导读:本文包含了免疫过氧化物酶单层试验论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:抗体检测试剂盒,ELISA,猪圆环病毒Ⅱ型,IPMA
免疫过氧化物酶单层试验论文文献综述
潘晓梅,贺笋,张伟,师小潇,徐龙飞[1]（2016）在《免疫过氧化物酶单层细胞试验检测猪圆环病毒Ⅱ型抗体方法的建立》一文中研究指出猪圆环病毒病(PCVD)是由猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)引起的猪传染性疫病,是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后新发现的又一重要疫病,临床主要表现为生长迟缓、进行性消瘦、呼吸困难、黄疸、腹泻、皮炎、繁殖障碍、震颤等~([1])。自1997年Clark等人首次分离到PCV-2以来,该病已给全世界养猪业造成巨大的经济损失,我国为养猪大国,PCV-2感染也相当严重,全国各大小猪场均存在PCV-2感染的报道~([2])。急需采取防治措施控制该病毒的传播,(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2016年13期）
张家林[2]（2015）在《小反刍兽疫血清抗体免疫过氧化物酶单层试验检测方法的建立》一文中研究指出小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由副粘病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒(Pest des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种急性、高度接触性烈性传染病,主要感染山羊和绵羊等小反刍动物。PPR自1942年在非洲被发现以来,不断向全球蔓延。2007年7月,我国首次在西藏爆发PPR疫情,2013年至2014年全国19个省区再次爆发PPR疫情,对我国养殖业造成巨大经济损失。2015年4月,在科特迪瓦首都阿比让举行的动物卫生专家会议一致同意,尝试在全球消除小反刍兽疫病毒。因此,尽快开展小反刍兽疫的病原学、流行病学、诊断与预防控制技术的综合性研究,建立快速敏感的诊断方法对PPR的防控具有深远的社会和经济意义。目前针对PPRV的诊断方法较多,其中血清学检测方法主要是病毒中和试验(virus neutralization test,VNT)和竞争ELISA方法,但前者存在操作周期长,因操作活病毒而设施要求高等缺点;后者存在价格较贵、制备复杂等缺点。免疫过氧化酶单层试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)具有快速、敏感、特异、操作简单的特点,已应用于多种病原的血清临床样本检测。但国内外还没有建立针对PPRV的IPMA检测方法,因此建立PPRV-IPMA检测方法对于PPR疫情的监测和防控具有一定的重要意义。为建立针对PPR的IPMA检测方法,本研究首先建立了稳定表达山羊SLAM的BHK-21细胞系(BHK-gSLAM)。rPPRV/GFP感染该细胞系后,能复制增殖且形成明显的合胞体,而在亲本细胞上无该现象。Western blot试验表明该细胞系能稳定表达SLAM蛋白至少20代。在细胞系建立的基础上,通过感染rPPRV/GFP制备抗原检测板,建立了IPMA检测方法,具体步骤如下:首先比较了Vero细胞和BHK-gSLAM两者在IPMA试验中的差别,结果表明,在IPMA反应板制备过程中,同等剂量的rPPRV/GFP感染Vero和BHK-gSLAM细胞,后者病变形成时间更早,并形成易于观察的合胞体;BHK-gSLAM细胞生长更紧密,形成的CPE更明显,其在AEC染色后更易于观察,因此最终选择该细胞系用于IPMA抗原检测板的制备。其次,本研究优化并确定了IPMA的最佳接毒剂量为104 TCID50/mL,病毒感染72 h后固定制备IPMA反应板,血清最佳起始稀释度为1:10,二抗最佳工作浓度为1:5000。最后,用该IPMA检测方法对198份羊血清(包括临床样本和PPR弱毒疫苗免疫后样本)进行检测,同时以VNT方法作为对照,结果表明,两者的符合率为95.5%。与VNT相比,IPMA的相对敏感性为91%,特异性为100%。综上所述,本研究建立的IPMA方法操作简单,易于观察,检测时间仅为3小时,检测结果与VNT方法符合率较高,同时具有良好的特异性和敏感性,可以替代VNT用于PPRV免疫效果的评价和流行病学调查。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2015-04-01）
郭全海,刘秀玲[3]（2012）在《免疫过氧化物酶单层细胞试验检测猪圆环病毒2型方法的建立》一文中研究指出猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)是目前发现的最小的动物病毒,属圆环病毒科、圆环病毒属病毒[1]。根据PCV的致病性、抗原性和核苷酸的序列差异将它分为猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2)2个血清型[2]。以前的研究认为,PCV-1对猪没有致病性[3],PCV-2对猪有致病性,但两者都不引起细胞病变[4]。但近年来从死产的仔(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2012年11期）
刘长明,张超范,危艳武,张朝霞,袁婧[4]（2007）在《猪圆环病毒2型免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒的研制及应用》一文中研究指出本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase monolayer assay,IPMA),用于猪圆环病毒2型血清抗体检测,通过对IPMA反应条件的优化,组装了诊断试剂盒。研究结果表明,用IPMA检测猪圆环病毒2型人工感染猪血清,于感染后3周抗体阳转,第3周～10周抗体阳性检出率为92.8%(52/56),对照组猪血清抗体检测均为阴性(33/33)。试剂盒在-20℃稳定保存18个月与其他几种猪病毒参考血清无交叉反应,与用重组蛋白抗原建立的rcELISA符合率为89.2%。对来自黑龙江、吉林、河北、上海、内蒙古、云南、江西等地猪场健康成年猪血清480份和发病猪血清424份进行了检测,抗体检出率分别为91.7%和79.2%,表明我国猪群中猪圆环病毒2型污染相当严重。该试剂盒的研制为我国PCV2流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2007年08期）
黄金海,李健强,伊岚[5]（1997）在《免疫过氧化物酶单层试验检测鸡传染性法氏囊病病毒抗体的研究》一文中研究指出建立了检测鸡血清中传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体的免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)。用于野外鸡血清中IBDV抗体检测。结果表明,IPMA比琼脂凝胶扩散试验(AGD)更敏感,快速、稳定。这为IBD和其它疾病的诊断提供了一种新方法。(本文来源于《中国畜禽传染病》期刊1997年01期）
免疫过氧化物酶单层试验论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由副粘病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒(Pest des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种急性、高度接触性烈性传染病,主要感染山羊和绵羊等小反刍动物。PPR自1942年在非洲被发现以来,不断向全球蔓延。2007年7月,我国首次在西藏爆发PPR疫情,2013年至2014年全国19个省区再次爆发PPR疫情,对我国养殖业造成巨大经济损失。2015年4月,在科特迪瓦首都阿比让举行的动物卫生专家会议一致同意,尝试在全球消除小反刍兽疫病毒。因此,尽快开展小反刍兽疫的病原学、流行病学、诊断与预防控制技术的综合性研究,建立快速敏感的诊断方法对PPR的防控具有深远的社会和经济意义。目前针对PPRV的诊断方法较多,其中血清学检测方法主要是病毒中和试验(virus neutralization test,VNT)和竞争ELISA方法,但前者存在操作周期长,因操作活病毒而设施要求高等缺点;后者存在价格较贵、制备复杂等缺点。免疫过氧化酶单层试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)具有快速、敏感、特异、操作简单的特点,已应用于多种病原的血清临床样本检测。但国内外还没有建立针对PPRV的IPMA检测方法,因此建立PPRV-IPMA检测方法对于PPR疫情的监测和防控具有一定的重要意义。为建立针对PPR的IPMA检测方法,本研究首先建立了稳定表达山羊SLAM的BHK-21细胞系(BHK-gSLAM)。rPPRV/GFP感染该细胞系后,能复制增殖且形成明显的合胞体,而在亲本细胞上无该现象。Western blot试验表明该细胞系能稳定表达SLAM蛋白至少20代。在细胞系建立的基础上,通过感染rPPRV/GFP制备抗原检测板,建立了IPMA检测方法,具体步骤如下:首先比较了Vero细胞和BHK-gSLAM两者在IPMA试验中的差别,结果表明,在IPMA反应板制备过程中,同等剂量的rPPRV/GFP感染Vero和BHK-gSLAM细胞,后者病变形成时间更早,并形成易于观察的合胞体;BHK-gSLAM细胞生长更紧密,形成的CPE更明显,其在AEC染色后更易于观察,因此最终选择该细胞系用于IPMA抗原检测板的制备。其次,本研究优化并确定了IPMA的最佳接毒剂量为104 TCID50/mL,病毒感染72 h后固定制备IPMA反应板,血清最佳起始稀释度为1:10,二抗最佳工作浓度为1:5000。最后,用该IPMA检测方法对198份羊血清(包括临床样本和PPR弱毒疫苗免疫后样本)进行检测,同时以VNT方法作为对照,结果表明,两者的符合率为95.5%。与VNT相比,IPMA的相对敏感性为91%,特异性为100%。综上所述,本研究建立的IPMA方法操作简单,易于观察,检测时间仅为3小时,检测结果与VNT方法符合率较高,同时具有良好的特异性和敏感性,可以替代VNT用于PPRV免疫效果的评价和流行病学调查。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫过氧化物酶单层试验论文参考文献
[1].潘晓梅,贺笋,张伟,师小潇,徐龙飞.免疫过氧化物酶单层细胞试验检测猪圆环病毒Ⅱ型抗体方法的建立[J].黑龙江畜牧兽医.2016
[2].张家林.小反刍兽疫血清抗体免疫过氧化物酶单层试验检测方法的建立[D].中国农业科学院.2015
[3].郭全海,刘秀玲.免疫过氧化物酶单层细胞试验检测猪圆环病毒2型方法的建立[J].黑龙江畜牧兽医.2012
[4].刘长明,张超范,危艳武,张朝霞,袁婧.猪圆环病毒2型免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒的研制及应用[J].中国预防兽医学报.2007
[5].黄金海,李健强,伊岚.免疫过氧化物酶单层试验检测鸡传染性法氏囊病病毒抗体的研究[J].中国畜禽传染病.1997