本文主要研究内容
作者李博（2019）在《出壳雏鸡病原菌分析及粪肠球菌定量PCR检测方法的建立》一文中研究指出：胚胎期以及刚出壳的雏鸡处于其生命最脆弱的时期,该阶段发育还不完善,抵抗力较差,容易受到外界各种因素影响而导致疾病发生,造成孵化率低、健雏率低,对孵化场和种鸡场的经济效益产生很大影响。因此,调查研究目前导致雏鸡胚胎病的主要病原菌的种类,对雏鸡胚胎病和提高雏鸡的成活率具有重要的意义。1、为调查病、弱感染雏鸡胚胎的主要病原菌,采集了90只刚出壳的病、弱雏鸡。解剖观察其病理变化,从肝脏分离细菌,观察细菌的菌落菌体形态,提取分离菌株的DNA、进行16SrDNA基因序列的扩增并测序,再将测序结果与GenBank数据库的标准株序列比对,最终将比对结果与菌落菌体形态相结合,对分离菌株进行鉴定。结果发现病、弱雏鸡腹围较大;解剖发现皮下胶冻样,卵黄吸收不良,肝呈土黄色;显微镜下显示肝充血,脂肪变性。从病、弱雏鸡的肝脏分离出菌株56株,分离率为62.2%(56/90)。其中粪肠球菌分离率为46.4%(26/56),大肠杆菌为16.1%(9/56),金色葡萄球菌为14.3%(8/56),奇异变形杆菌为8.9%(5/56),鲍氏不动杆菌为5.3%(3/56),沼泽考克氏菌为3.6%(2/56),柠檬酸细菌属为1.8%(1/56),无色杆菌为1.8%(1/56),地衣芽胞杆菌为1.8%(1/56)。结果提示刚出壳雏鸡感染的细菌有9种,主要有粪肠球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,为雏鸡胚胎细菌感染的防治奠定了基础。2、为探究粪肠球菌毒力的大小及耐药性,本试验测定了粪肠球菌对鸡胚的半数致死量,并对粪肠球菌做了8类抗生素15种药物的药敏试验。结果发现10倍系列浓度梯度粪肠球菌液,尿囊绒毛膜接种后,鸡胚的存活时间和死亡率呈明显的剂量依赖,粪肠球菌对鸡胚半数致死量为3.03×10~3cfu/mL;药敏试验发现鸡源粪肠球菌对头孢类药物有较强的耐药性,对青霉素和万古霉素较敏感。成功建立了粪肠球菌鸡胚毒力模型,同时筛选出粪肠球菌有效药物。3、为建立一种快速检测鸡源粪肠球菌的方法,参照GenBank中已发表的鸡粪肠球菌全基因组,采用Primer Express 5.0软件设计了一对特异引物,进行了敏感性、特异性、重复性试验,并通过临床组织样品检测评价其临床实用性。结果显示所建立的方法标准曲线线性关系良好,相关系数R~2=0.955;该方法灵敏度高,可检测粪肠球菌的最低限度可达10~1 cfu/mL;特异性强,不与其他鸡源致病菌发生交叉反应;重复性试验中变异系数小于5%,比较稳定。将患雏肝脏组织块提取的DNA作模板,经建立的SYBR GreenⅠLC-PCR方法检测,结果出现了特异性扩增曲线。此方法可用于临床上粪肠球菌的检测。
Abstract
pei tai ji yi ji gang chu ke de chu ji chu yu ji sheng ming zui cui ruo de shi ji ,gai jie duan fa yo hai bu wan shan ,di kang li jiao cha ,rong yi shou dao wai jie ge chong yin su ying xiang er dao zhi ji bing fa sheng ,zao cheng fu hua lv di 、jian chu lv di ,dui fu hua chang he chong ji chang de jing ji xiao yi chan sheng hen da ying xiang 。yin ci ,diao cha yan jiu mu qian dao zhi chu ji pei tai bing de zhu yao bing yuan jun de chong lei ,dui chu ji pei tai bing he di gao chu ji de cheng huo lv ju you chong yao de yi yi 。1、wei diao cha bing 、ruo gan ran chu ji pei tai de zhu yao bing yuan jun ,cai ji le 90zhi gang chu ke de bing 、ruo chu ji 。jie pou guan cha ji bing li bian hua ,cong gan zang fen li xi jun ,guan cha xi jun de jun la jun ti xing tai ,di qu fen li jun zhu de DNA、jin hang 16SrDNAji yin xu lie de kuo zeng bing ce xu ,zai jiang ce xu jie guo yu GenBankshu ju ku de biao zhun zhu xu lie bi dui ,zui zhong jiang bi dui jie guo yu jun la jun ti xing tai xiang jie ge ,dui fen li jun zhu jin hang jian ding 。jie guo fa xian bing 、ruo chu ji fu wei jiao da ;jie pou fa xian pi xia jiao dong yang ,luan huang xi shou bu liang ,gan cheng tu huang se ;xian wei jing xia xian shi gan chong xie ,zhi fang bian xing 。cong bing 、ruo chu ji de gan zang fen li chu jun zhu 56zhu ,fen li lv wei 62.2%(56/90)。ji zhong fen chang qiu jun fen li lv wei 46.4%(26/56),da chang gan jun wei 16.1%(9/56),jin se pu tao qiu jun wei 14.3%(8/56),ji yi bian xing gan jun wei 8.9%(5/56),bao shi bu dong gan jun wei 5.3%(3/56),zhao ze kao ke shi jun wei 3.6%(2/56),ning meng suan xi jun shu wei 1.8%(1/56),mo se gan jun wei 1.8%(1/56),de yi ya bao gan jun wei 1.8%(1/56)。jie guo di shi gang chu ke chu ji gan ran de xi jun you 9chong ,zhu yao you fen chang qiu jun 、da chang gan jun he jin huang se pu tao qiu jun ,wei chu ji pei tai xi jun gan ran de fang zhi dian ding le ji chu 。2、wei tan jiu fen chang qiu jun du li de da xiao ji nai yao xing ,ben shi yan ce ding le fen chang qiu jun dui ji pei de ban shu zhi si liang ,bing dui fen chang qiu jun zuo le 8lei kang sheng su 15chong yao wu de yao min shi yan 。jie guo fa xian 10bei ji lie nong du ti du fen chang qiu jun ye ,niao nang rong mao mo jie chong hou ,ji pei de cun huo shi jian he si wang lv cheng ming xian de ji liang yi lai ,fen chang qiu jun dui ji pei ban shu zhi si liang wei 3.03×10~3cfu/mL;yao min shi yan fa xian ji yuan fen chang qiu jun dui tou bao lei yao wu you jiao jiang de nai yao xing ,dui qing mei su he mo gu mei su jiao min gan 。cheng gong jian li le fen chang qiu jun ji pei du li mo xing ,tong shi shai shua chu fen chang qiu jun you xiao yao wu 。3、wei jian li yi chong kuai su jian ce ji yuan fen chang qiu jun de fang fa ,can zhao GenBankzhong yi fa biao de ji fen chang qiu jun quan ji yin zu ,cai yong Primer Express 5.0ruan jian she ji le yi dui te yi yin wu ,jin hang le min gan xing 、te yi xing 、chong fu xing shi yan ,bing tong guo lin chuang zu zhi yang pin jian ce ping jia ji lin chuang shi yong xing 。jie guo xian shi suo jian li de fang fa biao zhun qu xian xian xing guan ji liang hao ,xiang guan ji shu R~2=0.955;gai fang fa ling min du gao ,ke jian ce fen chang qiu jun de zui di xian du ke da 10~1 cfu/mL;te yi xing jiang ,bu yu ji ta ji yuan zhi bing jun fa sheng jiao cha fan ying ;chong fu xing shi yan zhong bian yi ji shu xiao yu 5%,bi jiao wen ding 。jiang huan chu gan zang zu zhi kuai di qu de DNAzuo mo ban ,jing jian li de SYBR GreenⅠLC-PCRfang fa jian ce ,jie guo chu xian le te yi xing kuo zeng qu xian 。ci fang fa ke yong yu lin chuang shang fen chang qiu jun de jian ce 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自河北工程大学的李博，发表于刊物河北工程大学2019-07-08论文，是一篇关于出壳雏鸡论文,病原菌论文,毒力论文,耐药性论文,鉴定论文,河北工程大学2019-07-08论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自河北工程大学2019-07-08论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。