济南市中医医院主管中药师250001
摘要:目的:对比分析加工炮制一体化延胡索饮片与传统工艺炮制延胡索饮片的镇痛作用状况。方法:首先用薄层层析法测定传统工艺炮制延胡索饮片和加工炮制一体化延胡索饮片成分状况,再用小鼠扭体法、热板法观察传统炮制延胡索与新炮制工艺延胡索镇痛作用。结果:从延胡索饮片成分测定结果上来看,加工炮制一体化回收率和测得量均高于传统工艺炮制。三种延胡索样品和阳性对照组均可让小鼠扭体潜伏期时间延长,20分钟后扭体次数降低,均有镇痛功效。和生理盐水组对比,在此实验内,炮制延胡索,其镇痛可能性分别为63.2%、35.9%、21.3%、69.7%,特别是样品1抑制可能性可达到63.2%。对比样品1、样品2与生理盐水组各时间段舔足潜伏期60min和120min时,组间数据有统计学意义(P<0.05);对比样品1、样品2与样品3的60min舔足潜伏期状况,组间数据有统计学意义(P<0.05)。结论:加工炮制一体化延胡索饮片和传统工艺炮制延胡索饮片对比,前者镇痛作用明显更具有优势性,因此,临床在应用时需结合患者状况综合性考虑给药。
关键词:镇痛;延胡索饮片;传统工艺炮制;加工炮制一体化
延胡索属于罂粟科延胡索植物的干燥块茎,也可将其称为元胡,延胡索属于较为常用的止痛理气药物,存在行气止痛、活血化瘀的功效,临床多用于治疗跌打肿痛、产后淤阻、经闭痛经、脘腹疼痛、胸胁等症状[1-2]。延胡索乙素属于延胡索的一个主要性化学成分,其镇痛作用明显。现代药理实验证实存在镇痛功效。现临床使用的延胡索药物均属于炮制品,传统工艺炮制包括两个阶段,则入药前炮制和产地加工两个阶段。具体报告如下:
1.仪器和材料
1.1动物
ICR小鼠,雄性和雌性小鼠均可使用,体重质量在18g-22g,小鼠由浙江省实验动物中心进行提供。
1.2试剂
醋酸溶液0.6%,由中国杭州化学试剂有限公司进行提供。以及阿司匹林肠溶片药物。
1.3方法
首先用薄层层析法测定传统工艺炮制延胡索饮片和加工炮制一体化延胡索饮片成分状况,再用小鼠扭体法、热板法观察传统炮制延胡索与新炮制工艺延胡索镇痛作用。
薄层层析法测定传统工艺炮制延胡索饮片和加工炮制一体化延胡索饮片成分:取传统工艺炮制和加工炮制一体化延胡索饮片适量,和无水乙醇进行溶解,得到对照品溶液,再制备样品液,取对照品液和阴性对照溶液在硅胶G板之上,15min饱和,上行展开10厘米,薄层板取出挥干,给予显色处理,观察结果。
给药样品用延胡索不同样品50g,将其浸泡一小时,用水煎熬两次,第一次煎熬时加入水400ml,第二次煎熬时加入水250ml,两次煎熬煮沸25分钟后,过滤,将滤液合并,进行水浴浓缩。制作为1g.ml-1水煎液。
样品1:加工炮制一体化延胡索,醋内进行减压并抽真空处理。炮制方式:把4mm鲜延胡索切片分别放置在1:1米醋内抽取真空,满足真空后,缓慢性放气,2分钟恢复到常压,两次抽气,让醋充分在细胞中进行渗透(含延胡索乙素1.3078mg.g-1)[3-4]。
样品2:加工炮制一体化延胡索(切片干燥后用醋进行浸润),炮制方式:把4mm鲜延胡索片在热风70度-80度下烘干,在质量为1:1米醋内进行浸润(含延胡索乙素1.0421mg.g-1)。
样品3:传统工艺炮制延胡索片(阿司匹林),炮制方式:依据传统炮制方式用醋煮法进行炮制(含延胡索乙素0.8185mg.g-1)。
1.4指标判定
整个研讨过程中,相关工作人员需认真此次研究所得各项数据,并对比讨论。
1.4统计学方法
用SPSS13.0软件分析所得数据,计数资料(X2)、计量资料(t)分别采用(n,%)、(±s)来表示,差异有统计学意义(P<0.05)。
2.结果
2.1延胡索饮片成分
从延胡索饮片成分测定结果上来看,加工炮制一体化回收率和测得量均高于传统工艺炮制。详见表1:
表1:延胡索饮片成分结果
2.2小鼠扭体法镇痛实验
取体重质量为18g-22g的小鼠随机分成五组,每组各16只,其组别分别为样品1、样品2、样品3、生理盐水组、阳性对照组,用灌胃给药三天,药物剂量10g.kg-1。最后一次给药前需禁止食用食物4小时,灌胃半小时后给予醋酸溶液0.6%进行腹腔注射,注射量0.1ml.(10g)-1,记录并观察其20分钟中所发生的平均扭体次数和扭体反应动物次数。三种延胡索样品和阳性对照组均可让小鼠扭体潜伏期时间延长,20分钟后扭体次数降低,均有镇痛功效。和生理盐水组对比,在此实验内,炮制延胡索,其镇痛可能性分别为63.2%、35.9%、21.3%、69.7%,特别是样品1抑制可能性可达到63.2%。其结果详见下表2:
表2:小鼠醋酸扭体反应状况(±s)
2.2小鼠热板法镇痛实验
室温在13度-18度状况下,取体重质量为18g-22g范围内的小鼠,在水浴(54±0.6)度状况下,测量小鼠痛阀值(小鼠投入热浴板内到发生舔后足反应时间作为痛阀指数),其痛反应潜伏时间在5s-60s小鼠则为合格鼠,排除反应迟钝或过敏的个体。把纳入小鼠分5组,实验前三天给药。最后一次给药把小鼠放在(54±0.6)度的热板上,测定其基础潜伏时间,取平均指数,对照组小鼠用生理盐水进行灌胃处理,另外4个给药则用相应样品进行灌胃处理,测定小鼠在给药120min、90min、60min、30min舔足潜伏阶段的改变(详见下表3),对比样品1、样品2与生理盐水组各时间段舔足潜伏期60min和120min时,组间数据有统计学意义(P<0.05);对比样品1、样品2与样品3的60min舔足潜伏期状况,组间数据有统计学意义(P<0.05)。
表3:小鼠热板法检测舔足反应潜伏期(±s)
注:和生理盐水组对比,#P<0.05,*P<0.05;和样品3对比,%P<0.05。
3.讨论
传统工艺炮制方式不仅存在工艺繁琐,实际上进行炮制时费时费力,质量也相对不平衡。且传统延胡索饮片则为粒状或块状,质地较为坚硬,煎出有效成分较低。把延胡索炮制和产地加工联合起来则为一体化加工,所加工出的延胡索片,其药材质量不仅可得到提高,且可降低丢失药材中有效成分。检测发现,加工炮制一体化延胡索饮片内延胡索乙素含量比药典要高出50%或以上[5-6]。加工炮制一体化延胡索饮片,不仅存在质量稳定的优势,保证了品质,且也降低了药物生产厂家的能源耗费,生产效率得到提升,加大了产业效益。此研究采用的缩尾法、热板法、扭体法对比加工炮制一体化延胡索饮片和传统炮制延胡索饮片镇痛功效的区别,为加工炮制一体化延胡索片提供相应科学依据。把延胡索炮制与产地加工两者联合起来,不仅可提升延胡索质量,降低丢失药材内有效成分,稳定其质量,保证药物品质。进而从检测延胡索乙素上来看,加工炮制一体化延胡索药物乙素和传统炮制延胡索含量对比,此文中所探讨的两种方式均证实了传统醋制与加工炮制一体化延胡索存在镇痛功效,表明加工炮制一体化延胡索饮片的镇痛功效比传统工艺炮制延胡索饮片要强。表明炮制一体化延胡索饮片的技术更加优势,此技术也降低了企业能源耗费。综上所述,加工炮制一体化延胡索饮片和传统工艺炮制延胡索饮片对比,前者镇痛作用明显更具有优势性,因此,临床在应用时需结合患者状况综合性考虑给药。
参考文献:
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