王桂杰:棉铃虫C型凝集素1参与细胞免疫和抗中华卵索线虫寄生的分子机理论文

王桂杰:棉铃虫C型凝集素1参与细胞免疫和抗中华卵索线虫寄生的分子机理论文

本文主要研究内容

作者王桂杰(2019)在《棉铃虫C型凝集素1参与细胞免疫和抗中华卵索线虫寄生的分子机理》一文中研究指出:包囊和吞噬作用是由血细胞介导的两种免疫反应,是昆虫先天免疫系统的重要组成部分。包囊作用是由多个血细胞参与的、针对较大的病原物(如寄生蜂的卵、病原线虫等)的清除,而吞噬作用是单个血细胞针对较小病原物(如细菌、病毒等)的清除。蜕皮激素的活化形式20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone,20E)作为调控昆虫蜕皮、变态、生殖、发育等过程的重要激素,也参与调节多种免疫应答,如细胞免疫(包囊和吞噬)。然而,目前我们对昆虫细胞免疫及其内分泌调控分子机制尚不清楚。本研究以棉铃虫(Helicoverpa armigera)为模型,首先统计了中华卵索线虫(Ovomermissinemsis 寄生后棉铃虫的死亡率,并分析了棉铃虫应答O.sinesis.寄生后的免疫反应。结果发现O.sinensis寄生后导致了棉铃虫存活率急剧下降,且寄生早期棉铃虫的血细胞吞噬能力和血浆抗菌活性显著升高。为了进一步获得识别O.sinensis并触发先天免疫反应的关键蛋白,我们将O.sinensis与棉铃虫变态期血浆孵育,经洗涤、洗脱后质谱鉴定,获得一个模式识别蛋白C-typelectin1b(HaCTL1b),该蛋白与他人前期报道的HaCTL1a高度同源(蛋白序列一致性为96%)。随后我们采用qRT-PCR、Western blot、RNAi和蛋白体外活性分析等研究方法,分析了HaCTLl(包括HaCTL1a和HaCTL1b)的时空表达模式,并对HaCTL1b参与细胞免疫功能进行了研究。结果如下:1.HaCTL1在变态期的血细胞和血浆中高表达,且其表达受20E显著诱导;2.人造葡聚糖凝胶珠(Beads,模拟寄生物)能刺激HaCTL1上调表达,且敲降HaCTL1表达后,血细胞对Beads的包囊率显著下降。3.重组HaCTL1b蛋白能够与O.sinen0.结合,且促进血细胞对Beads的包囊和对O.sinenO.的粘附;4.大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌faureus)刺激棉铃虫显著诱导HaCTL1的表达,且敲降HaCTL1表达后,血细胞对E.coli和S.aureus的吞噬率显著降低;5.重组HaCTL1b蛋白可以凝集并结合E.coli和S.aurreus,且促进血细胞对E.coli和S aureuss的吞噬。综上所述,我们的研究结果表明HaCTL1参与血细胞介导的包囊和吞噬反应,且在棉铃虫识别O.sinensis和细菌并触发细胞免疫反应以抵御其感染过程中发挥重要作用。由于棉铃虫变态期血淋巴中20E滴度显著升高,暗示变态期20E可以诱导HaCTL1基因的表达,以触发细胞免疫反应。本研究增加了我们对昆虫细胞免疫分子机理的了解,并为害虫生物防治提供了新的分子靶标。

Abstract

bao nang he tun shi zuo yong shi you xie xi bao jie dao de liang chong mian yi fan ying ,shi kun chong xian tian mian yi ji tong de chong yao zu cheng bu fen 。bao nang zuo yong shi you duo ge xie xi bao can yu de 、zhen dui jiao da de bing yuan wu (ru ji sheng feng de luan 、bing yuan xian chong deng )de qing chu ,er tun shi zuo yong shi chan ge xie xi bao zhen dui jiao xiao bing yuan wu (ru xi jun 、bing du deng )de qing chu 。tui pi ji su de huo hua xing shi 20-qiang ji tui pi tong (20-hydroxyecdysone,20E)zuo wei diao kong kun chong tui pi 、bian tai 、sheng shi 、fa yo deng guo cheng de chong yao ji su ,ye can yu diao jie duo chong mian yi ying da ,ru xi bao mian yi (bao nang he tun shi )。ran er ,mu qian wo men dui kun chong xi bao mian yi ji ji nei fen bi diao kong fen zi ji zhi shang bu qing chu 。ben yan jiu yi mian ling chong (Helicoverpa armigera)wei mo xing ,shou xian tong ji le zhong hua luan suo xian chong (Ovomermissinemsis ji sheng hou mian ling chong de si wang lv ,bing fen xi le mian ling chong ying da O.sinesis.ji sheng hou de mian yi fan ying 。jie guo fa xian O.sinensisji sheng hou dao zhi le mian ling chong cun huo lv ji ju xia jiang ,ju ji sheng zao ji mian ling chong de xie xi bao tun shi neng li he xie jiang kang jun huo xing xian zhe sheng gao 。wei le jin yi bu huo de shi bie O.sinensisbing chu fa xian tian mian yi fan ying de guan jian dan bai ,wo men jiang O.sinensisyu mian ling chong bian tai ji xie jiang fu yo ,jing xi di 、xi tuo hou zhi pu jian ding ,huo de yi ge mo shi shi bie dan bai C-typelectin1b(HaCTL1b),gai dan bai yu ta ren qian ji bao dao de HaCTL1agao du tong yuan (dan bai xu lie yi zhi xing wei 96%)。sui hou wo men cai yong qRT-PCR、Western blot、RNAihe dan bai ti wai huo xing fen xi deng yan jiu fang fa ,fen xi le HaCTLl(bao gua HaCTL1ahe HaCTL1b)de shi kong biao da mo shi ,bing dui HaCTL1bcan yu xi bao mian yi gong neng jin hang le yan jiu 。jie guo ru xia :1.HaCTL1zai bian tai ji de xie xi bao he xie jiang zhong gao biao da ,ju ji biao da shou 20Exian zhe you dao ;2.ren zao pu ju tang ning jiao zhu (Beads,mo ni ji sheng wu )neng ci ji HaCTL1shang diao biao da ,ju qiao jiang HaCTL1biao da hou ,xie xi bao dui Beadsde bao nang lv xian zhe xia jiang 。3.chong zu HaCTL1bdan bai neng gou yu O.sinen0.jie ge ,ju cu jin xie xi bao dui Beadsde bao nang he dui O.sinenO.de nian fu ;4.da chang gan jun (E.coli)he jin huang se pu tao qiu jun faureus)ci ji mian ling chong xian zhe you dao HaCTL1de biao da ,ju qiao jiang HaCTL1biao da hou ,xie xi bao dui E.colihe S.aureusde tun shi lv xian zhe jiang di ;5.chong zu HaCTL1bdan bai ke yi ning ji bing jie ge E.colihe S.aurreus,ju cu jin xie xi bao dui E.colihe S aureussde tun shi 。zeng shang suo shu ,wo men de yan jiu jie guo biao ming HaCTL1can yu xie xi bao jie dao de bao nang he tun shi fan ying ,ju zai mian ling chong shi bie O.sinensishe xi jun bing chu fa xi bao mian yi fan ying yi di yu ji gan ran guo cheng zhong fa hui chong yao zuo yong 。you yu mian ling chong bian tai ji xie lin ba zhong 20Edi du xian zhe sheng gao ,an shi bian tai ji 20Eke yi you dao HaCTL1ji yin de biao da ,yi chu fa xi bao mian yi fan ying 。ben yan jiu zeng jia le wo men dui kun chong xi bao mian yi fen zi ji li de le jie ,bing wei hai chong sheng wu fang zhi di gong le xin de fen zi ba biao 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自华中师范大学的王桂杰,发表于刊物华中师范大学2019-09-29论文,是一篇关于蜕皮激素论文,型凝集素论文,细胞免疫论文,棉铃虫论文,中华卵索线虫论文,华中师范大学2019-09-29论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自华中师范大学2019-09-29论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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