干出胁迫论文-钱飞箭

干出胁迫论文-钱飞箭

导读:本文包含了干出胁迫论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:坛紫菜,高温胁迫,干出胁迫,脂氧合酶

干出胁迫论文文献综述

钱飞箭[1](2014)在《坛紫菜受高温和干出胁迫的机理及脂代谢关键基因的研究》一文中研究指出坛紫菜生命周期中包括了叶状体和丝状体两种生活时期,高温和干出胁迫是坛紫菜养殖过程中不可避免的逆境。35℃高温热激胁迫30min后,我们对坛紫菜中脂肪酸和挥发性物质,超氧化物歧化酶、NADPH氧化酶活性、H2O2含量,红藻糖苷含量进行了测定,并对热激蛋白70(hsp70),NADPH氧化酶(rboh)基因进行了定量分析。结果表明:在常温下,丝状体中H2O2和脂肪酸衍生物含量,Phrboh和Phhsp70基因拷贝数,NADPH氧化酶活性和红藻糖苷含量均明显高于叶状体。热激后,叶状体中H2O2含量,Phrboh和Phhsp70基因表达量,NADPH氧化酶活性以及红藻糖苷含量均显着增加。丝状体中饱和脂肪酸显着增加,多不饱和脂肪酸减少,8-碳挥发物出现积累。然而,H2O2含量,氧爆发相关基因和酶均没有明显表达。此外,干出胁迫坛紫菜叶状体4h后,对藻体细胞的超微结构观察发现细胞形态出现了明显的变化,细胞失水率高达98%,并出现部分膜损伤。干出胁迫后,作为参与渗透压调节和细胞壁合成的红藻糖苷含量显着升高,同时合成红藻糖苷前体物质的甘油激酶(nho1)和3-磷酸甘油脱氢酶(gpdh)基因也均出现了上调表达。挥发性物质含量和种类较干出前均有较大的变化,参与合成挥发性物质的脂氧合酶(lox1,lox2)基因均有显着上调表达。脂氧合酶是一类具有调解激素和防御性物质生成的关键酶。本研究从坛紫菜叶状体中克隆得到一条与防御相关的基因(Phlox2),该基因编码表达一个脂氧合酶,Phlox2完整ORF为2700bp,编码899个氨基酸的蛋白。该蛋白有两个功能域(SRPBCC超家族功能域和LOX功能域)组成。系统发育树分析表明,红藻LOXs在进化早期已经形成一个独立的分支。PhLOX2是一个多功能酶,同时具有脂氧合酶和氢过氧化物酶两种活性,它具有底物广谱性和氧化位点的多样性。它可以催化多种不饱和脂肪酸,包括了C18到C22,生成包括单过氧化,双过氧化和单羟基产物,但对C20不饱和脂肪酸具有偏好性,简言之,以γ-亚麻酸为底物时,PhLOX2具有6-/9-/10-LOX活性;以花生四烯酸为底物时,具有5-/8-/11-LOX活性;以二十碳五烯酸为底物时,具有5-/8-/11-/14-LOX活性;以二十碳六烯酸为底物时,具有4-/7-/8-/13-/16-LOX活性。PhLOX2催化的底物需含有叁重烯键,羟基化产物的催化位点位于第二个和第叁个双键之间的碳原子上,而双过氧化产物的生成是分两步完成的。综上所述,热激时丝状体与叶状体具有不同的适应机制。而处于干出胁迫时,坛紫菜中红藻糖苷的累积,ROS的产生,以及挥发性物质的生成,这些生理反应与坛紫菜所具有极端耐旱性必有关联。本课题为藻类抗逆机制的研究提供实验基础。(本文来源于《宁波大学》期刊2014-06-15)

杨帆[2](2012)在《干出胁迫下孔石莼上调表达基因消减cDNA文库的构建与分析》一文中研究指出为研究干出胁迫条件下孔石莼(Ulva pertusa)相关功能基因的差异表达情况,在实验室内模拟干出胁迫状态,以处理后的孔石莼为检测方(Tester),以正常生长(对照组)的孔石莼为对照方(Driver),利用抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization, SSH)技术构建了孔石莼在干出胁迫下上调表达基因的消减cDNA文库。从孔石莼的消减cDNA文库中随机挑取160个克隆进行测序,共得到可以利用的EST片段是150条,它们占到总测序样品的93.8%。其中有21条为冗余序列(Redundant sequence, RS),137条为非冗余序列(Non-redundant sequence, NRS)且全为独立的EST片段(Singleton)。通过软件分析和序列比对发现,片段长度都集中在100-900bp间,平均长度为364bp。根据这些ESTs推导出的多肽序列与已知功能蛋白的氨基酸序列的相似度主要集中在20%-60%之间。其中,通过选取比对的22条EST序列发现,它们与已经完成基因组测序的高等植物及藻类的氨基酸序列相比有较高的相似性。获得的EST片段按其功能注释主要分为以下几大类:与细胞生长和发育相关,占22.63%;与蛋白合成及分解相关,占5.84%;与代谢相关,占7.30%;与胁迫应答相关,占5.11%;与光合作用和光诱导相关,占5.11%;与转录调节相关,占3.65%;与信号转导相关,占6.57%;未知功能,占24.09%;无对比结果,占19.71%;未知功能和无对比结果的序列共60条,占非冗余序列的43.80%,比例较高。对22条EST序列的密码子偏好性预测分析,计算结果显示孔石莼对密码子第叁位各碱基的使用偏好无显着差异(P>0.05),GC使用总频率为50.66%,在所分析的序列中,孔石莼终止密码子明显偏好TGA。利用实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR, RTq-PCR)技术对八氢番茄红素脱氢酶红素脱氢酶(Phytoene desaturase, PDS)、钙调素(Calmodulin, CaM)、14-3-3蛋白(14-3-3-like protein,1433s)及渗透活化蛋白激酶(Osmotic stress-activated protein kinase, OSAK)在干出胁迫处理前后的表达量差别进行分析,结果显示,这些基因表达量均随处理时间的增加而呈上调趋势。说明这些基因的表达调控在孔石莼抵御潮间带干出胁迫的分子响应机理过程中可能发挥了重要作用,这为阐释潮间带海藻在耐受不良环境胁迫的调控网络和分子机制方面提供了一定的参考依据。(本文来源于《辽宁师范大学》期刊2012-06-01)

吴倩倩[3](2012)在《干出胁迫对孔石莼生理影响及LHCSR基因的克隆》一文中研究指出孔石莼生长在潮间带的特殊环境中,所以经常性的遭受干出胁迫。研究干出胁迫下孔石莼的生长发育及体内的生理生化变化,以及胁迫条件下分子水平的调控机制,将有助于了解孔石莼对干出胁迫的适应机制。在众多的胁迫相关蛋白中,光捕获复合体(LHCSR)蛋白是存在于藻类中类囊体膜上的跨膜蛋白,可以结合不同的辅助色素,吸收光能并传递能量到光反应中心,且在光保护机制中起着重要作用。当藻体受到强光、低温、干出等环境胁迫后该基因的表达量升高,进而遣散藻体内吸收的过多光能,保证藻体光合作用的正常进行。本实验通过人工模拟干出条件研究孔石莼在不同干出条件下的生理生化反应。以采自大连潮间带的孔石莼为材料,测定在不同的干出时间(Oh、0.5h、1h、2h、4h、6h)下其叶绿素a(Chla)含量、可溶性糖含量、脯氨酸(proline, Pro)含量、丙二醛(MDA)含量和过氧化物酶(POD)活性的变化。结果表明:干出胁迫会对孔石莼的生理生化过程产生明显的影响。随着干出时间的延长,孔石莼中叶绿素a含量呈现下降的趋势;丙二醛和可溶性糖的含量呈现缓慢的升高趋势;过氧化物酶活性和脯氨酸含量呈现明显的上升趋势。采用RT-PCR和RACE技术成功克隆到孔石莼的光捕获复合物(LHCSR)蛋白基因。该基因全长1094bp, ORF为636bp,编码211个氨基酸,5′端的非翻译区UTR为77bp,3′端的非翻译区UTR为380bp。采用实时荧光定量PCR,检测在不同干出胁迫时LHCSR基因mRNA相对表达量的变化。结果表明,该基因在干出胁迫0.5h后表达量升高,随着干出时间的延长,其表达量呈下降趋势。以上研究结果为潮间带海藻的抗性生理研究提供了补充,也为进一步研究LHCSR基因的功能机制和表达规律提供了理论基础。(本文来源于《辽宁师范大学》期刊2012-04-01)

吴倩倩,佟少明,侯和胜[4](2011)在《干出胁迫对孔石莼生长及生理影响》一文中研究指出通过人工模拟干出条件研究孔石莼(Ulva pertusa)在不同干出条件下的生理生化反应。以采自大连潮间带的孔石莼为材料,测定在不同的干出时间(0 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h)下其叶绿素a(Chla)含量、可溶性糖含量、脯氨酸(proline,Pro)含量、丙二醛(MDA)含量和过氧化物酶(POD)活性的变化。结果表明:干出胁迫会对孔石莼的生理生化过程产生明显的影响。随着干出时间的延长,孔石莼中叶绿素a含量呈现下降的趋势;丙二醛和可溶性糖的含量呈现缓慢的升高趋势;过氧化物酶活性和脯氨酸含量呈现明显的升高趋势。这些结果为孔石莼的抗性生理研究提供了补充和参考。(本文来源于《海洋渔业》期刊2011年04期)

李世国,杨帆,吴倩倩,乔坤,佟少明[5](2011)在《孔石莼在干出胁迫下上调表达基因消减cDNA文库的构建及分析》一文中研究指出利用抑制消减杂交技术构建了潮间带绿藻孔石莼(Ulva pertusa)在干出胁迫状态下上调表达基因的消减cDNA文库。获得的阳性克隆经测序得到150条上调表达的EST片段,其中21条为冗余序列(RS),137条非冗余序列(NRS)。片段中最长833 bp,最短106 bp,平均长度364 bp。参与比对的EST片段按照其注释功能可分类为:细胞生长与发育、蛋白合成与分解、代谢过程、胁迫应答、光合作用与光诱导、转录调节、信号转导等相关基因。未知功能和无对比结果序列共60条,占非冗余序列的43.80%。比对相似度主要分布在20%~60%之间,主要与已经完成基因组测序的藻类或高等植物的氨基酸序列具有较高的相似性。孔石莼对密码子第叁位碱基的使用偏好无显着差别(P>0.05),GC使用总频率为50.66%,而对终止密码子则明显偏好TGA。实时荧光定量结果表明,部分分离的基因在干出胁迫状态下表达量上调。这些不同功能基因的表达构成了复杂的调控网络,能够为揭示孔石莼抵御潮间带不良环境的分子机制提供多方面的切入点。(本文来源于《海洋渔业》期刊2011年02期)

干出胁迫论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为研究干出胁迫条件下孔石莼(Ulva pertusa)相关功能基因的差异表达情况,在实验室内模拟干出胁迫状态,以处理后的孔石莼为检测方(Tester),以正常生长(对照组)的孔石莼为对照方(Driver),利用抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization, SSH)技术构建了孔石莼在干出胁迫下上调表达基因的消减cDNA文库。从孔石莼的消减cDNA文库中随机挑取160个克隆进行测序,共得到可以利用的EST片段是150条,它们占到总测序样品的93.8%。其中有21条为冗余序列(Redundant sequence, RS),137条为非冗余序列(Non-redundant sequence, NRS)且全为独立的EST片段(Singleton)。通过软件分析和序列比对发现,片段长度都集中在100-900bp间,平均长度为364bp。根据这些ESTs推导出的多肽序列与已知功能蛋白的氨基酸序列的相似度主要集中在20%-60%之间。其中,通过选取比对的22条EST序列发现,它们与已经完成基因组测序的高等植物及藻类的氨基酸序列相比有较高的相似性。获得的EST片段按其功能注释主要分为以下几大类:与细胞生长和发育相关,占22.63%;与蛋白合成及分解相关,占5.84%;与代谢相关,占7.30%;与胁迫应答相关,占5.11%;与光合作用和光诱导相关,占5.11%;与转录调节相关,占3.65%;与信号转导相关,占6.57%;未知功能,占24.09%;无对比结果,占19.71%;未知功能和无对比结果的序列共60条,占非冗余序列的43.80%,比例较高。对22条EST序列的密码子偏好性预测分析,计算结果显示孔石莼对密码子第叁位各碱基的使用偏好无显着差异(P>0.05),GC使用总频率为50.66%,在所分析的序列中,孔石莼终止密码子明显偏好TGA。利用实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR, RTq-PCR)技术对八氢番茄红素脱氢酶红素脱氢酶(Phytoene desaturase, PDS)、钙调素(Calmodulin, CaM)、14-3-3蛋白(14-3-3-like protein,1433s)及渗透活化蛋白激酶(Osmotic stress-activated protein kinase, OSAK)在干出胁迫处理前后的表达量差别进行分析,结果显示,这些基因表达量均随处理时间的增加而呈上调趋势。说明这些基因的表达调控在孔石莼抵御潮间带干出胁迫的分子响应机理过程中可能发挥了重要作用,这为阐释潮间带海藻在耐受不良环境胁迫的调控网络和分子机制方面提供了一定的参考依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

干出胁迫论文参考文献

[1].钱飞箭.坛紫菜受高温和干出胁迫的机理及脂代谢关键基因的研究[D].宁波大学.2014

[2].杨帆.干出胁迫下孔石莼上调表达基因消减cDNA文库的构建与分析[D].辽宁师范大学.2012

[3].吴倩倩.干出胁迫对孔石莼生理影响及LHCSR基因的克隆[D].辽宁师范大学.2012

[4].吴倩倩,佟少明,侯和胜.干出胁迫对孔石莼生长及生理影响[J].海洋渔业.2011

[5].李世国,杨帆,吴倩倩,乔坤,佟少明.孔石莼在干出胁迫下上调表达基因消减cDNA文库的构建及分析[J].海洋渔业.2011

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