导读:本文包含了非选择性钾离子通道论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人乳腺癌细胞MDA-MB-435S,多西紫杉醇(DOC),4-氨基吡啶(4-AP),细胞增殖
非选择性钾离子通道论文文献综述
宋依凝[1]（2008）在《非选择性钾离子通道阻断剂对多西紫杉醇抗人乳腺癌细胞MDA-MB-435S作用的影响》一文中研究指出前言乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率呈不断上升趋势。钾通道电流(I_K)在肿瘤细胞中的生物物理特性及其在肿瘤细胞生长中的调控作用已经被广泛研究。研究发现，I_K在肿瘤细胞增殖中具有促进作用，促进I_K传导的各种因子如缬氨霉素、泌乳素、胎牛血清等可刺激肿瘤细胞增殖；I_K阻断剂如四乙胺(TEA)、4-氨基吡啶(4-AP)等既能抑制各种肿瘤细胞中的I_K，又能抑制这些细胞的增殖。钾离子通道作为肿瘤细胞增殖关键调控物观点，近来已经被许多实验及临床证据所认同。钾离子通道活性的增加与增殖速率的提高有关，但是，钾离子通道调控肿瘤细胞增殖的机制尚不甚明了。抗肿瘤药多西紫杉醇(docetaxel，DOC)是由植物Taxus baccata针叶中提取巴卡丁(baccatin)经半合成改造而成，其基本结构类似紫杉醇，但水溶性较高。其为细胞有丝分裂抑制剂，通过促进小管聚合成稳定的微管抑制其解聚，使游离小管的数量明显减少而影响细胞的有丝分裂，导致细胞周期的变化，从而起到抑制肿瘤细胞生长的作用。目的1、DOC、非选择性钾离子通道阻断剂4-AP及DOC与4-AP联合应用对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响。2、明确非选择性钾离子通道阻断剂4-AP对DOC抗人乳腺癌细胞MDA-MB-435S作用的影响机制，为开发一种多靶点治疗乳腺癌方案提供理论依据。方法1、MTT比色法检测药物对MDA-MB-435S细胞增殖的影响：取对数生长期细胞接种孵育，药物处理24、48、72 h后，每孔加5μg·gL~(-1)的MTT 10μl，37℃继续培养4 h后弃液，每孔加DMSO 100μl，60 rpm振荡10 min，ELx800通用型酶标仪于570 nm处测OD值，并计算增殖抑制率。抑制率计算如下：抑制率(％)=(对照孔OD均值-实验孔OD均值)／对照孔OD均值×100％。2、流式细胞术Annexin V-FITC／PI双染法检测药物对MDA-MB-435S细胞凋亡的影响：取对数生长期细胞接种，药物处理24 h后收集细胞，1000 rpm离心10 min，弃上清，加入10~3μl冰冷的PBS使细胞悬浮，重复以上步骤两次，然后将细胞重悬于200μl Binding Buffer中，加入10μl Annexin V-FITC和5μlPI混匀，室温避光反应15 min，加入300μl Binding Buffer混匀，1 h内流式细胞仪检测细胞凋亡。3、流式细胞术PI单染法检测药物对MDA-MB-435S细胞周期的影响：取对数生长期细胞接种，药物处理24 h后收集细胞，1000 rpm离心5 min，弃上清，加入10~3μl冰冷的PBS使细胞悬浮，重复以上步骤3次后缓缓加入10~3μl冰冷的75％乙醇，4℃过夜，次日，1500 rpm离心10 min，小心弃上清后加入10~3μl冰冷的PBS使细胞悬浮，1500 rpm离心5 min后小心弃上清，加入0．1μg·μL~(-1)PI和0．1μg·μL~(-1) Rnase A各500μl，37℃培养40 min后流式细胞仪检测细胞周期。实验结果1、DOC、4-AP单独应用均能抑制MDA-MB-435S的增殖；5×10~3μmol·L~(-1)的4-AP合用25μmol·L~(-1)的DOC对MDA-MB-435S达最大抑制率的时间明显缩短，由72 h缩短到24 h；DOC和4-AP对MDA-MB-435S的增殖抑制有相加作用，并呈剂量-时间依赖性(P<0．05)。2、2μmol·L~(-1)和5μmol·L~(-1)的DOC单独作用24 h，MDA-MB-435S产生细胞凋亡并不明显，当与5×10~3μmol·L~(-1)的4-AP联合应用后，细胞凋亡和死亡明显增加，晚期凋亡和死亡细胞由对照组的6．99％±1．15％增加到2μmol·L~(-1)DOC+5×10~3μmol·L~(-1)4-AP组的20．67％±0．91％和5μmol·L~(-1)DOC+5×10~3μmol·L~(-1)4-AP组的11．98％±0．93％，这种变化随DOC剂量的增加而愈加明显(P<0．05)。3、单独应用DOC可使MDA-MB-435S阻断在G_2／M期，细胞比率由对照组的7．41％±2．89％增加到2μmol·L~(-1) DOC组的30．73％±1．69％和5μmol·L~(-1)DOC组的76．26％±0．84％；单独应用4-AP可使MDA-MB-435S阻断在G_0／G_1期，细胞比率由对照组的70．79％±0．62％增加到5×10~3μmol·L~(-1)4-AP组的75．73％±0．40％；两药联合应用可使MDA-MB-435S阻断在G_2／M期，2μmol·L~(-1) DOC+5×10~3μmol·L~(-1) 4-AP组的细胞比率为25．86％±0．92％，5μmol·L~(-1) DOC+5×10~3μmol·L~(-1) 4-AP组的细胞比率为40．02％±1．67％，这种变化随DOC剂量的增加而愈加明显(P<0．05)。结论1、DOC抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-435S在G_2／M期的增殖，可剂量依赖性诱导MDA-MB-435S细胞凋亡；2、4-AP抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-435S在G_0／G_1期的增殖，促进DOC诱导MDA-MB-435S细胞凋亡和细胞死亡。(本文来源于《中国医科大学》期刊2008-01-01）
宋依凝,付秀权,金万宝,魏敏杰[2]（2007）在《选择性钾离子通道阻断药对多西紫杉醇抗人乳腺癌细胞MDA-MB-435S作用的影响》一文中研究指出目的探讨选择性钾离子通道阻断药4-氨基吡啶(4-AP)对多西紫杉醇(docetaxel, DOC)抗人乳腺癌细胞 MDA-MB-435S 增殖、凋亡、周期的影响。方法通过 MTT 比色法分析 DOC、4- AP 以及两药联合应用对人乳腺癌细胞 MDA-MB-435S 增殖的影响；流式细胞术 Annexin V-FITC/PI 双染法和 PI 单染法检测两种药物对 MDA-MB-435S 凋亡和周期的影响。结果 DOC 和4-AP 单独应用均能够抑制人乳腺癌细胞株 MDA-MB-435S 的增殖；5 mmol·L~(-1)4-AP 可以使25μmol·L~(-1)DOC 对人乳腺癌细胞株 MDA-MB-435S 达最大抑制率的时间明显提前,DOC 和4-AP 对 MDA-MB-435S 细胞的增殖抑制有相加或协同作用。并呈剂量和时间依赖性。25 μmol·L~(-1)DOC 单用24 h 时促进 MDA-MB-435S 细胞凋亡作用并不明显,当与5 mmol·L~(-1)4-AP 联合应用后能明显增加细胞早期凋亡和死亡的发生率；单用 DOC 可使 MDA-MB-435S 细胞阻断在 G_2/M 期,单用4-AP 可使 MDA-MB-435S 细胞阻断在 G_0/G_1期,两药联合应用可使细胞阻断在 G_2/M 期。结论 DOC 和4-AP 分别在 G_2/M 期和 G_0/G_1期抑制 MDA-MB- 435S 细胞增殖,4-AP 通过促进 DOC 诱导细胞凋亡从而抑制 MDA-MB-435S 细胞的增殖。(本文来源于《中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议论文集》期刊2007-11-01）
非选择性钾离子通道论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨选择性钾离子通道阻断药4-氨基吡啶(4-AP)对多西紫杉醇(docetaxel, DOC)抗人乳腺癌细胞 MDA-MB-435S 增殖、凋亡、周期的影响。方法通过 MTT 比色法分析 DOC、4- AP 以及两药联合应用对人乳腺癌细胞 MDA-MB-435S 增殖的影响；流式细胞术 Annexin V-FITC/PI 双染法和 PI 单染法检测两种药物对 MDA-MB-435S 凋亡和周期的影响。结果 DOC 和4-AP 单独应用均能够抑制人乳腺癌细胞株 MDA-MB-435S 的增殖；5 mmol·L~(-1)4-AP 可以使25μmol·L~(-1)DOC 对人乳腺癌细胞株 MDA-MB-435S 达最大抑制率的时间明显提前,DOC 和4-AP 对 MDA-MB-435S 细胞的增殖抑制有相加或协同作用。并呈剂量和时间依赖性。25 μmol·L~(-1)DOC 单用24 h 时促进 MDA-MB-435S 细胞凋亡作用并不明显,当与5 mmol·L~(-1)4-AP 联合应用后能明显增加细胞早期凋亡和死亡的发生率；单用 DOC 可使 MDA-MB-435S 细胞阻断在 G_2/M 期,单用4-AP 可使 MDA-MB-435S 细胞阻断在 G_0/G_1期,两药联合应用可使细胞阻断在 G_2/M 期。结论 DOC 和4-AP 分别在 G_2/M 期和 G_0/G_1期抑制 MDA-MB- 435S 细胞增殖,4-AP 通过促进 DOC 诱导细胞凋亡从而抑制 MDA-MB-435S 细胞的增殖。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
非选择性钾离子通道论文参考文献
[1].宋依凝.非选择性钾离子通道阻断剂对多西紫杉醇抗人乳腺癌细胞MDA-MB-435S作用的影响[D].中国医科大学.2008
[2].宋依凝,付秀权,金万宝,魏敏杰.选择性钾离子通道阻断药对多西紫杉醇抗人乳腺癌细胞MDA-MB-435S作用的影响[C].中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议论文集.2007