本文主要研究内容
作者于萌琪（2019）在《一种电泳与质谱联用分析硫酸乙酰肝素的新方法》一文中研究指出：硫酸乙酰肝素(Heparan sulfate，HS)属于一类复杂的线性糖胺聚糖(Glycosaminoglycans，GAGs)。HS主要以蛋白聚糖的形式存在于细胞表面和细胞外基质中,参与细胞生长、信号传导、细胞粘附和分化以及血管的形成、病毒侵袭等多种重要的生理过程。HS的骨架结构是由糖醛酸(Uronic acid,HexA)与D-葡萄糖胺(Glucosamine，GlcN)通过1-4糖苷键连接组成的二糖单元,经重复拼接而成。糖醛酸是葡萄糖醛酸(Gluronicacid，GlcA)或艾杜糖醛酸(Iduronic acid,IdoA),HexA的C2位、GlcN的N位及C6位易发生硫酸化修饰。由于HS结构复杂,对其进行表征一直存在着巨大的挑战。HS具有多分散性、不均一性,但糖链的分子量分布是否具有连续性,以及不同分子量的糖链的硫酸化情况,目前仍没有有效且直接的方法对此进行研究。由于HS是微观异质性的生物分子,分析其结构的方法主要是将其经酶法或者化学法降解成二糖或者寡糖后再通过液相色谱(Liquid chromatography，LC)、液相色谱与质谱联用(Liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS)、核磁(Nuclearmagneticresonance，NMR)等方法进行分析。虽然这些方法提供了丰富的寡糖、二糖组成等信息,但这些方法存在一个共同的缺陷,即无法针对不同分子量的HS进行详细的结构表征。为了探究HS分子量分布是否连续、以及对不同分子量的糖链进行结构表征,我们建立了一套聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE)-胶内酶解-液相色谱-质谱联用的分析方法。相比于传统的技术,该方法可以实现对特定分子量范围内糖胺聚糖的结构表征。该法的灵敏度高,可以满足生物样品中低含量糖胺聚糖的分析需要。该法提出的PAGE中糖胺聚糖胶内酶解方法,打破了以往糖胺聚糖聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱技术不兼容的壁垒。我们将新方法应用到肝素(Heparin，Hp)等药物的分析中,我们发现,Hp的糖链为连续分布,并且不同分子量范围下的糖链硫酸化程度无明显差异;我们也将方法应用到小鼠肺部HS的分析中,实验发现,与Hp不同的是,小鼠肺部的HS呈现出不完全连续的分子量分布,主要分布在三个区间,并且硫酸化程度存在差异，主要趋势是随着糖链越长,硫酸化程度越低。本论文为Hp/HS提供了更加直观且深入的精细结构表征方法,促进了药品质量的全面控制,保障了药品安全;此外,该法良好的灵敏度和精确度,将为生物样品中低丰度HS等糖胺聚糖样品提供了新的分析策略,促进HS等糖胺聚糖的构效关系研究。
Abstract
liu suan yi xian gan su (Heparan sulfate，HS)shu yu yi lei fu za de xian xing tang an ju tang (Glycosaminoglycans，GAGs)。HSzhu yao yi dan bai ju tang de xing shi cun zai yu xi bao biao mian he xi bao wai ji zhi zhong ,can yu xi bao sheng chang 、xin hao chuan dao 、xi bao nian fu he fen hua yi ji xie guan de xing cheng 、bing du qin xi deng duo chong chong yao de sheng li guo cheng 。HSde gu jia jie gou shi you tang quan suan (Uronic acid,HexA)yu D-pu tao tang an (Glucosamine，GlcN)tong guo 1-4tang gan jian lian jie zu cheng de er tang chan yuan ,jing chong fu pin jie er cheng 。tang quan suan shi pu tao tang quan suan (Gluronicacid，GlcA)huo ai du tang quan suan (Iduronic acid,IdoA),HexAde C2wei 、GlcNde Nwei ji C6wei yi fa sheng liu suan hua xiu shi 。you yu HSjie gou fu za ,dui ji jin hang biao zheng yi zhi cun zai zhao ju da de tiao zhan 。HSju you duo fen san xing 、bu jun yi xing ,dan tang lian de fen zi liang fen bu shi fou ju you lian xu xing ,yi ji bu tong fen zi liang de tang lian de liu suan hua qing kuang ,mu qian reng mei you you xiao ju zhi jie de fang fa dui ci jin hang yan jiu 。you yu HSshi wei guan yi zhi xing de sheng wu fen zi ,fen xi ji jie gou de fang fa zhu yao shi jiang ji jing mei fa huo zhe hua xue fa jiang jie cheng er tang huo zhe gua tang hou zai tong guo ye xiang se pu (Liquid chromatography，LC)、ye xiang se pu yu zhi pu lian yong (Liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS)、he ci (Nuclearmagneticresonance，NMR)deng fang fa jin hang fen xi 。sui ran zhe xie fang fa di gong le feng fu de gua tang 、er tang zu cheng deng xin xi ,dan zhe xie fang fa cun zai yi ge gong tong de que xian ,ji mo fa zhen dui bu tong fen zi liang de HSjin hang xiang xi de jie gou biao zheng 。wei le tan jiu HSfen zi liang fen bu shi fou lian xu 、yi ji dui bu tong fen zi liang de tang lian jin hang jie gou biao zheng ,wo men jian li le yi tao ju bing xi xian an ning jiao dian yong (Polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE)-jiao nei mei jie -ye xiang se pu -zhi pu lian yong de fen xi fang fa 。xiang bi yu chuan tong de ji shu ,gai fang fa ke yi shi xian dui te ding fen zi liang fan wei nei tang an ju tang de jie gou biao zheng 。gai fa de ling min du gao ,ke yi man zu sheng wu yang pin zhong di han liang tang an ju tang de fen xi xu yao 。gai fa di chu de PAGEzhong tang an ju tang jiao nei mei jie fang fa ,da po le yi wang tang an ju tang ju bing xi xian an ning jiao dian yong yu zhi pu ji shu bu jian rong de bi lei 。wo men jiang xin fang fa ying yong dao gan su (Heparin，Hp)deng yao wu de fen xi zhong ,wo men fa xian ,Hpde tang lian wei lian xu fen bu ,bing ju bu tong fen zi liang fan wei xia de tang lian liu suan hua cheng du mo ming xian cha yi ;wo men ye jiang fang fa ying yong dao xiao shu fei bu HSde fen xi zhong ,shi yan fa xian ,yu Hpbu tong de shi ,xiao shu fei bu de HScheng xian chu bu wan quan lian xu de fen zi liang fen bu ,zhu yao fen bu zai san ge ou jian ,bing ju liu suan hua cheng du cun zai cha yi ，zhu yao qu shi shi sui zhao tang lian yue chang ,liu suan hua cheng du yue di 。ben lun wen wei Hp/HSdi gong le geng jia zhi guan ju shen ru de jing xi jie gou biao zheng fang fa ,cu jin le yao pin zhi liang de quan mian kong zhi ,bao zhang le yao pin an quan ;ci wai ,gai fa liang hao de ling min du he jing que du ,jiang wei sheng wu yang pin zhong di feng du HSdeng tang an ju tang yang pin di gong le xin de fen xi ce lve ,cu jin HSdeng tang an ju tang de gou xiao guan ji yan jiu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自山东大学的于萌琪，发表于刊物山东大学2019-07-16论文，是一篇关于肝素论文,硫酸乙酰肝素论文,电泳论文,胶内酶解论文,质谱论文,山东大学2019-07-16论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自山东大学2019-07-16论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。