导读:本文包含了酶解肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:抗肿瘤活性,抗氧化,酶解肽,研究与应用
酶解肽论文文献综述
侯璐,施维[1]（2019）在《鹿血浆酶解肽关于抗氧化抗肿瘤活性的研究与应用》一文中研究指出鹿血(膛血)是从梅花鹿或马鹿中分离得到的,具有治疗疾病和改善健康的功效。通过离心的方式将血浆从血液中分离提取出来,利用四种蛋白酶以不同的组合与不同浓度和时间梯度对其进行水解,制备具有活性的多肽成分。通过SDSPAGE对鹿血浆酶解产物进行分子量检测发现,与其他酶解组合相比,木瓜蛋白(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
刘洋[2]（2019）在《林蛙油蛋白及酶解肽的制备与抗氧化活性研究》一文中研究指出林蛙油是雌性林蛙输卵管的干燥品,是收录《中国药典》的中药材。蛋白质是林蛙油中主要活性成分,占到50%以上,水溶性林蛙油蛋白(PEOR)具有抗氧化、抗疲劳、抗衰老和增强机体免疫力等作用。因此,为系统研究PEOR,基于活性保留,本论文结合抗氧化活性跟踪首先对PEOR的提取工艺进行研究,并进一步考察其体内外抗氧化活性和抗疲劳作用,发现:PEOR体内抗氧化活性高,而体外作用弱。基于此,本论文模拟蛋白体内消化过程与程序,采用胃蛋白酶/胰蛋白酶分步水解法制备林蛙油酶解肽,并对其氨基酸组成与抗氧化活性进行研究。应用水提法提取PEOR,结合DPPH清除率,以pH值、料液比、提取时间、提取次数和浸提液含盐量为五个单因素考察指标,优化提取工艺,确定最佳提取条件为:pH 6.5的磷酸缓冲溶液(含0.5 mol/L的NaCl),在料液比1:150条件下浸提2次,每次浸提12 h;此条件下PEOR提取率为12.5%,经考马斯亮蓝法测得蛋白质含量为60.7%;应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定PEOR分子量分布,发现:PEOR在44.3-116 kDa范围内主要有叁个单体蛋白。对PEOR中氨基酸组成进行分析,结果表明:PEOR中有17种氨基酸,其中7种为必需氨基酸,占41.9%,氨基酸总含量为668.3 mg/g。以羟自由基清除率、DPPH自由基清除率、超氧阴离子清除率和总还原力为体外抗氧化模型,VC为阳性对照,评价PEOR体外抗氧化活性。结果表明,PEOR清除羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子的IC_(50)值分别为4.85 mg/mL、4.98mg/mL和2.58 mg/mL;对Fe~(3+)的还原能力,在A_(700 nm)值为0.2时,浓度为11.8mg/mL。以丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和蛋白质羰基(PC)为指标,VC为阳性对照,评价PEOR的体内抗氧化活性。结果表明,PEOR能降低小鼠体内MDA和PC含量,提高GSH和SOD水平,且呈量效关系。其中,400 mg/kg的PEOR对负重游泳小鼠具有显着的抗疲劳作用,能延长小鼠的负重疲劳游泳时间,减少剧烈运动引起的血尿素氮(BUN)和血乳酸(BLA)的升高。胃蛋白酶/胰蛋白酶分步水解法制备林蛙油酶解肽的工艺条件为:脱脂林蛙油,加入50倍量人工胃液,水解2 h,调节pH至8.5,再次水解4 h,水浴快速高温灭酶。在此条件下林蛙油酶解肽的提取率为31.5%;以羟自由基清除率、DPPH清除率、超氧阴离子清除率和总还原力四个体系,VC为阳性对照,考察林蛙油酶解肽抗氧化活性。结果表明,林蛙油酶解肽清除羟自由基、DPPH和超氧阴离子的IC_(50)值分别为3.96 mg/mL、3.25 mg/mL和2.58 mg/mL;对Fe~(3+)的还原能力,在A_(700nm)值为0.2时,浓度为11.8 mg/mL。综合以上结果,PEOR体内抗氧化效果优于体外,胃蛋白酶/胰蛋白酶分步水解法制备的林蛙油酶解肽的抗氧化活性高于PEOR。(本文来源于《吉林化工学院》期刊2019-06-01）
贾高旺,郭冉,张宇,李雪鹤,夏辉[3]（2019）在《家禽副产物酶解肽部分替代鱼粉对大菱鲆生长性能、消化指标和特异性免疫指标的影响》一文中研究指出本试验旨在研究家禽副产物酶解肽部分替代鱼粉对大菱鲆生长性能、消化指标和特异性免疫指标的影响。选取初始体重(10.32±0.26) g、大小均匀、体质健壮的大菱鲆450尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复30尾。首先配制含50%鱼粉的基础饲料,然后用家禽副产物酶解肽分别替代基础饲料中0(对照)、8%、16%、24%和32%的鱼粉,配制5种等氮等能的试验饲料,分别记为D0、D8、D16、D24、D32组。试验期为56 d。结果显示:家禽副产物酶解肽替代8%和16%的鱼粉对大菱鲆的增重率、存活率、特定生长率、饲料系数、肝体比、肥满度、脏体比等生长性能指标均无显着影响(P>0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉比例超过8%时,全鱼粗脂肪含量显着低于对照组(P<0.05)。D0、D8、D16组干物质表观消化率、粗蛋白质表观消化率和粗脂肪表观消化率显着高于D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组肝脏中胃蛋白酶、胰蛋白酶活性显着高于D16、D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组的血浆和肝脏中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性显着低于D24、D32组(P<0.05)。D8组血浆中补体3、补体4含量显着高于D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组血浆中尿素氮、丙二醛含量显着低于D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组的血浆中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性以及总蛋白、甘油叁酯、总胆固醇、葡萄糖含量显着高于D32组(P<0.05)。由此可见,在本试验条件下,以生长性能为基础,综合考虑消化、代谢、特异性免疫等指标,家禽副产物酶解肽替代大菱鲆饲料中鱼粉的适宜比例为8%。(本文来源于《动物营养学报》期刊2019年05期）
李娜,周德庆,吕世伟,刘楠,王珊珊[4]（2018）在《鳕鱼鱼鳔来源酶解肽的抗氧化活性与延缓H_2O_2诱导2BS细胞衰老作用的研究》一文中研究指出目的:对鳕鱼鱼鳔来源酶解肽的抗氧化活性与延缓H_2O_2诱导2BS细胞衰老作用的研究。方法:利用复合蛋白酶对鳕鱼鱼鳔进行酶解,将得到的酶解产物进行G-15葡聚糖凝胶柱层析。对分离纯化组分进行傅里叶红外光谱扫描、紫外光谱扫描、氨基酸组成分析与分子量测定。检测鱼鳔肽对DPPH·,HO·与O2·-自由基体外清除能力与Fe~(2+)螯合能力。通过H_2O_2诱导2BS细胞建立早期细胞衰老模型,对鱼鳔肽对氧化诱导衰老细胞的细胞增殖率、ROS活性氧含量、β-半乳糖苷酶含量与细胞凋亡率进行检测。结果:通过分离纯化得到两个组分,分别命名为SWP-Ⅰ与SWP-Ⅱ。体外清除自由基能力实验结果显示两个组分对DPPH·,HO·与O2·-自由基具有一定的清除能力,且具有较好的Fe~(2+)螯合能力。对H_2O_2诱导的早期衰老2BS细胞,鳕鱼鱼鳔肽能够有效提高细胞增殖率,降低ROS活性氧含量、β-半乳糖苷酶含量与细胞凋亡率。结论:通过酶解得到的鳕鱼鱼鳔肽具有较好的抗氧化能力并对H_2O_2诱导的早期衰老2BS细胞具有一定的保护作用,能够有效地延缓细胞衰老。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07）
路晶晶[5]（2018）在《家禽副产物酶解肽在凡纳滨对虾饲料中的应用研究》一文中研究指出为了研究家禽副产物酶解肽(peptides hydrolyzed from poultry by-products,PHFP)替代凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)饲料中部分鱼粉的可行性,本实验通过PHFP对鱼粉的替代量实验、不同形式蛋氨酸添加实验以及对虾肝胰腺蛋白质组学分析叁部分实验对凡纳滨对虾饲料中PHFP的应用进行了研究。主要研究方法与具体结果如下:实验一:以预混PHFP(在PHFP基础上添加包膜蛋氨酸,使其蛋氨酸含量与国产鱼粉相当)分别替代基础饲料中0(对照)、2%、4%、6%、8%的鱼粉,制作5种实验饲料并命名T0、T1、T2、T3、T4。选取900尾平均体重(0.31±0.01)g的凡纳滨对虾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复60尾,进行为期8周的室内养殖实验。结果表明:替代水平为2%~6%时,对虾的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、蛋白质效率(PER)、饲料系数(FCR)与对照组无显着差异(P>0.05);当替代水平超过2%时,全虾粗脂肪含量显着低于对照组(P<0.05),全虾粗灰分含量显着高于对照组(P<0.05);替代水平为2%时,肝胰腺中脂肪酶(LPS)活性最高,并可显着降低血淋巴中葡萄糖(GLU)和甘油叁酯(TG)的含量(P<0.05),显着提高血淋巴中溶菌酶(LZM)的活性(P<0.05)。当替代水平超过2%时,血浆中过氧化物酶(POD)的活性显着低于对照组(P<0.05)。各组粗蛋白质表观消化率、粗脂肪表观消化率以及肝胰腺中LZM活性、POD活性与总抗氧化能力(T-AOC)均无显着差异(P>0.05)。由此得出,在本实验条件下,以生长性能为基础,综合考虑消化、非特异性免疫等指标,包膜蛋氨酸预混PHFP替代凡纳滨对虾饲料中鱼粉的适宜水平为2%。实验二:研究了添加晶体蛋氨酸预混的PHFP替代对虾饲料中2%的鱼粉组与对照组和添加包膜蛋氨酸预混的PHFP替代对虾饲料中2%的鱼粉组对对虾生长的影响,分别记做P0(对照),P1(包膜蛋氨酸),P2(晶体蛋氨酸)组。实验结果表明,P2组对虾WGR、SGR、PER等指标略高于P1和P0组,组间无显着性差异(P>0.05);P2组全虾脂肪和肌肉脂肪显着低于P0和P1组(P<0.05),全虾灰分显着高于P0和P1组(P<0.05);P1组胃蛋白酶(PPS)活性显着低于P0组(P<0.05),与P2组无显着性差异(P>0.05);各组消化酶活性和营养物质表观消化率指标没有显着性差异(P>0.05);P1、P2组血淋巴中TG、GLU、AST、ALT浓度均低于P0组,但不构成统计学上的差异(P>0.05);对虾肝胰腺中ALP活性P1组显着低于P0组和P2组,其他免疫指标无显着性差异(P>0.05);血淋巴中POD活力P2组显着低于P1组和P0组(P<0.05),但T-AOC显着高于P1组和P0组(P<0.05),P1、P2组LZP活力略高于P0组,但无显着性差异(P>0.05)。由此得出,以生长性能为基础,综合考虑消化、非特异性免疫等指标,晶体蛋氨酸预混PHFP替代凡纳滨对虾饲料中2%鱼粉更优。实验叁:将实验二中的生长最优组P2和对照组P0组对虾肝胰腺进行了Label-free定量蛋白质谱分析分别记作V(P2)组和C(P0)组。结果表明,V组较C组对虾肝胰腺共有蛋白中有15蛋白个表达上调,3个蛋白(肌动蛋白T2,骨骼肌肌动蛋白6和α-葡糖苷酶)表达下调,表达上调蛋白分别为胰蛋白酶、丝氨酸胶原酶1、丝氨酸蛋白酶抑制剂3、水通道蛋白4、钙网蛋白、四跨膜蛋白、抗白细胞蛋白酶,微管蛋白α链、整合素β亚基、NADH泛醌氧化还原酶亚基3、钙转运ATP酶、Fo-ATP合成酶B链、α-淀粉酶,几丁质酶、果糖-1,6-二磷酸酶,分别涉及了在碳水化合物代谢、能量代谢、离子转换、抗炎抗菌以及信号传导等过程,彼此相互依存、相互制约共同促进对虾的生长。从分子水平讲,PHFP搭配一定晶体蛋氨酸替代对照组对虾饲料中2%的鱼粉具有可行性。(本文来源于《河北农业大学》期刊2018-06-01）
杨亚强[6]（2018）在《米渣酶解肽制备与生理活性及其对断奶仔猪生长性能的影响》一文中研究指出米渣是以大米为原料生产有机酸、淀粉糖和发酵工业中的副产物,蛋白含量高达50%以上,与大米蛋白质具有几乎相同的营养价值,氨基酸配比合理,然而因其溶解性低,在中性pH下消化率差被用作廉价的动物饲料。米渣经酶解其功能和营养特性能得到改善,可以提高米渣利用率。本课题通过物理超微粉碎辅助复合酶水解制备米渣蛋白肽,进而研究了肽抗肿瘤活性和功能特性,然后将米渣酶解物作为微胶囊壁材,研究对断奶仔猪生长性能的影响,为大米蛋白活性肽、断奶仔猪日粮营养添加物产品开发提供理论依据。主要研究结果如下:(1)超微粉碎结合复合酶法制备了6种大米蛋白酶解肽,其水解度、蛋白回收率、短肽含量研究结果表明,叁种蛋白酶(胰蛋白酶、中性蛋白酶及风味蛋白酶)复配比例为2:5:1结果最佳,氨基酸配比合理,米渣蛋白肽乳化性较差,但溶解性大于90%,RDPH-e起泡性较好,可能是因为超微粉碎使蛋白质的部分结构得以展开,改变了米渣蛋白的二级和叁级结构,分子容易吸附在气液界面,各蛋白肽抗氧化活性随着浓度增加均有不同程度增加。(2)米渣酶解大米蛋白肽经超滤制得不同肽组分RDPH-e-1(3-10k)、RDPH-e-2(1-3k)、RDPH-e-3(<1k),对HepG2细胞增殖、凋亡、周期、迁移等抗肿瘤结果显示,相对于对照组各组分处理组对肝癌细胞HepG2增殖均具有不同程度抑制作用,RDPH-e-1、RDPH-e-2对HepG2的最高抑制率超过了60%,有良好的量效关系。RDPH-e-1半数抑制浓度为(63.51±0.10)μg/mL,与其它各组有显着性差异,活性最高。细胞凋亡结果显示蛋白肽处理组相对于空白对照组均出现染色质聚集,细胞核皱缩,且凋亡率与浓度呈正相关。流式细胞法检测不同肽组分对肝癌HepG2细胞周期的影响,证明大米蛋白肽组分作用于HepG2细胞发生了G1期的阻滞,阻止了HepG2细胞向S期过渡,抑制了DNA复制。Transwell小室迁移试验可以看出,不同分子量肽组分能有效抑制HepG2细胞的迁移,且以RDPH-e-1作用迁移能力最小。(3)制备米渣酶解肽为壁材微胶囊产品,以包埋率为目标参数进行响应面优化,最优结果为乳化剂含量3.01%、壁材配比3.35:1、芯材含量29.17%,理论包埋率为81.78%。考虑到实际应用,将工艺参数设定为乳化剂含量3.0%、壁材配比3:1、芯材含量30.00%。以此优化工艺制备大米糖浆和米渣酶解蛋白肽为壁材椰子油微胶囊粉,其水分为2.07%,包埋率为81.68%,溶解性能良好。其粒径分布<10μm占90%,电镜表征可见微胶囊多呈圆球形,表面完整光滑。在25℃贮藏条件下,第30 d椰子油和椰子油微胶囊的过氧化值分别为6.21 meq/kg和5.02 meq/kg,在60℃加速氧化条件下,原料椰子油的过氧化值迅速增加,微胶囊化椰子油缓慢上升,贮藏30 d椰子油的过氧化值达到36.42 meq/kg;3种湿度条件下椰子油微胶囊的过氧化值分别为4.49 meq/kg,6.64 meq/kg,11.46 meq/kg,显示微胶囊产品应在通风干燥环境下保藏。(4)在日粮中添加以米渣酶解物和糖浆为壁材的椰子油微胶囊,评价其对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及其肠道菌群的影响,发现在断奶仔猪饲粮中添加3%以大米蛋白肽-糖浆为壁材的椰子油微胶囊后与对照组相比,平均日增重高24.00%,日采食量高14.81%,干物质、粗脂肪和粗蛋白的表观消化率与对照组相比分别高4.51%、17.34%、18.76%。对血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油叁酯有显着影响,对肠道菌群有改善趋势。表明椰子油微胶囊粉可以在仔猪饲料添加,为科学制定仔猪蛋白、油脂需要模式及大米蛋白肽应用提供科学了依据。(本文来源于《南昌大学》期刊2018-05-27）
曾凤仙,周道志,谢燕[7]（2018）在《外源氨基酸酶促修饰对波纹巴非蛤酶解肽抗氧化活性的影响》一文中研究指出本研究以波纹巴非蛤酶解液为研究对象,利用类蛋白反应的机理,通过添加外源氨基酸,以游离氨基酸减少量、DPPH自由基清除率、羟自由基清除率为指标,进行工艺条件优化,得到如下结果:(1)酶促修饰反应的最优蛋白酶为木瓜蛋白酶,最佳外源氨基酸为混合比为3∶7的半胱氨酸与赖氨酸。(2)底物浓度40%、p H 5.0、反应时间3 h、加酶量3 800 U/g、混合氨基酸添加总量0.56 g/g、反应温度34℃为最优反应条件。(3)以优化后的条件进行验证实验,得到游离氨基酸减少量为(24.05±0.24)mg/m L,DPPH自由基清除率为(90.24±0.46)%,羟自由基清除率为(50.44±0.07)%,与预测值基本吻合。(4)酶促胁迫修饰反应后产物的抗氧化活性显着提高,而HPSEC结果显示反应前后产物Mr<5 000 Da的占比并没有明显提升。研究结果表明,外源氨基酸酶促修饰可提高波纹巴非蛤酶解肽的抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。(本文来源于《现代食品》期刊2018年06期）
路晶晶,郭冉,夏辉,解伟,王美雪[8]（2018）在《家禽副产物酶解肽对凡纳滨对虾生长性能、消化指标和非特异性免疫指标的影响》一文中研究指出本试验通过评估凡纳滨对虾的生长性能、消化指标和非特异性免疫指标,来研究家禽副产物酶解肽作为蛋白质源替代凡纳滨对虾饲料中部分鱼粉的可行性。以预混家禽副产物酶解肽(在家禽副产物酶解肽基础上添加包膜蛋氨酸,使其蛋氨酸含量与国产鱼粉相当)分别替代基础饲料中0(对照)、2%、4%、6%、8%的鱼粉,共制成5种试验饲料。选取900尾平均体重(0.31±0.01)g的凡纳滨对虾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复60尾,进行为期8周的室内养殖试验。结果表明:家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平为2%~6%时,对虾的增重率、特定生长率、蛋白质效率、饲料系数与对照组无显着差异(P>0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平超过2%时,全虾粗脂肪含量显着低于对照组(P<0.05),全虾粗灰分含量显着高于对照组(P<0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平为2%时,肝胰腺中脂肪酶活性最高,并可显着降低血浆中葡萄糖和甘油叁酯的含量(P<0.05),显着提高血浆中溶菌酶的活性(P<0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平超过2%时,血浆中过氧化物酶的活性显着低于对照组(P<0.05)。各组粗蛋白质表观消化率、粗脂肪表观消化率以及肝胰腺中溶菌酶、过氧化物酶活性与总抗氧化能力均无显着差异(P>0.05)。由此得出,在本试验条件下,以生长性能为基础,综合考虑消化、非特异性免疫等指标,家禽副产物酶解肽替代凡纳滨对虾饲料中鱼粉的适宜水平为2%。(本文来源于《动物营养学报》期刊2018年02期）
侯璐,许鸿飞,施维[9]（2017）在《鹿血浆酶解肽关于抗氧化抗肿瘤活性的研究与应用》一文中研究指出鹿血,为鹿科动物梅花鹿或马鹿的膛血或茸血,具有治疗疾病和改善健康的功效,具有养血益精、行血祛瘀、消肿疗伤等作用。鹿血在中医临床上有重要地位。新鲜鹿血含水量为80%~81%,并含有多种氨基酸、酶类、维生素类、嘌呤类和多糖类,具有抗氧化、抗衰老、抗疲劳、美容、补血、补肾益精、增强免疫力等多种保健功能。但目前市场上的鹿血制品多为酒剂,不能满足儿童及青少年的需求,并且对酒精过敏者有局限性,而胶囊制剂不便于吞(本文来源于《2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集》期刊2017-08-21）
赵元,刘丹丹,张诗尧,潘丽,娜仁高娃[10]（2016）在《β-伴大豆球蛋白及其酶解肽对仔猪空肠上皮细胞机械屏障功能损伤的比较研究》一文中研究指出大豆抗原蛋白能够破坏仔猪等幼龄动物的肠道屏障功能,大豆抗原β-Conglycinin经消化酶酶解后可产生叁条主要酶解肽。因此,本文选取大豆中主要抗原蛋白β-Conglycinin及其酶解肽为致敏原,以仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)为体外研究模型采用不同浓度(0、0.125、0.25、0.5、1或2 mg/mL)β-Conglycinin及其酶解肽处理IPEC-J2不同时间(2、4、6、8、12或24 h)后,测定细胞存活力(MTT值),跨上皮细胞电阻值(TEER)以及细胞培养液中碱性磷酸酶(AP)的活性,检测β-Conglycinin及其酶解肽对细胞通透性的影响,进而选用浓度为0.5 mg/mLβ-Conglycinin及其酶解肽处理IPEC-J2 24h后,采用免疫荧光法和Western Blot法检测紧密连接蛋白(Occludin、Claudin-3、Claudin-4和ZO-1)在细胞中的分布及相对表达含量。结果显示,(25+30)kD混合酶解肽对IPEC-J2的破坏程度最强,酶解总产物次之,且各组之间差异显着(P<0.05),β-Conglycinin及其酶解肽对IPEC-J2的MTT值与TEER值呈时间-剂量依赖性下降趋势(P<0.05),24 h处理后,AP活性呈显升高趋势(P<0.05),同时也发现β-Conglycinin及其酶解肽刺激IPEG-J2后细胞间紧密连接处荧光染色程度降低且变得模糊和松散,通过Western Blot方法测得,紧密连接蛋白Occludin、Claudin-3、Claudin-4和ZO-1蛋白的相对表达量与对照组相比均有所下降(P<0.05)。综上所述,β-Conglycinin经消化酶水解后,对IPEC-J2械屏障功能的损伤能力加强,即酶解肽对IPEC-J2的损伤程度高于β-Conglycinin。而在各酶解肽段中,低分子量酶解肽破坏作用最为严重,酶解总产物次之,52 kD酶解肽较轻。以上研究结果为更进一步的揭示大豆的致敏机理提供依据。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集》期刊2016-10-21）
酶解肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
林蛙油是雌性林蛙输卵管的干燥品,是收录《中国药典》的中药材。蛋白质是林蛙油中主要活性成分,占到50%以上,水溶性林蛙油蛋白(PEOR)具有抗氧化、抗疲劳、抗衰老和增强机体免疫力等作用。因此,为系统研究PEOR,基于活性保留,本论文结合抗氧化活性跟踪首先对PEOR的提取工艺进行研究,并进一步考察其体内外抗氧化活性和抗疲劳作用,发现:PEOR体内抗氧化活性高,而体外作用弱。基于此,本论文模拟蛋白体内消化过程与程序,采用胃蛋白酶/胰蛋白酶分步水解法制备林蛙油酶解肽,并对其氨基酸组成与抗氧化活性进行研究。应用水提法提取PEOR,结合DPPH清除率,以pH值、料液比、提取时间、提取次数和浸提液含盐量为五个单因素考察指标,优化提取工艺,确定最佳提取条件为:pH 6.5的磷酸缓冲溶液(含0.5 mol/L的NaCl),在料液比1:150条件下浸提2次,每次浸提12 h;此条件下PEOR提取率为12.5%,经考马斯亮蓝法测得蛋白质含量为60.7%;应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定PEOR分子量分布,发现:PEOR在44.3-116 kDa范围内主要有叁个单体蛋白。对PEOR中氨基酸组成进行分析,结果表明:PEOR中有17种氨基酸,其中7种为必需氨基酸,占41.9%,氨基酸总含量为668.3 mg/g。以羟自由基清除率、DPPH自由基清除率、超氧阴离子清除率和总还原力为体外抗氧化模型,VC为阳性对照,评价PEOR体外抗氧化活性。结果表明,PEOR清除羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子的IC_(50)值分别为4.85 mg/mL、4.98mg/mL和2.58 mg/mL;对Fe~(3+)的还原能力,在A_(700 nm)值为0.2时,浓度为11.8mg/mL。以丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和蛋白质羰基(PC)为指标,VC为阳性对照,评价PEOR的体内抗氧化活性。结果表明,PEOR能降低小鼠体内MDA和PC含量,提高GSH和SOD水平,且呈量效关系。其中,400 mg/kg的PEOR对负重游泳小鼠具有显着的抗疲劳作用,能延长小鼠的负重疲劳游泳时间,减少剧烈运动引起的血尿素氮(BUN)和血乳酸(BLA)的升高。胃蛋白酶/胰蛋白酶分步水解法制备林蛙油酶解肽的工艺条件为:脱脂林蛙油,加入50倍量人工胃液,水解2 h,调节pH至8.5,再次水解4 h,水浴快速高温灭酶。在此条件下林蛙油酶解肽的提取率为31.5%;以羟自由基清除率、DPPH清除率、超氧阴离子清除率和总还原力四个体系,VC为阳性对照,考察林蛙油酶解肽抗氧化活性。结果表明,林蛙油酶解肽清除羟自由基、DPPH和超氧阴离子的IC_(50)值分别为3.96 mg/mL、3.25 mg/mL和2.58 mg/mL;对Fe~(3+)的还原能力,在A_(700nm)值为0.2时,浓度为11.8 mg/mL。综合以上结果,PEOR体内抗氧化效果优于体外,胃蛋白酶/胰蛋白酶分步水解法制备的林蛙油酶解肽的抗氧化活性高于PEOR。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶解肽论文参考文献
[1].侯璐,施维.鹿血浆酶解肽关于抗氧化抗肿瘤活性的研究与应用[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[2].刘洋.林蛙油蛋白及酶解肽的制备与抗氧化活性研究[D].吉林化工学院.2019
[3].贾高旺,郭冉,张宇,李雪鹤,夏辉.家禽副产物酶解肽部分替代鱼粉对大菱鲆生长性能、消化指标和特异性免疫指标的影响[J].动物营养学报.2019
[4].李娜,周德庆,吕世伟,刘楠,王珊珊.鳕鱼鱼鳔来源酶解肽的抗氧化活性与延缓H_2O_2诱导2BS细胞衰老作用的研究[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018
[5].路晶晶.家禽副产物酶解肽在凡纳滨对虾饲料中的应用研究[D].河北农业大学.2018
[6].杨亚强.米渣酶解肽制备与生理活性及其对断奶仔猪生长性能的影响[D].南昌大学.2018
[7].曾凤仙,周道志,谢燕.外源氨基酸酶促修饰对波纹巴非蛤酶解肽抗氧化活性的影响[J].现代食品.2018
[8].路晶晶,郭冉,夏辉,解伟,王美雪.家禽副产物酶解肽对凡纳滨对虾生长性能、消化指标和非特异性免疫指标的影响[J].动物营养学报.2018
[9].侯璐,许鸿飞,施维.鹿血浆酶解肽关于抗氧化抗肿瘤活性的研究与应用[C].2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集.2017
[10].赵元,刘丹丹,张诗尧,潘丽,娜仁高娃.β-伴大豆球蛋白及其酶解肽对仔猪空肠上皮细胞机械屏障功能损伤的比较研究[C].中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集.2016