吕大进:薏苡果壳黑色素提制鉴定、稳定性及其形成生理机制论文

吕大进:薏苡果壳黑色素提制鉴定、稳定性及其形成生理机制论文

本文主要研究内容

作者吕大进(2019)在《薏苡果壳黑色素提制鉴定、稳定性及其形成生理机制》一文中研究指出:黑色素是一类结构复杂多样非均质多酚聚合类或吲哚类生物大分子色素的总称,是生物生存所需的重要大分子物质,广泛存在于自然界中。天然黑色素能促进生物的生长和发育,提高生物生存的竞争力,具有光保护、抵抗生物氧化、促进螯合发生、降低辐射和促进免疫的作用;因而可作为一种光保护剂、生物抗氧化剂、螯合剂、抗辐射剂和免疫促进剂,同时还可用作生物半导体和光电传递材料等。在医药、化妆品、食品、材料等领域有着广泛的应用前景。植物天然黑色素安全性高,应用范围广。然而,生产中缺乏有开发利用价值的高黑色素含量原料,从植物中寻找和开发天然黑色素,具有重要的理论意义和应用价值。薏苡是禾本科薏苡属一种古老的粮食和经济作物,药食两用,营养丰富。我国薏苡的栽培面积最大,分布最广,资源丰富,是世界薏苡的重要起源地之一。本研究以薏苡深加工过程中产生的下脚料—薏苡果壳和不同居群的薏苡为材料,研究了薏苡中黑色素提取和纯化的工艺条件、理化性质、作为食品着色剂的稳定性,以及薏苡生长过程中黑色素形成的生理机制,对薏苡的各部位以及不同成熟度果壳的黑色素形成关键酶多酚氧化酶进行了活性及同工酶谱的分析,为进一步的工业化开发利用黑色素及研究薏苡果壳黑色素形成生理机制提供了基础和依据。主要的研究结果如下:1.薏苡果壳黑色素的提制与鉴定采用化学法从薏苡果壳中提取天然黑色素,用强酸水解、有机溶剂洗涤和反复沉淀法进行纯化。根据吸收光谱和多种化学反应,对提取的黑色素产物进行了鉴定。结果表明:薏苡果壳黑色素具有黑色素典型的光吸收特性,在短波紫外区(UVC,200-280 nm)和中波紫外区(UVB,280-320 nm)有广泛吸收,在229 nm波长处有个典型的最大吸收峰,不同居群的薏苡果壳黑色素的吸收光谱特征完全相同;薏苡果壳黑色素不溶于水和常见的有机溶剂,可被NaClO、H2O2、KMnO4和K2Cr2O7氧化漂白,多酚定性反应呈阳性。对其提取工艺进行了优化,得出薏苡果壳黑色素提制最适条件为:1.8 mol/L的NaOH溶液为溶剂,料液比1∶10(W/V),提取时间3 h,提取温度90℃,并获得国家发明专利授权(CN201710313442.5[P])。2.薏苡果壳黑色素稳定性分析运用分光光度法,以229 nm处吸光值为衡量指标,对薏苡果壳黑色素制品进行了稳定性分析。结果表明:薏苡果壳黑色素不受温度、糖等因素影响,但易受氧化剂和还原剂的影响而发生变色或褪色,容易受到自然光光照、氯化钠存在的影响;pH值对其也有一定的影响,黑色素溶液随pH的增大吸光值增加且颜色加深,吸光值在pH3-5时较为恒定,在pH5-7之间急剧增加,pH7-11的碱性条件下,缓慢增加。低温(4℃)对黑色素稳定性无影响;Cu2+有增色作用,Fe3+、Ca2+有减色作用,但不明显;Mg2+、K+和Zn2+对其没有显著影响。3.薏苡黑色素形成关键酶—多酚氧化酶(PPO)体外活性测定最适条件采用分光光度法测定PPO活性,研究结果表明:以pH6.0的0.2 mol/L磷酸缓冲液研磨提取PPO,最适料液比0.5:50(W/V),室温下最适浸提时间为1 h,底物邻苯二酚的最适浓度为100 mmol/L,最适反应温度为40℃,最适反应时间10 min,产物的最大吸收波长为400 nm,测定时间不超过20 min。4.不同薏苡材料不同部位多酚氧化酶(PPO)活性和酶谱比较分析通过对不同成熟度的薏苡果壳及灌浆期植株各部位的PPO活性比较发现,不同成熟度的薏苡果壳PPO活性有一定的规律性,早期活性较低,中期活性最强,晚期最弱;薏苡果壳、根、茎、叶、籽粒中均检测到PPO活性;不同材料、不同部位之间PPO活性均有差异,呈一定的规律性;从植株上部到下部PPO活性依次降低;植株幼嫩、叶绿素含量高的部位PPO活性较高。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、邻苯二酚—对苯二胺染色,进行了PPO同工酶谱分析。结果发现,在果壳成熟过程中共出现6条同工酶条带,活性最高的是高分子量的PPO同工酶条带,其对果壳黑色素的形成可能起主要作用。植株不同部位的条带具有明显的组织特异性,根、茎、叶的同工酶条带数目差别较大,根部出现5条带,茎节部位有4条带,叶片部位有8条带;叶片是同工酶条带最丰富、活性最强的部位,根次之,茎节部位最低。

Abstract

hei se su shi yi lei jie gou fu za duo yang fei jun zhi duo fen ju ge lei huo yin duo lei sheng wu da fen zi se su de zong chen ,shi sheng wu sheng cun suo xu de chong yao da fen zi wu zhi ,an fan cun zai yu zi ran jie zhong 。tian ran hei se su neng cu jin sheng wu de sheng chang he fa yo ,di gao sheng wu sheng cun de jing zheng li ,ju you guang bao hu 、di kang sheng wu yang hua 、cu jin ao ge fa sheng 、jiang di fu she he cu jin mian yi de zuo yong ;yin er ke zuo wei yi chong guang bao hu ji 、sheng wu kang yang hua ji 、ao ge ji 、kang fu she ji he mian yi cu jin ji ,tong shi hai ke yong zuo sheng wu ban dao ti he guang dian chuan di cai liao deng 。zai yi yao 、hua zhuang pin 、shi pin 、cai liao deng ling yu you zhao an fan de ying yong qian jing 。zhi wu tian ran hei se su an quan xing gao ,ying yong fan wei an 。ran er ,sheng chan zhong que fa you kai fa li yong jia zhi de gao hei se su han liang yuan liao ,cong zhi wu zhong xun zhao he kai fa tian ran hei se su ,ju you chong yao de li lun yi yi he ying yong jia zhi 。yi yi shi he ben ke yi yi shu yi chong gu lao de liang shi he jing ji zuo wu ,yao shi liang yong ,ying yang feng fu 。wo guo yi yi de zai pei mian ji zui da ,fen bu zui an ,zi yuan feng fu ,shi shi jie yi yi de chong yao qi yuan de zhi yi 。ben yan jiu yi yi yi shen jia gong guo cheng zhong chan sheng de xia jiao liao —yi yi guo ke he bu tong ju qun de yi yi wei cai liao ,yan jiu le yi yi zhong hei se su di qu he chun hua de gong yi tiao jian 、li hua xing zhi 、zuo wei shi pin zhao se ji de wen ding xing ,yi ji yi yi sheng chang guo cheng zhong hei se su xing cheng de sheng li ji zhi ,dui yi yi de ge bu wei yi ji bu tong cheng shou du guo ke de hei se su xing cheng guan jian mei duo fen yang hua mei jin hang le huo xing ji tong gong mei pu de fen xi ,wei jin yi bu de gong ye hua kai fa li yong hei se su ji yan jiu yi yi guo ke hei se su xing cheng sheng li ji zhi di gong le ji chu he yi ju 。zhu yao de yan jiu jie guo ru xia :1.yi yi guo ke hei se su de di zhi yu jian ding cai yong hua xue fa cong yi yi guo ke zhong di qu tian ran hei se su ,yong jiang suan shui jie 、you ji rong ji xi di he fan fu chen dian fa jin hang chun hua 。gen ju xi shou guang pu he duo chong hua xue fan ying ,dui di qu de hei se su chan wu jin hang le jian ding 。jie guo biao ming :yi yi guo ke hei se su ju you hei se su dian xing de guang xi shou te xing ,zai duan bo zi wai ou (UVC,200-280 nm)he zhong bo zi wai ou (UVB,280-320 nm)you an fan xi shou ,zai 229 nmbo chang chu you ge dian xing de zui da xi shou feng ,bu tong ju qun de yi yi guo ke hei se su de xi shou guang pu te zheng wan quan xiang tong ;yi yi guo ke hei se su bu rong yu shui he chang jian de you ji rong ji ,ke bei NaClO、H2O2、KMnO4he K2Cr2O7yang hua piao bai ,duo fen ding xing fan ying cheng yang xing 。dui ji di qu gong yi jin hang le you hua ,de chu yi yi guo ke hei se su di zhi zui kuo tiao jian wei :1.8 mol/Lde NaOHrong ye wei rong ji ,liao ye bi 1∶10(W/V),di qu shi jian 3 h,di qu wen du 90℃,bing huo de guo jia fa ming zhuan li shou quan (CN201710313442.5[P])。2.yi yi guo ke hei se su wen ding xing fen xi yun yong fen guang guang du fa ,yi 229 nmchu xi guang zhi wei heng liang zhi biao ,dui yi yi guo ke hei se su zhi pin jin hang le wen ding xing fen xi 。jie guo biao ming :yi yi guo ke hei se su bu shou wen du 、tang deng yin su ying xiang ,dan yi shou yang hua ji he hai yuan ji de ying xiang er fa sheng bian se huo tui se ,rong yi shou dao zi ran guang guang zhao 、lv hua na cun zai de ying xiang ;pHzhi dui ji ye you yi ding de ying xiang ,hei se su rong ye sui pHde zeng da xi guang zhi zeng jia ju yan se jia shen ,xi guang zhi zai pH3-5shi jiao wei heng ding ,zai pH5-7zhi jian ji ju zeng jia ,pH7-11de jian xing tiao jian xia ,huan man zeng jia 。di wen (4℃)dui hei se su wen ding xing mo ying xiang ;Cu2+you zeng se zuo yong ,Fe3+、Ca2+you jian se zuo yong ,dan bu ming xian ;Mg2+、K+he Zn2+dui ji mei you xian zhe ying xiang 。3.yi yi hei se su xing cheng guan jian mei —duo fen yang hua mei (PPO)ti wai huo xing ce ding zui kuo tiao jian cai yong fen guang guang du fa ce ding PPOhuo xing ,yan jiu jie guo biao ming :yi pH6.0de 0.2 mol/Llin suan huan chong ye yan mo di qu PPO,zui kuo liao ye bi 0.5:50(W/V),shi wen xia zui kuo jin di shi jian wei 1 h,de wu lin ben er fen de zui kuo nong du wei 100 mmol/L,zui kuo fan ying wen du wei 40℃,zui kuo fan ying shi jian 10 min,chan wu de zui da xi shou bo chang wei 400 nm,ce ding shi jian bu chao guo 20 min。4.bu tong yi yi cai liao bu tong bu wei duo fen yang hua mei (PPO)huo xing he mei pu bi jiao fen xi tong guo dui bu tong cheng shou du de yi yi guo ke ji guan jiang ji zhi zhu ge bu wei de PPOhuo xing bi jiao fa xian ,bu tong cheng shou du de yi yi guo ke PPOhuo xing you yi ding de gui lv xing ,zao ji huo xing jiao di ,zhong ji huo xing zui jiang ,wan ji zui ruo ;yi yi guo ke 、gen 、jing 、xie 、zi li zhong jun jian ce dao PPOhuo xing ;bu tong cai liao 、bu tong bu wei zhi jian PPOhuo xing jun you cha yi ,cheng yi ding de gui lv xing ;cong zhi zhu shang bu dao xia bu PPOhuo xing yi ci jiang di ;zhi zhu you nen 、xie lu su han liang gao de bu wei PPOhuo xing jiao gao 。cai yong ju bing xi xian an ning jiao dian yong 、lin ben er fen —dui ben er an ran se ,jin hang le PPOtong gong mei pu fen xi 。jie guo fa xian ,zai guo ke cheng shou guo cheng zhong gong chu xian 6tiao tong gong mei tiao dai ,huo xing zui gao de shi gao fen zi liang de PPOtong gong mei tiao dai ,ji dui guo ke hei se su de xing cheng ke neng qi zhu yao zuo yong 。zhi zhu bu tong bu wei de tiao dai ju you ming xian de zu zhi te yi xing ,gen 、jing 、xie de tong gong mei tiao dai shu mu cha bie jiao da ,gen bu chu xian 5tiao dai ,jing jie bu wei you 4tiao dai ,xie pian bu wei you 8tiao dai ;xie pian shi tong gong mei tiao dai zui feng fu 、huo xing zui jiang de bu wei ,gen ci zhi ,jing jie bu wei zui di 。

论文参考文献

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  • [2].重组FN多肽CH50抑制黑色素瘤B16细胞体内转移的研究[D]. 朱明.华中科技大学2007
  • 读者推荐
  • [1].糙米体外抗氧化和肠道益生活性研究[D]. 倪香艳.中国农业科学院2017
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自西南大学的吕大进,发表于刊物西南大学2019-09-24论文,是一篇关于薏苡果壳论文,黑色素制备论文,化学鉴定论文,稳定性论文,多酚氧化酶论文,西南大学2019-09-24论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自西南大学2019-09-24论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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