细胞种植支架论文-王雷

细胞种植支架论文-王雷

导读:本文包含了细胞种植支架论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:组织工程肝,脱细胞支架,循环灌注培养,内皮祖细胞

细胞种植支架论文文献综述

王雷[1](2017)在《大鼠肝脏脱细胞支架的制备及肝细胞和内皮祖细胞再种植的研究》一文中研究指出目的制备大鼠肝脏脱细胞支架;构建循环灌注培养体系,将大鼠正常肝细胞(BRL细胞株)及大鼠骨髓源性内皮祖细胞种植于脱细胞支架内进行叁维循环灌注培养,为构建血管化的组织工程肝提供实验基础。方法(1)采用灌注法制备大鼠肝脏脱细胞支架,HE染色、Masson染色、苦味酸-天狼星染色及I型胶原、IV型胶原、纤维连接蛋白、层粘连蛋白免疫组化检测脱细胞支架的结构及细胞外基质成分,扫描电镜观察脱细胞支架的超微结构,DNA含量检测脱细胞的效果;ELISA检测GAG的含量;CCK-8检测脱细胞支架的细胞毒性;异种动物体内移植检测生物相容性。(2)构建循环灌注培养体系;采用经门静脉途径和包膜直接注射两种方法将BRL细胞种植于脱细胞支架内,行循环灌注培养,检测培养基中总蛋白和总胆汁酸含量;HE染色、扫描电镜和ALB免疫荧光观察细胞在支架内的生长情况。(3)原代培养大鼠骨髓源性内皮祖细胞,并通过CD31、CD133免疫荧光、摄取DiI-ac-LDL和结合FITC-UEA鉴定;采用经门静脉途径将内皮祖细胞种植于脱细胞支架内,行循环灌注培养,HE染色和CD31免疫荧光检测内皮祖细胞在支架内的生长情况。结果(1)采用灌注法获得大鼠肝脏脱细胞支架,组织学染色未见细胞成分;免疫组化显示I型胶原、IV型胶原、纤维连接蛋白及层粘连蛋白等细胞外基质成分保留;扫描电镜显示细胞外基质的网状超微结构;DNA含量极低;GAG含量有所减少;CCK-8显示脱细胞支架对细胞生长增殖无影响;异种移植显示脱细胞支架具有良好的生物相容性。(2)构建由蠕动泵、培养瓶、氧合器及输送管道组成的循环灌注培养体系;包膜直接注射法种植BRL细胞的成功率优于经门静脉途径,总蛋白和总胆汁酸合成能力良好,HE染色、免疫荧光及扫描电镜显示BRL细胞在脱细胞支架内定植、生长良好。(3)原代培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞CD31、CD133免疫荧光阳性,并能摄取DiI-ac-LDL和结合FITC-UEA;将内皮祖细胞通过门静脉途径种植到脱细胞支架内,HE染色、CD31免疫荧光显示内皮祖细胞定植于脱细胞支架血管腔内壁。结论(1)采用灌注法获得的大鼠肝脏脱细胞支架具有良好的理化性质和生物相容性。(2)大鼠肝脏脱细胞支架可以为肝细胞提供良好的叁维生长环境。(3)循环灌注培养能成功将原代大鼠骨髓源性内皮祖细胞种植于大鼠肝脏脱细胞支架血管腔内壁。(本文来源于《苏州大学》期刊2017-05-01)

李婷婷[2](2017)在《水平旋转式细胞种植支架装置的设计与实现》一文中研究指出在冠状动脉粥样硬化性疾病的研究中,血管支架植入后的支架内再狭窄与血栓形成是其临床应用面临的两大瓶颈问题。而研究表明,支架植入术后,保持内皮及其功能的完整性可以显着降低支架内再狭窄率和支架内血栓形成率,揭示了促进支架表面快速内皮化是改善其有效性、安全性的重要途径。近年来细胞种植支架因其具有良好的促内皮化效应而被广泛关注。体外经细胞种植的血管支架,在支架植入后能直接代替受损细胞行使正常功能。目前体外种植方法多为静态培养法,但是该方法制约了细胞在支架表面的生长均匀性、粘附数量等,而动态叁维细胞培养技术由于实现了对细胞体内生长环境的高度模拟,为解决上述难题提供了契机。因此,本文立足于优化细胞种植支架技术,专注于拥有自主知识产权、价格低廉、自动化程度较高、操作简单的、具备独立种植能力的水平旋转式细胞种植支架装置的设计,主要完成的研究内容如下:(1)细胞种植支架装置的设计1)完成装置各个工作模块的硬件电路设计,其中,硬件设计以STM32F103为核心,结合继电器、环形加热管、模拟温度传感器PT100、模数转换器ADS1234等实现温度数据采集转化等,基于步进电机实现对转速的连续调节控制;基于SolidWorks完成旋转培养管的设计及加工;2)完成硬件控制程序设计,结合PID算法及Ziegler-Nichols回路整定技术实现恒温控制,温度失调时进行报警;基于红外遥控器实现对种植参数的控制、调节及液晶显示;3)LabVIEW上位机程序设计,上位机程序基于串口协议实现对寄存器的读写操作,建立与硬件装置之间的通信,实现对种植参数的设置及调节,且对部分种植参数进行实时监测,完善了装置的可操作性和可视化。(2)细胞种植支架装置的测试与初步验证1)装置组装后,完成运行稳定性测试、温度及转速调节测试、上位机与液晶显示的一致性测试,测试证明装置可连续工作至少8h,且在种植期间保持温度的恒定,温度、转速调节后,上位机与液晶均能正确显示;2)完成装置的工艺参数优化:316L不锈钢血管支架管材先经超声雾化在其表面喷涂一层明胶涂层,再种植内皮细胞,设计正交实验测定细胞种植数量最多的组合,最终得出最佳组合为转速1.5r/min、细胞液浓度为7.5×105个/ml、旋转培养8h;3)在最佳种植参数下比较水平旋转式种植与静态培养后细胞在支架管材表面的分布均匀性。SEM结果显示旋转组管材表面细胞分布更均匀,静态培养出现了种植空白区,结果表明本种植装置显着改善了支架表面细胞的粘附均匀性。综上所述,本装置能够独立完成细胞种植支架的制备,并筛选出了最佳的种植参数组合。与静态培养法相比,本装置能够改善支架表面细胞的粘附均匀性,有助于细胞种植支架的深入研发,造福于冠状动脉粥样硬化性疾病患者。(本文来源于《重庆大学》期刊2017-04-01)

金衍丰,谢弘[3](2017)在《细胞种植支架用于尿道重建动物实验的Meta分析》一文中研究指出目的系统性回顾了已发表的组织工程修复尿道的动物实验,分析动物实验的成功因素,总结其有效性及未来在临床应用中的可行性。方法文中收集了Pubmed、Embase、Biosis Previews与CNKI数据库1980—2014年的文章。所有的数据用Review Manager 5软件及STATA12.0软件进行Meta分析。结果 16项临床前期动物实验被纳入到我们的Meta分析中。细胞种植支架与脱细胞支架用于尿道重建的效果有明显差异(Z=4.7,P<0.000 01;RR=5.25,95%CI=2.60~11.20)。种植2种细胞与种植1种细胞无明显差异(Z=0.75,P=0.45),但病理提示种植2种细胞可产生更多的细胞层,形成毛细血管。上皮分化干细胞种植支架的手术效果明显优于未分化干细胞种植支架。结论运用种植细胞的生物支架制作尿道替代材料是可靠的。上皮细胞、平滑肌细胞或成纤维细胞均适于种植。干细胞,特别是上皮分化的干细胞可能成为未来的研究方向。(本文来源于《现代泌尿外科杂志》期刊2017年03期)

唐瑛,刘李娜,王庆敏,刘畅,杨义力[4](2014)在《种植骨髓间充质干细胞脑血管支架的性能评价》一文中研究指出背景:一般认为对支架表面进行修饰,尤其是种植细胞,可能会加速或导致其内皮化,避免支架内血栓形成而引起再狭窄的发生。目的:寻找骨髓间充质干细胞种植血管支架的最佳条件。方法:将1×106,1×107,1×108,1×109 L-1的第3代大鼠骨髓间充质干细胞分别接种至不锈钢血管支架制备细胞-支架复合物,接种48 h后电镜观察细胞形态变化。取SD大鼠160只,20只为正常对照组,其余140只制作缺血性脑卒中模型,造模8周后随机分为7组,分别植入不锈钢支架、高分子材料支架及不同浓度细胞-支架复合物,以不植入任何材料的为模型对照。植入后8周,蛋白免疫印迹技术检测植入支架上细胞的血管内皮生长因子表达,流式细胞仪检测各组大鼠血小板活化。结果与结论:种植的干细胞均能在不锈钢支架上贴壁生长,当细胞浓度为1×107 L-1时,上皮样细胞完整覆盖支架,细胞及细胞器形态正常。缺血性脑卒中模型实验中,1×107 L-1细胞-支架组细胞生长良好,在血管内环境诱导下具有良好的内皮化趋势,并且可显着抑制血小板活化。表明当细胞种植浓度为1×107 L-1时制备的血管支架通畅,具有良好的生物学效应。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2014年34期)

姜全春,赵秀兰[5](2013)在《脂肪干细胞与Bio-oss支架构建组织工程骨治疗种植体周围骨缺损》一文中研究指出背景:目前治疗种植体周围炎的方法主要有手术治疗、激光治疗、超声洁治加局部用药单独或联合治疗等,但并未完全达到理想的治疗效果。目的:探讨由骨形态发生蛋白修饰的脂肪干细胞与Bio-oss支架构建组织工程骨治疗种植体周围炎性骨缺损的可行性。方法:应用计算机检索1988年1月至2011年12月Pubmed数据库相关文章,检索词为"adipose-derivedstemcells、tissueengineering",并限定文章语言种类为英文。同时计算机检索2005年1月至2011年12月CNKI数据库相关文章,检索词为"脂肪干细胞、种植体周围炎",并限定文章语言种类为中文。共检索到文献56篇。结果与结论:利用组织工程原理与方法再生组织的特点和优势,将脂肪干细胞作为理想的种子细胞,骨形态发生蛋白2作为理想的细胞因子与Bio-oss生物材料混合,构成叁维环境,Bio-oss晶体内广泛交织的空隙结构,有利于脂肪干细胞的迁移。骨形态发生蛋白2与脂肪干细胞复合,促进控制其分化向骨形成中心募集,并分化为骨系细胞,通过钙盐沉积形成新骨,达到治疗种植体周围骨缺损的目的。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2013年06期)

谭海颂,符伟军,李健强,王忠新,李钢[6](2013)在《种植自体尿路上皮细胞的包膜化输尿管组织工程支架的构建》一文中研究指出目的探讨应用组织工程技术体外构建种植自体尿路上皮细胞的包膜化聚乳酸输尿管支架的可行性。方法将聚乳酸输尿管支架于比格犬皮下包埋3周,在其表面诱导形成一层结缔组织薄膜,获得包膜化聚乳酸输尿管支架。经脱细胞处理后,将体外扩增培养的自体尿路上皮细胞种植于包膜输尿管支架表面。采用常规HE染色组织切片、扫描电镜和免疫组化法对包膜输尿管支架及尿路上皮附着情况进行观察;应用MTT比色法比较尿路上皮细胞在包膜化聚乳酸输尿管支架组和管状小肠粘膜下基质组的生长差异。结果 HE染色及Ⅷ因子免疫组化染色结果显示结缔组织层内含有大量毛细血管,但无明显局部炎症反应;扫描电镜和免疫组化染色提示包膜含有丰富的胶原纤维构成、表面呈现叁维立体结构,尿路上皮细胞能在支架包膜表面粘附,形成连续的上皮层;MTT检测显示包膜化聚乳酸输尿管支架组和管状小肠粘膜下基质组组吸光光度值比较无明显差异(P>0.05),说明尿路上皮细胞在包膜化输尿管支架上能连续增殖。结论包膜化聚乳酸输尿管支架适合尿路上皮细胞黏附和增殖,体外构建的包膜化组织工程输尿管有潜在的临床应用价值。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2013年01期)

赵劲民,兰学文[7](2013)在《去细胞同种异体神经支架的制备及种植雪旺细胞的体外实验》一文中研究指出目的:通过化学萃取法制备同种异体神经支架,并将培养的雪旺细胞与支架进行体外结合培养。探讨如何构建具有仿生结构,抗原性小且能含有多种促神经再生成分的支架,修复较长距离的神经缺损。方法:取Wistar大鼠双侧坐骨神经,运用3%叁硝基甲苯和4%脱氧胆酸钠分别萃取1,2和3次,在新鲜神经和萃取神经中段取材,行HE染色,S一100及层粘连蛋白(Laminin)免疫组化染色及透射电镜检测。取SD胎鼠坐骨神经及臂从神经,使用复合酶消化,差速贴壁及Arab-c抑制成纤维细胞生长的培养方(本文来源于《中华医学会第10届全国显微外科学术会议暨世界首例断肢再植成功50周年庆典论文集》期刊2013-01-11)

赵劲民[8](2013)在《去细胞同种异体神经支架的制备及种植雪旺细胞的体外实验》一文中研究指出目的:通过化学萃取法制备同种异体神经支架,并将培养的雪旺细胞与支架进行体外结合培养。探讨如何构建具有仿生结构,抗原性小且能含有多种促神经再生成分的支架,修复较长距离的神经缺损。方法:取Wistar大鼠双侧坐骨神经,运用3%叁硝基甲苯和4%脱氧胆酸钠分别萃取1,2和3次,在新鲜神经和萃取神经中段取材,行HE染色,S-100及层粘连蛋白(Laminin)免疫组化染色及透射电镜检(本文来源于《中华医学会第10届全国显微外科学术会议暨世界首例断肢再植成功50周年庆典论文集》期刊2013-01-11)

夏雷,郝淑煜,李德志,陈刚,高川川[9](2012)在《种植神经干细胞-许旺细胞的共聚物支架移植修复大鼠损伤脊髓》一文中研究指出背景:前期实验显示,在体外乙交酯-丙交酯共聚物支架与神经干细胞和许旺细胞有良好的相容性。目的:观察与许旺细胞共移植,神经干细胞是否能在乙交酯-丙交酯共聚物取向支架内存活、分化,乙交酯-丙交酯共聚物组织工程复合物是否能促进轴突再生及其髓鞘化。方法:制作成年Wistar大鼠T8段半横断脊髓损伤模型,随机分为3组:支架组植入乙交酯-丙交酯共聚物支架,神经干细胞组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架,联合组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架。结果与结论:移植的神经干细胞可在大鼠脊髓内存活,并迁移至邻近脊髓,联合组标记绿色荧光蛋白阳性细胞存活率显着高于神经干细胞组(P<0.001)。联合组胶质纤维酸性蛋白/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞多于神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞,神经干细胞组未发现神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞。联合组有少部分绿色荧光蛋白阳性细胞表达突触素,再生轴突和有髓轴突数量高于其他两组,但差异无显着性意义(P=0.058)。表明与许旺细胞共移植,可促进神经干细胞向神经元样细胞分化,少部分神经元样细胞还可能形成了突触连接;种植了神经干细胞和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物支架可促进轴突再生及其髓鞘化。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年47期)

高国亮,宋剑非,王海永,郑民,王玮[10](2011)在《骨髓间充质干细胞-聚乙醇酸支架复合体种植动物皮下构建组织工程化小口径血管(英文)》一文中研究指出背景:课题组的前期工作已证实骨髓间充质干细胞可以诱导分化为血管内皮细胞和血管平滑肌细胞,并证实所诱导的细胞和胶原包埋的聚乙醇酸支架具有良好的组织相容性。目的:探讨利用动物皮下作为生物反应器构建小口径组织工程化血管的可行性。方法:骨髓间充质干细胞诱导分化为血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞,分层种植于胶原包埋聚乙醇酸支架表面,然后将细胞-支架复合体种植于动物皮下,构建小口径组织工程化血管。结果与结论:人工血管组织学观察见管壁结构清晰,其大体结构和天然血管相似,可承受26.6kPa的血管腔内压力不破裂。皮下培养8周免疫荧光观察Brdu标记的部分细胞核呈现明亮的黄绿色荧光。结果说明利用动物的皮下作为生物反应器,采用静态培养的方式构建小口径组织工程化血管是可行的。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2011年51期)

细胞种植支架论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

在冠状动脉粥样硬化性疾病的研究中,血管支架植入后的支架内再狭窄与血栓形成是其临床应用面临的两大瓶颈问题。而研究表明,支架植入术后,保持内皮及其功能的完整性可以显着降低支架内再狭窄率和支架内血栓形成率,揭示了促进支架表面快速内皮化是改善其有效性、安全性的重要途径。近年来细胞种植支架因其具有良好的促内皮化效应而被广泛关注。体外经细胞种植的血管支架,在支架植入后能直接代替受损细胞行使正常功能。目前体外种植方法多为静态培养法,但是该方法制约了细胞在支架表面的生长均匀性、粘附数量等,而动态叁维细胞培养技术由于实现了对细胞体内生长环境的高度模拟,为解决上述难题提供了契机。因此,本文立足于优化细胞种植支架技术,专注于拥有自主知识产权、价格低廉、自动化程度较高、操作简单的、具备独立种植能力的水平旋转式细胞种植支架装置的设计,主要完成的研究内容如下:(1)细胞种植支架装置的设计1)完成装置各个工作模块的硬件电路设计,其中,硬件设计以STM32F103为核心,结合继电器、环形加热管、模拟温度传感器PT100、模数转换器ADS1234等实现温度数据采集转化等,基于步进电机实现对转速的连续调节控制;基于SolidWorks完成旋转培养管的设计及加工;2)完成硬件控制程序设计,结合PID算法及Ziegler-Nichols回路整定技术实现恒温控制,温度失调时进行报警;基于红外遥控器实现对种植参数的控制、调节及液晶显示;3)LabVIEW上位机程序设计,上位机程序基于串口协议实现对寄存器的读写操作,建立与硬件装置之间的通信,实现对种植参数的设置及调节,且对部分种植参数进行实时监测,完善了装置的可操作性和可视化。(2)细胞种植支架装置的测试与初步验证1)装置组装后,完成运行稳定性测试、温度及转速调节测试、上位机与液晶显示的一致性测试,测试证明装置可连续工作至少8h,且在种植期间保持温度的恒定,温度、转速调节后,上位机与液晶均能正确显示;2)完成装置的工艺参数优化:316L不锈钢血管支架管材先经超声雾化在其表面喷涂一层明胶涂层,再种植内皮细胞,设计正交实验测定细胞种植数量最多的组合,最终得出最佳组合为转速1.5r/min、细胞液浓度为7.5×105个/ml、旋转培养8h;3)在最佳种植参数下比较水平旋转式种植与静态培养后细胞在支架管材表面的分布均匀性。SEM结果显示旋转组管材表面细胞分布更均匀,静态培养出现了种植空白区,结果表明本种植装置显着改善了支架表面细胞的粘附均匀性。综上所述,本装置能够独立完成细胞种植支架的制备,并筛选出了最佳的种植参数组合。与静态培养法相比,本装置能够改善支架表面细胞的粘附均匀性,有助于细胞种植支架的深入研发,造福于冠状动脉粥样硬化性疾病患者。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

细胞种植支架论文参考文献

[1].王雷.大鼠肝脏脱细胞支架的制备及肝细胞和内皮祖细胞再种植的研究[D].苏州大学.2017

[2].李婷婷.水平旋转式细胞种植支架装置的设计与实现[D].重庆大学.2017

[3].金衍丰,谢弘.细胞种植支架用于尿道重建动物实验的Meta分析[J].现代泌尿外科杂志.2017

[4].唐瑛,刘李娜,王庆敏,刘畅,杨义力.种植骨髓间充质干细胞脑血管支架的性能评价[J].中国组织工程研究.2014

[5].姜全春,赵秀兰.脂肪干细胞与Bio-oss支架构建组织工程骨治疗种植体周围骨缺损[J].中国组织工程研究.2013

[6].谭海颂,符伟军,李健强,王忠新,李钢.种植自体尿路上皮细胞的包膜化输尿管组织工程支架的构建[J].南方医科大学学报.2013

[7].赵劲民,兰学文.去细胞同种异体神经支架的制备及种植雪旺细胞的体外实验[C].中华医学会第10届全国显微外科学术会议暨世界首例断肢再植成功50周年庆典论文集.2013

[8].赵劲民.去细胞同种异体神经支架的制备及种植雪旺细胞的体外实验[C].中华医学会第10届全国显微外科学术会议暨世界首例断肢再植成功50周年庆典论文集.2013

[9].夏雷,郝淑煜,李德志,陈刚,高川川.种植神经干细胞-许旺细胞的共聚物支架移植修复大鼠损伤脊髓[J].中国组织工程研究.2012

[10].高国亮,宋剑非,王海永,郑民,王玮.骨髓间充质干细胞-聚乙醇酸支架复合体种植动物皮下构建组织工程化小口径血管(英文)[J].中国组织工程研究与临床康复.2011

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细胞种植支架论文-王雷
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