导读:本文包含了睾丸间质细胞培养论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肥胖,雄性生殖,leptin,OB-R
睾丸间质细胞培养论文文献综述
李晶,衣雪洁,高畅,刘璐[1]（2018）在《瘦素对于运动后肥胖雄性小鼠睾丸间质细胞培养组织leptin、OB-R mRNA表达的影响》一文中研究指出目的:瘦素(leptin)是肥胖基因表达的蛋白质产物,Leptin主要是通过受体瘦素受体(OB-R)传递信号起到抑制食欲的作用。目前关注较多的是leptin和OB-R结合后信号的转导。在通路leptin和OB-R结合后,不同细胞、不同发育阶段及生理病理情况下的表达分布特征都可以影响其作用。小鼠睾丸中leptin和OB-R表达后,其结合情况影响睾酮合成酶的表达,进一步影响小鼠的生殖功能。那么,leptin对于OB-R的表达有怎样的影响,在正常和肥胖两种状态下施加运动干预,会出现怎样的结果?本文目的在于探讨外源性瘦素干预对肥胖、正常、肥胖运动、正常运动的小鼠睾丸间质细胞培养组织的leptin、OB-R的m RNA相对表达量的影响。方法:4周龄刚断乳的雄性C57BL/6J小鼠,按照体重抽层随机分样分为两组,正常组,高脂组组间体重无差异。正常组普通饲料喂养,高脂组高脂饲料喂养,自由饮食饮水。12周后,高脂组超过正常组体重的20%造模成功,剔除肥胖抵抗小鼠。将正常组小鼠分为两组:NC(正常对照)组8只,NE(正常运动)组8只;高脂组小鼠分为两组:OHC(肥胖对照)组8只,OHE(肥胖运动干预)组8只,组间小鼠体重无显着性差异(p>0.05)。NC、NE组继续正常饮食喂养,OHC、OHE组继续高脂饮食喂养。造肥胖模型成功后,NE、OHE、两组进行跑台运动(v=20m/min,t=60min),每周运动6天(周一至周六,周日休息),持续运动8周,最后一次运动后36-48小时内取材。雄性小鼠进行颈椎脱臼处死后,进行睾丸间质细胞培养,瘦素干预浓度为10-9mol/L。培养时进行分组:不施加干预的组为NC-0、NE-0、OHC-0、OHE-0;施加leptin干预的组别为:NC-L、NE-L、OHC-L、OHE-L。培养成功后进行RT-PCR法进行检测组织中leptin、OB-Rm RNA相对表达量。结果:在雄性小鼠睾丸间质细胞培养组织内,与NC-0组相比,OHC-0组的leptin的m RNA相对表达量显着增加(p<0.01),而OB-RmRNA相对表达量下降(p<0.05);与NC-0组相比,NE-0组的leptin的m RNA相对表达量有增加的趋势,(p>0.05)但是没有统计学意义,OB-R的m RNA相对表达量增加(p<0.05);与OHC-0组相比OHE-0组leptin的m RNA相对表达量降低(p<0.05),OB-R的m RNA相对表达量升高(p<0.05)。而在进行瘦素干预后,NC-L组与NC-0组相比,leptin、OB-R的m RNA相对表达量有升高的趋势,但是没有统计学意义(p>0.05);NE-L组与NE-0组相比较,leptin的m RNA相对表达量升高(p<0.05),而OB-R的m RNA相对表达量有升高(p<0.05);OHC-L组与OHC-0组相比较,leptin的m RNA相对表达量降低(p<0.05),而OB-R的m RNA相对表达量增加(p<0.05);OHE-L组与OHE-0组相比较,leptin的m RNA相对表达量降低(p<0.05),OB-R的m RNA相对表达量显着增加(p<0.01)。结论:肥胖可以可能使雄性小鼠睾丸间质细胞内存在瘦素抵抗;运动对于正常小鼠体内leptin和OB-R mRNA相对表达量有促进作用,也可能改善肥胖小鼠体内所出现的瘦素抵抗现象。经过瘦素干预后,正常组小鼠对于干预的敏感性不高;正常运动组、肥胖组、肥胖运动组的leptin和OB-R的m RNA相对表达量达到一个合适的水平,可能通过leptin-OB-R结合的方式增加小鼠睾丸内睾酮合成酶的表达量,改善小鼠的生殖功能。(本文来源于《2018年中国生理学会运动生理学专业委员会会议暨“科技创新与运动生理学”学术研讨会论文集》期刊2018-08-22）
尚明玉,陈晨,张立昌,陈余,倪和民[2]（2018）在《种公鸡睾丸间质细胞的分离培养与鉴定》一文中研究指出【目的】旨在探明一种有效的体外分离、纯化公鸡睾丸间质细胞的方法,以得到纯度高且较稳定的睾丸间质细胞原代培养体系。【方法】采用胶原酶消化法结合差速离心法得到原代睾丸间质细胞,再利用差速贴壁法及传代弃掉未贴壁细胞,实现进一步纯化。采用3β-HSD染色法鉴定其纯度。【结果】该方法能够得到高细胞活率和纯度(>90%)的公鸡间质细胞,并通过试验检测证实分离、纯化的睾丸间质细胞生长状态良好,具备睾酮分泌能力。【结论】通过该方法成功分离并纯化公鸡睾丸间质细胞,其存活率为96.08%±0.85%,纯度可达97.73%±0.43%。(本文来源于《北京农学院学报》期刊2018年04期）
于宇翔,韩永利,李素娟,孙子龙[3]（2017）在《V_E,IGF-I和hCG对体外培养小鼠睾丸间质细胞增殖的影响》一文中研究指出为了探究不同浓度维生素E(V_E)、胰岛素样生长因子(IGF-I)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)对睾丸间质细胞(LCs)增殖的作用,试验通过添加不同浓度V_E,IGF-I,h CG分别处理小鼠睾丸间质细胞24,48 h,采用四唑盐比色法(MTT法)检测细胞活力。结果表明,与对照组相比,24 h时V_E组细胞活力显着增加(P<0.05),IGF-I,h CG组差异不显着(P>0.05);48 h时,V_E,h CG组细胞活力差异显着(P<0.05),IGF-I组差异不显着(P>0.05)。说明在24,48 h的IGF-I对细胞的增殖变化没有明显促进作用,V_E和h CG对细胞增殖有一定的促进作用。(本文来源于《山西农业科学》期刊2017年03期）
杨海婷[4]（2016）在《β_2肾上腺素受体激动剂克伦特罗对睾丸间质细胞与脂肪细胞共培养体系中睾丸间质细胞INSL3及3β-HSD的表达效应》一文中研究指出目的1.应用3T3-L1脂肪细胞体外培养体系,探讨克伦特罗(clenbuterol, CLB),莱克多巴胺(ractopamine, RAC)和齐帕特罗(zilpaterol, ZIL)对脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators activated receptor γ, PPARγ)及脂联素(adiponectin, ADP)表达的影响及差异,阐明CLB, RAC, ZIL引起脂肪细胞内分泌紊乱的分子机制,以及叁者对脂肪内分泌紊乱相关性生殖疾病潜在的影响。2.建立脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养模型,探讨成熟脂肪细胞对睾丸间质细胞胰岛素样因子(Insulin-like factor, INSL3)及3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)的表达效应,有助于阐明肥胖诱导男性不育症的分子机制。3.建立脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养模型,探讨CLB对共培养体系中睾丸间质细胞INSL3及3β-HSD表达的影响,阐明CLB在脂肪内分泌紊乱相关性男性生殖疾病中可能介导的环节。材料与方法1.材料1.1 3T3-L1脂肪细胞3T3-L1前脂肪细胞株购自于中国科学院上海细胞库,定向诱导为3T3-L1成熟脂肪细胞后进行实验。1.2 TM3睾丸间质细胞TM3睾丸间质细胞由暨南大学禹艳红老师惠赠,培养传代后可进行实验。2.实验分组及给药2.1 3T3-L1脂肪细胞分组及给药本项实验添加不同剂量的药物培养12h,24h后分别收集细胞,进行细胞活性与PPARγ及ADP表达水平的检测。本项实验分组见表1。2.2共培养体系分组及给药将睾丸间质细胞分别与成熟脂肪细胞,添加5μM CLB处理的成熟脂肪细胞共培养48小时,分别标记为脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养组,CLB处理脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养组；另添加5μM CLB处理睾丸间质细胞单独培养,标记为CLB处理睾丸间质细胞实验组；将单独培养的睾丸间质细胞设为对照组。3.实验方法3.1 3T3-L1前脂肪细胞诱导及鉴定3T3-L1前脂肪细胞用含10%胎牛血清(FBS)的DMEM高糖培养液在37℃,5%CO2条件培养。待细胞贴壁,生长至接触抑制后2天进行成脂诱导分化,更换含有0.5mM IBMX、10μg/ml胰岛素和1μM地塞米松的诱导剂及10% FBS的DMEM高糖培养液。2天后,更换只含10μg/ml胰岛素及10%FBS的培养液继续培养,每2天换液1次。8-10天后,90%的细胞内出现脂滴,可用于后续实验。油红O染色鉴定成熟脂肪细胞。3.2 TM3睾丸间质细胞的培养TM3睾丸间质细胞用含10%马血清的DMEM/F12培养液,在37℃,5% C02培养箱培养,每2天换液1次,直至细胞融合达80%以上,可进行传代。3.3共培养体系的建立采用Transwell系统进行3T3-L1脂肪细胞和TM3睾丸间质细胞共培养。3T3-L1脂肪细胞种入6孔培养板,经诱导后,在Transwell小室种入TM3睾丸间质细胞。在37℃,5% CO2培养箱中培养48小时。3.4 3T3-L1脂肪细胞活性检测MTT分别检测不同剂量CLB, RAC,ZIL对3T3-L1脂肪细胞活性的影响。3.5脂肪因子PPARγ及ADP,睾丸间质细胞INSL3及3β-HSD的表达RT-PCR和Western blot检测脂肪因子PPARγ、ADP,睾丸间质细胞INSL3、 3β-HSD表达水平的变化。4.统计学方法数据以平均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS21.0统计学软件进行分析。采用单因素方差分析(ANOVA),有统计学意义则用Tukey法作组间均数的两两比较。以P<0.05为差异有统计学意义。结果1.3T3-L1脂肪细胞诱导及鉴定3T3-L1前脂肪细胞生长接触抑制后,经诱导8-10天,3T3-L1前脂肪细胞可分化为成熟脂肪细胞。并经油红O染色鉴定,大约90%的3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞。2. CLB,ZIL,RAC对3T3-L1脂肪细胞活性的影响及差异与对照组相比,CLB,RAC,ZIL分别处理12h和24h后各剂量组细胞活性均呈下降趋势,剂量越大,活性影响越大,差异显着(P<0.05)。培养12h,细胞活性：B组<B1组<B2组,但组间无显着差异(P>0.05)；C组<C1组<C2组,组间无显着差异(P>0.05),C组<C2组(P<0.05)；D组<D2组(P<0.05),D1组<D2组(P<0.05),D组<D1组(P>0.05)。培养24h,B组<B1组<B2组,C组<C1组,C1组<C2组,组间均无显着差异(P>0.05)；C组<C2组,D组<D1组<D2组,组间差异显着(P<0.05)。3. CLB,ZIL,RAC对3T3-L1脂肪细胞PPARy及ADP表达的影响及差异CLB,RAC, ZIL对PPARγ、ADP的表达影响基本呈一致性。CLB, RAC, ZIL均下调PPARγ、ADP mRNA和蛋白的表达水平,且表达水平从高到低的顺序为：低剂量组,中剂量组,高剂量组(P<0.05)。培养12h,PPARγ的表达水平：B组<B1组(P<0.05),B组<B2组(P<0.05)；B1组<B2组,无显着差异(P>0.05)；C组<C1组<C2组,D组<D1组<D2组,组间差异显着(P<0.05)。培养24h,C组<C1组<C2组,D组<D1组<D2组,组间差异显着(P<0.05)。培养12h,ADP的表达水平：B组<B1组<B2组,C组<C1组<C2组,组间无显着差异(P>0.05)；D组<D1组<D2组(P<0.05)。培养24h,B组<B2组(P<0.05),B组<B1组(P>0.05),B1组<B2组(P>0.05);C组<C2组,C1组<C2组,D组<D2组,D1组<D2组,组间差异显着(P<0.05)；C组<C1组,D组<D1组,无显着差异(P>0.05)。4.脂肪细胞共培养及CLB对睾丸间质细胞INSL3及3β-HSD表达的影响与睾丸间质细胞单独培养对照组对比,CLB处理睾丸间质细胞组INSL3表达下降,但无显着差异(P>0.05),脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养组INSL3表达下降(P<0.05)；CLB处理脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养组INSL3下降程度更大(P<0.05)。与睾丸间质细胞单独培养对照组对比,CLB处理睾丸间质细胞组3p-HSD表达升高,但无显着差异(P>0.05)；脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养组3β-HSD表达下降(P<0.05); CLB处理脂肪细胞与睾丸间质细胞共培养组3p-HSD下降程度更大(P<0.05)。结论1. CLB, ZIL, RAC按影响程度从大至小依次降低脂肪细胞活性,下调PPARγ、ADP mRNA和蛋白的表达水平,并呈剂量依赖性,提示CLB,ZIL, RAC影响PPARγ和ADP的合成,可导致脂肪细胞内分泌紊乱,从而可能引起脂肪内分泌紊乱相关性生殖活动。2.β2AR激动剂对脂肪细胞内分泌功能的效应与激动剂种类相关,CLB,ZIL, RAC这3种激动剂对脂肪细胞产生效应不同,其中CLB影响最大,ZIL次之,RAC影响较小。3.与脂肪细胞共培养下,睾丸间质细胞INSL3与3β-HSD的表达下降可能是肥胖引发男性生殖疾病的重要机制；CLB与脂肪细胞共同作用下,3β-HSD与INSL3表达下降程度更大,CLB相关的脂肪细胞内分泌紊乱可能引起男性生殖系统异常。(本文来源于《暨南大学》期刊2016-05-18）
吕双阳,袁冬梅,许洁,史亚利,肖榕[5]（2015）在《C-fos对体外培养仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的影响》一文中研究指出通过C-fos ASODNs诱导C-fos基因发生转录后沉默,用人绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导体外培养的3周龄荣昌仔猪睾丸间质细胞(Leydig cells,LC)睾酮分泌,用酶联免疫分析方法检测基础状态下和HCG诱导下体外培养的仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的水平。结果显示,C-fos ASODNs以剂量依赖性方式抑制基础状态下和HCG诱导下的睾酮分泌(P<0.01),这表明C-fos在基础状态下还是HCG诱导下均可促进仔猪睾丸间质细胞睾酮的分泌。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2015年08期）
曹霞[6]（2015）在《黄芪提取液对大鼠睾丸间质细胞体外培养的影响》一文中研究指出为了研究黄芪提取液对大鼠睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌的影响,并研究黄芪提取液对大鼠睾丸间质细胞总SOD及GSH-Px活性的影响,本试验用7-9周龄的雄性大鼠做试验对象,通过体外分离、纯化,并用3p-HSD染色法鉴定大鼠睾丸间质细胞。体外培养大鼠睾丸间质细胞,向培养液中添加不用浓度的黄芪提取液,用CCK-8及Elisa检测细胞增殖及睾酮分泌情况并检测不同浓度黄芪提取液处理后睾丸间质细胞总SOD和GSH-Px的活性。通过荧光定量PCR技术检测睾丸间质细胞中抑癌基因P53及凋亡基因Bax和Bcl-2的相对表达量。其试验结果及分析如下：(1)经鉴定,分离纯化培养的大鼠睾丸间质细胞纯度在95%以上。(2)黄芪能促进大鼠睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌,并有一定的抗氧化作用。经CCK-8, Elisa及酶活性试验检测,添加黄芪提取液的试验组与对照组相比,吸光度逐渐升高,即间质细胞增殖呈上升趋势,数目逐渐增多；间质细胞分泌睾酮的浓度及SOD和GSH-PX的活性先升高后降低,黄芪提取液浓度为100μg/mL,150 μg/mL的试验组与对照组相比,细胞数目显着增多,后者差异极显着(P<0.01)。其中浓度为20μg/mL, 50 μg/mL,100 μg/mL的试验组与对照组相比,睾酮浓度显着升高,差异极显着(P<0.01)。黄芪提取液添加浓度为20μg/mL,50μg/mL的试验组,间质细胞总SOD和GSH-Px活性显着高于对照组(P<0.01)。(3)黄芪具有抑制大鼠睾丸间质细胞凋亡的作用。经荧光定量试验检测,添加20μg/mL黄芪提取液的试验组间质细胞Bax, Bcl-2基因的表达量降低,且Bax基因的表达量与对照组相比显着降低(P<0.01)。试验组与对照组相比,P53基因的表达量差异不显着(P>0.05)。与对照组相比,试验组间质细胞,基因Bcl-2和Bax表达量的比值显着升高(P<0.01)。本研究在动物繁殖学领域,为延缓体外培养的睾丸间质细胞衰老,延长其生物学功能等课题研究提供了理论依据和实践基础。(本文来源于《山西农业大学》期刊2015-06-01）
谢天承,许云飞[7]（2015）在《小鼠睾丸间质细胞分离培养方法的研究进展》一文中研究指出小鼠睾丸间质细胞是目前医学研究的常用细胞。高纯度的分离、纯化及体外培养小鼠睾丸间质细胞对于相关研究的开展至关重要。本文对目前常用的几种小鼠睾丸间质细胞分离、纯化和体外培养方法以及各类方法的原理进行了综述。(本文来源于《临床与病理杂志》期刊2015年04期）
陶熙,李坚,胡晓婷,张彩霞,王良[8]（2014）在《硫酸镍处理原代培养大鼠睾丸间质细胞某些生化指标的变化》一文中研究指出目的从氧化应激角度,探讨硫酸镍对体外培养大鼠睾丸间质细胞损伤的机制。方法选择健康雄性Wistar大鼠,采用胶原酶消化以及Percoll分离液密度梯度离心法,经体外贴壁培养获得高纯度大鼠睾丸间质细胞。取对数生长期大鼠睾丸间质细胞,硫酸镍0、250、500和1 000μmol/L分别处理6、12和24 h后收集细胞,超声处理后离心取上清液,采用分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,羟自由基(·OH)抑制能力以及丙二醛(MDA)含量。结果硫酸镍各浓度组与对照组比较:硫酸镍染毒6 h时,硫酸镍1 000μmol/L组CAT活力显着降低(P<0.01),硫酸镍500μmol/L抑制羟基由基能力也开始降低(P<0.01);染毒12 h时,硫酸镍500μmol/L组CAT活力开始下降(P<0.01),各染毒组SOD活力和抑制羟基由基能力开始降低(P<0.01);染毒24 h时,各染毒组CAT和SOD活力以及抑制羟自由基能力均降低,MDA含量升高(P<0.05或P<0.01)。结论硫酸镍可致大鼠睾丸间质细胞抗氧化能力下降而致氧化损伤。(本文来源于《毒理学杂志》期刊2014年03期）
时金玲[9]（2014）在《醋酸铅对体外培养小鼠睾丸间质细胞的毒性作用及凋亡机理的研究》一文中研究指出随着环境铅污染和职业铅暴露的日趋严重,铅对人类和动物的生殖毒性倍受关注,但铅的生殖毒性机制还不很清楚。睾丸间质细胞作为生精细胞的支架,可为生精细胞提供必需的营养物质,能合成与分泌雄激素结合蛋白为生精细胞提供高浓度的雄激素环境,并具备一定的吞噬功能等,是体内一种非常重要的雄性生殖细胞。因此,在本研究中,选用小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)为研究对象,探讨铅对雄性动物生殖细胞的损伤作用及机制,为进一步研究开发新型铅特效解毒药提供试验基础和理论依据,并为防治由重金属引发的畜禽繁殖机能障碍提供新的切入点。研究目的：以体外培养TM3细胞为模型,观察碱式醋酸铅对其凋亡的影响,进而探索凋亡死亡受体途径的机制。研究方法：体外培养小鼠睾丸间质细胞,胰酶消化传代后,待细胞密度达到80%,将细胞分为四组,分别加入0,2,10,50μmol/L的醋酸铅染毒TM3细胞,作用24h后,采用MTT法检测醋酸铅对细胞增殖的影响；用氮蓝四唑(NBT)显色法检测SOD活性变化,用硫代巴比妥酸法测定细胞中MDA的含量,间接法检测细胞中GSH-Px活力,ABTS法检测总抗氧化能力即T-AOC;Hoechest33258和Annexin-FITC/PI双染法检测细胞凋亡；Westernblot检测Caspase-8,FAS,FASI蛋白含量,以及Caspase-8阻断剂对细胞凋亡的抑制作用。结果：TM3细胞在36℃、5%CO2环境下生长良好,12-36h为细胞对数生长期。醋酸铅抑制TM3细胞增殖；试验所选浓度2,10,50μM醋酸铅均显着降低抗氧化酶SOD、GSH-Px活性以及总抗氧化能力T-AOC,升高MDA的含量从而引起细胞氧化损伤；研究表明醋酸铅诱导细胞凋亡,最高细胞凋亡率可达33.87%,且通过死亡受体途径的FAS/FAS-L途径诱导TM3细胞凋亡。主要表现为：醋酸铅组的FAS, FAS-L, Caspase-8蛋白含量与对照组相比显着增多,以及Caspase-8抑制剂(C21H34N4O10)显着抑制醋酸铅所诱导的TM3细胞凋亡。结论：醋酸铅对TM3细胞的毒性作用,主要是通过脂质过氧化作用引起细胞的氧化损伤,诱导细胞凋亡而实现的,FAS/FAS-L介导的死亡受体信号转导通路在调控TM3细胞凋亡中起着重要作用。(本文来源于《河南农业大学》期刊2014-06-01）
李坚,胡晓婷,张彩霞,王良,陶熙[10]（2014）在《硫酸镍对体外培养的大鼠睾丸间质细胞类固醇合成酶的影响》一文中研究指出目的探讨硫酸镍对体外培养的大鼠睾丸间质细胞睾酮(T)分泌及类固醇合成酶基因表达的影响。方法采用体外分离、纯化和培养的大鼠睾丸间质细胞,分别用0、250、500和1 000μmol/L硫酸镍处理6、12和24h。用酶联免疫吸附法检测培养上清液中T浓度,用实时荧光定量PCR技术检测间质细胞类固醇合成快速调节蛋白(StAR)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、类固醇17α-羟化酶(P450c17)mRNA的表达水平。结果人绒毛膜促性腺激素(hCG)和硫酸镍处理24h后,硫酸镍0μmol/L组与0h组比较,间质细胞分泌T浓度和StAR mRNA表达量均升高(P<0.05),而硫酸镍1 000μmol/L组T浓度和StAR mRNA表达量均降低(P<0.05)。NiSO4各浓度组与对照组比较,T浓度以及StAR、P450scc、3β-HSD和P450c17mRNA的表达量均明显降低(P<0.05)。结论硫酸镍引起的体外培养大鼠睾丸间质细胞T分泌量降低与类固醇合成酶基因表达下调有关。(本文来源于《工业卫生与职业病》期刊2014年03期）
睾丸间质细胞培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
【目的】旨在探明一种有效的体外分离、纯化公鸡睾丸间质细胞的方法,以得到纯度高且较稳定的睾丸间质细胞原代培养体系。【方法】采用胶原酶消化法结合差速离心法得到原代睾丸间质细胞,再利用差速贴壁法及传代弃掉未贴壁细胞,实现进一步纯化。采用3β-HSD染色法鉴定其纯度。【结果】该方法能够得到高细胞活率和纯度(>90%)的公鸡间质细胞,并通过试验检测证实分离、纯化的睾丸间质细胞生长状态良好,具备睾酮分泌能力。【结论】通过该方法成功分离并纯化公鸡睾丸间质细胞,其存活率为96.08%±0.85%,纯度可达97.73%±0.43%。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
睾丸间质细胞培养论文参考文献
[1].李晶,衣雪洁,高畅,刘璐.瘦素对于运动后肥胖雄性小鼠睾丸间质细胞培养组织leptin、OB-RmRNA表达的影响[C].2018年中国生理学会运动生理学专业委员会会议暨“科技创新与运动生理学”学术研讨会论文集.2018
[2].尚明玉,陈晨,张立昌,陈余,倪和民.种公鸡睾丸间质细胞的分离培养与鉴定[J].北京农学院学报.2018
[3].于宇翔,韩永利,李素娟,孙子龙.V_E,IGF-I和hCG对体外培养小鼠睾丸间质细胞增殖的影响[J].山西农业科学.2017
[4].杨海婷.β_2肾上腺素受体激动剂克伦特罗对睾丸间质细胞与脂肪细胞共培养体系中睾丸间质细胞INSL3及3β-HSD的表达效应[D].暨南大学.2016
[5].吕双阳,袁冬梅,许洁,史亚利,肖榕.C-fos对体外培养仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的影响[J].中国兽医杂志.2015
[6].曹霞.黄芪提取液对大鼠睾丸间质细胞体外培养的影响[D].山西农业大学.2015
[7].谢天承,许云飞.小鼠睾丸间质细胞分离培养方法的研究进展[J].临床与病理杂志.2015
[8].陶熙,李坚,胡晓婷,张彩霞,王良.硫酸镍处理原代培养大鼠睾丸间质细胞某些生化指标的变化[J].毒理学杂志.2014
[9].时金玲.醋酸铅对体外培养小鼠睾丸间质细胞的毒性作用及凋亡机理的研究[D].河南农业大学.2014
[10].李坚,胡晓婷,张彩霞,王良,陶熙.硫酸镍对体外培养的大鼠睾丸间质细胞类固醇合成酶的影响[J].工业卫生与职业病.2014