断和规范治疗一直是医学界关注研究的热点。近年来VUR外科治疗中的利用内镜注射各类填充剂抬高输尿管末端及开口位置,可以达到抗反流的目的。目前内窥镜下注射填充剂治疗VUR的研究逐渐开展,但国内尚未批准任何治疗VUR的注射用填充剂。本课题组与长期从事于VUR临床和基础研究的复旦大学附属儿科医院小儿肾脏和泌尿系疾病诊治中心合作,采用简单制备方法研发了热稳定性和机械强度较好的交联琼脂糖微球,将其与透明质酸水溶液进行混合,制得可注射治疗VUR的填充剂,取得了良好的初步效果。(本文来源于《中国化学会2017全国高分子学术论文报告会摘要集——主题F：生物医用高分子》期刊2017-10-10）
尹霜霜,屠丹宇,徐陈燕,钱鑫,黄佳薇[3]（2016）在《磁性琼脂糖微球的制备及其蛋白吸附性能研究》一文中研究指出以琼脂糖、纳米Fe_3O_4等为原料,采用反相悬浮再生法制得磁性琼脂糖微球,并偶联苄胺功能配基.采用X射线衍射、红外光谱、扫描电子显微镜等方法对微球进行表征.结果表明,微球球形度好,尺寸大小均一,平均粒径为60μm.包裹的Fe_3O_4含量约为10%,呈反式尖晶石结构.将微球用于分离牛血清蛋白(BSA),pH 5.0下对BSA的最大吸附容量为79mg/g,反复使用5次吸附容量降至原来的76%,表明微球吸附性能良好.(本文来源于《湖州师范学院学报》期刊2016年08期）
杨帆,杨小雁,孔英俊,康跻耀,张贵锋[4]（2016）在《基于点击化学的琼脂糖微球上溶菌酶定点偶联方法研究》一文中研究指出以溶菌酶为模型,研究了一种基于点击化学的琼脂糖微球上蛋白质定点偶联方法。首先将琼脂糖微球使用1,4-丁二醇二缩水甘油醚活化后与对氨基苯乙炔反应,将炔基引入琼脂糖微球。其次合成了迭氮基癸酸,通过EDC/NHS法将迭氮基癸酸偶联到溶菌酶表面,将不同修饰位点的溶菌酶进行色谱分离后,通过点击化学使溶菌酶分子上迭氮基与琼脂糖微球表面上的炔基进行反应。XPS分析结果表明偶联对氨基苯乙炔后的琼脂糖微球表面出现N元素,证明炔基成功偶联在微球表面。采用合成的迭氮基癸酸对溶菌酶进行修饰,质谱分析结果表明迭氮基主要出现3个位点,Lys~1、Lys~(33)和Lys~(96)。将偶联位点为Lys~(96)的溶菌酶进行了分离,通过点击化学反应将溶菌酶偶联在琼脂糖微球表面,质谱分析结果表明偶联的溶菌酶其酶解产物中未检测出多肽Gln~(74)-Lys~(96),证明溶菌酶通过Lys~(96)偶联在琼脂糖微球表面。该研究为偶联位点均一、可控的蛋白质偶联方法提供了参考。(本文来源于《生物学杂志》期刊2016年01期）
郑士亚[5]（2015）在《基于二氧化硅琼脂糖微球的液相芯片悬浮技术多元检测肿瘤标志物》一文中研究指出目的:为了提高肿瘤标志物的检测效能,建立了一种新型的基于二氧化硅琼脂糖微球的多元液相芯片检测方法。方法:在我们的研究中,使用了竞争法去同时检测CEA和AFP。首先,我们应用荧光定量的方法,琼脂糖扩撒实验,反射光谱分析以及扫描电镜对这种新型的二氧化硅琼脂糖微球特征(本文来源于《第九届中国肿瘤内科大会、第四届中国肿瘤医师大会、中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2015年学术年会论文集》期刊2015-07-01）
吴明慧,谭坚,梁晨[6]（2015）在《磁性琼脂糖微球活化条件的研究》一文中研究指出对环氧氯丙烷活化琼脂糖磁性微球的活化条件进行了研究。以微球表面的环氧基密度为指标,考察了活化时间、Na OH浓度、环氧氯丙烷体积分数、Na BH4浓度和活化温度等因素对琼脂糖磁性微球活性的影响。实验结果表明,环氧氯丙烷活化琼脂糖磁性微球的最优条件为活化时间为4 h,Na OH浓度为0.9 mol/L,环氧氯丙烷体积分数为40%,Na BH4的浓度为0.5g/L,活化温度为40℃。(本文来源于《大众科技》期刊2015年06期）
兰雄雕[7]（2015）在《磁性琼脂糖微球固定化猪肺血管紧张素转化酶分离长蛇鲻降血压肽的研究》一文中研究指出食物蛋白源降血压肽——血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽因其具有作用持久、安全、无毒副作用等优点,可做为功能食品替代部分药物起到降血压辅助治疗作用。将磁性分离技术与传统分离方法相结合,可实现ACE抑制肽的快速分离纯化。本文以琼脂糖和Fe304为原料,采用反相微乳包埋法制备磁性琼脂糖微球,将其做为载体,制备磁性亲和介质,用于长蛇鲻酶解液中ACE抑制肽的分离,经反相高效液相色谱(RP-HPLC)进一步纯化后,得到一个新的ACE抑制肽,并对其作用机理进行了初步研究。取得的主要研究结果如下：(1)采用反相微乳包埋法制备磁性琼脂糖微球(MAMs)。以琼脂糖和自制Fe304磁流体为原料,采用反相微乳包埋法制备磁性琼脂糖微球,以微球平均粒径做为考察指标,用单因素实验优化磁性微球的制备工艺条件。用扫描电子显微镜(SEM)、傅立叶红外光谱仪(FTIR)、热重分析仪(TG)以及振动磁强计(VSM)对微球的性能进行表征。实验结果表明,当琼脂糖浓度为25.0g·L-1,水油比W/O为1:10, Span 80浓度为40.0 g·L-1,乳化温度为80℃,搅拌速度为900r·min-1, Fe3O4浓度为4.5 g·L-1时,制备的磁性琼脂糖微球平均粒径为10.69 μm,具有良好是分散性,Fe304含量为29.5%,磁饱和强度为5.67 emu·g-1,微球具有超顺磁性,在外加磁场的作用下可快速实现固液分离。(2)以环氧氯丙烷为活化剂对微球进行活化。以环氧基密度为考察指标,采用单因素实验优化活化工艺条件。结果表明,在NaOH溶液浓度为0.9mol·L01,环氧氯丙烷体积分数为40.0%, NaBH4的浓度为0.5 g·L-1,活化温度为40℃,活化时间为4h时,磁性琼脂糖微球表面的环氧基密度最高,达到123.96μmol·g-1。(3)以磁性琼脂糖微球作为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为连接臂,将Zn2+固定到已活化的磁性琼脂糖微球上,制备磁性固定化金属亲和介质MAMs-IDA-Zn2+。以Zn2+螯合量为考察指标,通过单因素实验优化制备工艺条件,在IDA接合时间为8h、IDA浓度为0.8mol·L-1、Zn2+螯合时间为60 min, Zn+浓度为0.03 mol·L-1的条件下,Zn2+螯合量达到最大值101.69μmol·g-1。(4)采用磁性固定化金属亲和层析法对猪肺ACE进行分离纯化。以蛋白吸附量为考察指标,采用单因素实验优化吸附条件。在蛋白浓度为3.0mg·mL-1, NaCl浓度为0.5 mol·L-1,吸附时间为20 min, pH值8.3的条件下,ACE全部吸附到MAMs-IDA-Zn2+上,吸附的蛋白ACE比活为0.037 U·mg-1。在NH4Cl浓度为1.0 mol·L-1, pH值7.8,洗脱时间为40 min的条件下,可将吸附的ACE洗脱下来,得到的ACE比活为0.160 U·mg-1,纯化倍数为14.3,酶活回收率为65.8%。(5)采用共价结合法将猪肺粗提ACE固定到活化的磁性琼脂糖微球上,制备磁性固定化ACE(MAMs-ACE)。以MAMs-ACE的比活为考察指标,采用单因素实验对制备工艺条件进行优化。结果表明,在蛋白浓度为8.0mg·mL-1、时间为2 h、温度为50℃、pH值7.8的条件下,得到的MAMs-ACE活力最高,达到0.128 U·g-1。同时,还对MAMs-ACE的性质进行了研究,MAMs-ACE的最适pH值为7.8,最适温度为42℃,比游离ACE具有更好的pH稳定性和热稳定性；重复使用10次后, MAMs-ACE活力仍保持53.0%,具有良好的操作稳定性；MAMs-ACE在-20℃条件下保存30天后,仍保持90.3%的酶活,而游离酶只保留了43.0%,说明MAMs-ACE具有更好的储存稳定性。对ACE的米氏常数Km进行测定,发现MAMs-ACE的Km相对游离ACE变小,说明ACE的固定化有利于酶与底物的结合。(6)对MAMs-ACE的吸附性能进行研究。以ACE抑制肽HLPLP为特异性吸附模版蛋白,研究MAMs-ACE的特异性吸附性能。结果表明,在HLPLP浓度为4.0 mg·mL-1,吸附时间为30min, NaCl浓度为0.3 mol·L-1,pH值为7.8的条件下,特异性吸附量达到最大值22.77 mg·g-1。以牛血清白蛋白(BSA)为非特异性吸附的模版蛋白,在相同实验条件下确定MAMs-ACE的最大非特异性吸附量为2.46 mg·g-1,是特异性吸附量的10.8%,说明MAMs-ACE具有良好的特异性吸附,可用于ACE抑制肽的分离纯化。(7)将MAMs-ACE做为磁性亲和介质,用于长蛇鲻酶解液中ACE抑制肽的分离纯化。以蛋白吸附量为考察指标,通过单因素实验优化吸附工艺条件,在蛋白浓度为8.0 mg·mL-1,吸附时间为45 min, NaCl浓度为0.2mol·L-1, pH值为7.8的条件下,MAMs-ACE对蛋白的吸附量达到最大值29.50 mg·g-1。用2.0 mol·L-1 NaCl溶液反复洗脱8次,每次30 mmin,可将90.0%的蛋白洗脱下来。MAMs-ACE的吸附量随重复使用次数的增加而降低,最多只能重复使用4次。用RP-HPLC对亲和纯化的多肽进一步分离,得到单一的活性组分,质谱仪解析得到该组分的氨基酸序列为：Gly-Met-Lys-Cys-Ala-Phe (GMKCAF), IC50为45.7 μmol·L-1。(8)采用Lineweaver-Burk双倒数做图法对GMKCAF (GF-6)的抑制类型进行研究,确定GF-6属于非竞争性抑制剂。分别用初始速率法和等温滴定量热法(ITC)对测定ACE米氏常数Km,对结果进行比较。初始速率法和ITC法测得的Km分别为0.327 mmol·L-1和0.347 mmol·L-1,说明ITC测定的结果是可信的。(9)采用ITC对captopril和GF-6的抑制热力学进行研究。通过ITC实验得到了captopril和GF-6与ACE结合反应的热力学参数：结合常数Ka、化学计量数n、ΔH、ΔCp和AG。结果表明,captopril和GF-6与ACE的结合反应都是自发进行的吸热过程,captopril以1：1的比例与ACE结合,抑制肽GF-6以40：1的比例与ACE进行结合,进一步验证了它们的抑制类型。同时,对captopril和GF-6对ACE结合过程进行热力学研究。结果表明,captopril和GF-6与ACE的结合存在着很好的焓-熵补偿关系,都属于熵驱动过程。(本文来源于《广西大学》期刊2015-05-01）
兰雄雕,陈锡鸿,廖丹葵,孙丽霞,和筱宇[8]（2014）在《磁性琼脂糖微球固定化血管紧张素转化酶的制备及性质》一文中研究指出采用反相悬浮包埋法制备磁性琼脂糖微球,然后以环氧氯丙烷为活化剂固定血管紧张素转化酶(ACE)。探讨了ACE固定化的影响因素,确定了固定化最适条件:酶溶液蛋白质量浓度为8 g/L,p H=7.8,温度为50℃,固定化时间为2 h,所得的固定化酶的活力达到0.128 U/g;对磁性固定化ACE的性质进行了研究,固定化ACE最适温度为42℃,最适p H=8.3。同时,比较了磁性固定化与游离ACE对p H的耐受力和热稳定性,在p H=5的缓冲液中放置1 h后,固定化ACE和游离ACE酶活力保留率分别为62.1%和40.7%,当p H=9,两者酶活力保留率分别为95.7%和89.2%;60℃时,两者酶活力保留率分别为50.2%和20.7%;-20℃储存30 d后,两者酶活力保留率分别为90.3%和43.0%;连续操作10次后,固定化ACE活力仍保持53.0%。研究表明,磁性固定化ACE在外加磁场的作用下可快速重复回收利用,具有良好的应用前景。(本文来源于《精细化工》期刊2014年12期）
刘微,王勇尊,许慧,李优鑫,包建民[9]（2013）在《羧甲基琼脂糖微球的制备及其在国产碱性蛋白酶纯化中的应用》一文中研究指出以琼脂糖粉末为原料,利用反相悬浮原理制备琼脂糖凝胶微球。所得琼脂糖微球的粒径分布在45～165μm范围内,并对其进行了交联。以自制交联琼脂糖微球为基质,对其进行了羧甲基化反应。依据离子交换容量进行键合量的表征,综合考察了各种反应试剂的用量、反应温度、反应时间等条件对键合量的影响。将所得的羧甲基键合微球用于碱性蛋白酶粗品的分离纯化,结果表明,自制羧甲基弱阳离子交换填料对国产碱性蛋白酶具有较好的分离纯化、除色以及除味等作用,可以达到国外同类产品的效果。(本文来源于《现代化工》期刊2013年07期）
林楠,吴颉,郑国钧,马光辉,苏志国[10]（2009）在《微孔膜乳化法制备大粒径琼脂糖微球》一文中研究指出以6%的琼脂糖溶液为水相,不同体积配比的液体石蜡(LP)和石油醚(PE)的混合溶液为油相,PO-5S为乳化剂,采用微孔膜乳化法制备了平均粒径为90μm的琼脂糖微球.考察了SPG膜孔大小、油相组成、反应温度、压力等因素对成球粒径及其分布的影响.结果表明,在使用膜孔为25.9μm的微孔膜、LP/PE体积比为11:1及65℃的条件下可制得均一的大粒径琼脂糖微球,微球平均粒径为93.3μm,粒度分布系数为1.25,且各批产品的相对标准偏差仅为1.34%,产品重复性良好.(本文来源于《过程工程学报》期刊2009年05期）
琼脂糖微球论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
膀胱输尿管反流(Vesicoureteral reflux,VUR)是由于膀胱输尿管连接部瓣膜作用不全而致尿液反流回输尿管及肾脏的一类疾病。VUR患儿具有泌尿系统感染的高风险,可引起肾盂肾炎和肾疤痕的形成。肾疤痕及其后的慢性肾损伤可导致成人期高血压、蛋白尿和进行性肾功能衰竭。因此,对儿童VUR早发现、正确诊断和规范治疗一直是医学界关注研究的热点。近年来VUR外科治疗中的利用内镜注射各类填充剂抬高输尿管末端及开口位置,可以达到抗反流的目的。目前内窥镜下注射填充剂治疗VUR的研究逐渐开展,但国内尚未批准任何治疗VUR的注射用填充剂。本课题组与长期从事于VUR临床和基础研究的复旦大学附属儿科医院小儿肾脏和泌尿系疾病诊治中心合作,采用简单制备方法研发了热稳定性和机械强度较好的交联琼脂糖微球,将其与透明质酸水溶液进行混合,制得可注射治疗VUR的填充剂,取得了良好的初步效果。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
琼脂糖微球论文参考文献
[1].刘姗,刘艳霞,闫承慧,田孝祥,刘丹.应用琼脂糖微球抗体筛选原代乳鼠肺微血管内皮细胞新方法的建立[J].解放军医学杂志.2018
[2].吴攀,龙霈华,陈宏,曹君铭,徐虹.膀胱输尿管反流注射治疗用琼脂糖微球/透明质酸凝胶填充剂的制备和表征[C].中国化学会2017全国高分子学术论文报告会摘要集——主题F：生物医用高分子.2017
[3].尹霜霜,屠丹宇,徐陈燕,钱鑫,黄佳薇.磁性琼脂糖微球的制备及其蛋白吸附性能研究[J].湖州师范学院学报.2016
[4].杨帆,杨小雁,孔英俊,康跻耀,张贵锋.基于点击化学的琼脂糖微球上溶菌酶定点偶联方法研究[J].生物学杂志.2016
[5].郑士亚.基于二氧化硅琼脂糖微球的液相芯片悬浮技术多元检测肿瘤标志物[C].第九届中国肿瘤内科大会、第四届中国肿瘤医师大会、中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会2015年学术年会论文集.2015
[6].吴明慧,谭坚,梁晨.磁性琼脂糖微球活化条件的研究[J].大众科技.2015
[7].兰雄雕.磁性琼脂糖微球固定化猪肺血管紧张素转化酶分离长蛇鲻降血压肽的研究[D].广西大学.2015
[8].兰雄雕,陈锡鸿,廖丹葵,孙丽霞,和筱宇.磁性琼脂糖微球固定化血管紧张素转化酶的制备及性质[J].精细化工.2014
[9].刘微,王勇尊,许慧,李优鑫,包建民.羧甲基琼脂糖微球的制备及其在国产碱性蛋白酶纯化中的应用[J].现代化工.2013
[10].林楠,吴颉,郑国钧,马光辉,苏志国.微孔膜乳化法制备大粒径琼脂糖微球[J].过程工程学报.2009