导读:本文包含了胎儿骨髓间充质干细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:崂山奶山羊,胎儿,骨髓间充质干细胞,诱导分化
胎儿骨髓间充质干细胞论文文献综述
杨培培,程明,王学梅,刘萌萌,张倩[1]（2016）在《崂山奶山羊胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养及成神经诱导分化》一文中研究指出旨在建立崂山奶山羊胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养方法,并研究其生物学特性和成神经分化的能力。取怀孕3个月的崂山奶山羊胎儿股骨,分离培养骨髓间充质干细胞,并进行传代培养,测定其细胞倍增时间,利用RT-PCR技术检测Oct4、Nanog、Sox2基因的表达;取P3 BMSCs分别向成神经细胞进行诱导分化,并从组织学水平和基因水平进行鉴定。结果表明,分离得到的胎儿骨髓间充质干细胞大小较为均匀,呈梭形的成纤维细胞样,可表达Oct4、Nanog、Sox2基因;传代接种后第4天进入指数生长期,第8天进入平台期,前10代BMSCs的平均倍增时间为29.7 h;P3 BMSCs成神经诱导后,尼氏体经甲苯胺蓝染色后可见紫蓝色,其特异性表达基因ENO2和GFAP表达呈阳性。获得的崂山奶山羊BMSCs具有成神经分化潜能。(本文来源于《畜牧与饲料科学》期刊2016年09期）
雷钏[2]（2015）在《水牛胎儿骨髓间充质干细胞分离培养及基因转染的初步研究》一文中研究指出本研究以水牛胎儿四肢长骨骨髓为分离对象,采用全骨髓贴壁法分离培养水牛胎儿骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs),首先比较了不同胎儿大小和不同血清浓度对水牛胎儿BMSCs增殖效果和分化情况的影响,并对所分离得到的细胞进行生物学特性鉴定；同时探讨了水牛胎儿BMSCs分别培养在常氧条件(20%02)和低氧条件(5%02)下细胞表面抗原、间质标记基因、应力纤维和核型的变化情况；另外,还比较了水牛胎儿BMSCs和水牛胎儿成纤维细胞(BFFs)用不同转染试剂对其转染效果的影响,以期建立一套稳定的水牛胎儿BMSCs分离培养体系和高效转染外源基因的方法。研究结果如下：(1)随着培养基中血清浓度的增加,细胞增殖速度加快；细胞周期检测试验发现15%血清浓度中处于G0/G1期的细胞比例最小(35.8%vs52.4%,P<0.01;35.8%vs51.6%,P<0.01),10%血清浓度和20%血清浓度的差异不显着(52.4%vs51.6%,P>0.05)；但从细胞形态来看随着血清浓度的增加,胞质内出现钙沉积的细胞数量也随之增多。分离自不同大小胎牛的水牛胎儿BMSCs培养在10%血清浓度的培养基中,细胞形态无明显区别均与典型的MSCs细胞形态相似。细胞生长曲线均成“S”型,增殖速率与细胞代数和胎牛大小有关：10cm以下的水牛胎儿不易分离得到其骨髓,10cm～17cm的胎牛来源的BMSCs在3代以内随着代数的增加增殖速度加快,传至4代后,其增殖速度随着代数的增加而下降；17cm以上胎牛来源的BMSCs其增殖速率,第2代高于第1代细胞,第3代开始下降且低于第1代细胞。(2)对所分离得到的水牛胎儿BMSCs进行生物学特性鉴定发现：RT-PCR检测到第3代细胞表达oct4、sox2、nanog等多能因子和CD73、CD90、CD105等细胞表面抗原。免疫荧光分析发现第3代细胞表达OCT4、Nanog和CD73。流式细胞仪检测结果显示：第3代、第5代、第10代、第15代和第20代细胞的CD29和CD44的阳性率均大于95%,造血干细胞表面抗原CD45和内皮细胞表面抗原CD31的阳性率均小于2%。体外诱导分化试验表明第3代细胞可以被定向诱导分化为成骨细胞和成脂细胞。(3)在常氧培养条件下,水牛胎儿BMSCs随着培养代数的增加,CD29+阳性细胞比例逐渐下降；细胞内应力纤维合成受阻,细胞形态由梭形逐渐转变成多边型;培养至10代后,间质细胞标记(mesenchymal marker)基因：snail、slug、fn1、N-Cadhering mRNA的表达水平下降。然而,在低氧培养条件下,免疫荧光染色结果显示：细胞内的低氧诱导因子1、2(HIF-1、HIF-2)的表达被激活,其下游基因twist的表达量亦随之升高,与此同时间质标记基因snail、slug、fn1、N-Cadhering、coll a的表达量亦随之升高；细胞黏附试验表明,低氧条件下细胞的黏附性较于常氧条件下更小,更具有间质细胞特性；细胞免疫荧光染色亦表明：在低氧条件下,水牛胎儿BMSCs的应力纤维较在常氧下合成更稳定,表达量更高。培养于低氧条件下的P3、P10和P20水牛胎儿BMSCs核型分析统计结果表明随着细胞代数的增加,核型正常率下降,培养于低氧条件下的P10、P20细胞核型正常率高于常氧条件下的(4)在转染试剂相同的情况下,相同代数的水牛胎儿BMSCs转染效率显着高于BFFs(15.6%±0.17>13.3%±0.13,P<0.05;23.9%±0.21>19.1%±0.2 2,P<0.05);转染同一种细胞的情况下,转染试剂LipofectamineTM 3000的转染效率显着高于Roche(?) X-tremegene(19.1%±0.22>13.3%±0.13,P<0.05 ;23.9%±0.21>15.6%±0.17,P<0.05)。在此基础上利用LipofectamineTM 3000将带有催乳素(PRL)基因的质粒分别转染了相同代数的水牛胎儿BMSCs和BFFs,水牛胎儿BMSCs转染效率同样显着高于BFFs (18.5%±0.19>16.4%士0.14,P<0.05)；PCR检测结果显示转染的细胞有PRL基因整合。结论：(1)从10-17cm长的水牛胎儿长骨分离的骨髓利用全骨髓贴壁法可以分离得到具有间充质干细胞特性的BMSCs;(2)水牛胎儿BMSCs在10%的血清浓度和低氧(5%O2)条件下体外培养,细胞中HIF-Twist轴被激活,其下游靶基因snail、slug、N-Cadherin、fn1和colla1表达量升高,从而有助于BMSCs维持其间质干细胞的特性和更稳定的核型；(3)在质粒和转染试剂相同的情况下,水牛胎儿BMSCs的转染效率显着高于BFFs。(本文来源于《广西大学》期刊2015-06-01）
陈武举[3]（2015）在《长时期胰酶处理对牛胎儿骨髓间充质干细胞的影响》一文中研究指出最近的研究表明,从骨髓间充质干细胞分离得到几类具有多能性的干细胞类群,这些多能干细胞,不仅具有自我更新和多向分化能力,还能在机体受到压力,如组织损伤时,能够快速增殖和分化,进而修复受损组织。胰蛋白酶是细胞培养中经常使用的一种消化能力特别强,价格低廉的内切酶。长时间胰酶消化容易过度破坏细胞膜表面的膜蛋白引起细胞损伤,诱发细胞凋亡。一般消化细胞时间不宜过长,但是,日本的研究小组最近从经过长时间胰酶处理的成纤维细胞和间充质中发现并分离了Muse细胞,这类细胞高表达多能性的相关标记,能向叁胚层细胞分化。目前,关于长时间胰酶消化处理间充质干细胞的生物特性方面的报道很少。实验证明,骨髓间充质干细胞经长时间胰酶处理(Long Time Trypsin-treat)后,除了有利于富集成体细胞中的多能干细胞,存活下来的细胞,还具有比较强的压力耐受性。鉴于当前转基因动物生产、iPS诱导等对供体细胞在增殖能力、多能性、压力容受性、细胞活性等方面的要求越来越高,对长时间胰酶处理后细胞生物特性的研究非常有必要。本实验通过全贴壁培养的方法从牛胎儿骨髓中分离得到骨髓间充质干细胞,经过流式细胞检测和诱导分化实验对其进行了鉴定;通过0.25%胰酶对牛胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行10 h消化处理,然后进行形态观察、生长曲线绘制、AP染色、定量PCR、免疫荧光染色等分析消化后细胞(LTT-BMSCs)的生物特性,发现长时间胰酶消化有助于富集体积小的细胞、上调干性基因表达等;最后,分别用含0 ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml、40 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的培养液培养LTT-BMSCs,探究bFGF对LTT-BMSCs干性基因表达和增殖的影响。本实验为深入了解LTT法对骨髓间充质干细胞生物特性影响奠定了基础。1.牛胎儿骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定本实验,通过全骨髓贴壁法,成功从牛胎儿骨髓中分离得到骨髓间充质干细胞;通过免疫荧光染色、碱性磷酸酶染色、流式细胞仪检测细胞表面标记进行鉴定,表明分离得到的细胞为骨髓间充质干细胞,其中,骨髓间充质干细胞的CD105、CD90、CD73阳性表达量分别高达97.4%、84.1%、91.4%,阴性表达CD34表达量为3.5%;免疫荧光染色、诱导分化实验的结果,证明牛骨髓间充质干细胞的多能性。2.长时间胰酶处理(LTT)对骨髓间充质干细胞生物特性影响的研究首先,用0.25%胰酶对骨髓间充质干细胞进行不同时间的处理,通过定量PCR、细胞计数筛选出对提高干性基因表达最有利的处理时间;对骨髓间充质干细胞进行10 h的消化处理,通过形态观察、生长曲线、碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色、定量PCR、Brdu染色、核型分析对LTT-BMSCs的生物特性进行研究,发现LTT法有助于骨髓间充质干细胞中体积较小细胞的富集,能够提高多能基因的相对表达量,促进细胞的增殖;用不同bFGF浓度的培养液,对较高代次的LTT-BMSCs进行培养,通过生长曲线、碱性磷酸酶染得、定量PCR、免疫荧光染色及Western Blot确定20 ng/ml的bFGF有利于LTT-BMSCs的增殖和干性基因表达的维持。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2015-05-01）
锁利琼,刘瑞风,侯瑞霞,李俊琴,张开明[4]（2013）在《成人与胎儿骨髓间充质干细胞免疫特性比较》一文中研究指出比较成人与胎儿骨髓间充质干细胞(MSC)免疫学特性的差异,为实验室及临床MSC的应用提供依据。采用密度梯度离心法分离正常成人和胎儿骨髓单个核细胞,通过贴壁法培养骨髓MSC。以倒置显微镜观察细胞形态;取第3代细胞以流式细胞术进行表面标志鉴定;观察向脂肪细胞及成骨细胞诱导分化情况;收集第3代细胞培养上清,用ELISA法检测上清液中细胞因子水平;将第3代细胞与外周T细胞共培养,观察其对T细胞增殖的影响,用MTT法绘制MSC生长曲线。研究发现,成人与胎儿来源的骨髓MSC都具有体外扩增能力,并且形态相似、表型相同。成人MSC对T细胞的抑制能力强于胎儿MSC。成人及胎儿来源的骨髓MSC都具有免疫抑制功能,而且,成人MSC在免疫调节功能上优于胎儿MSC,因此更适合于作组织工程的种子细胞及免疫抑制剂。(本文来源于《现代免疫学》期刊2013年06期）
姜蓉,段江洁,田静,汪维伟[5]（2012）在《胎儿骨髓间充质干细胞EGF受体或IGF受体的表达与其向上皮细胞分化的关系》一文中研究指出目的:观察骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)表达表皮生长因子受体(Epidermal growth factor-receptors,EGF-R)和胰岛素样生长因子1受体(Insulin-like growth factor-1-receptors,IGF-1-R)与其向上皮细胞分化分化的关系。方法:取第3代(P3)-BMSCs分别用或不用含EGF、IGF-1的介质诱导培养;另取P5-BMSCs用EGF-R抗体或IGF-1-R抗体孵育4 h后,加入含或不含EGF、IGF-1的培养基培养。免疫组织化学SP法检测各组细胞表达EGF-R、IGF-1-R和细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)的时间。结果:P3-BMSCs分别于无诱导培养的8～11 d、10～14 d和16～18 d首次表达EGF-R,IGF-1-R和CK;经EGF或IGF-1诱导后,EGF-R、IGF-1-R的表达较无诱导组提前2～4 d。P5-BMSCs经抗EGF-R或IGF-1-R抗体阻滞后,细胞表达CK的时间较对照晚2 d。结论:EGF-R和IGF-1-R的表达与培养的BMSCs向上皮细胞分化密切相关;体外培养的P4-BMSCs～P5-BMSCs为加入外源性EGF、IGF-1诱导其向上皮细胞分化的最佳时间点。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2012年01期）
李秋明,程琳,刘春佳,张喜梅,申景岭[6]（2012）在《人骨髓间充质干细胞对体外培养的胎儿神经干细胞向少突胶质细胞分化的影响》一文中研究指出目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对体外培养的神经干细胞(NSCs)向少突胶质细胞分化的影响。方法以密度梯度离心的方法获得人hMSCs,设立3个实验组,分别是hMSCs+NSCs共培养组、hMSCs条件培养基+NSCs组、NSCs自发分化组(对照组)。通过免疫细胞化学染色及RT-PCR等手段检测不同组中NSCs向少突胶质细胞分化的情况,并探讨其可能的机制。结果与自发分化组相比,共培养组及hMSCs条件培养基作用组NSCs向少突胶质细胞分化的百分率分别为(61.3±5.7)%和(58.4±6.2)%,差异均具有显着性(<0.05);且RT-PCR结果显示,共培养组及hMSCs条件培养基作用组少突胶质细胞相关基因Olig1、Olig2的表达增强。结论 hMSCs促进体外培养的NSCs向少突胶质细胞分化,可能与hMSCs分泌可溶性因子相关。(本文来源于《解剖科学进展》期刊2012年01期）
刘蒙,杨少光,邢文,卢士红,赵钦军[7]（2011）在《胎儿和成人骨髓间充质干细胞体外造血支持能力的比较(英文)》一文中研究指出胎儿出生以后,造血干细胞(HSC)才从胎儿的肝脏和脾脏转移到骨髓,这一过程可能由不同的造血微环境中的信号分子所介导。间充质干细胞(MSC)是骨髓微环境中间质细胞如成骨细胞、内皮细胞的前体祖细胞。研究者推测,胎儿出生前的骨髓可能并不特别适合HSC生长。然而,该假说尚缺乏直接的证据支持。本研究通过对胎儿和成人骨髓MSC的造血支持能力进行比较,拟为此提供证据。成人骨髓MSC来源于3位健康供者,胎儿骨髓MSC来源于孕19-20周流产的胎儿。MSC辐照后与CD34+一起进行长期培养启动细胞分析,计数克隆形成细胞的数量,流式分析培养后CD34+的表型变化。RT-PCR分析两种MSC中细胞因子的表达。结果显示,成人骨髓MSC比胎儿骨髓MSC具有更强的造血支持能力,两者都促进CD34+向髓系细胞分化,两者之间细胞因子的表达存在差异。结论:与胎儿骨髓MSC相比,成人骨髓MSC在某些治疗,尤其是促进造血恢复方面具有更广泛的应用前景。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2011年04期）
郭嘉宁,雷建园,李奕,畅继武[8]（2011）在《体外诱导胎儿骨髓间充质干细胞向胰岛β样分泌细胞的分化》一文中研究指出背景:体外诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛样细胞,目前尚无成熟的鉴定方案。目的:探讨胎儿骨髓间充质干细胞在适当的条件下体外分化为胰岛样分泌细胞的可能性。方法:将胎儿骨髓间充质干细胞与胎儿胰岛素细胞分别接种于Transwell双层细胞培养板上下层共培养。对照组中的骨髓间充质干细胞仅用胰岛细胞培养基培养。倒置相差显微镜观察胎儿骨髓间充质干细胞、胎儿胰岛细胞的形态,放射免疫分析法检测共培养刺激下胰岛素的分泌情况。结果与结论:未经诱导的骨髓间充质干细胞呈长梭形贴壁生长,与胰岛细胞共培养的骨髓间充质干细胞逐渐变圆,并聚集成团,共培养9d后骨髓间充质干细胞经RAI检测分泌大量胰岛素,DTZ染色为阳性,细胞免疫化学检测阳性。而对照组无胰岛素释放。提示在适当的培养条件下,胎儿骨髓间充质干细胞具有向胰岛素分泌细胞分化的能力。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2011年19期）
李晓波,关云谦,顾建娟,任萍,吴迪[9]（2010）在《慢病毒转染胶质细胞源性神经营养因子基因的胎儿骨髓间充质干细胞的研究》一文中研究指出目的探讨胎儿骨髓间充质干细胞(fBMMSCs)经慢病毒转染胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因后GDNF的表达情况。方法利用贴壁培养法,从流产胎儿的股骨骨髓中分离培养fBMMSCs,并进行扩增。取第5代fBMMSCs,用慢病毒载体转染GDNF基因。应用免疫组化法及ELISA法检测被转染的fBMMSCs GDNF的表达情况。结果被转染GDNF基因的fBMMSCs GDNF表达阳性,且培养液中GDNF含量随培养时间延长而增高。结论被慢病毒转染GDNF基因的fBMMSCs能表达GDNF。(本文来源于《临床神经病学杂志》期刊2010年06期）
张娟,刘珍清,栗炳南,宋柳江,谭孟群[10]（2010）在《胎儿骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化研究》一文中研究指出前言探讨胎儿骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外培养及其生长特性及向脂肪、成骨、神经细胞分化的诱导条件。方法取正常流产胎儿四肢骨髓,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法,用含10%胎牛血清(FCS)的L-DMEM,分离、培养胎儿骨髓间充质干细胞(MSCs),使其在体外扩增。传代至P2后换用含10%新生牛血清(NBCS)的L-DMEM培养,传代至第3～5代时,用条件培养液诱导法检测其多向分化潜能,分为A组:加入抗坏血酸、β-甘油磷酸钠、地塞米松的诱导培养基向成骨细胞诱导;B组:加入胰岛素、抗坏血酸、地塞米松的诱导培养基向脂肪细胞诱导;C组:加入β-巯基乙醇(β-ME)、丁羟基茴香醚(BHA)、全反式维甲酸(ATRA)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、二甲亚砜(DMSO)、向神经细胞诱导;D组:只加基础培养基作阴性对照。观察其形态学变化并进行相应染色和免疫组化鉴定。结果来源于胚胎的MSCs在体外可以实现数目扩增,分离培养得到成纤维状MSCs,可多次传代并保持MSCs生物学特性不变。在特定诱导剂的作用下,A组:细胞逐渐变为立方形、多角形,体积增大,有明显的钙沉积,茜素红染色可见钙结节,碱性磷酸酶(ALP)染色阳性;B组:细胞变为圆形或多角形,油红O染色,细胞中有大小不一的橘红色脂滴;C组:呈典型的神经样细胞,其胞体收缩成锥形、叁角形或不规则形,折光性强,突起细长,尼氏体染色及神经元特异性烯醇酶(NSE)阳性;D组:细胞形态与之前相比无明显变化。结论胎儿骨髓中可分离培养出MSCs,能在体外传代扩增且保持其低分化状态;来源于胚胎的MSCs是具有多向分化潜能的干细胞,通过不同的诱导培养基,MSCs在体外可向成骨、脂肪、神经方向分化,有望成为干细胞移植治疗的理想细胞材料。(本文来源于《中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集》期刊2010-10-18）
胎儿骨髓间充质干细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究以水牛胎儿四肢长骨骨髓为分离对象,采用全骨髓贴壁法分离培养水牛胎儿骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs),首先比较了不同胎儿大小和不同血清浓度对水牛胎儿BMSCs增殖效果和分化情况的影响,并对所分离得到的细胞进行生物学特性鉴定；同时探讨了水牛胎儿BMSCs分别培养在常氧条件(20%02)和低氧条件(5%02)下细胞表面抗原、间质标记基因、应力纤维和核型的变化情况；另外,还比较了水牛胎儿BMSCs和水牛胎儿成纤维细胞(BFFs)用不同转染试剂对其转染效果的影响,以期建立一套稳定的水牛胎儿BMSCs分离培养体系和高效转染外源基因的方法。研究结果如下：(1)随着培养基中血清浓度的增加,细胞增殖速度加快；细胞周期检测试验发现15%血清浓度中处于G0/G1期的细胞比例最小(35.8%vs52.4%,P<0.01;35.8%vs51.6%,P<0.01),10%血清浓度和20%血清浓度的差异不显着(52.4%vs51.6%,P>0.05)；但从细胞形态来看随着血清浓度的增加,胞质内出现钙沉积的细胞数量也随之增多。分离自不同大小胎牛的水牛胎儿BMSCs培养在10%血清浓度的培养基中,细胞形态无明显区别均与典型的MSCs细胞形态相似。细胞生长曲线均成“S”型,增殖速率与细胞代数和胎牛大小有关：10cm以下的水牛胎儿不易分离得到其骨髓,10cm～17cm的胎牛来源的BMSCs在3代以内随着代数的增加增殖速度加快,传至4代后,其增殖速度随着代数的增加而下降；17cm以上胎牛来源的BMSCs其增殖速率,第2代高于第1代细胞,第3代开始下降且低于第1代细胞。(2)对所分离得到的水牛胎儿BMSCs进行生物学特性鉴定发现：RT-PCR检测到第3代细胞表达oct4、sox2、nanog等多能因子和CD73、CD90、CD105等细胞表面抗原。免疫荧光分析发现第3代细胞表达OCT4、Nanog和CD73。流式细胞仪检测结果显示：第3代、第5代、第10代、第15代和第20代细胞的CD29和CD44的阳性率均大于95%,造血干细胞表面抗原CD45和内皮细胞表面抗原CD31的阳性率均小于2%。体外诱导分化试验表明第3代细胞可以被定向诱导分化为成骨细胞和成脂细胞。(3)在常氧培养条件下,水牛胎儿BMSCs随着培养代数的增加,CD29+阳性细胞比例逐渐下降；细胞内应力纤维合成受阻,细胞形态由梭形逐渐转变成多边型;培养至10代后,间质细胞标记(mesenchymal marker)基因：snail、slug、fn1、N-Cadhering mRNA的表达水平下降。然而,在低氧培养条件下,免疫荧光染色结果显示：细胞内的低氧诱导因子1、2(HIF-1、HIF-2)的表达被激活,其下游基因twist的表达量亦随之升高,与此同时间质标记基因snail、slug、fn1、N-Cadhering、coll a的表达量亦随之升高；细胞黏附试验表明,低氧条件下细胞的黏附性较于常氧条件下更小,更具有间质细胞特性；细胞免疫荧光染色亦表明：在低氧条件下,水牛胎儿BMSCs的应力纤维较在常氧下合成更稳定,表达量更高。培养于低氧条件下的P3、P10和P20水牛胎儿BMSCs核型分析统计结果表明随着细胞代数的增加,核型正常率下降,培养于低氧条件下的P10、P20细胞核型正常率高于常氧条件下的(4)在转染试剂相同的情况下,相同代数的水牛胎儿BMSCs转染效率显着高于BFFs(15.6%±0.17>13.3%±0.13,P<0.05;23.9%±0.21>19.1%±0.2 2,P<0.05);转染同一种细胞的情况下,转染试剂LipofectamineTM 3000的转染效率显着高于Roche(?) X-tremegene(19.1%±0.22>13.3%±0.13,P<0.05 ;23.9%±0.21>15.6%±0.17,P<0.05)。在此基础上利用LipofectamineTM 3000将带有催乳素(PRL)基因的质粒分别转染了相同代数的水牛胎儿BMSCs和BFFs,水牛胎儿BMSCs转染效率同样显着高于BFFs (18.5%±0.19>16.4%士0.14,P<0.05)；PCR检测结果显示转染的细胞有PRL基因整合。结论：(1)从10-17cm长的水牛胎儿长骨分离的骨髓利用全骨髓贴壁法可以分离得到具有间充质干细胞特性的BMSCs;(2)水牛胎儿BMSCs在10%的血清浓度和低氧(5%O2)条件下体外培养,细胞中HIF-Twist轴被激活,其下游靶基因snail、slug、N-Cadherin、fn1和colla1表达量升高,从而有助于BMSCs维持其间质干细胞的特性和更稳定的核型；(3)在质粒和转染试剂相同的情况下,水牛胎儿BMSCs的转染效率显着高于BFFs。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胎儿骨髓间充质干细胞论文参考文献
[1].杨培培,程明,王学梅,刘萌萌,张倩.崂山奶山羊胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养及成神经诱导分化[J].畜牧与饲料科学.2016
[2].雷钏.水牛胎儿骨髓间充质干细胞分离培养及基因转染的初步研究[D].广西大学.2015
[3].陈武举.长时期胰酶处理对牛胎儿骨髓间充质干细胞的影响[D].西北农林科技大学.2015
[4].锁利琼,刘瑞风,侯瑞霞,李俊琴,张开明.成人与胎儿骨髓间充质干细胞免疫特性比较[J].现代免疫学.2013
[5].姜蓉,段江洁,田静,汪维伟.胎儿骨髓间充质干细胞EGF受体或IGF受体的表达与其向上皮细胞分化的关系[J].重庆医科大学学报.2012
[6].李秋明,程琳,刘春佳,张喜梅,申景岭.人骨髓间充质干细胞对体外培养的胎儿神经干细胞向少突胶质细胞分化的影响[J].解剖科学进展.2012
[7].刘蒙,杨少光,邢文,卢士红,赵钦军.胎儿和成人骨髓间充质干细胞体外造血支持能力的比较(英文)[J].中国实验血液学杂志.2011
[8].郭嘉宁,雷建园,李奕,畅继武.体外诱导胎儿骨髓间充质干细胞向胰岛β样分泌细胞的分化[J].中国组织工程研究与临床康复.2011
[9].李晓波,关云谦,顾建娟,任萍,吴迪.慢病毒转染胶质细胞源性神经营养因子基因的胎儿骨髓间充质干细胞的研究[J].临床神经病学杂志.2010
[10].张娟,刘珍清,栗炳南,宋柳江,谭孟群.胎儿骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化研究[C].中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集.2010